全 文 :穗花马先蒿对枸杞蚜虫的杀虫活性研究
梁瑞 , 杨敏丽 (宁夏大学能源化工重点实验室 ,宁夏银川 750021)
摘要 [目的]为穗花马先蒿的开发利用和活性成分的研究提供依据。[方法] 采用点滴法 ,研究穗花马先蒿乙醇提取物和石油醚、氯仿 、
乙酸乙酯、正丁醇和水 5种萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性。[结果] 用 95%乙醇作提取剂 ,料液比1∶10 ,提取穗花马先蒿杀虫活性成分为
15.30%。随着乙醇提取物浓度的增大和处理时间的延长 , 枸杞蚜虫的校正死亡率升高 ,浓度 50.00 mg/ml 时 , 48 h的校正死亡率达
96.38%,毒力回归方程为 y=2.220x +2.859。5种萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性的顺序为石油醚>正丁醇>氯仿>乙酸乙酯>水 ,石
油醚萃取物 48 h的校正死亡率达 96.38%。[结论]穗花马先蒿乙醇提取物对枸杞蚜虫有较好的杀虫效果 , 48 h的 LC50为 9.21 mg/ml。不
同极性萃取物的活性比较得知 ,杀虫活性成分主要是酯溶性的弱极性物质 ,分布在石油醚所在极性范围内。
关键词 穗花马先蒿;枸杞蚜虫;杀虫活性
中图分类号 Q946 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2008)03-01112-02
Study on the Insecticidal Activity of Pedicularis spicata Pall on Wolfberry Aphis
LIANGRui et al (Key Laboratory of Energy Sources &Chemical Engineering ,Ningxia University , Yinchuan ,Ningxia 750021)
Abstract [ Objective] The aim of the study was to supply foundation for the exploitation and utilization of Pedicularis spicata Pall and the research on its
active components.[ Method] Topical application was used to study the insecticidal activities of the ethanol extracts and 5 kinds of extracts with petroleum
ether, chloroform , ethyl acetate, n-butanol , aqueous as extractants from P.spicata on wolfberry aphis.[ Result] 15.30% of insecticidal active components
from P.spicata was extracted with 95% ethanol as extractant and material-liquid ratio of 1∶10.The corrected mortality of wolfberry aphids increased along
with the increment of ethanol extracts concentration and the extending of treating time.When the ethanol extract was at 50.00 mg/ml , the corrected mortali-
ty after 48 h reached 96.38% and the regression equation of virulence was y=2.220x +2.859.The insecticidal activities of 5 extracts on wolfberry
aphids in order were petroleum ether >n-butanol > chloroform >ethyl acetate >water and the corrected mortality of petroleum ether extracts after 48
h reached 96.38%.[ Conclusion] The ethanol extracts from P.spicata had better insecticidal effect on wolfberry aphids with LC50being 9.21 mg/ml after
48 h.Its main insecticidal active components wereweak polar matter and mainly distributed in the polarity range of petroleum ether.
Key words Pedicularis spicata Pall;Wolfberry aphis;Insecticidal activity
基金项目 国家自然科学基金项目(20565003);宁夏自然科学基金项
目(NZ0719)。
作者简介 梁瑞(1982-), 女 ,宁夏银川人 ,硕士 , 从事天然产物分析
和农药化学研究。
收稿日期 2007-08-30
枸杞是一种名贵的中药材 ,也是一种很好的滋补品 ,被
国家卫生部列为药食同源品种之一 ,在国际市场上十分畅
销。但是枸杞的病虫害不断发生演变 ,给农民造成巨大的经
济损失。枸杞蚜虫(Aphis sp.)属同翅目 ,是枸杞的重要害
虫 ,多年来以化学防治为主 ,由于药农对防效下降经常采取
随意提高药剂浓度和增加施药次数等办法 ,加速了枸杞蚜虫
抗性的发展 ,不仅增加了生产投入 ,也污染了环境[ 1] 。因此 ,
寻找和开发新一代高效 、低毒 、无公害农药势在必行。植物
源农药因其来源广 、对害虫作用机制独特 、不易产生抗性 、与
环境兼容等优点而倍受全世界农药研究及应用部门的广泛
重视 ,已成为新一代农药研究的热点[ 2-3] 。
穗花马先蒿(Pedicularis spicata Pall.)是玄参科马先蒿属
一年生草本植物。它具有很高的药用价值 ,性温 ,味甘微苦 ,
其根可入药 ,有大补元气 ,生精安神 ,强心之功效[ 4] 。目前 ,
对穗花马先蒿的研究主要集中在化学成分[ 5]和药理活性[ 6]
的研究 ,而对其杀虫活性的研究未见报道。笔者首次对穗花
马先蒿的杀虫活性进行了研究 ,并采用点滴法测试了穗花马
先蒿乙醇提取物及不同溶剂萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性 ,
发现乙醇提取物和石油醚萃取物对枸杞蚜虫均具有较好的
杀虫效果。该研究结果对穗花马先蒿活性成分的进一步研
究以及将其开发成新型的植物源农药具有参考价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试植物 。穗花马先蒿采自宁夏六盘山大水沟(海
拔 1 300~ 2 800 m)。主要利用花和花序部分 ,将其与其他部
位分开 ,阴干 ,放入恒温箱烘干(40 ~ 45 ℃)。磨碎 ,过 40目
筛 ,装入保鲜袋密封贮于冰箱中备用。
1.1.2 供试昆虫 。枸杞蚜虫采自没有喷施药剂的活体枸杞
树 ,选择个体大小一致 、无翅健康成蚜作供试昆虫 。
1.1.3 供试仪器 。HP400GS型智能人工气候培养箱(武汉瑞
华仪器设备有限责任公司);AL204型电子天平(上海梅特勒
-托利多仪器有限公司);RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣
生化仪器厂);SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州长城工贸
有限公司);KA-250 DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 提取方法。称取 100 g 穗花马先蒿的花和花序粉末 ,
装入 1 000 ml锥形瓶中 ,加入 10倍量的 95%乙醇 ,浸泡 48 h
后超声提取 40 min ,过滤 ,滤液减压浓缩后得乙醇提取物(简
称 PSEE)。
称取PSEE 15 g ,加 10倍量蒸馏水 ,热溶 ,装入分液漏斗
中 ,采用液-液分配萃取 ,依次用石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、正
丁醇各萃取 3~ 5次 ,最后分别将各萃取液和水萃取液减压
浓缩至浸膏 ,称取适量 ,用 50%丙酮配成一定浓度进行杀虫
活性测试。
1.2.2 杀虫活性测试。采用点滴法[ 7] :穗花马先蒿乙醇提
取物用 50%丙酮稀释成系列浓度 ,在试虫的前胸背板上点滴
1μl ,每个浓度处理 30头试虫 ,重复 5次 ,50%丙酮处理作对
照。处理后的枸杞蚜虫放入新鲜枸杞叶上 ,置于智能人工气
候培养箱内 ,分别于 24、48 h记录试虫的死亡情况 ,计算死亡
率以及校正死亡率。
2 结果与分析
2.1 乙醇提取物对枸杞蚜虫的杀伤活性 用“1.2.2”的方法
测定了不同浓度乙醇对枸杞蚜虫的杀虫活性 ,结果见表 1。
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008 , 36(3):1112-1113 责任编辑 李玮 责任校对 李玮
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.03.053
表1 不同浓度乙醇提取物对枸杞蚜虫的杀虫活性 %
Table 1 Inseticidal activity of different ethanol extracts concentration on
wolfberry aphis
浓度
mg/ml
Concentration
24 h
死亡率
Mortality
校正死亡率
Corrected mortality
48 h
死亡率
Mortality
校正死亡率
Corrected mortality
50.000 92.67 92.47 96.67 96.38
25.000 71.33 70.54 82.00 80.43
12.500 46.67 45.21 58.00 54.35
6.250 28.67 26.71 41.33 36.23
3.125 16.67 14.38 24.00 17.39 CK 2.67 - 8.00 -
注:每处理 30头 ,重复 5次。下表同。
Note:The number in each treatment is 30, and 5 repeats.The same as below.
由表 1可见 ,乙醇提取物对枸杞蚜虫有较好的杀虫效
果。随着浓度的增大和时间的延长 ,枸杞蚜虫的校正死亡率
都在升高;浓度为 50.00 mg/ml , 48 h 校正死亡率可达
96.38%,毒力回归方程为:y =2.220x +2.859 , LC50 =9.21
mg/ml , r=0.990 7。
2.2 不同萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性 将“1.2.1”所得萃
取物各称取 0.1 g ,用 50%丙酮配成 4 mg/ml的供试浓度 ,采
用“1.2.2”的方法进行杀虫活性测试 ,结果见表 2。
表 2 不同萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性 %
Table 2 Inseticidal activity of different extracts on wolfberry aphis
萃取物
Extract
24 h
死亡率
Mortality
校正死亡率
Corrected mortality
48 h
死亡率
Mortality
校正死亡率
Corrected mortality
石油醚萃取物 93.33 93.15 96.67 96.38
Petroleum ether extract氯仿萃取物 42.00 40.41 53.33 49.27
Chloroform extract乙酸乙酯萃取物 22.67 20.54 29.33 23.18
Ethyl acetate extract正丁醇萃取物 84.67 84.25 90.67 89.86
Butanol extract水萃取物 16.00 13.70 26.67 20.29
Water extract
CK 2.67 - 8.00 -
表 2表明 ,各萃取物对枸杞蚜虫的杀虫活性存在显著差
异 ,杀虫活性由大到小依次为:石油醚萃取物>正丁醇萃取
物>氯仿萃取物>乙酸乙酯萃取物>水萃取物 。其中石油
醚萃取物的杀虫效果最高 ,48 h的校正死亡率可达 96.38%;
而水萃取物的杀虫效果最低 ,48 h的校正死亡率为 20.29%。
这说明穗花马先蒿的杀虫活性部分主要是酯溶性的弱极性
物质 ,具体成分有待进一步研究 。
3 结论与讨论
(1)该试验采用冷浸和超声提取相结合的方法 ,以 95%
的乙醇作提取剂 ,料液比为 1∶10 ,提取穗花马先蒿杀虫活性
成分 ,得率为 15.30%。
(2)穗花马先蒿乙醇提取物对枸杞蚜虫具有较好的杀虫
活性 , LC50为 9.21 mg/ml 。
(3)通过比较不同极性萃取物的活性得出 ,穗花马先蒿
的杀虫活性成分主要是酯溶性的弱极性物质 ,且主要分布在
石油醚所在极性范围内 ,这为穗花马先蒿活性成分的进一步
分离纯化研究提供了理论依据。
(4)目前对穗花马先蒿的研究主要集中在药理活性 ,而
该研究发现其对枸杞蚜虫具有较好杀虫效果。这为进一步
研究和利用穗花马先蒿 ,从中寻找出高活性的杀虫物质 ,将
其开发成新型的植物源农药具有参考价值。
参考文献
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(上接第 1102页)
上培养证实:部分菌株在培养过程中发生了变异 ,其致病性
减弱甚至丧失。病原接种试验证实:接种急性型症状病株上
分离所得青枯病病原菌的桉树苗木死亡率普遍高于接种慢
性型青枯病病原菌的。急性型症状的病原菌致病力强于慢
性型症状的病原菌 ,筛选出 4个致病力较强的菌株(Ⅴ-1-1、
Ⅳ-1-1、Ⅴ-1-2、Ⅲ-2-2),其中Ⅴ-1-1菌株的致病力最强。
林雪坚等[ 8]从广东不同地区 ,不同桉树品种上分离的青
枯病原细菌经鉴定为青枯假胞菌 ,属青枯小种 l号 、生物型Ⅲ
号 ,不同菌株毒性差异的测定结果表明都有致病性 ,发病程
度无明显差异。而吴光金等[ 9]从广东 、广西 、海南桉树青枯
病流行区采集病菌进行病菌生理小种和生物型的鉴定后认
为 ,广东省的桉树青枯病菌主要是小种 1号 ,广西和海南除
小种 1号外还有小种 2号和 3号;生物型主要归属于生物型
Ⅲ号 ,生物型Ⅱ、Ⅴ号较少;除Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ号外 ,还发现有一些尚难
归入Hayward的 5个生物型中其他的生物型。说明广西的桉
树青枯病原菌具有多样性和复杂性 。该试验虽未对供试的
青枯病原菌进行生理小种和生物型的鉴定 ,但从试验结果可
知 ,广西的桉树青枯菌种群组成较复杂。因此 ,建议生产单
位在进行桉树青枯病防治时 ,应充分了解各桉树栽培区病菌
的毒性差异 ,有针对性地进行综合防治。
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