全 文 ：＊通讯作者 , E-mail:163.hw x@163.com
收稿日期:2010-12-29;修回日期:2011-06-10
基金项目:国家自然科学基金(30700561 , 61070130 , 31000710);
济南大学科研基金(B0523 , XKY0814)项目
作者简介:何文兴(1973-),男(蒙古族),内蒙古宁城县人 ,副教
授 ,博士 , 2004年毕业于四川大学 ,主要从事牧草功能基因研究 , 发
表论文 20篇.
文章编号:1673-5021(2011)05-0007-08
赖草根茎分蘖相关基因 LRC1的克隆及表达
何文兴1 , 2 ,李洪梅1 ,叶春江1 ,秦余香1 ,彭　珊1 ,马　丽1 ,陈月辉2 , 3 , ＊
(1.济南大学医学与生命科学学院 , 山东　济南　250022;2.山东省网络环境智能计算技术重点实验室 ,
山东　济南　250022;3.济南大学信息科学与工程学院 ,山东　济南　250022)
　　摘要:运用同源基因克隆技术从典型的克隆植物赖草中克隆了其根茎分化相关基因 LRC1 , 通过 RACE 获得其
全长 cDNA 为 1.598kb , 开放阅读框(ORF)为 1299bp , 编码 432个氨基酸。同源分析结果显示 ,赖草 LRC1 基因属于
GRAS 转录因子家族 , 与控制水稻分蘖及烟草侧枝发生的相应蛋白具有很高的同源性 , 与控制水稻分蘖的 MOC1 基
因同源性达到 91%。实时定量检测结果表明 , LRC1 基因在赖草初花期的根茎节 、根茎节间 、根茎尖和穗 、茎 、叶片 6
个组织部位均有表达 ,但在根茎中的表达量显著高于其它部位, 特别是在分蘖产生的根茎节其表达量是叶片的 43倍。
关键词:赖草;根茎;分蘖基因;实时荧光定量 PCR
中图分类号:Q943.2　　　文献标识码:A
　　赖草是典型的通过无性繁殖方式实现个体增
殖(繁殖)的克隆植物 ,相对于非克隆植物更能耐受
和适应干旱 、瘠薄的生长环境 。克隆植物在进行克
隆生长时 ,其地下根茎在水平方向上逐级分化并延
伸生长 ,进而分化产生逐级根茎及子代分株。这种
逐级分化既不同于双子叶植物的分枝(分化结果是
产生分枝),也不同于单子叶植物茎秆基部不伸长茎
间上产生的分蘖(分化结果是产生地上枝)。针对赖
草这种特殊的地下根茎分化方式已开展了包括形态
学 、种群生态学等方面的研究工作 ,但在分子水平 、
基因调控方面始终不清楚是哪些基因 、在哪些水平 、
哪些部位如何调控根茎分化 ,同时如何与外界因子
协调进而共同影响赖草的克隆生长习性 。近些年 ,
一系列调控植物侧芽 、侧枝发育的基因被相继发现
和克隆 ,其中 GRAS 蛋白家族与根 、茎分化的关系
倍受关注[ 1] 。GRAS 转录因子家族是高等植物所特
有的一大类具有相当保守羧基末端的蛋白质家族 ,
其长度一般在 400 ～ 700 个氨基酸残基之间 ,在烟
草 、水稻等植物中都有发现 ,已被证实在植物根和茎
的生长发育过程中发挥着十分重要的作用[ 2 ～ 3] 。例
如 ,可减少水稻分蘖的 MOC1基因[ 2] ;番茄中的 LS
基因参与叶腋分生组织形成侧芽[ 3] ;矮牵牛中的
HAM 基因参与了茎尖分生组织的维持[ 2] ;GA I 、
RGA和 RGL 基因负调控赤霉素的信号转导途径 ,
使赤霉素对植物茎的伸长作用降低 ,其突变导致植
物对赤霉素不敏感而呈现矮化[ 4 ～ 9] 等。本研究以广
泛分布于沙漠 、草原 、农田的典型克隆植物赖草为研
究对象 ,克隆了其根茎分化相关基因 LRC1并对其
表达特性进行了分析 ,试图为从基因和分子调控水
平揭示赖草分蘖机理及人为调控根茎分蘖 、无性生
殖奠定基础 。
1　材料与方法
1.1　实验材料
以内蒙古农业大学牧草研究室栽培的赖草(Ley-
mus secalinus)为实验材料 ,种群群体年龄为 5年 。
1.2　试剂
包括 Plant RNA M ini Kit总 RNA抽提纯化试
剂盒(上海华舜)、M -MLV RTase cDNA Synthe-
sis Ki t 试剂盒(TaKaRa)、MightyAmpTM for Real
Time 实时荧光定量试剂盒(T aKaRa)、TaKaRa
Agarose Gel DNA Purification Kit 试剂盒(TaKa-
Ra)、 pMD 19 -T Vecto r T 载体(TaKaRa)、
DL2000 Marker (TaKaRa)、 T4 RNA Ligase
(TaKaRa)、Calf intestinal phosphatase (CIP)
(TaKaRa)、Tobacco acid py rophosphatase (TA P)
(JBI , USA)、GeneRacerlTM Kit RACE 扩增试剂盒
(Invit rogen)。引物(除试剂盒自带外)由上海生工
生物工程有限公司合成 ,其序列见表 1 ,其余试剂均
—7—
第 33 卷　第 5 期　　　　　　　　　　中　国　草　地　学　报　　　　　　　　　　2011 年 9 月
　　Vol.33　No.5　　　　　　　　　　Chinese Journal of G rassland　　　　　　　　　　Sept.2011　　
表 1　引物名称及序列
Table 1　The list of primers and sequences
引物
Primers
序列
S equences
RTP 5′-GCTG TCAACGAT ACGCTACGT AACGGCATGACAG TGT18-3′
3RP 5′-G TCAACGATACGCT ACGTAAC-3′
3RNP 5′-TACG TAACGGCA TGACAGTG-3′
OligoRNA 5′-GAGCACGAGGACACUGACA UGGACUGAAGGAG UAGAAA-3′
5RP 5′-GAGCACGAGGACACTGACA TG-3′
5RNP 5′-CACTGACA TGGACTGAAGGAGT A-3′
PS1 5′-CTCACGGCG AACCAGGCCA TCC-3′
PTS1 5′-YTCACGGCKAAYCARGCSA TYY-3′
PS2 5′-TCCACATCCTCGACCTCGACGCT -3′
PR2 5′-T GCGACACGGCGAACGCGCTGA-3′
PT R1 5′- TGYGABAVKGCRAAMGSGCTKA -3′
PR1 5′-GGTAGCCCT CCGACGGGTAGT G -3′
P333 5′-GCT ACATCCCGACGAGACGC -3′
P602 5′- CCTGCCGAGAACCT CCTGCT -3′
　　注:兼并碱基代码为 R(A , G), Y(C , T), M(A , T), K(G , T), S(G , C), B(G , T , C), V(G , A , C)。
Note:Mergers base code R(A , G), Y(C , T), M(A , T), K(G , T), S(G , C), B(G , T , C), V(G , A , C).
为进口或国产分析纯试剂 。序列由上海生工生物工
程有限公司测定 。
1.3　赖草各组织总 RNA提取及 cDNA合成
取赖草根茎尖(尖端 2cm 范围)、根茎节(节两
侧 0.5cm 范围以内)、根茎节间 、茎 、叶片 、穗各
100mg ,用灭菌去离子水反复冲洗干净后吸干表面
水分 , 在液氮中研磨 , 按试剂盒操作说明提取总
RNA ,用分光光度法和电泳法鉴定质量后用于实
验。参照 M -MLV RTase cDNA Synthesis Kit 试
剂盒(TaKaRa)实验操作手册进行 cDNA 合成。
1.4　赖草根茎 LRC1基因片段同源克隆
根据番茄 LS 基因(GenBank登录号AF098674)、
水稻MOC1基因(GenBank登录号 AY242058)、烟草
LS 基因(GenBank登录号 EU935581)同源性分析结
果 ,设计赖草同源基因扩增引物编号为 PTS1 、PTR1。
以赖草根茎尖总RNA 反转录合成的 cDNA为扩增模
板克隆赖草根茎 LRC1基因。扩增体系和条件分别
为:反应体系 25μl ,其中 1μl cDNA 、2.5μl 10×PCR缓
冲液(含 MgCl2)、2.5mmol/L dNTPs 4μl 、10μmol/ L
上 、下游引物各 1μl、5U/μL Taq酶 0.25μl ,加灭菌
去离子水至总体积为 25μl。PCR 扩增 [ PTC -
200TM(BOD)热循环仪]条件为:94℃保温 2min后 ,
进行 35个循环的 94 ℃30S 、60℃30S 、72 ℃2min的
反应 ,最后 72℃保温 8min。
1.5　3′RACE与 5′RACE反应
3′RACE 采用通用方法 。5′RACE 参照 Gen-
eRacerl
TM
Kit(Invit rogen),具体方法是:(1)用磷酸
酶 CIP(Calf intestinal phosphatase)去掉已经降解
了的暴露出了 5′磷酸基团的 mRNA 的 5′磷酸基
团 ,使之不能参加下一步反应。(2)用专一性的脱帽
酶 TAP(Tobacco acid py rophospha tase)切掉完整
的 mRNA 的 5′茑苷帽 ,暴露出 5′磷酸基团 ,使之能
参加下一步反应。(3)用 T4 RNA Ligase 连接 Oli-
go RNA 到被脱帽的 mRNA 上。(4)经处理的
mRNA反转录。用 RTP 做反转录的引物 ,用 M -
MLV合成 cDNA 。(5)用基因的专一性引物(PR1 、
PR2)和根据 Oligo RNA 设计的 5′RACE 引物
(5RP 、5RNP)做 Nested -PCR。其 PCR 参数同
3′RACE ,PCR所得片段用胶回收试剂盒纯化回收 ,
亚克隆进 pMD19 -T ,转化 E.col i DH5α细胞 ,经
菌落 PCR确认验证后送上海生工生物工程有限公
司测序 。所得序列用序列组装软件 DNAMAN 进
行组装以及比对分析 ,确认其正确性 。
3′RACE 是以赖草根茎尖总 RNA 进行 cDNA
合成。在 20μl 的反应体系中加入 1μg 总 RNA 、
1μg/μL RTP 引物 2μl 、5 ×First -Stand 缓冲液
4μl 、10mmo l/L dNT P Mix ture 1μl 、RNase Inhibi-
tor 1μl 、200U/μL 的 M -MLV 1μl ,加无菌去离子
水至总体积 20μl。室温放置 10min , 42℃保温 1.5h
后冰水冷却 2min 。再依次向上述反应体系中加入5
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中国草地学报　2011年　第 33 卷　第 5 期
×2nd-Stand缓冲液 30μl 、10mmol/L dN TP Mix-
ture 3μl 、无菌去离子水 89μl 、E. col i DNA Po ly-
merase Ⅰ 2μl 、E. coli RNase H/ E. coli DNA
Ligase Mixture 2μl。16℃反应 2h , 并于 70℃保温
10min后加入 4μl T4 DNA Po lymerase ,轻轻搅拌 ,
37℃保温 10min , 加入 15μl 0.25mo l/L 的 EDTA
(pH8.0)以及 15μl 10 %的 SDS 溶液停止反应 。经
酚 、氯仿抽提纯化后作为 3′RACE 扩增模板 。
巢式 PCR反应体系组成及扩增条件为:10 ×
PCR缓冲液 2.5μl 、cDNA 1μl 、10μmol/L 3RP 引物
1μl 、10μmo l/L PS1 引物 1μl 、2.5mmo l/L dN TP
Mix ture 2μl 、5U/μL T aq 酶 0.25μl ,加灭菌去离子
水至总体积 25μl。PCR扩增 [ PTC-100TM(BOD)
热循环仪] 条件为:94℃保温 2min后进行 35 个循
环的 94 ℃30S 、61℃ 30S 、72 ℃2min 的反应 , 最后
72℃保温 8min 。第二轮 PCR扩增时引物为 PS2 、
3RNP ,将第一轮扩增产物稀释 50倍后作为第二轮
扩增模板 ,扩增条件同第一轮 。
1.6　LRC1基因表达分析
采用实时荧光定量 RT -PCR方法 ,检测赖草初
花期 LRC1基因在根茎尖 、根茎节 、根茎节间 、茎 、叶 、
穗的表达水平。抽提上述各组织总 RNA ,各取 1μg
总RNA用 RTP引物和M -MLV 反转录酶进行反转
录 ,反转录产物用 1×TE稀释 4倍后作为 PCR扩增
模板。以 P333和 P602为上 、下游引物进行实时荧光
定量 RT-PCR ,参照Mighty AmpTM for Real Time实
时荧光定量试剂盒(TaKaRa)操作手册创建 10μl反应
体系 ,包括 2 ×PCR缓冲液混合液 5μl 、cDNA 0.6μl、
10μmol/L P333 引物 0.4μl 、10μmol/L P602 引物
0.4μl 、50×ROX Ⅱ 0.2μl ,加灭菌去离子水至总体积
为10μl。PCR扩增条件为:98℃保温 3min后 ,进行
35个循环的 98℃15S 、60℃25S 、72℃1min的反应。
选用 β -actin 为内标基因 ,在 ABI 7500 荧光定量
PCR仪(ABI PRISM 7500 ,美国)上进行。
1.7　序列分析
将获得的 cDNA 序列通过登陆 NCBI(ht tp://
www.ncbi.nlm.nih.gov/)与 GenBank 数据库进行
同源序列比对分析 ,通过 DNAMAN 软件进行序列拼
接与翻译 ,通过 ExPasy(http://www.expasy.ch)服
务器进行蛋白质结构域(Domain)、基序(Motif)的分
析。统计分析应用 spss13.0统计软件包进行。
2　结果与分析
2.1　赖草各组织总 RNA提取及质量分析
通过 RNA 抽提纯化试剂盒提取赖草根茎尖 、
根茎节 、根茎节间 、茎 、叶片 、穗总 RNA ,进行紫外吸
收检测和电泳 ,结果表明其 A 260/A 280均大于 1.9 ,
A 260/A 230均大于 2.0 ,RNA 样品质量适合此实验。
2.2　赖草根茎 LRC1基因片段同源克隆
根 据 番 茄 LS 基 因 (GenBank 登 录 号
AF098674)、水稻 MOC1 基因(GenBank 登录号
AY242058)和 LS 基 因 (GenBank 登 录 号
EU935581)同源性分析结果 ,设计出赖草同源基因
扩增引物 PTS1和 PT R1。以赖草根茎尖总 RNA
反转录合成的 cDNA 为扩增模板 , PCR扩增赖草
LRC1基因得到了大小约为 750bp的扩增片段(见
图 1),进一步通过胶回收片段和亚克隆 ,测序得到
了 743bp的序列。同源比对结果显示该基因片段
与水稻 MOC1基因同源性达到了 91%。
图 1　LRC1 基因片段同源克隆电泳图
Fig.1　Agaro se gel electrophor esis o f homologous
gene amplification of LRC1 gene
2.3　赖草 LRC1基因全长的获得及序列分析
依据测序序列设计了用于 3′RACE和 5′RACE
的基因特异性引物 PS1 、PS2和 PR1 、PR2 , 3′RACE
得到的片段约为 970bp , 5′RACE 得到的片段约为
1350bp(图 2), 与原序列拼接后得到全长基因的
cDNA为 1598bp(GenBank登录号 HQ340162)。通
过登陆 NCBI 进行 ORF Finder 分析 ,发现该全长
cDNA 含有一个编码 432个氨基酸的开放阅读框架
(起始于第 196 位核苷酸 , 终止于第 1494 位核苷
酸)。将所获得的全长 cDNA 通过 Blastn 、Blastx 与
NCBI的 GenBank数据库进行同源性检索 ,氨基酸
序列同源比对结果显示 ,该基因编码蛋白与水稻
(aap13049 ,91%)、高粱(xp 002437271 , 84 %)等相
应蛋白序列均具有较高的同源性(图 3)。
进一步的蛋白功能分析结果显示 ,赖草 LRC1基
因属于 GRAS转录因子家族 ,与控制水稻分蘖(MOC1
—9—
何文兴　李洪梅　叶春江　秦余香　彭　珊　马　丽　陈月辉　　　赖草根茎分蘖相关基因 LRC1的克隆及表达
图 2　LRC1 基因 RACE 电泳结果
Fig.2　Electropho resis o f RACE amplification o f LRC1
基因)及其他物种侧枝发生基因家族成员(如烟草
LS 基因等)有较高的同源性 。赖草 LRC1基因编码
蛋白具有 GRAS 转录因子典型结构域:2个亮氨酸
多聚体重复区 、VHIID 、PFYRE 和 SAW结构域(见
图3)。通过与水稻(aap13049)、高粱(xp 002437271)、
烟草(ach47034)、胡萝卜(bad42666)、杨树(xp
002321384)、葡萄(xp 002265645)的比对分析 , 发
现在这些物种中 PFYRE 结构域高度保守 ,其次是
SAW结构域。而在 VHIID 结构域中赖草和水稻
均为 VHILD ,高粱中则为 IH ILD ,综合所分析的
7个物种 ,其保守模式为 -HI-D。同源进化分析
结果显示 ,7个物种分为 2大分支 ,其中赖草 、水稻 、
高粱为 1 组 ,另外 4 个物种归为 1组(图 4)。该进
化树分析结果说明 , GRAS 转录因子在进化上存在
明显的种属差异 ,同属禾本科的赖草 、水稻和高粱的
亲缘关系较近。
2.4　LRC1基因表达分析
LRC1基因在 6个组织部位的表达存在显著差
异 ,其表达量由高到低依次是:根茎节 、根茎节间和
根茎尖 、穗 、茎 、叶片 ,其中除了根茎尖和根茎节间的
表达量间无统计学差异之外 ,其他部位相互间差异
显著 。即赖草 LRC1 基因在根茎节中表达量最高 ,
而在叶片中表达量最低。检测结果同时表明 ,LRC1
基因在赖草初花期各组织器官表达很普遍 ,并不是
只在根茎中特异表达 ,只是不同部位间表达量差别
很大 ,特别是在根茎中的表达量显著高于其他组织 ,
尤其是分蘖产生的根茎节 ,其 LRC1基因表达量是
叶片的 43倍(图 5)。
3　讨论
植物根和茎的分化受多种基因调控 , Kaur 等对
赖草属内不同株型间基因表达进行检测分析发现 ,
直立茎与水平根茎间绝大多数基因表达类似 ,在超
过 15132 个表达序列中仅有 27 个表达存在差
异[ 1 0] ,说明为数不多的关键基因表达决定了根茎分
化状态 。如控制水稻分蘖的 MOC1 基因处于分蘖
调控的上游 ,对调控分裂组织起始及维持的 OSH1
基因以及调控腋芽分化与生长的 OsTB1基因均有
调控作用[ 2 , 11] 。本文克隆的赖草 LRC1基因是水稻
MOC1 基因的同源基因 , 同属 GRAS 转录因子家
族 。GRAS 转录因子家族是高等植物所特有的一大
类具有相当保守羧基末端的蛋白质家族 ,其保守的
羧基末端一般由几个典型的结构组成:亮氨酸重复
区 I(LHRI)、VHIID 、亮氨酸重复区 II(LHRII)、
PFYRE 和 SAW[ 1 , 9] 。Pysh 等研究表明:VHIID基
序是所有GRAS家族成员所共有的 ,尽管它在序列
上不十分保守[ 2] ,赖草 LRC1基因编码蛋白在 VHIID
结构域中的序列为 VHILD ,与水稻相同 ,高粱中则
为 IH ILD ,综合所分析的 7个物种表明其保守模式
为-HI-D 。同时发现 ,包括赖草 LRC1基因编码
蛋白在内 ,VHIID结构域基序-HI-D的上游-10
至-17区域及下游 5至 12区域存在另外 2 个均由
8个氨基酸构成的更为保守的序列 ,分别为 LTA N-
QAIL 和 HGVQWPPL。 VHIID 基序被认为是
GRAS 转录因子与 DNA 相结合的区域 , 那么在
VHIID基序上下游存在的 2个 8 连体保守结构区
在与 DNA 的结合中具有什么作用或功能还有待探
讨 。通常认为 PFYRE 基序的保守程度比 VHIID
和 SAW 低 ,其中只有脯氨酸残基绝对保守[ 9 , 12] ,赖
草 、水稻 、高粱 PFYRE 结构域的序列组成是
PLYRE ,另外 4个物种为 PFYRE ,禾本科的 3 个物
种在 PFYRE基序中的第二位是亮氨酸 ,而不是苯
—10—
中国草地学报　2011年　第 33 卷　第 5 期
图 3　7 个物种 GRAS 转录因子序列比对结果
Fig.3　Alignment o f 7 species GRAS gene products
—11—
何文兴　李洪梅　叶春江　秦余香　彭　珊　马　丽　陈月辉　　　赖草根茎分蘖相关基因 LRC1的克隆及表达
丙氨酸。SAW 基序的特征是具有 3对绝对保守的
碱基 ,即 R-E 、W -G 和W -W [ 9 , 11] ,在分析的 7个
物种内该基序保守性较强(图 3)。综合以上分析 ,
赖草 LRC1基因编码蛋白存在典型的 GRAS 转录
因子相应结构域 ,且在参与比对的另外 6个物种中
与水稻亲缘关系最近 , 说明 LRC1 基因具有水稻
MOC1基因类似或相同功能 。
基因表达分析结果显示 ,尽管是在初花期 ,不是
赖草产生旺盛分蘖的时期 , LRC1 基因在赖草根茎
中的表达量仍显著高于其他组织(茎 、叶 、穗),特别
是根茎分化的根茎节内的表达量更高 。该结果同时
也说明 LRC1基因并不仅仅局限于根茎内表达 ,只
是在茎 、叶 、穗等组织中其表达量显著低于根茎 。水
稻 MOC1基因在叶腋处形成可见的分蘖枝分化突
起之前 ,就已开始在叶腋表皮及皮下细胞中表达 ,说
明 MOC1基因是处于分蘖分化调控网络中的上游
基因 ,除了对调控分裂组织起始及维持的 OSH1基
因及调控腋芽分化与生长的 OsTB1 基因具有调控
作用外[ 2] ,最近的研究表明还存在一系列下游响应
基因[ 13 ～ 22] 和其他分枝调控基因 ,如 L AX 1 基因的
综合作用[ 23 ～ 24] 。Sun 等最近关于 MOC1作用机制
的研究表明 ,MOC1作用的发挥依赖于与 MIP1的
相互作用 ,MIP1 基因表达分析结果显示其在水稻
多种组织内均有低水平表达[ 25] 。赖草 LRC1基因
与水稻MOC1基因是同源基因 ,MOC1基因的调控
模式是否提示 LRC1基因除了具有调控根茎分化的
功能之外 ,同时也具有其他调节活性或是其调控根
茎分化功能的发挥依赖于其他组织(非根茎)内该基
因的协同表达 , 还需要深入研究和分析 。同时 ,
LRC1基因本身上游是否还存在更上位的调控起始
基因也有待研究 ,因为赖草 LRC1 基因的表达并不
局限于根茎特定部位 ,这也提示我们该基因表达调
控网络比较复杂 。总之 ,作为调控根茎分化相关基
因的重要一员 ,赖草 LRC1基因的克隆为从基因和
分子调控水平上揭示诸多根茎型禾草分蘖机理及人
为调控根茎分蘖及无性生殖奠定了基础。
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何文兴　李洪梅　叶春江　秦余香　彭　珊　马　丽　陈月辉　　　赖草根茎分蘖相关基因 LRC1的克隆及表达
Cloning and Expression of Gene LRC1 Related to Rhizome
Tillering of Leymus secalinus
HE Wen-xing1, 2 , LI Hong-mei1 , YE Chun-jiang1 , QIN Yu-xiang1 , PENG Shan1 , MA Li1 , CHEN Yue-hui2 , 3
(1 .College of Medical and Li fe S cience , J inan Universi ty , J inan 250022 ,China;2.Shandong
Prov incial K ey Laboratory o f Network I ntel l igent Computing , J inan 250022 ,China;3.College of
In formation Science and Engineering , Universi ty o f J inan , J inan 250022 , China)
Abstract:A new ti llering gene (named LRC1)was cloned from Leymus secal inus through homo logous
cloning.The ful l leng th of cDNA of g ene LRC1 w as 1598bp , and w as highly homologous to MOC1 gene
(91% similarity)which w as considered to be the tillering gene in rice.The open reading f rame of LRC1
w as 1299bp , coding 432 amino acids.Homo logous analy sis revealed that the pro tein belonged to G RAS
family , w ith a high homolo gy to t ranscription facto r such as MOC1(contro lling ti lle ring)and LS (contro l-
ling axilare meristem)in rice and tobacco respectively .T he expression examination of LRC1 w ith real t ime
PCR show ed that the gene w as expressed in the node of rhizome , internode o f rhizome , top o f rhizome ,
ear , stem and leaf of Leymus secalinus a t the stage o f initial blo om.However , the expression levels of
LRC1 w ere quite dif ferent , the highest e xpre ssion level w as found in rhizome (the expression level in the
node of rhizome w as about 43 t imes than in leaves).The resul ts paved the w ay to elucidate the mechanism
of gene regulation fo r t illering in cloning plants and how to control ti lle ring of rhizome plants artif icially.
Key words:Leymus secal inus ;Rhizome;Tillering gene;Real time PCR
《植物遗传资源学报》征订启事
《植物遗传资源学报》是中国农业科学院作物科学研究所和中国农学会主办的学术期刊 , 为全国中文核心期刊、
中国科技核心期刊 、中国农业核心期刊 、全国优秀农业期刊。该刊为中国科技论文统计源期刊 、中国科学引文数据库
来源期刊(核心期刊)、中国核心期刊(遴选)数据库收录期刊 、中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊 ,又被《中国生
物学文摘》和中国生物学文献数据库 、中文科技期刊数据库收录。据中国期刊引证研究报告统计 , 2010 年度《植物遗
传资源学报》影响因子 1.081。
报道内容为大田 、园艺作物 , 观赏 、药用植物 , 林用植物 、草类植物及其一切经济植物的有关植物遗传资源基础
理论研究 、应用研究方面的研究成果 、创新性学术论文和高水平综述或评论。诸如 , 种质资源的考察 、收集 、保存 、
评价 、利用 、创新 ,信息学 、管理学等;起源 、演化 、分类等系统学;基因发掘 、鉴定 、克隆 、基因文库建立 、遗传多样性
研究。
双月刊 ,大 16 开本 , 128 页。定价 20 元 , 全年 120元。各地邮局发行。邮发代号:82-643。国内刊号 CN11-
4996/ S ,国际统一刊号 ISSN1672-1810。本刊编辑部常年办理订阅手续 , 如需邮挂每期另加 3 元。
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中国草地学报　2011年　第 33 卷　第 5 期