全 文 ：·园林花卉·植物 北方园艺２０１３（０４）：６４～６７
第一作者简介：王亚沉（１９８５－），女，海南海口人，在读硕士，现主要
从事花卉栽培生理及生物技术等研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｚｈｉ２４７＠
１６３．ｃｏｍ．
责任作者：李枝林（１９５５－），男，云南宾川人，硕士，教授，硕士生导
师，现主要从事野生花卉遗传资源利用研究工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｚｌ－ｙｎ
＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ．
基金项目：云南省教育厅科学基金资助项目（Ｚ２００５－２－６５００８）；云
南省科技基金资助项目（２００９ＢＢ０１３）；云南省科技攻关资助项目
（２０１２ＢＢ００８）。
收稿日期：２０１２－１０－２５
碧玉兰和独占春正反交及种子无菌萌发研究
王 亚 沉１，石 镇 源１，王 　 丹１，张 小 平１，周 慧 恒２，李 枝 林３
（１．云南农业大学 花卉研究所，云南 昆明６５０２０１；２．云南农业大学 食品科学技术学院，云南 昆明６５０２０１；
３．云南农业大学 花卉研究所和云南农业大学协同创新中心，云南 昆明６５０２０１）
　　摘　要：以碧玉兰和独占春为亲本，采用正反交杂交法进行杂交育种试验，并在无菌条件下
对其所获得的杂交种子进行培养。结果表明：２种方法杂交兰花的结实率为６０％～１００％，正反交
对种子的萌发率没有显著影响。种子预处理、培养基激素和培养条件对种子萌发都有一定的影
响，其中，氢氧化钾和次氯酸钠浸泡种子可使兰花种子提早萌发并提高萌发率。光培养和暗培养
对种子萌动的影响差异不明显，但暗培养１０周不利于种子后期发育。较优处理为种子在播种前用
０．１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钾浸泡８ｍｉｎ和１０％次氯酸钠浸泡１０ｍｉｎ。１／２ＭＳ＋６－ＢＡ（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ，适合于２种兰花杂交种子的无菌萌发。
关键词：碧玉兰；独占春；正反交育种；种子无菌萌发
中图分类号：Ｓ　６８２．３１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１３）０４－００６４－０４
　　兰花是我国家喻户晓的传统名花，其味幽香，花色
淡雅、高洁，素有“花中君子”之称，具有很高的观赏价值。
在兰花产业的形成与发展过程中，新品种的选育起着重
要的作用。针对国内对兰属附生兰研究利用程度比较
低的现状，有必要培育适应性更广、观赏价值更高的新
品种。碧玉兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｌｏｗｉａｎｕｍ）和独占春（Ｃｙｍｂｉｄｉ－
ｕｍ　ｅｂｕｒｎｅｕｍ）是兰属附生兰中２个优良原生种，是蕙兰
中的金童玉女。碧玉兰花期４～６月，花型奇特、花色艳
丽，花朵唇瓣上“Ｖ”形红斑明显，株形优美，但花无香味。
独占春花期２～５月，花香，味如丁香，但株形较松散。该
试验以碧玉兰与独占春互为父、母本进行正反交，再以
得到的杂交种子为材料，研究无菌萌发进程，为利用自
有兰属植物资源培育新品种打下基础。目前有关兰花
杂交方面的研究已很多，但碧玉兰和独占春的杂交及杂
交种子无菌萌发的研究还鲜见报道。云南的兰花资源
极为丰富，其中不乏珍品和极品，观赏价值很高，在国际
国内都享有盛誉。兰花种子无菌萌发是杂交育种的关
键技术之一，也是建立兰花繁育体系的一种有效方法。
选用碧玉兰和独占春作为杂交亲本，旨在利用杂种优势
获得色香俱佳、适宜作为大型盆栽或切花的后代。此２
种兰花花期大概一致，杂交易行，该试验在借鉴前人经
验的基础上，利用云南丰富的兰花资源，进一步研究杂
交种子的萌发规律和技术，以期为今后建立更好的兰花
繁育体系提供参考。
１　材料与方法
１．１　试验材料
以碧玉兰和独占春互为父母本作杂交亲本材料，再
以杂交种子作无菌萌发试验材料。
１．２　试验方法
该试验于２０１１年３月至２０１２年４月在云南农业大
学花卉研究所资源圃和组培室进行。杂交授粉在２０１１
年４月１０日花期进行。２０１１年１１月，果实由深绿色转
变成淡黄绿色时，挑选尚未开裂的饱满蒴果，于１１月１３
日进行无菌播种试验。
１．２．１　杂交亲本的选择　该研究旨在培育出色香俱佳、
天资丽质的盆花以及耐瓶插、适合普通民众、高洁的切
花新品种。根据育种目标，从云南农业大学花卉研究所
的兰花资源圃中选择碧玉兰和独占春互为父、母本，进
行正反交杂交育种。
１．２．２　人工授粉　人工授粉在云南农业大学花卉所的
资源圃内进行，资源圃条件为：温度２０～２５℃，湿度
６０％～８０％。所选用的杂交方法为正反交杂交法。当
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北方园艺２０１３（０４）：６４～６７ 植物·园林花卉·
花朵开放２ｄ后开始授粉，一般选择在晴天进行，授粉前
先把花粉块顶端的药帽去掉（动作要轻，注意不要把花
粉块弄掉），再把母本花粉块用手轻轻取下来，放入干燥
的烧杯中。然后将父本的花粉块置于母本的蕊腔中，可
不用套袋（资源圃内几乎没有传粉的昆虫）。再把母本
上取下的花粉块置于父本的蕊腔中（此处的父本是相对
于前面所做的杂交组合而言，其实在该组合中它是作为
母本的）。授粉后挂牌，并在牌子上分别写明杂交时间、
杂交的父母本和被授粉的花朵数（一般用铅笔书写，以
避免浇水后字迹模糊）。授粉后应加强管理并注意观察
杂交果实的生长状况。
１．２．３　杂交种子预处理对比试验　取兰花杂交所得的
约八成熟，尚未裂开的蒴果为试验对象，将蒴果分为Ⅰ、Ⅱ
组，Ⅰ组蒴果直接进行表面消毒处理后接种，具体操作如
下：用自来水冲洗蒴果，以除去尘土等杂物，并在一定程
度上减少污染源。用７５％酒精擦净果皮，在超净超净工
作台上用７５％的酒精消毒２ｍｉｎ，无菌水清洗１次，然后
再用０．１％的升汞消毒２５ｍｉｎ，无菌水冲洗４次，然后用手
术刀剖开蒴果，将种子取出。把获得的种子分成２个处
理：处理（Ⅰ?１）：取出种子用纱布包裹好，用无菌水浸泡
２ｍｉｎ，然后再均匀播种到培养基上。处理（Ⅰ?２）：取出种
子用纱布包裹好，先用０．１ｍｏｌ／Ｌ　ＫＯＨ溶液浸泡８ｍｉｎ，
倒出ＫＯＨ溶液，加入无菌水清洗３次，最后用１０％
ＮａＣｌＯ处理１０ｍｉｎ，无菌水洗３次后再均匀播种到培养
基上。将Ⅱ组蒴果置于冰箱（４～６℃）冷藏２５ｄ后取出，
按Ⅰ组方法进行处理，得到另外２个处理，即冷藏处理（Ⅱ?
１）、冷藏＋ＫＯＨ＋ＮａＣｌＯ处理（Ⅱ?２）（表１）。
表１ 种子预处理试验设计
　　Ｔａｂｌｅ　１ Ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ｓｅｅｄ　ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｔｅｓｔ
　
温度
编号
无菌水 氢氧化钾＋次氯酸钠
常温 Ⅰ?１ Ⅰ?２
冷藏 Ⅱ?１ Ⅱ?２
１．２．４　不同培养基激素组合和培养条件对种子萌发的
影响　以杂交种为试验对象，分别选用６－ＢＡ（１．０、１．５、
２．０ｍｇ／Ｌ）、ＮＡＡ（０．５、１．０、１．５ｍｇ／Ｌ）以及二者的组合
共９个处理，具体见表４。基本培养基为１／２ＭＳ，所有培
养基均附加３０ｇ／Ｌ的蔗糖，７．２ｇ／Ｌ琼脂粉，１．０ｇ／Ｌ活
性炭，ｐＨ为５．８。温度（２５±２）℃，光培养和完全黑暗培
养２种条件，光照强度１　５００～２　０００ｌｘ。
２　结果与分析
２．１　兰花杂交结果
对２种兰花杂交后的生长和发育进行观察，发现杂
交后２～８ｄ，蕊柱的顶端开始下卷并盖住蕊腔，花瓣开
始萎蔫，整个花朵开始收缩，８ｄ后子房开始膨大。在试
验中还观察到不成功的杂交现象，子房发育到一定大小
后，果实变黄导致脱落。其原因可能是授粉已成功，但
后期的发育受阻。
由表２可知，这２种兰花人工授粉的花朵数相同
（同一天授粉），结实率为６０％～１００％，碧玉兰与独占春
杂交较易成功。说明这２种兰花的亲缘关系可能较近，
杂交的亲和力较强。
表２　 ２种兰花杂交结果
　　Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｒｏｓｓｉｎｇ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｗｏ　ｏｒｃｈｉｄｓ
杂交组合（♀×♂） 授粉数／个 结实数／个 结实率／％
碧玉兰×独占春 ５　 ３　 ６０
独占春×碧玉兰 ５　 ５　 １００
２．２　不同预处理对种子萌发的影响
该试验结果表明，药物处理对种子萌发有明显的促
进作用，对萌发数和萌发时间都有影响。
由表３可知，药物处理后，杂交的种子萌发时间均
提前了１５ｄ左右，萌发率均提高了约２５％。低温处理
对杂交的种子萌发也都有影响。比较常温和低温冷藏
处理，发现低温冷藏的Ⅱ?１萌发时间和萌发率均分别优
于常温处理组Ⅰ?１，Ⅱ?２萌发时间和萌发率均分别优于常
温处理组Ⅰ?２。总体来看，碧玉兰和独占春杂交种子的萌
发率约为７０％，母本的选择对杂交种子的萌发率没有明
显影响。
表３　　不同的预处理对种子萌发的影响
　　Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ　ｏｎ　ｓｅｅｄｓ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
处理
碧玉兰（♀）×独占春（♂） 独占春（♀）×碧玉兰（♂）
Ｇ．Ｄ／ｄ 萌发率／％ Ｇ．Ｄ／ｄ 萌发率／％
Ⅰ?１　 ６５　 ５０　 ６９　 ６０
Ⅰ?２　 ５０　 ８０　 ５３　 ８０
Ⅱ?１　 ５６　 ６０　 ６０　 ７０
Ⅱ?２　 ４０　 ９０　 ４２　 ９５
　　注：Ｇ．Ｄ（ｄ）为第１粒种子初始萌发天数。
２．３　不同激素组合对种子萌发的影响
相对于国兰而言，该杂交种子的萌发比较容易，在９
种培养基上均能顺利萌发，种子大部分萌动，接种４５ｄ左
右开始萌发，该杂交种以原球茎方式萌发，萌发时白色
小圆点，随着原球茎体积的增大，其上长出毛状假根，萌
发后生长较快，１５ｄ左右原球茎体转为绿色，但原球茎
不伸长。
由表４可知，从原球茎发育、生长情况看，６号和３
号培养基最好，种子萌发后，小球茎生长又快又大，发育
状况好；其次２号培养基。种胚转绿后，２周左右可由油
菜籽大小长成为小球体，在不转换培养基的情况下，随
着培养时间的延长，在原球茎的顶端出现芽。顶端的
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·园林花卉·植物 北方园艺２０１３（０４）：６４～６７
芽，长大分化出茎和叶。以诱导分化的效果比较，２、３、６
号培养基效果最好，１、４、５号其次，７、８、９号最差。
该试验结果表明，低浓度的细胞分裂素６－ＢＡ和高浓
度的生长素ＮＡＡ有利于原球茎的形成和增长。根据上
述试验结果，可选择１／２ＭＳ＋６－ＢＡ（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ作为种胚萌发培养基。
　　表４　 不同激素组合对种子萌发的影响
　　Ｔａｂｌｅ　４ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｓｅｅｄｓ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
编号 ６－ＢＡ／ｍｇ·Ｌ－１　 ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ 生长状况（９０ｄ）
１　 １．０　 ０．５ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较小，生长一般
２　 １．０　 １．０ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积很大，表面被白毛，生长健壮
３　 １．０　 １．５ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较大，表面被白毛，颜色鲜绿，生长健壮
４　 １．５　 ０．５ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较小，部分表面被白毛，生长较好
５　 １．５　 １．０ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较小，表面被白毛，生长较好
６　 １．５　 １．５ 大部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较大，表面被白毛，颜色鲜绿，生长健壮
７　 ２．０　 ０．５ 部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较小，少数表面被白毛，生长一般
８　 ２．０　 １．０ 部分种子萌动后逐渐形成原球茎，体积较小，生长一般
９　 ２．０　 １．５ 部分种子萌动后逐渐形成原球茎，但体积较小，生长一般
２．４　光暗培养对种子萌发的影响
种子暗培养１０周后观察发现，形成白色原球体的
百分数和光培养比较，没有明显差别；移到光下经过一
段时间培养后，观察发现，转绿原球茎的数量明显少于
光培养形成的数量，生长状态也差于光培养形成的原球
茎，体积较小，分化也较晚。
该试验结果表明，在光照（光暗周期１４ｈ／１０ｈ，光照
强度１　５００～２　０００ｌｘ）和完全黑暗条件下，碧玉兰和独占
春杂交种子均可萌发，而且萌发率均可达到较高水平，
但光照能够有效促进原球茎的诱导，在完全黑暗条件
下，形成的原球茎也比较小，移到光下后，经过一段时间
培养后，观察发现，转绿原球茎的数量明显少于光培养
形成的数量。根据上述试验结果，光培养对碧玉兰和独
占春杂交种子萌发较好。
３　讨论与结论
３．１　种子预处理
适当对种子进行预处理也可以提高国兰种子萌发。
对种子预处理的方法比较多，主要有物理方法和化学药
剂法。物理方法有低温处理、超声波处理、剪破种皮等。
化学方法有利用０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液、ＫＯＨ溶液
或１０％的ＮａＣ１Ｏ溶液浸种，腐蚀种皮［１］，同时溶解一些
种皮内含有的酸性抑制物。王菲等［２］的研究结果表明，
用２５％的ＮａＣ１Ｏ浸泡树莓种子１ｄ时，发芽率比对照高
出４２％；Ｊｉｎ等［３］利用ＫＯＨ对玉竹种子进行种皮软化处
理的结果表明，用１０％的ＫＯＨ浸泡种子４０ｍｉｎ，可显著
提高发芽率。段金玉等［４］通过对兰属１０种植物种子萌
发试验发现，有的种子只需剪破种皮，而另一些种子则
用氢氧化钠处理后萌发最快、萌发率最高，说明抑制种
子萌发的主要原因可能是一些能溶于氢氧化钠抑制萌
发的物质的存在。该研究也发现利用氢氧化钾等碱性
溶液能迅速解决中国兰种子的透气性差、透水的问题，
能明显提高种子的萌发率，且萌发时间明显缩短，与以
往研究结果基本一致。
３．２　基本培养基和激素
基本培养基是植物组织培养的重要基质，由于每种
植物的遗传特性、生物学和生态学特性不同，所需的营
养成分也不尽相同，对培养基的成分要求也存在差
异［５－６］，因此，要实现国兰的快速繁殖，首先必须对各阶段
培养基进行筛选。一般认为中低浓度无机盐（１／２ＭＳ）比
较适合兰花种子的萌发［７］。该试验中，杂交种子在培养
基１／２ＭＳ的培养下，都顺利萌发，说明了低盐培养基较
适合兰花种子萌发，支持了此结论。研究者们在兰花种
子无菌培养中激素的应用上进行了一些探索，试验证
明［８］，激素能够诱导兰花种子的胚发育成原球茎，它还
可以大大加快其个体发生和形态建成的速度［９］，并提高
种子的萌发率［１０－１１］。此在该杂交种子萌发试验中也得
到了证实。培养基中添加的激素（种类、量、组合）是兰
花组织培养技术的关键环节。常用的植物生长调节剂
有生长素（ＮＡＡ）、细胞分裂素（６－ＢＡ），并常配合使用。
３．３　培养条件
通常种子萌发采用暗培养［１２］或光照强度１　０００～
１　５００ｌｘ左右，光照时间１０～１２或１６ｈ／ｄ较宜［１３－１４］。地
生兰在黑暗的条件下往往比在光照下具有较好的萌发
率和成苗率，而黑暗对附生兰没有太大的影响。该试验
中发现附生兰碧玉兰和独占春在黑暗状态下的萌动率
与光培养条件下的萌动率差异不大，但萌发率差。在该
试验中，不需要专门的诱导苗的培养基，可直接成苗，减
少了换瓶工序，有利于在生产中节约成本。
该研究结果表明，种皮对于大多数地生兰种子萌发
都存在着一定的影响，也许是种皮的机械阻碍作用，也
６６
北方园艺２０１３（０４）：６４～６７ 植物·园林花卉·
许是由于种皮内含有抑制物，也许是兼而有之。这些预
处理效果的生理机制还待进一步深入研究。合适的处
理（处理液种类、植物生长调节剂、环境条件）能加快萌发
及生长速度，而不合适的处理会造成种子的死亡。总的来
说，该研究探索了一条比较适合碧玉兰和独占春杂交种子
萌发的方法，那就是采用授粉后第２４周的杂交兰种子作
为材料，先用０．１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钾溶液浸泡８ｍｉｎ，再用
１０％ＮａＣｌＯ处理１０ｍｉｎ，在温度（２５±２）℃、光照强度
１　５００～２　０００ｌｘ、光照时间１４ｈ／ｄ的条件下，较适宜种子
萌发的培养基为１／２ＭＳ＋６－ＢＡ（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
（１．０～１．５）ｍｇ／Ｌ。
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Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｃｒｏｓｓ　Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　Ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｌｏｗｉａｎｕｍａｎｄ　Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｅｂｕｒｎｅｕｍ
ａｎｄ　Ａｓｅｐｔｉｃ　Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｈｅｉｒ　Ｓｅｅｄｓ
ＷＡＮＧ　Ｙａ－ｃｈｅｎ１，ＳＨＩ　Ｚｈｅｎ－ｙｕａｎ１，ＷＡＮＧ　Ｄａｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｐｉｎｇ１，ＺＨＯＵ　Ｈｕｉ－ｈｅｎｇ２，ＬＩ　Ｚｈｉ－ｌｉｎ１
（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｆｌｏｒａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ　６５０２０１；２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ
Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ　６５０２０１；３．Ｃｏ　Ｉｎｎｏｖａｔｅ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｆｌｏｗｅｒ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ
Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ　６５０２０１）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ　Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｌｏｗｉａｎｕｍａｎｄ　Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｅｂｕｒｎｅｕｍａｓ　ｔｈｅ　ｐａｒｅｎｔｓ，ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ　ｃｒｏｓｓｅｓ，
ｈｙｂｒｉｄ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｔｗｏ　ｏｒｃｈｉｄ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ；ｔｈｅ　ｓｅｅｄｓ　ｏｆ　ｈｙｂｒｉｄ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ａｓｅｐｔｉｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ．
Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｆｒｕｉｔ－ｓｅｔｔｉｎｇ　ｖａｒｉｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　６０％ａｎｄ　１００％．Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓｅｅｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｄｉｒｅｃｔ　ｃｒｏｓｓｉｎｇ　ａｎｄ　ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ　ｃｒｏｓｓｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｓｅｅｄ　ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｔｈｅ　ｈｏｒｍｏｎｅ
ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｈａｄ　ｅｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ＮａＣｌＯ　ａｎｄ　ＫＯＨ　ｍａｄｅ　ｔｈｅ　ｓｅｅｄ
ｇｅｒｍｉｎａｔｅ　ｅａｒｌｉｅｒ　ａｎｄ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｔｈｅ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ．Ｓｅｅｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ｗｈｅｎ　ｓｅｅｄｓ　ｗｅｒｅ
ｓｏｗｅｄ　ｉｎ　ｌｉｇｈｔ　ｏｒ　ｄａｒｋ，ｂｕｔ　１０－ｗｅｅｋｓ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｉｎ　ｄａｒｋ　ｈａｄ　ａ　ｎｅｇｔｉｖｅ　ｅｆｅｃｔ　ｏｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ａｆｔｅｒ　ｓｅｅｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．
Ｔｈｅ　ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ　ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓｅｅｄｓ　ｗｅｒｅ　ｓｏａｋｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　０．１ｍｏｌ／Ｌ　ＫＯＨ　ｓｏｗｉｎｇ　８ｍｉｎ　ａｎｄ
１０％ＮａＣｌＯ　ｆｏｒ　１０ｍｉｎ　ｂｅｆｏｒｅ　ｓｏｗｉｎｇ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ．１／２ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０～１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０～１．５ｍｇ／Ｌ　ｗａｓ
ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎａｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　ｓｅｅｄｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｌｏｗｉａｎｕｍ；Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍ　ｅｂｕｒｎｅｕｍ；ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ　ｃｒｏｓｓ；ａｓｅｐｔｉｃ　ｓｅｅｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
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