全 文 ： 收稿日期：2008-03-31
基金项目：湖南省长沙市科技计划重大专项（K051003-22）资助
作者简介：刘亮（1982-），女，湖南长沙人，硕士，从事花卉组织培养研究。
注：易自力为通讯作者。

蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组织培养研究
刘 亮，易自力，蒋建雄，陈智勇，黄丽芳
(湖南农业大学 生物科学技术学院，湖南 长沙 410128)

摘 要：对蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组织培养进行研究，结果表明，不经过愈伤组织直接诱导丛生芽的
过程中，1/2MS + 6-BA 6.0mg/L 和 1/2MS + 6-BA 3.0mg/L + NAA 0.2mg/L 两种培养基的诱导率可达 100%，丛
生芽增殖阶段采用 1/2MS + 6-BA 5.0mg/L + NAA 0.5mg/L 效果最好；原球茎途径中，1/2MS + 6-BA 15.0mg/L +
NAA 1.0mg/L 诱导率达 20.0%，接入 1/2MS + 6-BA 3.0mg/L + NAA 0.5mg/L 培养基中，增殖倍数达 7.4，随后
转入 1/2MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.5mg/L 中，可很快分化成芽。生根培养基以 1/2MS + IBA 0.3mg/L 较好，
将生根的蝴蝶兰移栽至水苔中，两个月后成活率达 100%。此外，蝴蝶兰移栽 6 个月后转至水培更有利于生长。
关键词：蝴蝶兰；原球茎；丛生芽；组织培养
中图分类号：S682.31; Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2008)03-0043-03
A Study on Tissue Culture of Phalaenopsis spp.
LIU Liang, YI Zi-li, JIANG Jian-xiong, CHEN Zhi-yong, HUANG Li-fang
(College of Bioscience & Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128, Hunan China)

Abstract: The experiment studied in the tissue culture of Phalaenopsis spp.. The results showed
that in 1/2MS medium with 6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L or with 6-BA 6.0mg/L, the induction rate
of clustered shoots reached 100%. During the proliferating period of clustered shoots, the 1/2MS
medium with 6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L showed the best effects; in 1/2MS medium with 6-BA
15.0mg/L + NAA 1.0mg/L, the induction rate of protocorm-like body reached 20%, and in 1/2MS
medium with 6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L, the coefficient of reproduction is up to 7.4. It was easy
for protocorm-like body differentiation to buds in 1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L. In rooting
stage, the 1/2MS medium with IBA0.3 mg/L was efficient. Transplanted them on water moor, and its
survive rate reached 100% after two months. In addition, it was more conducive to the growth by
water culture in the late cultivation.
Key words: Phalaenopsis spp.; protocorm-like body; clustered shoots; tissue culture

蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)为兰科蝴蝶兰属花卉，原产于菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西亚及
我国台湾等地[1]。蝴蝶兰花型奇特，色彩艳丽，花朵色彩和花纹变化层出不穷，花期持久，可达 2～4
个月，素有“洋兰皇后”之美誉。它不仅是高档盆花，还可用作贵宾胸花、花篮插花等，具有极高的
欣赏价值与经济价值。长期以来，世界各地广泛开展蝴蝶兰快速繁殖途径的研究，以满足日益增长的
市场需要。蝴蝶兰为单茎气生兰，少有侧芽萌发，很难通过分蘖繁殖；其种子发芽率低，播种繁殖更
加困难。因此，繁殖蝴蝶兰一般采用组织培养方式。利用种子无菌发芽及原球茎途径快速繁殖蝴蝶兰
的报道较多，但以上两种方法均会产生较高的变异率。为了进一步减少变异，人们开始研究蝴蝶兰丛
生芽途径的快速繁殖[2,3]。本文对两个蝴蝶兰品种丛生芽、原球茎途径的组织培养及生根壮苗、移栽等
方面进行研究，并成功获得再生植株。

2008,37(3):43-45.
Subtropical Plant Science
第 37 卷 ﹒44﹒
1 材料与方法
1.1 丛生芽途径
1.1.1 材料 供试材料为两个蝴蝶兰杂交品种，分别为白花红唇系列的‘红唇美人’和迷你系列的‘婚
宴’（多分枝品种）。
1.1.2 方法 (1)取材与消毒：剪取花朵将要凋谢的花梗，其中多分枝品种在花梗芽即将抽出时剪取。用
75%酒精将花梗擦拭干净，然后以节为单位切成段，含芽的花梗上下留不同长度，置于超净工作台。
将花梗腋芽的苞片去除，放入 0.1%升汞中 12min，无菌水洗涤 5 次，然后截去两端，取中间部分插入
培养基中。(2)培养基：以 1/2MS 为基本培养基，在不同培养阶段分别添加不同浓度的生长调节剂(表 1
和表 2)，加入 0.5%琼脂粉，3%食用白砂糖，pH5.8。(3)培养条件：培养温度(25±2)℃，光照强度 1 500～
2 000 lx，连续光照 12h/d。
1.2 原球茎途径
1.2.1 材料 材料为萌发出的休眠芽的幼嫩叶片和成熟植株的花柄。
1.2.2 方法 (1)花梗的取材及消毒：剪取花梗，用 75%酒精擦拭干净，然后切成约 2mm 的薄片，放入
0.1%升汞中 10min，无菌水洗涤 5 次，分别接入⑤～⑧培养基中。(2)幼嫩叶片的取材：休眠芽萌发出
1～2 片叶后，取其幼嫩叶片，切去边缘部分，直接接种于①～④培养基中。(3)培养基： 1/2MS① + 6-BA
6.0mg/L(单位下同) + NAA 1.0， 1/2MS② + 6-BA 10.0， 1/2M③ S + 6-BA 10.0 + NAA1.0， 1/2MS④ + 6-BA
15.0 + NAA 1.0， 1/2MS⑤ + 6-BA 3.0， 1/2MS⑥ + 6-BA 1.0 + NAA 0.5， 1/2MS⑦ + 6-BA 3.0 + NAA 0.5，
1/2MS⑧ + 6-BA 5.0 + NAA 0.5，以上培养基均添加 0.5%琼脂粉，3%蔗糖，pH 5.8。(4)培养条件：培养
温度(25±2)℃，光照强度 1 500～2 000 lx，连续光照 12h/d。
2 结果与分析
2.1 丛生芽途径
2.1.1 花梗腋芽诱导 外植体接种约 14d 后，腋芽开始萌动膨大，约 20d 后长出小叶。各培养基均能诱
导出花梗芽，且出芽率较高，但出芽时间有明显差异，其中接种于 1/2MS + 6-BA 6.0 的腋芽最早诱导
出花梗芽(表 1)。对于多分枝的
‘婚宴’品种，接种约 14d 后，
腋芽开始萌动膨大，随后抽出
细嫩梗茎，细嫩梗茎上的芽点
又可抽出芽来，可使诱导率提
高 2～3 倍。
在不添加 NAA 的条件下，随着 6-BA 浓度的增加，诱导率提高，且诱导时间缩短，说明 6-BA 是
影响腋芽诱导的重要因素，且较高浓度的 6-BA 更有利于腋芽诱导。当 6-BA 3.0mg/L 时，添加少量 NAA，
诱导率也可达 100%，可见 6-BA 和 NAA 混合使用能达到较好的诱导效果。
2.1.2 丛生芽诱导 截取花梗腋芽诱导得到的花梗芽数目较少，因此笔者将切割下来的花梗芽移接到
1/2MS+6-BA3.0 培养基中诱导丛生芽，约 1 个月后可诱导出丛生芽。
2.1.3 丛生芽增殖 为了使丛生芽快速增殖，采用 4 种培养基进行实验。培养两个月后统计，结果表明，
1/2MS + 6-BA 5.0 + NAA 0.5 培养基
中增殖倍数最高，可达 5.5 倍(表 2)。
可见丛生芽的增殖仍需较高浓度
6-BA 与低浓度 NAA 混合使用。
2.2 原球茎途径
2.2.1 原球茎诱导 外植体叶片接入培养基后约 38d，③、④培养基中均出现浅绿色的颗粒状突起，约
50d 左右，①培养基中也开始出现原球茎状体，但②培养基中一直未诱导出原球茎状体。接入到各培养
基中的花柄薄片两个月后仍未诱导出原球茎状体，诱导结果见表 3。
表 1 不同 6-BA 与 NAA 配比对蝴蝶兰花梗腋芽诱导的影响
培养基(mg/L) 诱导时间(d) 接种数(个) 诱导成苗(个) 诱导率(%)
1/2MS + 6-BA 1.0 28 20 15 75
1/2MS + 6-BA 3.0 20 20 18 90
1/2MS + 6-BA 6.0 14 20 20 100
1/2MS + 6-BA 3.0 + NAA 0.2 15 20 20 100
表 2 6-BA 与 NAA 不同配比对蝴蝶兰丛生芽增殖的影响
培养基(mg/L) 接种数(个) 新增芽数(个) 增殖倍数
1/2MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5 89 228 3.56
1/2MS + 6-BA 3.0 + NAA 0.5 100 480 4.80
1/2MS + 6-BA 5.0 + NAA 0.5 90 405 5.50
1/2MS + 6-BA 3.0 86 374 5.35
第 3 期 刘亮,等：蝴蝶兰丛生芽、原球茎途径的组织培养研究 ﹒45﹒
从叶片诱导原球茎过程中可知，原球
茎诱导需高浓度的 6-BA，本实验设定的最
高 6-BA 浓度为 15mg/L，诱导率为 20.0%。
②培养基的 6-BA 虽然达到了 10mg/L，但
由于未添加 NAA，诱导率为 0，可见 NAA
在原球茎的诱导中也起着重要作用。在花
柄诱导原球茎的实验中，⑤～⑧培养基中均未产生原球茎，其原因有待进一步实验。
2.2.2 原球茎增殖与分化 将叶片诱导的原球茎接入 1/2MS + 6-BA 3.0 + NAA 0.5 培养基中，两个月后
增殖倍数达 7.4，随后转入 1/2MS + 6-BA 1.0 + NAA 0.5 中，可很快分化出芽。
2.3 生根壮苗
将两种途径获得的增殖芽转入 1/2MS + NAA 1.0 和 1/2MS + IBA 0.3 培养基中进行生根壮苗试验。
结果表明，两种培养基均能诱导试管苗生根，但后者生根快，平均根数可达 3.3 条，植株生长健壮。
2.4 移栽
当试管苗具 3～4 片叶、2～3 条根时即可出瓶移栽。为了提高试管苗移栽成活率，移栽前应进行
炼苗。将试管苗移至明亮通风的炼苗室中，揭开瓶盖炼苗 2～3d，然后将苗取出，洗净粘在根部的培养
基。将试管苗放入 0.1%高锰酸钾中浸泡 20～30min，再移栽至已消毒的基质上。本实验选用水苔、泥
炭+珍珠岩两种基质进行实验，并用水培方式进行对比，以期找到更适合蝴蝶兰的栽培方式。
由表 4 可见，水苔较适合蝴蝶兰移栽，其移栽成活率可达 100.0%。而水培蝴蝶兰前两个月成活率
可达 92.3%，但幼苗长势不佳，植株弱小，且长霉较多。至第三个月，较弱小的苗相继死亡，成活率
仅 64.6%。为进一步明确水培方式是否适合蝴蝶兰栽培，笔者将水苔栽培六个月的幼苗转为水培，结
果发现水培植株生长速度比基质中的快，且长
势好。一些栽培在基质中根已腐烂、叶片萎蔫
的蝴蝶兰转为水培后，又能长出新根，叶片也
重新挺立。综上所述，蝴蝶兰组培苗前期适宜
用基质栽培，待其生长较为健壮后再转至水
培，则更有利于生长。
3 结 论
目前，蝴蝶兰组织培养研究大多采用原球茎途径[4-6]，而丛生芽途径报道较少。本实验对两种途径
进行了研究，发现在原球茎诱导的环节中，叶片的原球茎诱导率很低，且诱导时间较长，而花柄不能
诱导出原球茎，可见提高原球茎诱导率是该途径的关键，仍待进一步提高；而丛生芽途径诱导率高，
诱导时间较短，丛生芽增殖率也较高，可达 3～5 倍，且变异率较前者低。相对而言，丛生芽诱导是一
条快速繁殖蝴蝶兰的好途径。
从花梗腋芽诱导实验来看，花梗消毒是极为重要的一步，只要消毒液及消毒时间掌握准确，一般
能诱导出芽，且诱导率较高。本实验培养基均采用白糖代替蔗糖，不论是诱导还是增殖培养，均取得
较好结果，且节约成本。有分枝的‘婚宴’红花品种在花梗芽即将抽出分枝时取材，可先抽出梗茎，然后
由梗茎的芽点再抽出芽，可使诱导率提高 2～3 倍。
蝴蝶兰栽培实验结果表明，组培苗前期适宜用水苔基质栽培，待生长较为健壮后转至水培，则更
有利于生长。
参考文献：
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表 3 6-BA 与 NAA 不同配比对蝴蝶兰原球茎诱导的影响
培养基 外植体 诱导时间(d) 原球茎诱导率(%)
① 叶片 50 11.1%
② 叶片 60 0
③ 叶片 38 15.0%
④ 叶片 38 20.0%
~⑤ ⑧ 花柄 60 0
表 4 不同栽培方式对移栽成活率的影响
成活率(%) 栽培方式 移栽苗数
(株) 2 个月 3 个月 3 个月后长势
水苔 30 100.0 100.0 长势较好
泥炭+珍珠
岩 40 62.5 60.0 长势差,长霉较多
水培 65 92.3 64.6 长势差,长霉较多