全 文 ：收稿日期:2007-12-29;　修订日期:2008-03-31
作者简介:陈　忠(1963-),男(汉族),海南海口人 ,现任海南师范大学教
授 ,学士学位 ,主要从事实验药理学研究工作.
＊通讯作者简介:陈光英(1971-), 女(汉族),四川射洪人 , 现任海南师范
大学教授 ,博士学位 ,主要从事天然产物化学研究工作.
青梅和大叶鱼骨木提取浸膏的抑菌活性
陈　忠 1, 2 , 杨　燕1, 2 , 王天山 1, 2 , 陈光英1, 2＊ , 莫峥嵘 1, 2 , 王安伟 1, 2
(1.海南省热带药用植物化学重点实验室 ,海南 海口　 571158;　2.海南师范大学 ,海南 海口　571158)
摘要:目的 测定青梅和大叶鱼骨木不同有机溶剂提取浸膏的抑菌活性。方法 采用常规扩散法测定青梅和大叶鱼骨木
的石油醚 、氯仿 、醋酸乙酯和正丁醇提取浸膏对大肠杆菌 、金黄色葡萄杆菌 、枯草杆菌 、根霉和黑曲霉的抑制活性。结果
在两种药物提取浸膏中 ,只有青梅醋酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏以及大叶鱼骨木氯仿浸膏对这 3种细菌有抑制活性 ,而所
有浸膏对两种霉菌均没有抑制活性;同时 , 随着溶液浓度的增大其抑制效果也逐渐增强。结论 青梅醋酸乙酯浸膏和正
丁醇浸膏以及大叶鱼骨木氯仿浸膏对 3种细菌有抑制活性 ,而所有浸膏对两种霉菌均没有抑制活性。
关键词:抑菌活性;　青梅;　大叶鱼骨木
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0445-01
AntimicrobialActivityofExtractsfromVaticamangachpoiBlancoandCanthiumsimile
MerrofHainanIsland
CHENZhong1, 2 , YANGYan1, 2 , WANGTian-shan1, 2 , CHENGuang-ying1, 2＊ ,MOZheng-rong1, 2 , WANGAn-wei1, 2
(1.HainanProvincialKeyLabofTropicalPharmaceuticHerbChemistry, Haikou, China571158, China;
2.DepartmentofChemistry, HainanNormalUniversity, Haikou, 571158, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheantimicrobialactivityoftheextractspreparedfromVaticamangachpoiBlancoandCanthiumSimileMerofHainanIsland.MethodsInpresentstudy, theclassicdiscdifusionmethodwasappliedfortestingtheantimicrobi-
alactivityofpetroleumether, chroloform, ethylacetateandn-butanolfromV.mangachpoiBlancoandC.SimileMerr, respec-
tively.ResultsOnlytheethylacetateandn-butanolextractsfromV.mangachpoiBlancoandthechroloformextractfromC.
SimileMerrshowedantimicrobialactivityagainstE.coli, S.aureusandB.subtilis, butnoremarkableactivitywasobservedagainst
R..nigricansandA.niger.ConclusionTheethylacetateandn-butanolextractsfromV.mangachpoiBlancoandthechroloform
extractfromC.simileMerrhasantimicrobialactivityagainstthesethreebacteria, buthasnoantimicrobialactivityagainstthese
twomoulds.
Keywords:Antimicrobialactivity;　VaticamangachpoiBlanco;　CanthiumSimileMerr
　　海南素有 “天然药库”的美称 , 分布有三千四百多种热带及
亚热带植物 , 是南药的主要生产基地 [ 1] , 其中有 40%的植物已被
当地居民作为民族药物 , 主要用于治疗一些疑难病症。实验室利
用地处海南的优势 , 长期研究海南地区黎苗族的传统药用植物 ,
旨在寻找具有生物活性的天然药物和结构先导物。其中青梅在
海南民间长期用作杀菌消毒 , 治疗肝炎及提取中药龙脑香。国外
学者对大叶青梅属植物的化学成分进行了研究 ,主要得到白藜芦
醇低聚物和三萜类化合物。白藜芦醇和它的低聚物由于具有抗
人免疫缺陷病毒(HIV)[ 2] 、抗肿瘤 [ 3] 、抗氧化和抗菌消炎等 [ 4]生
物活性而引起关注。而大叶鱼骨木在民间被用于治疗各种外伤
疼痛 、金伤 、跌打损伤 、淤血疼痛 、肿胀 、闷挫伤 、扭伤。国外学者
对大叶鱼骨木属植物的化学成分进行了研究 , 得到烯醚类 、酚苷
类 [ 5] 、氰苷类 [ 6]和黄酮苷类 [ 7]化合物。而这两种植物的化学成
分和药理活性研究未见报道。本文报道了这两种民间药用植物
的不同有机溶剂提取物对细菌和霉菌的抑制活性。
1　材料
1.1　供试菌种 大肠杆菌 、金黄色葡萄杆菌 、枯草杆菌 、根霉 、黑
曲霉 , 均由海南师范大学生物系提供。
1.2　供试样品 青梅与大叶鱼骨木采集于海南霸王岭地区 ,由海
南霸王岭国家级自然保护区陈庆鉴定为青梅 Vaticamangachpoi
Blanco与大叶鱼骨木 CanthiumSimileMerr。
2　方法
2.1　浸膏提取方法 取青梅的茎皮部分和大叶鱼骨木的叶子与
嫩枝部分分别用 70%的乙醇在 80℃回流提取 3h,分别提取 3次
后合并提取液进行浓缩 ,得到醇提浸膏;此醇提浸膏分散于适量
水中 , 依次用石油醚 、氯仿 、醋酸乙酯和正丁醇提取浓缩后得到对
应溶剂提取的浸膏。青梅的石油醚浸膏 、氯仿浸膏 、醋酸乙酯浸
膏和正丁醇浸膏分别标记为 VMBA, VMBB, VMBC和 VMBD, 而
大叶鱼骨木的石油醚浸膏 、氯仿浸膏 、醋酸乙酯浸膏和正丁醇浸
膏分别标记为 CSMA, CSMB, CSMC和 CSMD。这些提取浸膏供
测试用 。
2.2 　抑菌活性测定方法
2.2.1　培养基 细菌培养基:取 19.5 g营养肉汤培养基粉末溶
于 1 L无菌水中 , 加 15 g的琼脂 , 加热待其溶解后灭菌。
霉菌固体培养基:取 28.5 g真菌培养基粉末溶于 1L无菌水
中 , 加 15 g的琼脂 , 加热待其溶解后灭菌。
2.2.2　抑菌实验方法 用半径 15mm的滤纸片分别将各药品不
同提取浸膏及不同浓度的溶液浸透滤纸片。待其自然晾干后放
入接有菌种的培养皿中。利用其扩散作用 ,使滤纸片的药品溶入
培养基中。菌种在经过 24h或 48h培养后(细菌培养 24 h、霉菌
培养 48 h), 然后用游标卡尺测量其抑菌圈大小 , 其计算方法
如下:
抑菌圈半径 R= x±SD
x=∑Xn, SD= ∑X
2 -(∑X2)/n
n-1 　(n=6, 单位 mm)
3　结果与分析
从青梅和大叶鱼骨木中提取的 8种浸膏分别配制成浓度为
0.025, 0.050和 0.100 g/ml的乙醇溶液 , 测试其对大肠杆菌 、金
黄色葡萄杆菌 、枯草杆菌 、根霉和黑曲霉 5种微生物的抑制效果。
测试结果显示 , 这些提取浸膏只对大肠杆菌 、金黄色葡萄杆菌和
枯草杆菌这 3种细菌有抑制作用 , 而对根霉和黑曲霉这两种霉菌
没有抑制作用。这些提取浸膏在不同浓度下对不同细菌的抑制
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.2 时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期
效果列于表 1 ～ 3中。青梅的正丁醇浸膏和醋酸乙酯浸膏在测试
浓度下对细菌有很强的抑制效果 ,其中对大肠杆菌和金黄色葡萄
杆菌的抑制作用强于对枯草杆菌的抑制作用。 而大叶鱼骨木的
提取浸膏中只有氯仿浸膏有抑菌活性 ,且抑制作用明显弱于青梅
相应浸膏相应浓度的抑制作用 , 在浓度为 0.025 g/ml时没有抑
制作用。
表 1　青梅 、大叶鱼骨木提取物对大肠杆菌的抑菌效果( x±s)
浓度 C/g· ml-1 VMBD VMBC CSMB 对照组
0.025 16.6±0.3＊ 17.4±0.2 - -
0.050 17.5±0.5 17.8±0.4 16.5±0.4 -
0.100 18.6±0.3 20.0±0.4 17.0±0.1 -
　　＊单位为 mm
表 2　青梅 、大叶鱼骨木提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果( x±s)
浓度 C/g· ml-1 VMBD VMBC CSMB 对照组
0.025 17.1±0.3 18.7±0.6 - -
0.050 19.6±0.5 19.4±0.2 15.9±0.2 -
0.100 21.8±0.1 22.9±0.3 17.4±0.2 -
表 3　青梅 、大叶鱼骨木提取物对枯草杆菌的抑菌效果( x±s)
浓度 C/g· ml-1 VMBD VMBC CSMB 对照组
0.025 - - - -
0.050 - 15.7±0.2 17.4±0.3 -
0.100 15.9±0.2 16.4±0.1 17.8±0.3 -
4　讨论
由于实验供试品是粗提取物 ,所含的化学成分较复杂 , 并且
不是所有的化合物均表现出抑菌活性 ,因此所配制溶液的浓度均
比较高。在此抑菌活性初步实验的指引下 ,我们正在研究具有抑
菌活性的提取浸膏的化学成分 。初步分离纯化的结果显示 ,大叶
鱼骨木氯仿浸膏主要含有小分子酚类化合物;另外根据文献报
道 , 青梅属植物的正丁醇浸膏和醋酸乙酯浸膏主要含有二苯乙烯
类化合物 ,且这些化合物表现出很强的抗 HIV活性。
抑菌活性初步定性实验提示青梅和大叶鱼骨木这两种药用
植物具有相当的生物活性 ,其活性部位的化学成分研究在国内外
尚未有报道。因此对这两种药用植物的药理活性和化学成分正
在研究中 , 可望从这两种药用植物中发现新颖的具有抗菌 、抗
HIV和抗 HBV活性的天然产物。
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收稿日期:2008-03-05;　修订日期:2008-05-27
作者简介:潘海峰(1967-),女(满族),河北承德人 ,现任承德医学院副主任药师 ,硕士学位 ,主要从事中药新药研究工作.
金莲花露毒理学安全性评价
潘海峰1 ,李艳荣 1 ,辛春兰 2 ,李守拙1
(1.承德医学院中药研究所 ,河北 承德　067000;　2.承德医学院附属医院 ,河北承德　067000)
摘要:目的 对金莲花露毒理学安全性进行评价。方法 清洁级昆明种小鼠 、SD大鼠以金莲花露各按最大耐受量(MTD)
等体积灌胃 , 记录中毒表现及死亡情况;采用平板掺入法 ,分加与不加 S-9混合液两种;选清洁级昆明种小鼠 , 取胸骨骨
髓制片 , 查其骨髓嗜多染红细胞微核发生率;选雄性小鼠 , 取附睾制片 ,查小鼠精子畸形率;30 d喂养实验 , 观察生长发
育 、食物利用率 、血液学检查和生化学检查结果。结果 雌雄性小 、大鼠均未见明显的中毒症状及死亡;在加与不加 S-9
的情况下 , 均未呈现致突变作用;小鼠微核实验 、小鼠精子畸形实验均呈阴性;30 d喂养大鼠 , 全部存活 , 且发育良好 , 选
定各指标均未见异常。结论 金莲花露对两种性别的大 、小鼠的 MTD均大于 20 000 mg/(kg· bw), 说明该产品属实际无
毒物;三项致突变实验结果阴性;大鼠 30 d喂养实验各项指标均无明显异常。
关键词:金莲花露;　毒理学;　安全性评价
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)02-0446-02
SafetyAssessmentofTrolliusBeverrage
PANHai-feng1 , LIYan-rong1 , XINChun-lan2 , LIShou-zhuo1
(1.InstituteofChineseMateriaMedica, ChengdeMedicalColege, Chengde067000, China;2.AfiliatedHos-
pitaltoChengdeMedicalColege, Chengde067000, China)
Abstract:ObjectiveToassessthesafetyofTrolliusBeverrage.MethodsTheexperimentalanimalswereKunmingmiceandSD
rats.MiceandratsweregastricinfusionwithMTDthesamevolumeofTroliusBeverrage.Detoxificationanddeathstatuswerere-
corded.Flatplateincorporatingmethodwasusedwith2 kindsofmixturesolutionswhichwereaddedS-9 ornot.Thesternal
bonemarrowofcleanKunmingmicewasisolatedanddrivenfilmproducer.Alivingrateofmousebonemarrowpolychromatice-
rythrocytemicronucleustestwaschecked.TheepididymisofthedoublesidesinfemalecleanKunmingmicewasdrivenfilmpro-
ducer.Therateofspermteratogenicitywasobserved.Performtheresultsofthegrowthanddevelopment, foodutilizationrate, the
checkofbloodandbiochemistryaftertheanimalswerefedtokeepexperimentfor30days.ResultsThemiceandratswereallnot
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.2