全 文 ：蝴蝶兰有“兰花皇后”之美称，在鲜切花中是不可多得
的高级材料，具有极高的观赏价值和经济价值。但由于它的
自然生长速度慢，繁殖系数低，影响了它的推广和应用。笔
者通过对蝴蝶兰的再生体系的优化研究，旨在提高蝴蝶兰
的繁殖系数，为蝴蝶兰的遗传转化做好前期准备工作。
! 材料与方法
!! 原球茎的诱导 供试材料为红花蝴蝶兰的试管苗叶
片和气生根。在无菌条件下，切下不同生长龄的叶片和根
尖。设计蝴蝶兰诱导培养基为：!基本培养基，#$$ % &’()、
$* %+ &’()，设计不同浓度的 ,$，另添加 -+.椰汁、/ ’()琼
脂和 -+ ’()蔗糖（01值 234）。每个处理接种 2+个外植体，5
次重复。光照设置散射光和 - +++ 67两种强度作比较。统计
原球茎的诱导率和原球茎的大小。
!# 原球茎的增殖 将诱导的原球茎按 5!2 个为一团接
种到不同浓度的 ,$培养基中培养，设计蝴蝶兰增殖培养
基：8基本培养基，#$$ % &’()、$* %+ &’()，设计不同浓度
的 ,$。另添加 -+ 9椰汁、/ ’()琼脂和 -+ ’()蔗糖（01值
2:4），每个处理接种 2+个外植体，5个重复。培养条件均为
-2 ，光照时间 %; <，光照强度 - +++ 67。统计原球茎的增殖
倍数和原球茎的大小。
!$ 原球茎的出苗 设计 5种基本培养基和 4 种浓度的
=$$，交互为 %-个处理，分别对原球茎进行出苗试验。在培
养基中添加几种其他物质：苹果酸 5+ ’()>香蕉泥 %++ ’()>
活性炭 % ’()>蔗糖 %2 ’()>琼脂 / ’()。每个处理接种 55个
外植体，5次重复。培养条件均为 -2 ，光照时间 %; <，光照
强度 - +++ 67。统计原球茎的出苗率。
# 结果与分析
#! 原球茎的诱导
#!! 不同外植体对原球茎诱导的影响。对蝴蝶兰组培苗
的根尖、生长龄为 %4 *的幼叶和生长龄为 5+ *的成熟叶进
行原球茎的诱导实验。结果表明（表 %）：切割后的叶片在接
种 5+ *后，幼叶的诱导率最高，成熟叶的诱导率很低且褐
化严重，而根尖几乎没有诱导出原球茎，可见幼小的叶片有
利于原球茎的产生。还发现在同一叶片上，叶基部的切块较
叶中和叶尖的切块诱导率高。对于比较小的幼叶，未切割时
也能诱导出原球茎。
#!# 不同浓度的 ,$对原球茎诱导的影响。选用生长龄
为 -周，大小为 % ?&左右、叶色嫩绿的叶片为诱导材料。用
刀片将叶片切割下来后，置于含不同浓度的 ,$培养基上
培养。培养 %2!-+ *发现叶片被切割周围产生浅绿色的原
球茎状小突起，小突起是叶的近轴面叶肉和表皮细胞分裂
增生形成的，这些细胞具有旺盛的分生能力，很快发育成为
原球茎。
由表 -可知，不同浓度的 ,$对原球茎的诱导率和原
球茎的大小影响比较明显。当 ,$为 %+ &’()时，诱导率最
高，但原球茎不足 % &&。在试验中发现当原球茎不足 % &&
时，很难进一步增殖生长；诱导出的原球茎越大，越有利增
殖生长。当 ,$为 ; &’()时，诱导出的原球茎达到最大为 5
&&以上。所以在原球茎的诱导试验中，选择 ,$的最佳浓
度为 ; &’()。
#!$ 不同光照条件对原球茎诱导的影响。在对原球茎进
行诱导的过程中，发现外植体很容易褐化。抑制叶片褐化的
表 ! 不同外植体对原球茎诱导的影响
外植体 接种数 诱导数 褐化数 诱导率! 9 褐化率!9
幼叶 %2+ ;@ @ 4; ;
成熟叶 %2+ 5 ;@ - 4;
根尖 %2+ + -% + 4
表 # 不同浓度 %!&’对原球茎诱导和生长势的影响
;!,$
&’()
#$$
&’()
$A
&’()
诱导率
9
原球茎直径
&&
- % %+ ;:55#+:BB * -:55$+:%B C
4 % %+ %-:;/$+:BB ? -:2/$+:+@ C
; % %+ -/:++$%:%2 C 5:2/$+:+@ D
B % %+ 5B:55$%:2- D %://$+:%- ?
%+ % %+ 4%:;/$%:-+ D +:@/$+:-- *
蝴蝶兰再生体系优化的研究
徐文华 %，-，范燕萍 - （%:长江大学园艺园林学院，湖北荆州 454+-2；-:华南农业大学园艺学院，广东广州 2%+;4-）
摘要 探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。试验表明：用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好，最适培养基为：8>
;!,$ %+ &’() >#$$ % &’() >EF -+9G蔗糖 -+ ’() >琼脂 / ’()（01值 2:4）；最适增殖培养基为：8>;!,$ - &’() >#$$ % &’() >EF -+
9>蔗糖 -+ ’() >琼脂 / ’()（01值 2:4）；最适生根长苗培养基为：%(-8>#$$ % &’() >苹果酸 5+ ’()>香蕉泥 %++ ’()>活性炭 % ’() >蔗
糖 %2 ’() >琼脂 / ’()（01值 2:4）。
关键词 蝴蝶兰；原球茎；组织培养；再生体系
中图分类号 H@4@:/%>B:45 文献标识码 $ 文章编号 +2%/I;;%%（-++2）+;I%+5+I+-
()*+, -. /0)12*2 3454.467)1-. (,8)42 1. !#$#%&’()*)
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@4, A-6+8 !,$,%&’()*)；\NJQJ?J&!6P^K CJ*X；ZPWWRK ?R6QRNK；cK’KOKNDQPJO WXWQK&
基金项目 广东省科技攻关重点项目（E-+5+4），广州市科技攻关重点
项目（-++55B）。
作者简介 徐文华（%@/@’），女，湖北武汉人，硕士，从事观赏植物的遗
传育种研究。 通讯作者。
收稿日期 ())2!+4!++
安徽农业科学!*+,-./0 +1 2.3,4 25-467846())9! 55;#$%+5+I%+5% 责任编辑 罗芸 责任校对 罗芸
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2005.06.058
方法是勤换培养基（! #换 !次），及时将叶片移入新鲜的
培养基，可减轻褐化状况。实验还发现，褐化的程度与培养
时的光照强度有关，当光照强度为 $ %&时，叶片褐化的
程度较严重，达 ’ (左右；当光照为其他培养架反射过来
的弱散射光时，褐化得到了较好的抑制，仅为 ! (左右。
!! 原球茎的增殖 将原球茎从幼叶中诱导出来后，需将
原球茎移入到新的培养基中进行增殖培养。原球茎在增殖
过程中，可见表面突起一个个圆球，部分表面细胞分化出根
毛状物。由表 )可知，不同浓度的 *+对原球茎的增殖和原
球茎的大小影响比较明显，随着 *+浓度的增加，原球茎增
殖倍数和原球茎的大小均有下降的趋势。当 *+为 $ ,-./
时，原球茎的增殖倍数达到最高，且原球茎的大小达到最大
值。所以 *+的最佳浓度为 $ ,-./。
!# 原球茎的生根壮苗 原球茎增殖培养约 $个月后，肉
眼可见原球茎顶部具有 !!$个叶原基，此时将原球茎转移
到生根壮苗培养基中，培养 ) #后统计出苗率。由表 ’可
知，当基本培养基为 !.$ 01，2++为 ! ,-./时，原球茎的出
苗率达到最高，且苗的生长势最佳。
# 讨论
#$ 影响原球茎诱导的因素 在蝴蝶兰的固体培养中，进
行原球茎诱导的外植体选择时，明显地发现生长肥厚的幼
嫩叶片的诱导率最为理想，这与杨美纯3!4等（$）的研究一
致。在实验中还发现，叶基部的切块较叶中和叶尖的切块的
诱导率高。在对叶片切割时，过多的切口会使叶片褐化死
亡，所以在对幼叶切割时，将叶片从叶基部切下，可以获得
最高的诱导率。
在原球茎的诱导过程中，*+的浓度对原球茎的诱导
效率和生长势有很大的影响。在 *+为 !! ,-./的范围
内，随着 *+浓度的升高原球茎的诱导率也在增加，但原球
茎的生长势却不好。近年来，一些研究只报道了 *+浓度对
原球茎诱导率的影响，却没研究对诱导出的原球茎的生长
势的影响3$! ’4。笔者结合 $方面的比较，确定最终的 *+的浓
度为 5 ,-./，这样诱导率比较高，且原球茎的生长状况良
好，为原球茎的进一步增殖打下基础。
光照条件也是影响原球茎诱导的一个重要因素。散射
光有利于原球茎的诱导，并能有效地减轻叶片诱导时的褐
化状况。
#%! 影响原球茎增殖的因素 在对蝴蝶兰原球茎的增殖
实验中研究发现，随着 *+浓度的降低，原球茎的增殖率提
高。并且在不加 *+的条件下，原球茎也能较好的增殖，这
可能是原球茎自己体内已积累了较高水平的细胞分裂素的
缘故。这与周俊辉364（$$）、王芳3’4（$)）的报道一致，但与
王亦菲354（!775）、彭立新3$4（!777）的结果不同。另外，从控制
遗传变异方面考虑，不应使用高浓度的激素组合，以免原球
茎多代增殖后形成异常苗。在实验中还发现，原球茎在切割
时，不应切得太小，否则褐化情况严重。在接种时，原球茎应
紧密的靠在一起，这样才能生长旺盛。从实验中可以得出原
球茎在增殖生长时，具有较强的群体优势效应，与彭立新 3$4
（!777）、马子骏384（!779）和周俊辉364（$$）的报道一致。
## 影响蝴蝶兰生根壮苗的因素 在蝴蝶兰生根壮苗培
养中发现，!.$01比 01的效果好，因此蝴蝶兰的生根壮苗
应以较低的无机盐浓度为好。2++浓度对出苗率没有多大
影响。活性炭的添加，可以有效防止原球茎褐化，有利于小
苗的生长。
在蝴蝶兰的生根壮苗实验中，笔者参照有关报道394，在
培养基的设计中添加了香蕉汁、苹果酸、蛋白胨等附加物，
获得了较高的出苗率。
参考文献
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的影响3:4<中南林学院报，$)，$)（6）：!!;!)<
表 # 不同浓度 &!’(对原球茎增殖和生长势的影响
5!*+
,-./
2++
,-./
+=
,-./ 增殖倍数
原球茎大小
,,
! ! 8<78#<5 > $<5)$#
$ ! ! 9<’8$<5 ? )<’)$<7 ?
’ ! ! 9<)8$<) ? )5 ! ! 9
9 ! ! 8<75$<’ > $<6)$! ! ! 8<67$<) # $<$5$<7 A
!!!!注：!B<6；以原球茎增殖 5 #为统计时间。
表 ) 不同基本培养基和 *((对蝴蝶兰原球茎生根壮苗的影响
基本培养基 2++,-./ 接种数 出苗数
出苗率
( 生长势
01 ! ! )$ )$
$ !6 )7 )7 苗较小
) ! )) )) 叶色浓绿
’ ! ) )
!.$01 ! ! 6! 6!
$ ! ’) ’) 苗较大
) ! ’ ’ 叶色浓绿
’ ! ’6 ’6
花宝 !号 ! ! )) ))
$ ! ’) ’) 苗较大
) ! )$ )$ 叶色浓绿
’ ! )! )!
徐文华等 蝴蝶兰再生体系优化的研究))卷 5期
本刊提示 来稿请用国家统一的法定计量单位的名称和符号!不要使用国家已废除了的单位 如面积用 C,$#公
顷$%,$&平方米$!不用亩%尺 $等’质量用 D&吨$%E-&千克$%,-&毫克$!不再用担等’表示浓度的 FF, 一律改用 ,-.E-%
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