全 文 ：第 33 卷 第 3 期 青 海 医 学 院 学 报 Vol． 33 No． 3
2012 年 JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE 2012
* 青海大学医学院中青年科研基金项目(2005 － KY － 03)
袁 明(1969 ～) ，男，汉族，青海籍，副教授
藏药全缘叶绿绒蒿不同提取部位对
小鼠急性肝损伤的保护作用*
袁 明1，任延明2，赵协慧2，陈湘宏1
(1．青海大学医学院药学系;2．青海大学医学院中医系)
摘 要 目的 筛选藏药全缘叶绿绒蒿抗 CCl4 小鼠急性肝损伤的有效部位。方法 采用
CCl4(0． 15%，腹腔注射)制备小鼠急性肝损伤模型，测定各组小鼠血清 ALT、AST 的活性及肝脏指
数，观察肝组织的病理损伤程度。对全缘叶绿绒蒿不同提取部位进行保肝活性筛选，并与联苯双酯
进行对照。结果 与正常对照组相比，模型组小鼠血清 ALT、AST 活性显著升高(P ＜ 0． 01) ，肝脏
出现不同程度坏死及变性;与模型组比较，乙酸乙酯组能显著降低小鼠血清 ALT、AST 活性
(P ＜ 0． 01) ，与联苯双酯组无显著性差异(P ＞ 0． 05) ，并能明显减轻 CCl4 引起的肝组织结构损伤。
结论 藏药全缘叶绿绒蒿乙酸乙酯提取部位具有较强保肝作用。
关键词 全缘叶绿绒蒿 部位 急性肝损伤
中图分类号 R291． 408 文献标识码 A
THE PROTECTIVE EFFECT OF DIFFERENT FRACTIONS
EXTRACTED FROM TIBETAN MEDICINAL HERB
Meconopsis integrifolia
ON ACUTE LIVER INJURY IN MICE
Yuan Ming1，Ren Yanming2，Zhao Xiehui2，Chen Xianghong1
(1． Department of Pharmacy，Qinghai University Medical College;
2． Department of Tradition Chinese Medicine，Qinghai University Medical College)
Abstract Objective To screen the active components extracted from Tibetan medicinal herb Meconopsis inte-
grifolia and find out the parts which can protect against acute liver injury induced by carbon tetrachloride in mice．
Methods Murine acute liver injury models were induced by CCl4(0． 15%，Intraperitoneal injection)． The hepato-
protective activity was selected by experiments on water extracts and different parts of extracts，and to take Bifendate
Pills as control，then determined activities of serum alanine aminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase
(AST)and examined the liver indexes，observed the pathological changes of hepatic tissue． Results Compared with
the control group，the liver indexes and the activities of serum ALT，AST in model group were significantly increased
(P ＜ 0． 01)and the liver was shown mild，moderate and severe necrosis and degeneration;compared with the model
group，the activities of serum ALT，AST in the ethyl acetate extracts group were decreased significantly(P ＜ 0． 01)
061
DOI:10.13452/j.cnki.jqmc.2012.03.002
and the liver damage induced by CCl4 was reduced remarkably;while compared with the bifendate group，there was
no significant difference (P ＞ 0． 05)． Conclusion Ethyl acetate extracts of Tibetan medicine Meconopsis integrifolia
has a better hepatoprotective effect．
Key words Meconopsis integrifolia Effective fraction Acute liver injury Protective effect
全缘叶绿绒蒿［Meconopsis integrifolia (Maxim．)
Franch．］为罂粟科绿绒蒿属野生药用植物，主产于
青海、西藏、甘肃等省区，以花或全草入药，藏药名为
“欧贝赛保”。该药具有清热解毒、消炎止痛、利尿
等功效，用于治疗肝热、肺热、头痛、水肿、皮肤
病［1］。目前，有关全缘叶绿绒蒿的研究主要集中在
挥发油化学成分［2 － 3］和其他有效成分的含量测定［4］
等方面，而无藏药全缘叶绿绒蒿不同提取部位对小
鼠急性肝损伤保护作用的研究。本文采用 CCl4 致
小鼠急性肝损伤模型，对全缘叶绿绒蒿不同提取部
位保肝活性进行了对比研究，从中筛选药效活性部
位。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 药品与试剂
全缘叶绿绒蒿采自班玛县达卡乡，经青海大学
医学院中药教研室魏全嘉教授鉴定为 M． integrifolia
(Maxim．)Franch的全草。联苯双酯滴丸(DDB，批
号 080303，规格 1． 5mg /丸，山东德州德药制药有限
公司)。
CCl4(分析纯，批号 071204，天津化学试剂公
司) ，临用前用花生油配成 0． 15%的溶液;谷丙转氨
酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒(批号 070201，
南京建成生物技术研究所) ;HCHO(批号 070322，
天津化学试剂公司) ，临用前用磷酸盐缓冲液(PBS)
配成 10%的福尔马林溶液。
1． 1． 2 仪器
AU2700 全自动生化分析仪(日本 OLYMPUS 公
司) ;UV －9100 型紫外 －可见分光光度计(北京瑞
利分析仪器厂) ;生物显微镜(日本 OLYMPUS 公
司) ;RE －52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ;
冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂) ;电子分析天平
(瑞士梅特勒 －托利多公司)。
1． 1． 3 实验动物
昆明种小鼠，雌雄各半，体重(20 ± 2)g，由青海
省地方病预防控制所实验动物中心提供(合格证
号:20070009)。试验前，动物适应性饲养 7 d(温度
20℃ ～24℃，湿度 40% ～ 60%) ，喂食颗粒饲料和自
来水，给药前禁食 12 h。
1． 2 方法
1． 2． 1 全缘叶绿绒蒿各部分的提取
全缘叶绿绒蒿全草 2． 0 kg，粉碎为粗粉，用
95%乙醇加热回流提取 3 次，每次 1 h，合并滤液，回
收乙醇至无醇味，得浸膏，浸膏再依次用石油醚
(60℃ ～90℃)、乙酸乙酯、正丁醇萃取各 3 次，分别
回收各部分溶剂，真空干燥(60℃) ，制成干浸膏，称
定各提取物，得石油醚提取物(43． 2g)、乙酸乙酯提
取物(39． 0g)、正丁醇提取物(22． 6g)、剩余水层提
取物(18． 2g) ，备用。
1． 2． 2 动物分组和模型制备
取小鼠 70 只，随机分为 7 组，即对照组(A)、模
型组(B)、联苯双酯组(C)、石油醚提取部位组(D)、
乙酸乙酯提取部位组(E)、正丁醇提取部位组(F)、
水提取部位组(G) ，每组 10 只。A组和 B 组不作处
理，予常规颗粒饲料和生理盐水;C 组予联苯双酯
(0． 6 g /kg·d) ;D、E、F、G 组分别予不同提取部位
浸膏混悬液，剂量根据人与动物等效剂量换算，每天
各组 小 鼠 均 灌 胃 给 药 1 次，给 药 容 量 为
0． 2 mL /10 g，连续给药 7 d。末次给药后禁食不禁
水，8 h后除对照组腹腔注射等容量的生理盐水外，
其余各组小鼠均腹腔注射 0． 15% CCl4 花生油溶液
(10mL / kg)。禁食 16 h，小鼠眼球取血，离心
(3000r /min)10 min，分离血清，测定(均严格按照试
剂盒说明书操作)血清 AST、ALT 含量;脱颈椎处死
小鼠，迅速摘取肝脏，称重，计算肝脏指数;后切取肝
脏左叶，用 10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片，
HE染色，光镜下观察肝脏组织病理学变化。
1． 2． 3 统计学处理
所有数据资料采用 SPSS13． 0 软件进行统计学
处理，计量资料以 珋x ± s 表示，多组间数据比较采用
方差分析，两两比较采用 q 检验，检验水准
α = 0． 05。
2 结果
2． 1 全缘叶绿绒蒿不同提取部位对小鼠急性肝损
伤肝脏指数的影响(表 1)
161
表 1 全缘叶绿绒蒿不同提取物对小鼠急性肝损伤肝脏指数的影响(珋x ± s)
Table1 Effect of different fractions extracted from Meconopsis integrifolia on liver index of mice
with acute liver injury(珔x ± s)
组别 n
剂量
(g /kg)
体重
(g)
肝脏重量
(g)
肝脏指数
(mg /g)
正常对照组 10 － 20． 51 ± 2． 52 0． 939 ± 0． 065 44． 10 ± 3． 14＊＊Δ
模型组 10 － 21． 74 ± 3． 24 0． 977 ± 0． 148 61． 69 ± 5． 47##ΔΔ
联苯双酯组 10 0． 2 22． 06 ± 1． 61 0． 873 ± 0． 107 44． 60 ± 2． 71＊＊Δ
石油醚组 10 20． 0 20． 13 ± 3． 13 0． 953 ± 0． 168 47． 14 ± 3． 45＊＊Δ
乙酸乙酯组 10 20． 0 20． 70 ± 2． 28 0． 803 ± 0． 190 45． 22 ± 4． 16＊＊Δ
正丁醇组 10 20． 0 19． 52 ± 2． 24 0． 898 ± 0． 128 46． 67 ± 4． 37＊＊
水提组 10 20． 0 21． 71 ± 2． 21 0． 942 ± 0． 174 51． 01 ± 3． 79#＊＊
注:#与正常对照组比较，P ＜ 0． 05，##与正常对照组比较，P ＜ 0． 01;* 与模型组比较，P ＜ 0． 05，＊＊与模型组比较，P ＜ 0． 01;
Δ与水提组比较，P ＜ 0． 05，ΔΔ与水提组比较，P ＜ 0． 01．
表 1 显示，与正常对照组比较，模型组、水提组
肝脏指数有显著性差异，其中以模型组(P ＜ 0． 01)
最为明显，说明造模成功。与水提组比较，正常对照
组、联苯双酯组、石油醚组、乙酸乙酯组肝脏指数有
显著性差异(P ＜ 0． 05) ;与模型组比较，正常对照
组、联苯双酯组、石油醚组、乙酸乙酯组、正丁醇组、
水提组肝脏指数有显著性差异(P ＜ 0． 01) ，其中以
乙酸乙酯组下降最为明显，与联苯双酯组之间作用
强度无差异。
2． 2 全缘叶绿绒蒿不同提取部位对小鼠急性肝损
伤血清 ALT、AST活性的影响(表 2)
表 2 全缘绿绒蒿不同提取部位对小鼠急性肝损伤血清 ALT、AST活性的影响(珋x ± s)
Table2 Effect of different fractions extracted from Meconopsis integrifolia on activity of ALT and AST
in serum of mice with acute liver injury(珔x ± s)
组别 n
剂量
(g /kg)
ALT
(U/L)
AST
(U/L)
正常对照组 10 － 57． 5 ± 29． 2* 76． 5 ± 28． 4*
模型组 10 － 662． 7 ± 79． 2# 737． 2 ± 68． 6#
联苯双酯组 10 0． 2 342． 1 ± 73． 1#* 346． 7 ± 57． 5#*
石油醚组 10 20． 0 627． 3 ± 82． 0# 703． 1 ± 51． 6#
乙酸乙酯组 10 20． 0 381． 7 ± 88． 9#* 411． 9 ± 92． 0#*
正丁醇组 10 20． 0 609． 2 ± 92． 4# 698． 7 ± 78． 3#
水提组 10 20． 0 589． 3 ± 81． 7# 672． 3 ± 74． 8#
注:#与正常对照组比较，P ＜ 0． 01;* 与模型组比较，P ＜ 0． 01．
表 2 显示，小鼠注射 CCl4 后引起急性肝损伤，
与正常对照组比较，模型组血清 ALT和 AST显著升
高(P ＜ 0． 01) ;与模型组比较，联苯双酯组和乙酸乙
酯组能显著抑制 CCl4 诱导的血清 ALT和 AST升高
(P ＜ 0． 01) ，石油醚组、正丁醇组、水提组抑制血清
ALT和 AST升高不明显。
2． 3 全缘叶绿绒蒿不同提取部位对小鼠肝组织病
理学的影响
正常对照组:肝小叶结构完整，肝细胞索排列整
齐，以中央静脉为中心呈放射状排列，肝细胞呈多边
形，核大而圆，肝窦内及汇管区无淋巴细胞浸润，无
纤维组织增生。模型组:肝小叶失去正常结构，肝细
胞索排列完全异常，肝细胞普遍变性，可见大量的嗜
酸性小体，汇管区和肝中央静脉周围的结缔组织中
可见炎细胞浸润，有大量成纤维细胞、纤维细胞，增
生的胶原纤维自中央静脉及汇管区向周围延伸，包
261
绕肝小叶，并分割肝小叶而形成假小叶。联苯双酯
组:肝小叶结构基本恢复正常，肝细胞索排列规则，
肝细胞有轻度变性，细胞轻度增生，汇管区炎细胞浸
润少，纤维组织增生不明显。乙酸乙酯组:肝小叶结
构基本恢复正常，肝细胞索排列规则，肝细胞有轻度
变性，细胞轻度增生;汇管区中央静脉周围无炎细胞
浸润，纤维组织增生不明显。石油醚组、正丁醇组、
水提组:肝细胞索排列紊乱，可见小的坏死灶，汇管
区和中央静脉周围见炎细胞浸润、肝细胞肿胀和嗜
酸性变。
3 讨论
本实验以藏药全缘叶绿绒蒿为研究对象，采用
CC14 造小鼠急性肝损伤模型。CC14 可引起化学性
肝损伤，导致肝细胞变性、坏死、间质细胞浸润，也可
引起肝细胞纤维化［5］。CC14 在体内代谢产生一种
氧化能力很强的中间产物，导致生物膜上的脂质过
氧化，破坏膜的磷脂，改变细胞的结构与功能。当肝
细胞受损时，由于肝细胞内转氨酶的浓度比血清中
的高，胞浆内的 ALT、AST 因浓度差释放入血，造成
血清 ALT、AST 升高，故血清中 ALT、AST 含量是反
映肝受损的敏感指标，也能反映肝细胞损伤程度。
通过对全缘叶绿绒蒿 95%乙醇提取物经不同
极性溶剂萃取物的保肝活性研究，从小鼠肝脏指数，
血清 ALT、AST活性，组织病理学改变方面证实，不
同提取物中“乙酸乙酯部分”能明显降低小鼠肝脏
指数(P ＜ 0． 01) ，抑制 CC14 诱导的血清 ALT、AST
升高(P ＜ 0． 01) ，并能减轻 CC14 所导致的肝组织病
理损伤，而石油醚、正丁醇和水提取物保肝作用不明
显。药效学实验提示，藏药全缘叶绿绒蒿乙酸乙酯
部位在一定程度上可保护肝细胞膜结构，减少自由
基的攻击而减轻肝细胞的损伤，对 CC14 所致小鼠
急性肝损伤具有较好的降酶、保肝作用，其保肝降酶
作用的活性部位为乙酸乙酯萃取部位，至于全缘叶
绿绒蒿乙酸乙酯部位对 CC14 所致小鼠急性肝损伤
的作用机制以及乙酸乙酯部位的成分和含量，尚待
进一步研究。
参考文献
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人民卫生出版社，2005:200．
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收稿 2012 － 01 － 07
361