全 文 ：大孔吸附树脂纯化富集五脉绿绒蒿总生物碱
孙政华1，2， 郭 玫1，2* ， 邵 晶1，3* ， 王志旺1，3
(1． 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000;2． 甘肃省高校中 ［藏］药化学与质量研究重点实验室，甘肃中
医药大学，甘肃 兰州 730000;3． 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室，甘肃中医药大学，甘肃 兰州
730000)
收稿日期:2015-09-01
基金项目:甘肃省中医药管理局基金项目 (GZK-2008-31) ;甘肃省中医药英才基金项目 (GZK-2010-52)
作者简介:孙政华 (1989—) ，男 (苗族) ，硕士，从事中药有效成分与质量标准研究。Tel: (0931)8765394，E-mail:412124387@
qq． com
* 通信作者:郭 玫，女，教授，硕士生导师，从事中药有效成分与质量标准研究。Tel:(0931)8765394，E-mail:guomeig@ sina． com
邵 晶，女，副教授，从事中药和中药制剂有效部位及质量标准研究。Tel:(0931)8765394，E-mail:cn221@ 163． com
摘要:目的 优化大孔吸附树脂纯化富集藏药五脉绿绒蒿 Meconopsis integrifolia 中总生物碱的工艺。方法 以盐酸罂
粟碱为对照品，采用紫外分光光度法测定总生物碱含有量;以吸附率及解吸率等为指标，考察不同型号树脂;考察静
态吸附-解吸附动力学曲线，确定吸附和解吸时间。然后，筛选解吸剂体积分数、上样液质量浓度、流量等相关参数。
结果 AB-8 型树脂对五脉绿绒蒿总生物碱的吸附解吸性能最好，比吸附量 44. 15 μg /g、吸附率 86. 74%，解吸率
91. 39%，静态吸附和解吸时间分别为 8 h和 10 h。结论 经 AB-8 大孔树脂纯化富集后，所得干浸膏中五脉绿绒蒿总
生物碱纯度提高了 2. 39 倍，回收率为 79. 88%，而且干浸膏黏度和吸湿性均降低。
关键词:五脉绿绒蒿;总生物碱;大孔吸附树脂
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)01-0077-07
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2016. 01. 016
Purification technology for total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel
by macroporous resin
SUN Zheng-hua1，2， GUO Mei1，2* ， SHAO Jing1，3* ， WANG Zhi-wang1，3
(1． Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China;2． Gansu Provincial High Educational Key Laboratory for Chemistry and Quality of
Traditional Chinese Medicine，Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China;3． Gansu Provincial Key Laboratory for Pharmacology and
Toxicology of Traditional Chinese Medicine，Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，China)
KEY WORDS:Meconopsis quintuplinervia Regel;total alkaloids;macroporous resin
绿绒蒿收载于 《中华人民共和国卫生部药品
标准·藏药》第一册，为常用藏药，是罂粟科绿绒
蒿属植物，主要分布于西藏、青海、甘肃等地，基
源复杂，其中五脉绿绒蒿 Meconopsis quintuplinervia
Regel、全缘绿绒蒿 Meconopsis integrifolia (Max-
im．)Franch和红花绿绒蒿 Meconopsis punicea Max-
im均系其主流品种。其味甘、涩，性凉，具有清
热、消炎、止痛、镇咳、平喘、利尿等功效，藏医
主要用其治疗肝炎、肺炎、胆囊炎、肺结核、胃溃
疡等疾病，并且该植物消炎止痛的功效在临床尤为
突出［1-2］。本实验以纯化富集五脉绿绒蒿总生物碱
为目标，筛选了大孔树脂型号及纯化工艺参数，确
定最佳工艺条件，为进一步研究藏药绿绒蒿总生物
碱抗炎镇痛作用机理及其提取物的制备提供了科学
方法，为相关新药的开发提供工作基础。
1 仪器与试药
1. 1 仪器与设备 BS-124S 电子天平 (北京赛多
利斯仪器系统有限公司) ;UV-3300 紫外-可见分光
光度计、石英比色皿 (上海美谱达仪器有限公
司) ;小型粉碎机 (北京兴时利和科技发展有限
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公司)。
1. 2 实验药物与试剂 五脉绿绒蒿采自甘肃甘南，
经甘肃中医药大学晋玲教授鉴定为罂粟科植物绿绒
蒿 Meconopsis integrifolia (Maxim．) Franch 的干燥
全草。罂粟碱对照品 (中国食品药品检定研究院，
编号 171214-200404)。NKA-9、D101、AB-8、DM-
301、HPD-100 树脂 (天津市海光化工有限公司)。
实验用水为娃哈哈纯净水 (杭州娃哈哈集团有限
公司) ;其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 五脉绿绒蒿总生物碱含有量测定方法的
建立［3-4］
2. 1. 1 对照品溶液的制备 精密称取罂粟碱对照
品 15. 4 mg，0. 01 mol /L 盐酸溶液溶解并定容至
250 mL量瓶中，即得 61. 6 μg /mL盐酸罂粟碱对照
品溶液。
2. 1. 2 供试品溶液的制备 精密称取五脉绿绒蒿
粗粉 2. 0 g，置于 250 mL锥形瓶中，加 10 mL氨水
充分搅拌，静置 30 min，加 95%乙醇 60 mL，超声
提取 40 min，放冷，抽滤，滤液转移至蒸发皿中，
水浴挥干溶剂，加 0. 01 mol /L盐酸 5 mL使其完全
溶解，过滤，即得。
2. 1. 3 测定波长选择 扫描盐酸罂粟碱对照品溶
液和纯化后绿绒蒿总生物碱的紫外光谱图，并结合
文献，确定以其最大吸收波长 416 nm为检测波长。
2. 1. 4 标准曲线的制备 精密吸取盐酸罂粟碱对
照品溶液 1. 0、2. 0、4. 0、5. 0、6. 0 mL，分别置
于分液漏斗中，加醋酸盐缓冲液 5. 0 mL、溴甲酚
绿 2. 0 mL摇匀，再加氯仿 16 mL充分振摇，静置，
分取氯仿层，在 416 nm 处测定其吸光度，再以
0. 01 mol /L盐酸同法作空白对照。以罂粟碱浓度
(x)为横坐标，吸光度 (A)为纵坐标绘图，结果
在 3. 85 ～ 23. 10 μg /mL 范围内，两者呈良好的线
性关系，回归方程 A = 0. 032 3x + 0. 026 3，r =
0. 998 5。
2. 1. 5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液
0. 5 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定吸光度，连续
测定 5 次。结 果，平 均 值 为 0. 428，RSD 为
0. 33%，表明仪器精密度良好。
2. 1. 6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液
0. 5 mL，按 “2. 1. 4”项下方法分别于 0、2、4、
6、20 h测定吸光度。结果，RSD为 1. 95%，表明
样品溶液在 20 h内稳定性良好。
2. 1. 7 重复性试验 精密称取 5 份样品，按
“2. 1. 2”项下方法制备供试品溶液， “2. 1. 4”项
下方法测定吸光度。结果，RSD 为 2. 30%，表明
该方法重复性良好。
2. 1. 8 加样回收率试验 精密称定含有量已知的
样品 1 g，共 6 份，分别加入盐酸罂粟碱对照品溶
液，按 “2. 1. 2”项下方法制备供试品溶液，
“2. 1. 4”项下方法测定吸光度。结果，平均回收
率为 97. 49%，RSD 为 2. 25%，表明加样回收率
良好。
2. 1. 9 样品中总生物碱含有量的测定 精密吸取
样品溶液 1. 0 mL，于蒸发皿中水浴挥干溶剂，加
0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过滤，精
密吸取 4. 0 mL，按 “2. 1. 4”项下方法测定吸光
度，代入回归方程，计算总生物碱含有量，得五脉
绿绒 蒿 粗 提 液 中 总 生 物 碱 的 质 量 浓 度
为10. 18 μg /mL。
2. 2 大孔吸附树脂纯化五脉绿绒蒿总生物碱的工
艺研究
2. 2. 1 五脉绿绒蒿粗总生物碱溶液的制备［3-4］ 称
取五脉绿绒蒿粗粉 200 g，95%乙醇回流提取 2 次
(第 1 次 1 000 mL，浸渍 12 h，回流 1. 5 h;第 2 次
800 mL，回流 1 h) ，滤过，合并滤液，减压回收
溶剂，转移至蒸发皿，蒸干至无醇味。残留物用石
油醚振摇脱脂后，加 0. 01 mol /L 盐酸溶液 100 mL
溶解，并调 pH值至 2 ～ 3，过滤，滤液加浓氨水调
pH 值至 9 ～ 10，再用氯仿萃取数次，合并氯仿层，
回收溶剂，残留物即为五脉绿绒蒿总生物碱，加水
搅拌稀释至 200 mL，备用。
2. 2. 2 树脂的预处理［4-6］ 分别取 NKA-9、D101、
AB-8、DM-301、HPD-100 5 种型号大孔树脂，
95%乙醇浸泡 24 h，使其充分溶胀，再用 95%乙
醇洗至流出液加适量蒸馏水时，无白色浑浊现象，
最后用蒸馏水洗至水液澄清无醇味，备用。
2. 2. 3 树脂型号对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影
响［4-5］ 分别准确称取预处理好的 5 种型号大孔吸
附树脂 3 份，每份 2 g，置于具塞锥形瓶中，加入
总生物碱质量浓度为 10. 18 μg /mL 的绿绒蒿提取
液 10. 0 mL，25 ℃下振摇吸附 12 h，再静置吸附
12 h，使其达到饱和吸附，过滤，适量蒸馏水冲洗
树脂，合并滤液，水浴蒸干，残留物加 0. 01 mol /L
盐酸 5. 0 mL以使其完全溶解，过滤，精密吸取滤
液 2. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定吸光度，并
计算其总生物碱含有量和比吸附量。
取上述吸附已达饱和并冲洗滤出的树脂，再加
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入 95%乙醇 50 mL 进行解吸，25 ℃下振摇 12 h，
再静置 12 h，吸取上层液 5. 0 mL，水浴蒸干，残
留物加 0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过
滤，精密吸取 2. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定
其吸光度，计算解析液中总生物碱含有量和解析
率，结果见表 1、图 1，计算公式如下。
比吸附量 (μg /g) = (C0 － Ce) × V /m;比
解吸量 (μg /g) = C1V /m;解吸附率 (%) = 比
解吸量 /比吸附量 × 100%。其中，C0为起始质量浓
度，Ce为平衡质量浓度，V为溶液体积，m 为树脂
质量，C1 为解吸液浓度。
由表 1 和图 1 可知，5 种大孔吸附树脂的比吸
附量按大小，依次为 AB-8 ＞ D-101 ＞ NKA-9 ＞ DM-
301 ＞ HPD-100;解吸率按大小，依次为 AB-8 ＞ D-
101 ＞ NKA-9DM-301 ＞ HPD-100。而且，AB-8 型树
脂的比吸附量为 44. 15 μg /g、吸附率为 86. 74%，
比解吸量为 10. 35 μg /g，解吸率为 91. 39%。由于
吸附解吸性能最好，因此选择 AB-8 型树脂。
表 1 树脂型号对绿绒蒿总生物碱富集的影响 (n =3)
Tab. 1 Effects of macroporous resin types on the purifica-
tion of total alkaloids from Meconopsis quintuplin-
ervia Regel (n =3)
树脂型号
比吸附量 /
(μg·g － 1)
吸附率 /
%
比解吸量 /
(μg·g － 1)
解吸率 /%
NKA-9 42. 23 82. 97 32. 30 76. 49
D-101 42. 79 84. 07 35. 15 82. 14
AB-8 44. 15 86. 74 40. 35 91. 39
DM-301 40. 03 78. 64 28. 36 70. 85
HPD-100 38. 41 75. 46 22. 34 58. 16
2. 2. 4 静态吸附时间和静态解吸时间对五脉绿绒
蒿总生物碱富集的影响［6-7］ 精密称取预处理的
AB-8 型大孔吸附树脂 4 g，置于具塞磨口锥形瓶
中，精密加入总生物碱质量浓度为 10. 18 μg /mL
的绿绒蒿提取液 40. 0 mL，25 ℃下静置，进行吸
附。然后，分别在 1、2、4、6、8、10、12、24 h
时吸取上清液 2. 0 mL，水浴 蒸 干，残 渣 加
0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过滤，精
密吸取 4. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定其吸光
度，计算上清液中残留总生物碱含有量，并换算成
在 t时刻内 AB-8 型树脂对绿绒蒿总生物碱的比吸
附量，结果见表 2。再以比吸附量 (μg /g)对时间
t (h)作图，得到 AB-8 型大孔吸附树脂的静态吸
附动力学曲线，见图 2。
将吸附 24 h 后的树脂过滤，蒸馏水冲洗，加
入 95%乙醇 50 mL进行解吸，25 ℃下静置，1、2、
图 1 树脂型号对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响
Fig. 1 Effects of macroporous resin types on the purifica-
tion of total alkaloids from Meconopsis quintuplinerv-
ia Regel
4、6、8、10、12、24 h时吸取上清液 2. 0 mL，过
滤，蒸干，加 0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL使其完全溶
解，过滤，精密吸取 4. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方
法测定其吸光度，并计算总生物碱含有量，计算在
t时刻内 AB-8 型树脂的比解吸量，结果见表 2。以
比解吸量 (μg /g)对时间 t (h)作图，得到 AB-8
型树脂的静态解吸附动力学曲线，见图 3。
由图 2 和图 3 可知，AB-8 型大孔吸附树脂静
态吸附过程中的比吸附量在 8 h 后增加缓慢，基本
达到平衡，而在静态解吸过程中的比解吸量在 10 h
后基本达到平衡。结合实际工业生产情况，选择静
态吸附时间为 10 h，解吸时间也为 10 h。
表 2 AB-8 型大孔吸附树脂静态吸附-解吸附动力学曲线数
据 (n =3)
Tab. 2 Data of the kinetic curve of static adsorption and
desorption for AB-8 macroporous resin (n =3)
时间 /h 比吸附量 /(μg·g － 1) 比解吸量 /(μg·g － 1)
1 14. 55 12. 91
2 25. 07 21. 89
4 31. 57 28. 48
6 35. 60 32. 04
8 40. 49 37. 99
10 41. 24 38. 61
12 40. 95 38. 53
24 39. 96 37. 55
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图 2 AB-8 型大孔吸附树脂的静态吸附动力学曲线
Fig. 2 Kinetic curve of static adsorption for AB-8
macroporous resin
图 3 AB-8 型大孔吸附树脂的静态解吸附动力学曲线
Fig. 3 Kinetic curve of static desorption for AB-8 macro-
porous resin
2. 2. 5 解吸剂浓度对五脉绿绒蒿总生物碱富集的
影响［8-9］ 准确称取预处理的 AB-8 型树脂 2 g，置
于具塞磨口锥形瓶中，加入总生物碱质量浓度为
10. 18 μg /mL的五脉绿绒蒿提取液 10. 0 mL，25 ℃
下静置吸附 10 h，过滤，蒸馏水冲洗，合并滤液，
水浴蒸干。残留物加 0. 01 mol /L 盐酸5. 0 mL使其
完全溶解，过滤，精密吸取 4. 0 mL，按 “2. 1. 4”
项下方法测定其吸光度，并计算其总生物碱含有量
和比吸附量。
取上述各吸附已达饱和并冲洗过滤的树脂，分
别加入 100%、90%、80%、70%、60%、50%的
乙醇 50 mL 进行解吸，25 ℃下静置 10 h，过滤，
滤液蒸干，残留物加 0. 01 mol /L 盐酸 5. 0 mL 使
其完 全 溶 解，过 滤，精 密 吸 取 4. 0 mL，按
“2. 1. 4”项下方法测定其吸光度，并计算其总生
物碱含有量和比解吸量，考察其解吸率，结果见
表 3、图 4。
由表 3 和图 4 可知，80%以上乙醇水溶液的吸
附、解吸附效果较好，解吸率可达 90. 29%。同
时，考虑到随着解吸剂体积分数的增加，解吸下的
杂质也会增多，因此选择 80%的乙醇溶液作为解
吸剂较合理。
表 3 解吸剂浓度对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响 (n =3)
Tab. 3 Effects of strippant concentrations on the purifica-
tion of total alkaloids from Meconopsis quintuplin-
ervia Regel (n =3)
乙醇 /%
比吸附量 /
(μg·g － 1)
比解吸量 /
(μg·g － 1)
解吸率 /%
100 44. 27 40. 05 90. 46
90 43. 96 39. 92 90. 80
80 42. 34 38，23 90. 29
70 42. 66 34. 53 80. 94
60 44. 02 32. 58 74. 01
50 43. 46 27. 65 63. 62
图 4 解吸剂浓度对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响
Fig. 4 Effects of strippant concentrations on the purifica-
tion of total alkaloids from Meconopsis quintuplin-
ervia Regel
2. 2. 6 药液质量浓度对绿绒蒿总生物碱富集的影
响［4，9］ 精密称取 15 份已预处理好的 AB-8 树脂，
每份 2 g，分别精密加入总生物碱质量浓度为
20. 36、10. 18、6. 75、5. 09、4. 07 μg /mL 的绿绒
蒿提取液 10. 0 mL，平行 3 份，静置吸附 10 h，过
滤，蒸馏水冲洗，合并滤液，水浴蒸干，残留物加
0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过滤，精
密吸取 4. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定其吸光
度，并计算比吸附量和吸附率，结果见表 4、图 5。
由表 4 和图 5 可知，当上样液质量浓度为 6. 75 ～
10. 18 μg /mL时，吸附率较好，因此选择吸附质量
浓度 6. 5 ～ 10. 0 μg /mL范围内均可。
表 4 药液质量浓度对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响
(n =3)
Tab. 4 Effects of soup concentrations on the purification of
total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Re-
gel (n =3)
上柱液质量浓度 / (μg·mL －1)比吸附量 / (μg·g － 1)吸附率 /%
20. 36 48. 98 48. 11
10. 18 42. 20 82. 91
6. 75 29. 30 86. 81
5. 09 20. 36 80. 00
4. 07 15. 10 74. 20
注:吸附率 =比吸附量 × 2 g /上样液质量浓度 × 10 mL
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图 5 药液质量浓度对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响
Fig. 5 Effects of soup concentrations on the purification of
total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Re-
gel
2. 2. 7 动态解吸洗脱液体积流量的选择［10-11］ 精
密称取 9份已预处理好的 AB-8树脂，每份 10 g，湿
法装柱，加入五脉绿绒蒿总生物碱含有量为
10. 18 μg /mL的上柱液 20. 0 mL，交换吸附 10 h，平
行 3份。吸附饱和后，蒸馏水洗至无色，分别调节
体积流量为 0. 5、1. 0、1. 5 mL /min，收集溶液，过
滤，水浴蒸干，加0. 01 mol /L盐酸5. 0 mL使其完全
溶解，过滤，精密吸取 4. 0 mL，按 “2. 1. 4”项下
方法测定其吸光度，并计算其总生物碱含有量和比
吸附量。
取蒸馏水洗至无色的树脂，90%乙醇 40 mL解
吸，分别调节体积流量为 0. 5、1. 0、1. 5 mL /min，
收集洗脱液，过滤，水浴蒸干，加 0. 01 mol /L 盐
酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过滤，精密吸取
4. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定其吸光度，并
计算其总生物碱含有量和比解吸量，考察其解吸
率，结果见表 5、图 6。
由表 5 和图 6 可知，在动态解吸过程中，洗脱
液体积流量在 0. 5 ～ 1. 0 mL /min 时，解吸率达
80%以上，总生物碱吸附和解吸效果均较好;但再
降低体积流量时，吸附量并没有明显提高，说明体
积流量过快时，化学成分还未被树脂完全吸附便已
流出色谱柱，但过慢则会延长操作周期。同时，考
虑到实际生产情况，选择流量为 1. 0 mL /min。
表 5 洗脱液流量对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响 (n =
3)
Tab. 5 Effects of strippant flow rates on the purification of
total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Re-
gel (n =3)
流量 /
(mL·min －1)
比吸附量 /
(μg·g － 1)
吸附率 /
%
比解吸量 /
(μg·g － 1)
解吸率 /%
0. 5 11. 20 83. 85 9. 48 84. 64
1. 0 10. 28 76. 96 8. 55 83. 17
1. 5 10. 93 81. 83 8. 21 75. 11
图 6 洗脱液流量对五脉绿绒蒿总生物碱富集的影响
Fig. 6 Effects of strippant flow rates on the purifica-
tion of total alkaloids from Meconopsis quintup-
linervia Regel
2. 3 验证性试验 取已处理好的 AB-8 树脂 30 g
装柱，量取总生物碱质量浓度为 10. 18 μg /mL 的
五脉绿绒蒿提取液 100 mL 上样，吸附 10 h。先用
蒸馏水以 1. 0 mL /min 的体积流量洗涤至洗脱液无
色，再用 90% 乙醇以 1. 0 mL /min 的体积流量洗
脱，洗脱液用量为 500 mL，收集洗脱液，回收溶
剂，蒸干，残渣加蒸馏水 100 mL溶解定容。
再精密吸取 1. 0 mL 至蒸发皿中，水浴蒸干，
残渣加 0. 01 mol /L盐酸 5. 0 mL 使其完全溶解，过
滤，精密吸取 4. 0 mL，按“2. 1. 4”项下方法测定
其吸光度，并计算其总生物碱含有量 (μg /mL)。
另外，分别精密吸取上述经树脂纯化处理并蒸干重
新溶解的溶液 25 mL，以及未经树脂纯化的原提取
液 25 mL，蒸干，称定质量，计算浸膏中总生物碱
含有量 (μg /g) ，结果见表 6。
表 6 大孔树脂纯化五脉绿绒蒿中总生物碱的验证试验 (n =3)
Tab. 6 Verification tests for the purification of total alkaloids from Meconopsis quintuplinervia Regel by macroporous resin
(n =3)
试验号
提取物中含有量 /
(μg·mL －1)
纯化后含有量 /
(μg·mL －1)
回收率 /%
浸膏中含有量 /
(μg·g － 1)
纯化后含有量 /
(μg·g － 1)
纯化率 /倍
1 10. 18 8. 12 79. 76 171. 14 413. 54 2. 42
2 10. 18 8. 24 80. 94 169. 10 406. 28 2. 40
3 10. 18 7. 96 78. 19 176. 74 417. 14 2. 36
平均值 10. 18 8. 11 79. 88 172. 34 412. 32 2. 39
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2016 年 1 月
第 38 卷 第 1 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
January 2016
Vol． 38 No． 1
由表可知，AB-8 大孔树脂纯化绿绒蒿中总生
物碱后，所得干浸膏中总生物碱的含有量由
172. 34 μg /g 提高到 412. 32 μg /g，纯度提高了
2. 39 倍，回收率为 79. 88%。
3 讨论
现有的消炎止痛药大多主要作用于中枢神经系
统，缓解疼痛的作用较强，但其大部分药物反复应
用易于成瘾，本课题组期望从植物药中寻找出一种
不会成瘾、疗效安全、质量可控的新型消炎止痛药
物。经初步研究，绿绒蒿属藏药在消炎止痛方面有
其独特的疗效，极有希望开发成为新型的消炎止痛
药。本课题组前期已通过耳廓肿胀法、腹腔毛细血
管通透性实验及醋酸致小鼠扭体实验，追踪研究了
五脉绿绒蒿活性部位，结果显示其原生药中所含的
总生物碱与总黄酮均有一定的抗炎镇痛作用，而且
前者镇痛作用明显优于后者［10-11］。为了更好地深
入研究五脉绿绒蒿总生物碱抗炎镇痛作用机制及量
效关系，必须对其进行有效的纯化富集。
大孔吸附树脂具有较好的吸附性能，而且理化
性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，对有机物的
选择性较好，不受无机盐类及强离子低分子化合物
存在的影响，解吸容易，再生简单，使用寿命
长［12-13］。该填料为吸附和筛选原理相结合的分离
材料，对化学成分有选择性吸附，其吸附作用是通
过表面吸附、表面电性或形成氢键所产生的，吸附
过程主要是被吸附物通过树脂孔径进入树脂内部，
被树脂的内表面选择性吸附，所以树脂的比表面
积、极性及孔径、成分分子量等是影响吸附效果的
主要因素［14-15］，只有合适的孔径和性质，被吸附
物才能进入树脂并被有选择性地吸附。因此，不同
型号的大孔树脂对不同成分的吸附与解吸能力存在
较大差别，应从吸附性能、经济性及生产的实用性
等方面综合评价，选择树脂型号。此外，其纯化效
果与吸附时间、解吸时间、解吸剂体积分数、上样
液质量浓度、流量等因素均有关系，需进行系统
考察［14-15］。
在本实验中，所需要富集的是五脉绿绒蒿中的
总生物碱部位，在提取过程中，采用碱溶处理方
法，将生物碱以游离态提取出来。再以吸附率、解
吸率等为指标，考察对比了 5 种树脂，结果发现
AB-8 型树脂对五脉绿绒蒿总生物碱吸附解吸的性
能最好，因此选择 AB-8 型树脂。静态吸附和解吸
附的动力学曲线显示，静态吸附 8 h及解吸 10 h后
基本达到平衡，结合实际工业生产情况，选择吸附
和解吸时间均为 10 h。大孔吸附树脂常用的解吸剂
是不同体积分数的乙醇，本实验考察了 100%、
90%、80%、70%、60%、50%这 6 种不同体积分
数乙醇的解吸效果，结果显示 80%以上乙醇解吸
效果均较好，解吸率可达 90%，考虑到随着解吸
剂浓度的增加，解吸出的杂质可能也会增多，故选
择 80%的乙醇溶液作为解吸剂较合理。解吸剂流
量过快，则化学成分还未被树脂完全吸附便流出色
谱柱，但过慢则会延长操作周期，实验发现，
1 mL /min左右的流量较为适宜。上样液质量浓度
过高，则溶液过于黏稠，会在树脂颗粒表面形成粘
性吸附，严重影响吸附效果;上样液质量浓度过
低，则待吸附成分分散在大量溶剂中，减少了与大
孔树脂接触吸附的时间，吸附效果也会受到影响。
实验显示，上样液质量浓度为 6. 5 ～ 10. 0 μg /mL
均可。
经 AB-8 大孔树脂纯化后，所得干浸膏中五脉
绿绒蒿总生物碱纯度提高了 2. 39 倍，回收率为
79. 88%，所得纯化物更容易干燥处理，干浸膏黏
度和吸湿性均降低，说明通过 AB-8 大孔树脂纯化
富集后，除去了较多的多糖、蛋白质等成分，提高
了提取物中总生物碱的含有量，使药效成分得到有
效富集，为藏药五脉绿绒蒿活性部位总生物碱提取
物的内在质量提高提供了科学方法，也为后期相应
的新药开发研究提供了研究基础。
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