全 文 ：武爱龙，吴建阳，卓海容．蝴蝶兰 “大辣椒”组织培养与快速繁殖 ［Ｊ］．福建农业学报，２０１５，３０ （１１）：１０７５－１０８１．
ＷＵ Ａ－Ｌ，ＷＵ Ｊ－Ｙ，ＺＨＵＯ Ｈ－Ｒ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ［Ｊ］．Ｆｕｊｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１５，３０ （１１）：１０７５－１０８１．
蝴蝶兰 “大辣椒”组织培养与快速繁殖
武爱龙１，吴建阳１，卓海容２
（１．广东省湛江师范学院基础教育学院生化系，广东 湛江 ５２４０３７；２广东省茂名市化州中学，广东 茂名 ５２５１００）
收稿日期：２０１５－０５－０８初稿；２０１５－０８－２３修改稿
作者简介：武爱龙 （１９７８－），男，讲师，研究方向：植物遗传育种与组织培养研 （Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｕａｉｌｏｎｇ８３９０＠１２６．ｃｏｍ）
基金项目：广东省教育研究院教育研究课题 （ＧＤＪＹ－２０１４－Ｂ－ｂ０９１）
摘 要：采用蝴蝶兰品种“大辣椒”幼嫩花梗作为试验材料，通过正交试验设计研究基本培养基、植物生长调节剂
成分及含量对花梗不定芽的诱导、增殖、分化、生根的影响。结果表明，不定芽诱导的最佳培养基为：花宝一号＋
ＮＡＡ ０．３ｍｇ·Ｌ－１＋６－ＢＡ ５ｍｇ·Ｌ－１；不定芽增殖和分化的最佳培养基为：花宝一号＋ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１＋６－ＢＡ
６ｍｇ·Ｌ－１，增殖系数最高达到５．５３倍；最佳的壮苗和生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１，生根率为９６％，
椰子汁、苹果汁、土豆汁作为复合添加物对生根较为有利；组培生根苗移栽成活率在９１．５％以上。
关键词：蝴蝶兰；正交设计；组织培养
中图分类号：Ｓ ６８１．３１ 文献标识码：Ａ
Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
ＷＵ Ａｉ－ｌｏｎｇ１，ＷＵ Ｊｉａｎ－ｙａｎｇ１，ＺＨＵＯ Ｈａｉ－ｒｏｎｇ２
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ Ｎｏｒｍａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５２４０３７，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｈｕａｚｈｏｕ Ｈｉｇｈ Ｓｃｈｏｏｌ，Ｍａｏｍｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５２５１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｙｏｕｎｇ，ｔｅｎｄｅｒ ｆｌｏｗｅｒ ｓｔａｌｋｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ
ｒａｐｉｄ ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｏｒｃｈｉｄ．Ｕｓｉｎｇ ａｎ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂａｓｉｃ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ａｓ ｗｅｌ ａｓ
ｈｏｒｍｏｎｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｐｅｄｉｃｅｌｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ａｎｄ
ｔｈｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｐｌａｎｔ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ（ａ）ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ
ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｔｈｅ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｗａｓ Ｈｙｐｏｎｅｘ Ｎｏ．１＋ＮＡＡ （０．３ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （５ｍｇ·Ｌ－１）；（ｂ）ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ
ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｗａｓ Ｈｙｐｏｎｅｘ Ｎｏ．１＋ＮＡＡ （０．２ｍｇ·Ｌ－１）＋６－ＢＡ （６
ｍｇ·Ｌ－１），ｗｈｉｃｈ ｒｅｓｕｌｔｅｄ ｉｎ ａ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ｕｐ ｔｏ ５．５３ｔｉｍｅｓ；（ｃ）ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒｓｅｅｄｌｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ
ｒｏｏｔｉｎｇ ｗａｓ １／２ＭＳ＋ＮＡＡ （０．２ｍｇ·Ｌ－１），ｗｈｉｃｈ ｙｉｅｌｄｅｄ ａ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ ９６％，ａｎｄ ｃｏｃｏｎｕｔ ｍｉｌｋ，ａｐｐｌｅ ｊｕｉｃｅ，ｐｏｔａｔｏ
ｊｕｉｃｅ ａｓ ｐａｒｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ａｄｄｉｔｉｖｅｓ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅ ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ ｆｏｒ ｒｏｏｔｉｎｇ；ａｎｄ（ｄ）ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ
ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｗａｓ ｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｎ ９１．５％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ
蝴蝶兰Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ是兰科蝴蝶兰属植物，在
中国台湾、泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚等地
都有分布。蝴蝶兰被誉为“兰中皇后”，近几年迅速
成为盆花中最流行的品种，为年宵花首位［１］。由于
蝴蝶兰的生产设备具有很强的复制性，现在全国各
个地区，从南方到北方，都在进行蝴蝶兰的生
产［２－４］，蝴蝶兰的产业由此得到快速发展，产量极速
增加。但是近年由于受国内外经济形势的影响，蝴
蝶兰的销售在２０１２、２０１３年陷入低谷期，重要因素
之一是新品种缺乏，很多蝴蝶兰生产商主要集中生
产几个流行的品种，品种单一造成市场大幅度滑坡。
为促进蝴蝶兰产业的持续发展，除了加强蝴蝶
兰新品种的选育，还需要加强新品种的组织培养配
套生产技术研究以促进推广生产，使新品种得以迅
速进入消费市场，抢占市场先机。黄象男等［５］、曾
碧玉等［６］、张彦妮等［７］、谭鹏鹏等［８］有过对蝴蝶兰
的组培技术的研究，但实验室研究与工厂化生产育
苗有很大的区别。工厂化生产育苗需要配方稳定、
增殖系数高的实用化组培生产技术模式，而由于正
交设计是多因素分析的有力工具，可用较少的试验
福建农业学报３０（１１）：１０７５～１０８１，２０１５
Ｆｕｊｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
文章编号：１００８－０３８４ （２０１５）１１－１０７５－０７
次数获得较多的信息，林宗铿等［９］、李成慧等［１０］、王
冬云等［１１］已应用在蝴蝶兰组培技术研究。为此选
择最近流行的蝴蝶兰“大辣椒”品种进行实用化组培
技术生产研究，采用正交设计法对不定芽诱导、不定
芽增殖、丛生芽壮苗和生根培养基进行对比分析，以
优化培养基配方，以期建立一整套蝴蝶兰实用化组
培生产技术流程，满足工厂化生产的要求。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
选择蝴蝶兰品种 “大辣椒”为试验材料，采集
供试品种幼嫩的花梗，其母株花芽饱满，排列正
常、花形也对称、无瑕疵。
１．２ 试验方法
１．２．１ 花梗消毒 从母株上切下带有腋芽的蝴蝶
兰幼嫩花梗，用自来水冲洗干净，并用无菌滤纸将
其擦干净，然后，将其切成长２．０ｃｍ的小段，每
段带１个花芽。在超净工作台上先用７５％的酒精
漂洗２０ｓ；迅速放入到０．１％升汞溶液中浸泡１０
ｍｉｎ；浸泡完毕之后用无菌水冲洗４次，然后将其
放在无菌碟子切去两端伤口，并放置３０ｍｉｎ，等
到花梗晾干之后，接种到不同的诱导培养基上；先
暗培养１５ｄ，然后再将其放入光照条件下培养。培
养室温度为 （２８士３）℃，光／暗周期为１４ｈ／１０ｈ，
光照强度３ ５００～４ ０００ｌｘ。
１．２．２ 培养基的配置 试验利用 ＭＳ，花宝１号，
ＫＣ为基本培养基，在基础培养基上按不同的培养
阶段添加不同浓度、不同配比的植物生长调节剂
（ＮＡＡ、６－ＢＡ），并添加椰子汁、马铃薯、香蕉等
天然添加物，其中马铃薯剥皮称质量后，切成小碎
块煮烂用纱布过滤后使用，成熟香蕉剥皮研磨成香
蕉泥。调节所有培养基的ｐＨ 值为５．８，并用１
ｇ·Ｌ－１卡拉胶固化，分装到３５０ｍＬ三角瓶中，在
１２１℃条件下灭菌２４ｍｉｎ，待冷却凝固后使用。
１．２．３ 不定芽诱导 为筛选出促使腋芽萌发最为
适宜的培养基和激素浓度，蝴蝶兰 “大辣椒”花梗
不定芽诱导培养基因素与水平见表１，其Ｌ９ （３３）
正交设计试验因素与水平组合见表１，将花梗切段
后，按自然生长状态接种到不同基本培养基、不同
生长调节剂配比的培养基上，每个处理接种３０个
花梗段，共接种２７０个花梗段，每个培养都添加了
１５０ｍＬ·Ｌ－１椰汁 （ＣＭ）、香蕉泥２００ｇ·Ｌ－１、
马铃薯泥２００ｇ·Ｌ－１、糖２０ｇ·Ｌ－１、水解乳蛋白
１ｇ·Ｌ－１。不定芽诱导培养基的正交试验设计因素
与水平见表１。
表１ 蝴蝶兰“大辣椒”不定芽诱导培养基因素及水平Ｌ９（３３）
Ｔａｂｌｅ １ Ｌ９ （３３）ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｂｕｄ
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｎ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
因子
水平
基本
培养基
植物生长调节剂
ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ６－ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）
１ ＭＳ ０．１ １
２ 花宝一号 ０．２ ３
３ ＫＣ ０．３ ５
１．２．４ 不定芽的增殖及分化 为筛选出不定芽增
殖及分化最为适宜的培养基和植物生长调节剂含
量，蝴蝶兰“大辣椒”不定芽增殖及分化培养基因素
与水平见表２，其Ｌ９（３４）正交设计试验因素与水平
的组合见表２，将不定芽切取之后，按自然生长状态
接种到不同基本培养基、不同生长调节剂配比的培
养基上，每个处理接种３０棵不定芽，共接种３００棵
不定芽，每个培养都添加了１５０ｍＬ ·Ｌ－１椰汁
（ＣＭ）、香蕉泥２００ｇ·Ｌ－１、马铃薯泥２００ｇ·Ｌ－１、
糖２０ｇ·Ｌ－１、并附加０．５ｇ·Ｌ－１活性炭（ＡＣ）。
表２ 蝴蝶兰“大辣椒”不定芽增殖及分化培养基因素及水
平Ｌ９（３４）
Ｔａｂｌｅ ２ Ｌ９（３４）ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ
ｂｕｄ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎ ｔｉａｔｉｏｎｏｎ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ
Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
因子
水平
基本
培养基
植物生长调节剂
ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ６－ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１）
１ ＭＳ ０．２ ２
２ １／２ＭＳ ０．４ ４
３ 花宝一号 ０．６ ６
１．２．５ 蝴蝶兰的壮苗及生根培养基 为筛选出最
为适宜的壮苗及生根培养基，本研究主要对植物生
长调节剂含量和配比做些调整，蝴蝶兰 “大辣椒”
壮苗和生根培养基的因素与水平见表３。小苗分别
接种在接种到不同的壮苗和生根培养基上 （表
１０），每个处理接种１０瓶 （每瓶１０芽），共接种
６０瓶 。都添加了１５０ｍＬ·Ｌ－１椰汁 （ＣＭ）、香蕉
泥２００ｇ·Ｌ－１、马铃薯泥 ２００ｇ·Ｌ－１、糖 ２０
ｇ·Ｌ－１，并附加０．５ｇ·Ｌ－１活性炭 （ＡＣ）。培养
条件以日光灯为光源，无菌苗光照时间为每天１２
ｈ，光照强度为１ ４００～１ ８００ｌｘ，温度为２６℃左
右。
１．２．６ 组培苗的驯化和移栽 小苗经过３个月左
右的生根培养，等到叶片长度达到５ｃｍ左右，同
时根的长度也达到了５ｃｍ左右就可以移入温室中
６７０１ 福建农业学报 第３０卷
进行炼苗。炼苗过程要将小苗根部的培养基洗干
净，同时用多菌灵或高锰酸钾进行消毒，然后栽入
水草基质中进行生长。
表３ 蝴蝶兰“大辣椒”壮苗及生根培养基的因素与水平
Ｔａｂｌｅ ３ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｎ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｅｅｄｌｉｎｇ
ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ Ｂｉｇ Ｃｈｉｌｉ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
因子水平 基本培养基
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
１ １／２ＭＳ ０
２ 花宝一号 ０．２
３ ０．４
１．３ 调查统计分析
每１５ｄ调查１次瓶苗生长情况，统计不定芽
的诱导及增殖数量；接种后１５ｄ统计生根数量，
计算生根率，并利用ＳＰＳＳ ２１软件对试验数据进行
方差分析和单因子主效应分析。
２ 结果与分析
２．１ 不同基本培养基、植物生长调节剂配比对花
梗不定芽的诱导效果比较
将花梗段接种在不定芽诱导培养基上，培养
１５ｄ后不定芽开始膨大，２０ｄ后萌发长出小叶，
３０ｄ形成１个不定芽 （图１）。试验结果表明 （表
４）用花梗作为初次外植体接入不定芽诱导培养基
中，由于污染的原因，造成接种瓶数损失较大，为
２０％～３０％。同时，所诱导出来的不定芽长势，一
般是激素含量越高，芽比较小，叶色就会出现由水
泽状，生长速度快。
方差分析结果表明 （表５）：基本培养基对出
芽率的影响 （Ｓｉｇ．＝０．００３）呈极显著性 （Ｐ＜
０．０１），ＮＡＡ对出芽率的影响 （Ｓｉｇ．＝０．１９９）表
现不明显 （Ｐ＞０．０５），ＢＡ 对对出芽率的影响
（Ｓｉｇ．＝０．０１４）呈显著性 （Ｐ＜０．０５），３个因素中
对出芽率影响大小次序依次为基本培养基＞ＢＡ＞
ＮＡＡ。
单因子主效应分析对出芽率的影响，表６结
果分析表明：对于提高出芽率来说，基本培养基
应选择花宝一号 （均值最大，为６７．２９），ＮＡＡ含
量应该为０．３ｍｇ·Ｌ－１ （均值最大，为３６．５６），６－
ＢＡ 含 量 应 该 为 ５ ｍｇ·Ｌ－１ （均 值 最 大，为
４９．８０），因此对于不定芽诱导的最佳培养基为基础
培养基：花宝一号；ＮＡＡ：０．３ｍｇ·Ｌ－１；６－ＢＡ：
５ｍｇ·Ｌ－１。
图１ 花梗诱导出不定芽
Ｆｉｇ．１ Ｐｅｄｉｃｅｌ ｉｎｄｕｃｅｄ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ
表４ 不同基本培养基、不同植物生长调节剂配比对花梗不定芽诱导效果影响
Ｔａｂｌｅ ４ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
序号
基本
培养基
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数
／瓶
污染数
／瓶
出芽数
／瓶
出芽率
／％
不定芽长势情况
１ ３ ３ １ ３０ ７ ２ ８．７０ 芽小，生长速度慢，芽正常
２ １ ２ ３ ３０ ６ ８ ３６．３６ 芽眼多，有些形成小芽，生长速度慢，芽正常
３ ３ １ ３ ３０ ７ ８ ３４．７８ 芽眼多，有些形成小芽，生长速度较快，芽正常
４ １ ３ ２ ３０ ８ ５ ２２．７３ 芽大，生长速度慢，芽正常
５ ２ ３ ３ ３０ ７ １８ ７８．２６ 芽小，生长速度快，芽正常
６ ３ ２ ２ ３０ １１ ４ ２１．０５ 芽小而粗壮，生长速度慢，芽正常
７ ２ ２ １ ３０ ７ １２ ５２．１７ 芽大，生长速度慢，芽正常
８ ２ １ ２ ３０ ９ １５ ７１．４３ 芽小，生长速度较快，芽正常
９ １ １ １ ３０ ９ ４ １８．０５ 芽小，粗壮，叶色鲜绿，生长速度慢，芽正常
注：出芽率＝出芽的花梗数／（接种的花梗数－污染的花梗数）×１００％
７７０１第１１期 武爱龙等：蝴蝶兰 “大辣椒”组织培养与快速繁殖
表５ 培养基和植物生长调节剂对出芽率的影响方差分析
Ｔａｂｌｅ ５ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
方差来源 ＩＩＩ型平方和 ｄｆ 均方 Ｆ Ｓｉｇ．
基本培养基 ３８４１．５１３ ２ １９２０．７５７ ３２５．８１２ ０．００３
ＮＡＡ ４７．５３３ ２ ２３．７６７ ４．０３１ ０．１９９
ＢＡ ８２８．１５０ ２ ４１４．０７５ ７０．２３８ ０．０１４
误差 １１．７９１ ２ ５．８９５
总计 １７８４１．５２７ ９
校正的总计 ４７２８．９８７ ８
注：Ｒ２＝０．９９０
表６ 单因素影响出芽率统计结果
Ｔａｂｌｅ ６ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｎ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｓｐｒｏｕｔｉｎｇ
ｒａｔｅ
因素 水平 均值
标准
误差
９５％ 置信区间
下限 上限
基本培养基 ＭＳ ２５．７１３ １．４０２ １９．６８２ ３１．７４５
花宝一号 ６７．２８７ １．４０２ ６１．２５５ ７３．３１８
ＫＣ ２１．５１ １．４０２ １５．４７８ ２７．５４２
ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ０．１ ４１．４２ １．４０２ ３５．３８８ ４７．４５２
０．２ ３６．５２７ １．４０２ ３０．４９５ ４２．５５８
０．３ ３６．５６３ １．４０２ ３０．５３２ ４２．５９５
ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） １ ２６．３０７ １．４０２ ２０．２７５ ３２．３３８
３ ３８．４０３ １．４０２ ３２．３７２ ４４．４３５
５ ４９．８ １．４０２ ４３．７６８ ５５．８３２
２．２ 不同基本培养基、植物生长调节剂配比对不
定芽增殖及分化效果比较
花梗不定芽诱导出来之后，将所获得的不定芽
在无菌操作台上分切为单芽后转入准备好的不定芽
增殖及分化培养基里面进行培养之后，发现２０ｄ
其不定芽就逐渐萌发出芽眼，再过２０ｄ之后，逐
渐长出小叶并舒展，叶色由渐渐白转为淡绿、鲜
绿、浓绿 （图２、３）。
通过不同基本培养基、不同植物生长调节剂配
比对不定芽增殖及分化效果影响 （表７），表明将
所获得的不定芽转入到增殖和分化培养基中，污染
数比较低为０～２％，符合一般组培公司操作污染
的规定 （夏天污染不能超过１０％，冬天污染不能
超过４％），同时，植物生长调节剂越高，丛生芽
眼的数量增长也越多，但是，也存在芽体生长不正
常的现象，如玻璃化，变异现象的出现。增殖系数
最高的培养基为花宝一号＋ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１＋
６－ＢＡ ６ｍｇ·Ｌ－１达到５．５３倍。
图２ 不定芽增殖前表现
Ｆｉｇ．２ Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ｂｅｆｏｒｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
图３ 不定芽增殖后表现
Ｆｉｇ．３ Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ ａｆｔｅｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
通过方差分析增殖系数的影响 （表８）：基本
培养基的显著值Ｓｉｇ．为０．００５ （Ｐ＜０．０１）对增殖
系数有极显著性影响，ＮＡＡ 的显著值Ｓｉｇ．为
０．０４９ （Ｐ＜０．０５）对增殖系数有显著性影响，ＢＡ
的显著值Ｓｉｇ．为０．０１３ （Ｐ＜０．０５）对增殖系数有
显著性影响。３个因素中，影响大小次序依次为基
本培养基＞ＢＡ＞ＮＡＡ。
单因子主效应分析对增殖系数影响统计结果
（表９），表明对于提高增殖系数来说，基本培养基
应选择花宝一号 （均值最大，为４．４３），ＮＡＡ含
量应该为０．２ｍｇ·Ｌ－１ （均值最大，为３．３３），６－
ＢＡ含量应该为６ｍｇ·Ｌ－１ （均值最大，为３．５１），
因此，对于不定芽增殖和分化的最佳培养基为基础
培养基：花宝一号；ＮＡＡ：０．２ｍｇ·Ｌ－１；６－ＢＡ：
６ｍｇ·Ｌ－１。
８７０１ 福建农业学报 第３０卷
表７ 不同基本培养基、不同植物生长调节剂配比对不定芽增殖及分化效果影响
Ｔａｂｌｅ ７ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ ｂｕｄｓ
序号
基本
培养基
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数
／瓶
污染数
／瓶
形成丛
生芽数
增殖
系数
丛生芽长势情况
１ ３ ３ １ １０ １ ８１４ ３．０１ 小芽健壮，叶片鲜绿
２ １ ２ ３ １０ ０ ５４３ ２．２６ 小芽长势一般，叶片淡绿
３ ３ １ ３ １０ ２ １３２９ ５．５３ 小芽多而密，有点变异，叶片水泽状
４ １ ３ ２ １０ １ ４０５ １．５ 小芽少而粗壮，长势慢，叶片浓绿
５ ２ ３ ３ １０ ０ ８２５ ２．７５ 小芽小而粗壮，长势慢，叶片淡绿
６ ３ ２ ２ １０ ０ １４２２ ４．７４ 小芽多而密，长势正常，叶片鲜绿
７ ２ ２ １ １０ ２ ９８３ １．０４ 小芽少而粗壮，长势慢，叶片浓绿
８ ２ １ ２ １０ １ ３１１ ３．２８ 小芽健壮，叶片鲜绿
９ １ １ １ １０ ２ ２８４ １．１８ 小芽少而健壮，长势慢，叶片鲜绿
注：计算形成的丛生芽数和增殖系数时都去除掉污染瓶数。
表８ 培养基和植物生长调节剂对增殖系数的影响方差
分析
Ｔａｂｌｅ ８ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ｏｎ ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
方差来源 ＩＩＩ型平方和 ｄｆ 均方 Ｆ Ｓｉｇ．
基本培养基 １２．５１７ ２ ６．２５９ １８６．２７１ ０．００５
ＮＡＡ １．３１８ ２ ．６５９ １９．６１６ ０．０４９
ＢＡ ５．２９３ ２ ２．６４７ ７８．７７１ ０．０１３
误差 ０．０６７ ２ ０．０３４
总计 ９０．２６１ ９
校正的总计 １９．１９６ ８
注：Ｒ２＝０．９８６
表９ 单因素影响增殖系数统计结果
Ｔａｂｌｅ ９ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ
ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ
因素 水平 均值
标准
误差
９５％ 置信区间
下限 上限
基本培养基 ＭＳ １．６４７ ０．１０６ １．１９１ ２．１０２
１／２ＭＳ ２．３５７ ０．１０６ １．９０１ ２．８１２
花宝一号 １．６４７ ０．１０６ １．１９１ ２．１０２
ＮＡＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ０．２ ３．３３０ ０．１０６ ２．８７５ ３．７８５
０．４ ２．６８０ ０．１０６ ２．２２５ ３．１３５
０．６ ２．４２０ ０．１０６ １．９６５ ２．８７５
ＢＡ／（ｍｇ·Ｌ－１） ２ １．７４３ ０．１０６ １．２８８ ２．１９９
４ ３．１７３ ０．１０６ ２．７１８ ３．６２９
６ ３．５１３ ０．１０６ ３．０５８ ３．９６９
２．３ 不同基本培养基、植物生长调节剂配比对蝴
蝶兰的壮苗及生根培养基效果比较
将无根丛生芽分开后接种到生根培养基中，
２０ｄ左右根就开始萌发，２～３个月就可移栽 （图
４）。选用不同的基本培养基对萌发并具有４～５片
叶的小苗进行生根培养结果 （表１０），表明低盐培
养基１／２ＭＳ较适合生根培养。在培养基２中，生根
率为９６％，且根长势健壮，数量多；而以花宝一
号为基本培养基中，生根率最高为４４％，最低为
３４％，且长势较弱；以 ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１根长势
较好；椰子汁、苹果汁、土豆汁作为复合添加物对
生根较为有利。最佳的壮苗和生根培养基为１／２ＭＳ
＋０．２ｍｇ·Ｌ－１。
图４ 组培苗
Ｆｉｇ．４ Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ
注：Ａ为生根前表现，Ｂ为生根后表现。
９７０１第１１期 武爱龙等：蝴蝶兰 “大辣椒”组织培养与快速繁殖
表１０ 不同基本培养基、不同植物生长调节剂配比对蝴蝶兰的壮苗及生根培养基影响
Ｔａｂｌｅ １０ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｍｅｄｉａ ａｎｄ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ
序号 基本培养基
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种瓶数／
（个·瓶－１）
平均根数
／条
平均根长
／ｃｍ
生根率
／％
根生长情况
１ １／２ＭＳ ０ １０ １．６２ ２．７８ ６７ 细长，数量少
２ １／２ＭＳ ０．２ １０ ３．４３ ３．１６ ９６ 粗壮，根较多
３ １／２ＭＳ ０．４ １０ ２．８４ ３．０４ ８３ 短，根多
４ 花宝一号 ０ １０ １．４５ ２．１７ ３４ 粗短，根较少
５ 花宝一号 ０．２ １０ ２．５６ １．６６ ４２ 弱，根少
６ 花宝一号 ０．４ １０ ２．１４ １．８７ ４４ 细弱，根少
２．４ 生根苗移栽
选取根系发达、粗壮、长４～５ｃｍ的试管苗，
在移栽前先经炼苗培养，即将试管苗 （未打开培养
瓶盖）放在温室大棚里面的滚床上，室温下３０ｄ，
等到三角瓶里面的蝴蝶兰生根苗的叶子由鲜绿变为
墨绿之后，再打开瓶盖在室温下放置２０ｄ，然后移
栽，所用基质是消毒灭菌的水苔，加盖塑料薄膜，
薄膜上有通风小口，基质用营养液喷湿，但不能过
湿，置于散射光下生长。待蝴蝶兰根系成活后，再
喷洒清水１次，然后每隔７ｄ浇水１次，这样蝴蝶
兰成活率较高，一般的成活率在９１．５％以上。
２．５ 蝴蝶兰温室管理
蝴蝶兰属于热带阴生植物，喜高温不耐严寒，
在温度５℃以下便会死亡，如果温度低于１０℃时蝴
蝶兰的花瓣上就容易出现黑色的斑点，冬季要注意
防寒。同时，蝴蝶兰喜欢高湿的环境，根部又忌积
水，因此，蝴蝶兰喜通风，水分过多，容易引起根
部腐烂，对于刚出瓶的小苗就要及时补充水分，中
苗或大苗应根据干湿程度浇水，一般７～１０ｄ基质
变干，盆面发白时宜浇水，浇水时要让盆中水苔湿
透，并且夏季通风不良植株易染病，日常管理注意
光照不宜过强，施肥根据不同生长需要来完成，栽
成活率达到９１．５％。组培苗移栽４～６周之后可适
当施一些液体肥料，每周１次。一般栽培２年时间
就可以根据销售需求来调控其抽花梗以及开花时
间，以达到既满足市场对蝴蝶兰的需求，又能够达
到盈利目的．
３ 讨论与结论
影响组培效果的因素主要有污染、褐化问题。
本研究过程笔者不建议采取添加抗菌剂，尽可能采
用升汞进行蝴蝶兰花梗以及叶片表面消毒，这与何
荆州等［１２］研究一致的。本研究采取尤海龙等［１３］、
唐德华等［１４］在培养基里面添加适当含量的ＰＶＰ和
ＶＣ，新组培的瓶苗采取在低温１７～２０℃、黑暗培
养７ｄ，再转到正常温度、光照培养，能较大降低
褐化程度。同时生根培养基中添加活性炭，褐化效
果更好。
研究结果表明，选择花宝一号为基本培养基，
不定芽诱导的最佳培养基为：花宝一号＋ＮＡＡ
０．３ｍｇ·Ｌ－１＋６－ＢＡ ５ｍｇ·Ｌ－１；不定芽增殖和分
化的 最 佳 培 养 基 为：花 宝 一 号 ＋ ＮＡＡ ０．２
ｍｇ·Ｌ－１＋６－ＢＡ ６ｍｇ·Ｌ－１，增殖系数最高达到
５．５３倍。在工厂化生产中，一般都是使用花宝一
号作为诱导以及增殖培养基使用，张伟等［１５］在蝴
蝶兰组培中就发现在 ＭＳ＋３．０ｍｇ·Ｌ－１ ６－ＢＡ＋
１．０ｇ·Ｌ－１花宝１号培养基中诱导出营养芽，其诱
导率 达 ９０％，叶 秀 仙 等［１６］在 添 加 甘 露 醇 １５
ｇ·Ｌ－１或多效唑 （ＰＰ３３３）６．０ｍｇ·Ｌ－１的１３．０
ｇ·Ｌ－１＋ＡＣ ０．５ｇ·Ｌ－１＋蔗糖２０ｇ·Ｌ－１培养基
上保存１８个月，存活率达８０．０％以上，且保持较
高的增殖速率，增殖系数４．１，这都意味着蝴蝶兰
应用花宝一号作为培养基具有更强的实用性。同时
研究发现最佳的壮苗和生根培养基为１／２ＭＳ＋
ＮＡＡ ０．２ｍｇ·Ｌ－１，生根率为９６％，椰子汁、苹
果汁、土豆汁作为复合添加物对生根较为有利，这
与很多蝴蝶兰组培研究者［５－８］利用１／２ＭＳ作为壮
苗和生根培养基的结果是一致的。
本研究采用蝴蝶兰品种 “大辣椒”幼嫩花梗作
为试验材料，通过正交试验设计研究基本培养基、
激素成分及浓度水平对花梗不定芽的诱导、增殖、
分化、生根的影响，以及蝴蝶兰温室管理等方面进
行了较为系统的研究，建立了蝴蝶兰组织培养与快
速繁殖技术体系，可为工厂实用化种苗生产提供技
术支持。
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（责任编辑：黄爱萍）
１８０１第１１期 武爱龙等：蝴蝶兰 “大辣椒”组织培养与快速繁殖