全 文 ：第 2 1卷 第 6期 现 代 应 用 药 学 1995年 2 1月
· 中药与天然药 ·
复方金钱草口服液检验方法研究
肖 丹 周淑芳 (成都中医药大学 , 成都 6 1 00 72)
提要 应用薄层色谱法对制荆 中金钱草 、 车前草和石韦进行了鉴别、 方法专属性强 , 重现性好 , 并对制 荆
中黄酮类成分采用聚院胺 柱色谱分离 , 兰抓化铝显色 , 以芦丁 为对照品 , 进行了比 色侧定 , 在一定 p H 条 件下 ,
可获得稳定的吸收峰 。
关盆词 金钱草 口服液 芦丁 色谱法 薄层 质盆控制
复方金钱草口服液由金钱草 、 车前草 、 石韦、
玉米须四味中药组成 。 具有清热解毒 、 利胆排石 ,
通淋利尿的功效 。 用于治疗热 淋 、 砂 淋 、 尿 短 涩
痛 、 黄疽尿赤 、 肝胆结石 、 尿路结石 。 本文收载了
处方中主要组成金钱草 、 车前草和石韦!的 鉴 别 试
验 , 并对制剂中总黄酮含量进行了比色测定 , 以期
为成品的质量控制提供依据 。
仪器与试药
日本岛津产 U V 一 240 型紫外分析仪
硅胶 G (青岛海洋化工厂 ) ,
对照品 : 芦丁 (中国药品生物制品检定所为
药材对照品 : 金钱草 、 车前草 (四川省药 品检
验所提供 ) , 石韦 (成都中医药大学中药标本中心提
供 ) 。
复方金钱草口服液 (四川内江制药四厂 )
试剂均为分析纯 。
方法与结果
1 供试品溶液和对照药材溶液的制备
1
.
1 取样品 20 m l , 加稀盐酸调节 p H 至 2 , 用 醋
酸乙醋提取二次 , 每次 20 m l , 合并醋酸乙 醋提取
液 , 蒸干 , 残渣加无水乙醇 1 0 1溶解 , 作为供试品
溶液 。 另取金钱草对照药材 2 9 , 加水煮沸 30 也 in ,
放冷 , 滤过 , 滤液必要时浓缩至 约 20 m l , 同法制
成对照药材溶液。
1
.
2 取样品 20 m l , 同 1 项下制成供试品溶液 , 蒸
干 , 残渣加乙醚 10 m l , 浸泡 2 仇 i n , 倾去 乙醚液 ,
残留物用无水乙醉 1 m l 溶液 , 作为供试 品 溶液 。
另取石韦对照药材 1 9 , 加水煮沸 30 m in , 放冷 ,
涟过 , 滤液必要时浓缩至约 20 m l , 同法 制成对照
药材溶液 。
1
.
3 取本品 20 m l , 用正丁醉提取二 次 , 每 次 20
m l , 合并正丁醇提取液 , 用水20 m l 洗涤 , 分取正
丁醇液 , 蒸干 , 残渣加无水乙 醇 1 m l溶 解 , 作为
供试品溶液 。 另取车前草对照药材 1 9 , 加水煮沸
30分钟 , 放冷 , 滤过 , 滤液必要时浓缩至约 20 m l ,
同法制成对照药材溶液 。
2 阴性对照落液的制备
按制剂处方比例和工艺 , 分别除去一味药材 ,
再按供试品溶液制备项下制成相应的阴性对照液 。
3 薄层层析
3
.
1 吸取金钱草的供试品、 对照药材及阴性 对 照
溶液各 10 协 1, 分 别 点于同一含狡甲基纤维素钠为
粘合剂的硅胶 G薄层板上 , 以 甲苯一甲酸 乙醋一甲
酸 (5 : :4 1) 为展 开 剂 , 展 开 、 取 出、 晾 干 、 喷 以
2 %三氯化铝乙醇液至斑点显色清晰 。 供试品色谱
中 , 在对照药材色谱相应的位置上 , 显相同颜色的
斑点 。
3
.
2 吸取石韦的供试品 、 对照药材及阴性对 照 溶
液各 10 川 , 分 别 点于 同一含狡甲基纤 维 素钠为粘
合剂的硅胶 G 薄层板上 , 以甲酸乙醋一甲苯一甲酸
( :6 :3 1) 为展开剂 , 展开 、 取出 、 晾 干 , 喷 以 2 %
l a
DOI : 10. 13748 /j . cnki . i ssn1007 -7693. 1995. 06. 007
三氯化铝乙醇液至斑点显色清晰 。 供试品色谱中 ,
在与对照药材色谱相应的位置上 , 显一个相同颜色
的斑点。
3
.
3 吸取车前草供试品 , 对照药材及车前草 阴 性
对照溶液 各 10 户 , 分 别点于同 一含浚 甲基纤维素
钠为枯合剂的硅胶 G薄层板上 , 以苯一丙酮一甲酸
(7
, 3 , 0
.
1) 为展开剂 , 展开 、 取出 、 晾千 , 喷 以 对
二氮基苯甲醛试液 , 热风吹至斑点显色清晰 。 供试
品色谱中 , 在与对照药材色谱相应位置上 , 显一个
相同的黄色斑点 。
4 总黄砚含t 侧定
4
.
1 标准曲线的制备及其线性范围测定
精密称取 80 0 干燥至恒重的芦 丁 对 照 品 1 0 . 2
m g
, 置 10 0 m l 量 瓶中 , 加甲醇使溶解并稀 释 至
刻度 。 精密吸取对照品溶液 1 . 0 、 2 . 0 、 3 . 0 、 4 . 。 、
5
.
0
、
6
.
0
、
7
. 。 、 8 . 0 m l , 分别置 25 m l量瓶中 , 显
色后放置 40 分钟 , 在 272 n m 波长处测定吸收度 , 以
吸收度为纵坐标 , 重量为横坐标 , 绘制标准曲线 。
精密量取本 .钻一定量 , 加入芦 丁 对 照 品一定
量 , 按样品测定法中规定的操作方法分离测定 , 计
算加样回收率为10 1 . 3 % 。
加样回收试验结果
样品中总黄酮含量
(m g )
加 入芦 丁 量
(m g 、
实 侧 值
(m g )
回 收 率
( % )
R S D
( % )
0
.
2 5 6
0
.
2 5 6
0
.
2 5 6
0
.
2 5 6
0
.
5 5 0
0
.
5 9 0
0
.
1 0 2
0
.
1 0 2
0
.
2 0 4
0
.
2 0 4
0
.
1 0 2
0
.
1 0 2
0
.
3 6 0
0
.
3 6 3
0
.
4 6 7
0
.
4 e 9
0
.
6 8 9
0
.
6 9 0
10 2
.
3 5
10 2
.
5 1
1 03
.
2 4
10 4
.
4 6
97
.
4 5
9 7
.
9 4
2
.
8 7
回收率 = 实测值一样品 中黄酮含量加入芦丁量
火 1 0 0%
4
.
5 精密度试验
取同一批号的样品六份 , 测定其总黄酮含量 ,
结果如下 :
编 号 1 2 3 4 5 6
芦丁对照品
( m g )
吸 收 度
0
.
1 0 2 0
.
2 0 4 0
.
3 0 6 0
.
4 08 0
.
5 10 0
.
6 1 2
0
.
l b 5 0
.
3 17 0
.
46 8 0
.
6 3 4 0
.
7 80 0
.
9 2 7
总黄酮含世
( m g )
R S D (% )
6 2
.
5 2
.
6
2
.
0 1
y 二 0
.
0 1 2 + 1
.
5 0 3 x ( r 二 0
.
99 9 9 )
4
.
2 柱色谱洗脱剂的选择
取样品 1 m l 与聚酞胺 1 9 拌匀 , 干 燥 后装入
层析柱内 , 分别用甲醇 、 20 % 乙醇 、 30 % 乙醉和 70 %
乙醇洗脱 , 洗至洗脱液不显黄酮反应为止 , 蒸干洗
脱液 , 残渣用甲醇溶解并转入 10 m l 量瓶中 , 稀释
至刻度 , 摇匀 、 滤过 , 取滤液显色测定 , 结果表明
以 3。% 乙醇的洗脱效果最好 , 杂质千扰最小 , 故选
择 30 % 乙醇为洗脱剂 。
4
·
3 显色稳定性考察
取芦丁对照品溶液 , 显色后放置不同时间 , 测
定吸收度 , 结果如下 :
4
.
6 样品测定
精密量取样品 1 m l 与聚酞胺 (柱层析用 , 30 一
60 口 ) 1 9 拌匀 , 于 60 0 干燥 4 小时 , 装入层 析 柱
(玻璃柱 , 内径约 g m m ) 内 , 用 30 % 乙醇 40 m l 洗
脱 , 收集洗脱液 , 蒸千 , 残渣加甲醇溶解 、 并转入
10 m l量瓶中 , 稀释至刻度 , 摇匀 、 滤过 , 精密蚤
取滤液 1 m l , 置 25 m l 量瓶中 , 照标准曲线制备项
下方法 , 自“ 加三氯化铝溶液 ”起依法测定吸收度 ,
以标准曲线读出供试品溶液中芦丁的重量 ( m g) , 计
算 , 即得 。 测得三批样品中总黄酮含量如下 :
总黄酮含扭 ( m g /m l)
放置时间 (m i n ) 1
吸 收 度 0 . 39 8
1 0
0
.
3 9 8
2 0
0
.
3 9 7
3 0
0
.
3 9 8
9 4 10 10
9 4 10 1 1
9 4 1 0 12
放置时 rH] ( m i n )
吸 收 度
4 0 5 0
0
.
3 9 2 0
.
3 9 3
6O
0
.
3 92
12 0
0
.
3 92 讨 论
从测定结果可见 , 显色后放置 40 分钟 , 吸收度值
可达到基本稳定 , 故规定显色后放置时间为40 分钟 。
4
.
4 加样回收试验
l 本文所用鉴别方法 , 分离度 、 重现性均较好 ,
有较强专属性 。
2 由于缺乏金钱草 、 车前草 、 石韦的主要成分的
14
第 1 2卷 第 6期 现 代 应 用 右 举 199 5年 1 2月
化学对照品 , 而三味药物又均含有黄酮类化合物 ,
故以芦丁为标准品 , 进行比色测定总黄酮含量 。 实
验采用了聚酞胺柱色谱分离黄酮类成分 。 三氯化铝
显色 , 在一定 p H 条件下 , 可获得稳定的吸收峰 ,
样品及芦丁对照品均在2 72 n ln 处有最大吸收 。
收稿 日期 : 19 9 5一 05 一05
伪品鹿茸— “宝牌梅花鹿茸片 ” 的鉴别章素玻 (福建省龙岩地 区药品性脸所 , 龙岩 3 6 4。。0)
鹿茸是一味温补肾阳的名贵中药 , 为鹿科动物
梅 花 鹿 〔 C e r v u s n i P p o n T e m m i n e k〕或 马 鹿
[ C e r v u s e l a p h u s L i n n a e u s〕的雄鹿尚未骨化而
密生茸毛的幼角 。 近来 , 我区发现一种伪品 , 该伪
品包装精美 , 塑料合 5 9 装标名 : “ 梅花鹿茸片 ” ,
冒充正品鹿茸饮片在我区各医药市 场 销售 。 此 “ 鹿
茸片 ” 是吉林省东丰县农垦鹿业总公司所 制 造 。 为
确保人民用药安全有效 , 现将正品鹿茸饮片和伪品
“ 宝牌梅花鹿茸片 ” 鉴别报道如下 :
1 性状
正品: 呈类圆形或椭圆形薄片 , 胶质透明 , 无
角质化 。 外层有黄棕色的皮 , 间见焦斑 , 饮片边缘
皮茸紧贴 , 残存茸毛或茸毛痕迹明显 , 中部蜂窝状
小孔自然排列 。 体轻 , 质硬而脆 , 入水不变形 , 煮
沸不变软不糊化 。 气微 , 味微咸 。
伪品 : 呈不规则圆形或半圆形薄片 , 色黄白相
间 , 片边缘有一光滑半透明角质样外圈 , 无茸毛及
残留茸毛痕迹 , 外皮易剥离 , 片内蜂窝状小孔细而
密 , 不甚明显 。 体轻 , 质脆 , 入水软化变形 , 煮沸
即成琼脂状 。 气微 , 味淡 。
2 簇外光 , 鉴别洲定
2
.
1 仪器与试药 仪器 : 日本岛津 U V 一 2 1。。型紫
外分光光度计 。正品鹿茸片由龙岩市医药公司提供 ,
伪品鹿茸片系抽检样品 。
2
.
2 实验方法与结果 分别取正品鹿茸片及 伪 品
鹿茸片粉末。 . 2克 , 置 10 m l 容量瓶中 , 加 40 % 乙
醇至刻度 , 温浸 12 h , 放冷 , 滤过 , 分取滤液 , 同
时以4 0 % 乙醉为空 自对照 , 在波长 20 ~ 3 0 n m 处
测定吸收光谱 。 结果表明正品鹿茸片在 253 士 2 n m
和 2 3 6 士 2 n m 的波长处有最大 、 最 小 吸 收 , 见 图
1
。 伪品鹿茸片均无最大 、 最小吸收 , 与正 品鹿茸
片具有明显的差别 , 见图 2 。
荟t 、 言爵
鑫荟
藻盘 多, 9 二肠0 添昙
[ p E ^ K 」 一
W A V E L EN G T H
正昌班理片工外吸收光1
( A sB ) 口 A L L屯亨〕 - -一又A B )S
V A L U E W A V E L E N G T H V A L U E
1 , 2 5 1
.
1 0
.
5 0压
2 1 2 0 2
.
0 2
.
53 1
1 . 2 3通、 0 0 . 3 7 3
重蓦
毫一除七嗦~ 嗯产嘿昌I 二 伪品宝牌梅花鹿茸片策外吸收光诊〔P E A K I ( A B S ) 仁V A L I J E Y 〕 ( A B S )
W A V E L E N G T H V A L U E W A V E L E N G T H V A L U E
1 . 2 1 1
.
8 2
.
9 8 3
本法具有简便 、 快速 、 准确优点 , 尤其对外观
性状 、 显微鉴别 、 薄层色谱等方法难于 鉴 别 的 检
品 . 具有一定实用性 。 收稿 日期 : 19舫一 05 一 15
1 5