全 文 ：中国肿瘤 2011 年第 20 卷第 1 期 China Cancer,2011,Vol.20,No.1
重楼复方对荷肝癌 H22小鼠生长及生存
时间的影响
肖 敏，季建美，张国铎，胡文静，邹征云，禹立霞，钱晓萍，刘宝瑞
（南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心，江苏 南京 210008）
Im pa ct of Ch ine se Tra d it iona l Medicine , Com ple x Chong -lou , on the Growth
a nd Su rviva l of Mice Be a ring Live Ca nce r H22 Ce lls
XIAO Min, JI Jia n -me i, ZHANG Guo -d uo , e t a l.
摘 要： ［目的］ 观察重楼复方对荷肝癌 H22小鼠体内抑瘤作用及生命延长作用。［方法］ 建立
荷肝癌 H22实体瘤小鼠模型，随机分为对照组、环磷酰胺组、复方斑蝥组及重楼复方常规剂量
组（117mg/kg·d）、低剂量组（58.5mg/kg·d），观察各给药组中荷肝癌 H22实体瘤小鼠抑瘤率、给
药前后体重及生存时间。 ［结果］ 与对照组相比， 重楼复方在常规、 低剂量组抑瘤率分别为
34.81%、8.28%（P=0.003）；生命延长率分别为 91.4%、13.5%（P<0.001）；环磷酰胺组在抑瘤率
上明显优势，达 70.44%，但是其对小鼠体重的增加受到显著抑制（P=0.011），不同剂量重楼复
方对小鼠体重无明显抑制。 ［结论］ 重楼复方常规剂量组对荷肝癌 H22实体瘤小鼠肿瘤生长有
明显抑制作用，且能显著提高荷肝癌 H22实体瘤小鼠的生存期。
关键词：重楼复方；小鼠；肝癌；抑瘤率；中医中药
中图分类号：R735.7 文献标识码： 文章编号：1004-0242（2011）01-0055-04
近年来中医中药在肿瘤治疗
的研究中越来越重要， 同时在临
床实践中可明显发现大多数肿瘤
病人在治疗中使用中医中药。 中
药重楼是来源百合科植物云南重
楼或七叶一枝花的干燥根茎，目
前药理研究表明， 中药重楼及其
提取物主要具有抗肿瘤、 抗菌消
炎、止血、免疫调节等作用，同时
我们实验室长期致力于传统中医
药中具有体内外抗肿瘤作用的药
物及有效成分的研究，包括：延胡
索总碱、石见穿、叶下珠等[1~5]。 在
结合著名中医学专家刘沈林、赵
昌基、陈锐深、周维顺等 [6~10]常于
临床的一些单味中药， 及文献中
报道的有明确抗肿瘤作用的单味
中药[11~25]，之后组成重楼复方作为
抗肿瘤的基本方。 为证实该基本
方的抗肿瘤作用并指导后续临床
使用， 进行了对荷肝癌 H22实体
瘤的小鼠实验。 现将重楼复方对
荷肝癌 H22实体瘤小鼠生长的抑
制作用报道如下。
1 材料与方法
1.1 药物及配制
重楼复方主要包括：重楼、延
胡索、吴茱萸等 10味中药。 均购
于南京大学医学院附属鼓楼医院
中药房， 各味药材按组方比例混
合后粉碎成细粉， 用 10 倍量，8
倍量蒸馏水依次加热回流提取两
次，每次 1h，过滤水提液，合并 2
次滤液， 旋转蒸发至一定浓度的
混悬液，置于 4℃冰箱保存备用，
按实验小鼠每克每天用量设计剂
量为常规、低剂量，用超纯水稀释
至 分 别 相 当 于 生 药 量 每 日
117mg/kg （本实验采用重楼复方
在蒸馏水中最大溶解度，相当于人
的临床用量 1.5 倍） 及 58.5mg/kg
（相当于人的临床用量的 0.75
倍）。 环磷酰胺（CTX）200mg/支，
江苏恒瑞医药股份有限公司，批
号 10021821； 复方斑蝥胶囊，陕
西方舟制药有限公司，0.25g/粒，
批号：国药准字 Z20013152。
1.2 瘤 株
小鼠肝癌 H22细胞株由南京
大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中
心实验室提供，小鼠腹水传代，每
7~9d传代 1次。
1.3 动 物
昆明种小鼠，体重（20±2）g，
收稿日期：2010-11-04；修回日期：2010-12-08
基金项目：南京市卫生局资助项目
（ykk09095，ykk09097）
通讯作者：刘宝瑞，E-mail: baoruiliu@hotmail.com
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表 2 不同剂量的重楼复方对 H22荷瘤
小鼠生存时间的影响（x±s，n=10）
组 别
对照组
CTX 组
复方斑蝥组
低剂量组
常规剂量组
平均生存
时间（d）
19.38±11.17
12.78±8.38
16.70±9.03
22.00±12.84
37.10±8.67△☆*
生命延长率
（%）
-
-34.0
-13.8
13.5
91.4
注：△：与对照组比较，P＜0.001；☆：与 CTX 组
比较，P＜0.001；*：与复方斑蝥组比较，P＜0.001。
表 3 不同剂量的重楼复方对 H22荷瘤
小鼠体重的影响（x±s，n=10）
组 别
对照组
CTX 组
复方斑蝥组
低剂量组
常规剂量组
给药前体重（g） 给药后体重（g）
23.41±1.74
22.31±1.31
24.05±1.74
22.61±2.61
22.87±1.88
32.79±5.56
26.28±4.45△
34.41±5.62
33.41±5.50
30.67±5.23
注：△：与对照组比较，P=0.011。
表 1 不同剂量的重楼复方对 H22荷瘤
小鼠抑瘤率的影响（x±s，n=10）
组 别
对照组
CTX 组
复方斑蝥组
低剂量组
常规剂量组
瘤重（g）
3.02±1.20
0.89±0.21
3.38±1.79
2.77±1.16
1.97±0.86△☆*
抑瘤率（%）
-
70.44
-4.98
8.28
34.81
注：△：与对照组比较，P=0.003；☆：与 CTX 组
比较，P＜0.001；*：与复方斑蝥组比较，P=0.031。
雄性， 由南京大学医学院附属鼓
楼医院实验动物中心提供， 饲养
一周后再行实验。
1.4 实验器械
R-501 旋转蒸发仪， 上海申
顺生物科技有限公司 ；DFY-500
中药粉碎机， 温岭市林大机械有
限公司；JY 超声细胞粉碎机，宁
波新芝生物科技股份有限公司。
1.5 方 法
1.5.1 荷肝癌 H22小鼠模型的建
立
将荷腹水型 H22肝癌细胞小
鼠传代一次至抽出乳白色腹水，
抽取腹水， 无菌条件下以生理盐
水按 5∶1 的比例稀释腹水； 血细
胞培养板计数至 1×107/ml，用 1ml
针管取 0.2ml 稀释后腹水， 接种
于小鼠右前肢腋下 (每次接种前
均轻轻摇匀接种液)。
1.5.2 重楼复方对荷肝癌 H22小
鼠的影响
按 1.5.1 方法接种小鼠后，次
日随机分为：对照组(超纯水组)；
环磷酰胺组（25mg/kg·d）；复方斑
蝥组（350mg/kg·d）；重楼复方常
规剂量组（117mg/kg·d）及低剂量
组 （58.5mg/kg·d）， 均连续灌胃
（按照 0.2ml/10g 小鼠体重） 给药
14d， 于末次给药后 24h 称量重
后，脱颈椎处死小鼠，剥取瘤体并
称重。 计算肿瘤抑制率。
抑瘤率=(对照组平均瘤重-
实验组平均瘤重)/对照组平均瘤
重×100%
1.5.3 重楼复方对荷肝癌 H22小
鼠生命延长率的影响
按 1.5.1 方法接种完成后，次
日随机分组， 分组及给药方法同
实验 1.5.2，给药后记录各组动物
存活时间，计算生命延长率。
生命延长率=(实验组平均生
存天数-对照组平均生存天数 )/
对照组平均生存天数×100%
1.5.4 重楼复方对小鼠的体重的
影响
称量小鼠种瘤前及连续给药
14d 后处死前的体重， 比较各组
小鼠体重的变化， 以初步判断各
组小鼠毒副作用的大小。
1.6 统计学处理
采用 SPSS 16.0 统计软件统
计分析。 两组间差别显著性检验
进行方差分析及 t 检验分析，以
P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
CTX 组和重楼复方常规剂
量组的平均瘤重均低于对照组，
抑 瘤 率 分 别 为 70.44% 和
34.81%，表明重楼复方常规剂量
组对小鼠 H22实体瘤有明显抑瘤
作用（表 1）。
重楼复方常规剂量、 低剂量
组对荷瘤小鼠的生存时间较对照
组有明显延长作用， 生命延长率
分别为 91.4%及 13.5%。 表明重
楼复方对荷 H22实体瘤小鼠生存
时间有明显延长， 其中以常规剂
量组为显著（表 2）。
在各种实验组中， 给药前各
组小鼠体重无明显统计学差异，
给药结束后除 CTX 组体重较对
照组有统计学差异外， 其余各组
体重变化与对照组均无明显统计
学差异（表 3），表明重楼复方对
小鼠无明显毒副作用。
3 讨 论
上述实验表明重楼复方对荷
肝癌 H22实体瘤小鼠的瘤重有抑
制作用， 且能提高荷肝癌 H22实
体瘤小鼠的生存期尤其是在常规
剂量时。 在重楼复方常规剂量时
对小鼠肝癌 H22实体瘤瘤重抑制
率上达到 34.81%，虽不及环磷酰
胺组的 70.44%，但是从两药对小
鼠实验前后的体重影响所表现出
来的毒副反应及后续生存时间来
看，环磷酰胺提高了抑瘤率，但带
来较严重的副作用， 并未明显延
长荷瘤小鼠的生存时间。 关于实
验中复方斑蝥组，无论在抑瘤率、
生存时间、 给药前后体重中均未
与实验对照组有明显区别， 与部
分文献结果不完全相符， 从该实
验模型的建立及后续实验中均未
见明显异常， 可能原因有斑蝥在
溶解过程中虽经超声助溶， 但仍
论 著 56
中国肿瘤 2011 年第 20 卷第 1 期 China Cancer,2011,Vol.20,No.1
有一些细小颗粒， 较难通过灌胃
针，可能对小鼠实际给药量有一定
影响，具体原因值得进一步研究。
在肿瘤治疗的早期，各种治疗
手段的核心理念是如何提高抑瘤
率，尽量缩小肿瘤大小，而往往忽
视了肿瘤患者从治疗中的明确获
益情况。在分子靶向药物问世后国
外的肿瘤治疗已从单一的追求抑
瘤率逐渐转移到如何延长病人生
存时间， 更加强调了带瘤生存，从
而努力让肿瘤成为一种可防可控
的慢性疾病，如同高血压、糖尿病
之类。 通过搜索国内关于重视“带
瘤生存”的相关文献，我们可以看
出 2006~2010 这 5年期间的相关
文献较 2001~2005 期间有了明显
增加， 文章总数增加近一倍之多。
同样传统中医药也正在逐步转变
为以注重生存时间、 减轻患者痛
苦及实现带瘤生存为目的 [26~29]。
重楼复方常规剂量组在实验中具
有明显的延长荷瘤小鼠的生存时
间的作用（91.4%，P<0.001），同时
具有一定的抑制肿瘤生长的作用
（34.81%，P=0.003）， 提示该方有
明显抗肿瘤及延长生存时间的作
用，即实现长期“带瘤生存”的目
的，从而可以以此为基本方，根据
辨证施治指导原则指导后续临床
运用。
中药抗肿瘤作用有其独特的
优势与作用机制 [5，18，19，21，30~40]，目前
中药抗肿瘤作用研究主要集中在
提高免疫力、抗血管生成、抑制肿
瘤转移、直接杀伤肿瘤细胞、促进
细胞凋亡等方面。 通过组成复方
剂后往往能有提高机体免疫力，
增加机体对其他抗肿瘤化学药物
的耐受性，逆转肿瘤耐药，减少
化、放疗等产生的毒副反应的作
用 [1，2，22，41~44]，从而起到抑制肿瘤生
长、提高疗效、减轻患者痛苦，提
高患者抗肿瘤治疗耐受性。 重楼
复方中：郑海音等 [18]发现石见穿
多糖可以通过诱导 SMMC-7721
细胞凋亡来抑制肿瘤生长， 并且
随着石见穿多糖的浓度增加细胞
的凋亡率易随之增加；张国铎等[4]
发现延胡索总碱可能通过调控相
关 miRNA 基因表达来调控相关
信号通路及细胞周期进程或者通
过诱导细胞凋亡、 阻滞细胞周期
等来抑制肿瘤细胞的增殖； 王爱
武等 [19，20]发现猫爪草水提物在体
内实验中有调节动物免疫力，增
加抗肿瘤的作用， 同时在体外实
验中发现猫爪草的皂苷、 多糖成
分均有抑制肿瘤细胞的增殖的作
用；宋颖等 [15]发现腹腔内给不同
剂量的吴茱萸碱对小鼠肿瘤
S180 及 HepA 有一定抑制作用；
季建美等 [3]发现在体外实验中叶
下珠醇提物对胃癌细胞有明确的
抑制作用， 而其机制可能就是促
进肿瘤细胞凋亡， 而黄育华等 [45]
发现叶下珠能通过诱导肝癌细胞
株向正常化分化来预防及抑制肝
癌细胞生长及克隆形成；胡静等[5]
发现重楼醇提物在体外实验中发
现其可能有抑制内皮细胞增生、
迁移、管腔形成、诱导内皮细胞凋
亡及抑制内皮细胞 DNA 合成来
抑制体外血管生成等等。 通过广
泛调研有明确抗肿瘤作用的中药
单体或水提、 醇提物及各中医名
家常用抗肿瘤药物， 我们所选取
的中药均为实验或临床已证实有
明确抗肿瘤作用的， 上述实验证
实重楼复方在体内有明显抗肿瘤
及延长生存时间的作用， 同时该
方中各成分在体内外的抗肿瘤作
用机制有所不同， 所以组方后其
抗肿瘤作用机制如何值得进一步
研究。 同时重楼复方在实验中对
荷瘤小鼠无明显毒副作用， 则其
后续是否可以联合化疗药物协同
增效、是否有逆转肿瘤细胞耐药、
是否有减轻化放疗不良反应的作
用等亦值得进一步研究。
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