全 文 ：蝴蝶兰无菌播种快繁技术
丁　峰 , 徐建新 , 孙　莉 , 朱秀琴
(江苏省张家港市农业试验站 ,江苏张家港 215616)
　　摘要:取蝴蝶兰不同品种成熟蒴果中的种子进行无菌播种 ,诱导形成原球茎状球体。 试验结果表明 ,对各供
试成熟蒴果种子的诱导均获成功;最适于种子原球茎产生的培养基为花宝 1号 +3 mg/L6-BA+0.05 mg/L
NAA+10% ～ 15%香蕉汁 ,种子萌发率高达 95%。
　　关键词:蝴蝶兰;种子培养;原球茎;诱导;快速繁殖
　　中图分类号:S682.31　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1302(2005)04-0079-02
(上接第 78页)
表 4　诱导所得韭菜种子的成苗率
处理
平韭 2号
结籽数
(粒)
成苗数
(棵)
成苗率
(%)
关东大马莲
结籽数
(粒)
成苗数
(棵)
成苗率
(%)
四选 1号
结籽数
(粒)
成苗数
(棵)
成苗率
(%)
关东雪宝
结籽数
(粒)
成苗数
(棵)
成苗率
(%)
A 0 0 0 0 0 0 21 15 71.4 2 1 50.0
B 1 1 100 3 1 33.3 22 10 45.5 16 13 81.3
C 2 0 0 0 0 0 10 5 50.0 3 0 0
D 1 1 100 0 0 0 24 14 58.3 10 10 100
E 25 9 36.0 0 0 0 30 13 43.3 42 22 52.4
F 4 0 0 0 0 0 5 4 80.0 14 12 85.7
合　计 33 11 33.3 3 1 33.3 112 61 54.5 87 58 66.7
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　　蝴蝶兰是热带花卉珍品 ,其花色品种多 ,花大而
色艳 ,花期长 ,具有很高的观赏价值和经济价值 。蝴
蝶兰属于单茎性气生兰 ,极少发育侧枝 ,比其他兰花
更难进行常规的无性分株繁殖 。本试验通过杂交收
获种子 ,利用种子进行无菌发芽 ,诱导大量的原球茎
分化 ,通过增繁培养 , 在短期内获得了大量幼小植
株 。可见无菌播种是经济有效的快速繁殖方法 ,也
收稿日期:2005-01-21
基金项目:江苏省张家港市科技攻关项目。
作者简介:丁　峰(1979—),男 ,江苏无锡人 ,助理农艺师 ,主要从事
植物生理研究。 Tel:(0512)58478270。
是工厂化育苗的重要途径。
1　材料与方法
1.1　供试材料
供试蝴蝶兰品种为 HOO2(花瓣粉红色)、HOO3
(唇瓣红色 ,其他花瓣白色)、HCH(花瓣白色 ,上有
深紫红色条纹)。
蝴蝶兰 4月底至 5月初开花 ,亲本进行人工授
粉后花冠逐渐枯萎 , 6月份子房逐渐膨大 ,约 120 d
成为成熟蒴果 。
—79—江苏农业科学　2005年第 4期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2005.04.027
1.2　无菌播种
取未开裂的成熟蒴果用自来水冲洗 10 min,在
超净工作台上用 75%的酒精浸泡 1min,再用 0.1%
的 HgCl2灭菌 10 min,经无菌水反复冲洗 6 ～ 8次 ,
在纸上将蒴果纵切为二 ,将粉末状种子均匀地撒在
培养基上 ,培养温度为 25℃左右 ,光照 12h/d,光照
强度 1 500lx。
培养基为:花宝 1号 +1 ～ 3mg/L6-BA+0.05
mg/LNAA+10% ～ 15%香蕉汁 +8g/L琼脂 +蔗糖
30 g/L, pH值为 5.2;MS培养基 。
1.3　原球茎的发生与增殖
种子在培养基中培养 10 ～ 14 d后开始膨胀 ,萌
发形成白色原球茎。 6周内种子变成绿色之后即进
入小球阶段 ,小球顶上形成一凹面 ,不久须根便覆盖
在小球体表面。播种 2 ～ 3个月后 ,当第一片叶自顶
上凹面内生出且小球增大并呈扁时即形成原球茎 。
将原球茎接种到增殖培养基上 , 30 d后基部长出丛
生的愈伤组织。 40 ～ 50 d后 ,每个原球茎分化形成
10 ～ 15个不定芽 。
1.4　成苗培养
将不定芽切割转接到成苗生根培养基上 ,随后
每个不定芽出现 2 ～ 3片小叶 ,且长出第一条根 , 6
个月后叶片逐渐长大 ,根系增多变得粗壮 ,生根率达
95%。生根培养基为 Kyoto营养基:3g/L花宝 1号
+2g/L胰蛋白胨 +10g/L香蕉汁 +12 g/L琼脂 +
30 g/L蔗糖 +3 g/L活性炭 , pH值为 5.0 ～ 5.4;对
照为 MS培养基。
2　结果与分析
2.1　基本培养基对蝴蝶兰种子萌发的影响
试验中用 MS、花宝两种基本培养基作比较 ,结
果表明 ,在其他物质相同的条件下 ,种子在花宝培养
基中的萌发率比 MS的高 , 前者约 90%, 后者约
70%(因种子为粉末状 ,非常细小 ,无法精确统计萌
发率)。这可能与花宝培养基中含有丰富的营养成
分和各种营养成分的比例适当有关。
2.2　激素对蝴蝶兰种子萌发和幼苗生长的影响
在花宝培养基中分别加入不同浓度的 6 -BA
(1mg/L、3mg/L、5 mg/L),播种结果表明 , 3个组的
萌发率都在 78%以上 ,尤以 3 mg/L6-BA处理组
的萌发率最高 , 达 95%, 且生长健壮 , 苗高 , 根多
(表 1)。
表 1　不同浓度 6-BA对蝴蝶兰种子萌发和幼苗生长的影响
6-BA
浓度
(mg/L)
种子
萌发率
(%)
30d种子
直径
(cm)
200d
苗高
(cm)
300d
苗高
(cm)
300d
根长
(cm)
300d
根数
(条)
1 78 0.6 1.6 5 4 4
3 95 1.0 2.0 7 5 5
5 82 0.8 1.7 6 3 3
2.3　不同培养基对幼苗生长和生根的影响
原球茎所得小苗需转到生根培养基中生根壮
苗 ,试验用 Kyoto培养基和 MS附加生长素培养基作
比较 ,结果以 Kyoto培养基较好(表 2)。
在 Kyoto培养基中 ,无根苗培养 4周后生根率
为 90%, 10周后为 95.65%,且根粗壮肥大。
表 2　不同培养基对蝴蝶兰苗生根的影响
培养基
培养 4周
调查
株数
(株)
生根
株数
(株)
生根率
(%)
培养 10周
调查
株数
(株)
生根
株数
(株)
生根率
(%)
Kyoto 20 18 90.00 23 22 95.65
MS+0.05mg/LNAA 24 8 33.33 28 17 60.71
MS+0.05mg/LIAA 26 10 38.46 25 13 52.00
2.4　在培养基中添加香蕉汁对蝴蝶兰长苗生根的
影响
在 Kyoto培养基中进行了两组试验(第一组不
加香蕉汁 ,第二组加香蕉汁 10 g/L),培养 40d后观
察结果表明 ,在 Kyoto培养基中加入 10 g/L香蕉汁
表现为生根多 、叶片宽大 ,证明香蕉汁对蝴蝶兰苗生
长具有良好的促进作用(表 3)。
表 3　香蕉汁对蝴蝶兰苗生长的影响
处理 平均每株发根量(条)
平均叶长
(cm)
平均叶宽
(cm)
叶片
宽长比
不加香蕉汁 3 2.80 1.1 0.39
加 10 g/L香蕉汁 8 2.75 1.3 0.47
3　讨论
本试验结果表明 ,在无菌播种的培养过程中 ,为
达到大量繁殖的目的 ,在原球茎状球体阶段做增殖
最为理想;在切块较大而密集的瓶内群体生长十分
旺盛 ,幼叶诱导率高 ,反之则低 ,表现出一定的群体
生长效应;在植物组织培养过程中 ,试管苗易发生褐
变 ,特别是兰科植物 ,可加入 0.2% ～ 0.3%的活性
炭 ,能有效防止试管苗因褐变而导致死亡。
—80— 江苏农业科学　2005年第 4期