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基于GC指纹图谱及聚类分析评价黔琼产艾纳香质量



全 文 :20 16 年 4 月 第 18 卷 第 4 期中 国现代 中药 ModChi nMedApr.20 16Vol. 1 8No . 4
? 基础研究 ?
基于 GC 指纹图谱及聚类分析评价黔琼产艾纳香质量 &
孙懂华 h 2 ’ 3 , 张影波2 ’ 3 , 庞玉新 2 ’ 3 , 杨全卜 , 于福 来2 ’ 3 , 黄梅2 ’ 3
( 1 . 广 东 药 学 院 中 药 学 院 , 广 东 广 州 5 1 0006 ;
2. 中 国热 带 农 业 科学 院 热 带 作 物 品 种 资 源研 究所 , 海 南 儋州 57 1 7 37 ;
3 . 海 南 省 艾纳 香 工程研 究 中 心 , 海 南 儋 州 57 1 737 )
[ 摘要 ] 目 的 : 基于指纹 图谱与系统聚类分析方法对黔琼产艾纳香进行质量评价 。 方法 : 利用气相色谱法 ( GC )
建立 1 2 个不同产地艾纳香的指纹图谱 , 采用相似度评价软件及 SPSS16 . 0 进行数据处理 , 对贵州和海南产地的艾纳香
样品进行分析 。 结果 : 对 12 个产地的艾纳香进行 了分析 , 建立 了艾纳 香药材气相色谱指纹图谱 。 S2 、 S6 、 S7 的相似
度在 0. 900 以下 , S3 、 S8 、 S 1 0 、 S 1 2 的相似度在 0 . 923-0. 969 , 其他样 品的相似度在 0. 970 以上 ; 1 2 批样品可大致分
为 4类 。 结论 : 建立了艾纳香气相指纹图谱方法 , 该方法重复性好 、 简单 、 易行 , 可为艾纳香整体质量评价提供依据 。
[ 关键词 ] 艾纳 香 ; 气相色谱指纹图谱 ; 聚类分析
StudyonQual ityEvaluationof历umeafromHainanandGu izhou
Prov incebyGCFingerprintandC lusterAnalysis
SU NDon ghua
1 '2 ' 3
,ZH ANGY in gbo 2 '\PANGYuxin 2 3 ,YANG Quan 1 * ,YUFu l a i 23 ,H UANGM e i 2 ' 1
( 1 .School ofTrad it ion alChinese ,GuangdongPharmaceut icalUn ive rsity ^Guangzho u5 10006 ,Ch ina  ;
2 .Tropi ca lCropsGene t icR esourc esIns t it ute . ,ChineseAcademyofTrop icalAgricult ural Sc iences ,Danzhou5 7 1 737 ,China ;
3 .Hai nan Provi ncialEnginee ringResearchCen te r forB lumeaBalsam ifera ,Danzh ou57 173 7,Chi na )
[ Abstra ct  ] Objective :GCfinge rp ri ntofBlumeabalsamiferaand thecl us teranal ys iswereu sedtoeva lu a te
B .balsam ife rafromH a inanan dGu i zhouprov ince .Methods :Thech romatographi cfin ge rprint sofB.ba lsam ifera from1 2
d ifere ntor iginswerees tabl ishe dbyGC .MSi mil ar i tyEval uatio nSys temforCh roma tograph icFi ngerpri ntofTCM MandSPSS
1 6 . 0wasappl iedtoanal yz eB . balsam ife ra sam pl es fromHa inanan dGu izhoup rov in ce . Resul ts ;1 2 ba tchesofB. ba lsamifera
w e rean a lyz ed ,thefi ngerp rin tsofB .bals amiferafromdifferen t areas we rees tabl ished .Thefinge rprints im i lar i ty of S2,S6 ,S7
w as0 . 7 1 1to0. 888 .Th efingerprin ts im i lari t yofS3 ,S8 ,S 10 ,S 1 2was0 . 9 23 to9 .9 69 ,and th esamplesw e red i vi ded int o
4c lus tersby th ei rqual itydifferen ce . Conclusion :Thi smethodi sreprod uc ibl e ,simpl e an deasy ,andcanb eu sedtoprovi de
abaseforth eq ual ityc on trolofB. ba lsamife ra.
[ Keywords ]B lumea balsamifera ,GC fi ngerprin t ,c lu steranalysi s
do i : 1 0 . 133 1 3/j . i ssn . 16734890 . 20 1 6 . 4 . 009
艾纳香 B/ iwnea6a/s <wu/era ( Linn .)DC , 又称大风后风痛 、 痛经 , 外 用跌打损伤 、 疮布痛 肿 、 湿疹 、
艾 、 大艾 、 冰片艾等 , 是菊科艾纳香属多年生草本皮炎 U ] 。 现代药理学研究表 明 , 艾纳 香还具有抗氧
植物 , 生长在热带 、 亚热带 , 耐旱喜温不 耐寒 , 主化 、 抗癌和抗病毒等作用 [ 35 ] 。
产于我国贵州 、 海南 、 广西 、 广东 、 云南等地 , 是艾纳香是制得艾片 的原料 , 艾 片是将艾 纳香 叶
贵州 罗甸县道地药材 [ 1 ] 。 艾纳 香以根 、 嫩枝 、 叶人和嫩枝经过蒸馏设 备进行蒸馏 , 制得艾粉 , 然后再
药 , 其性味辛 、 微苦 、 微温 , 具有祛风消肿 、 活血纯化 , 但其得率较低 [ 6 1 。 而 目前 , 我国天然冰片 (艾
散瘀之功效 , 可用 于治疗感 冒 、 风湿性关节炎 、 产片和天然冰片 )市场供不应求 , 价格居高不下 。 近年

 [基金项 目 ] 中 央级公益性科研院所基本科研业务费专项 ( 1 6 ;30032〇 1 5 039 ) ; 国家 自然科学基金 ( 8 1 3 74065 )

[通信作者 ] 杨全 , 教授 , 研究 方 向 : 植 物类药材 的 规范化生产 ( GAP ) 、 道地药材质 量及其形成机 制 ; Tel :( 0898 )
23 30026 8 ,E-ma i l :yangquan7208@ v ip. 1 63 . com
? 435?
20 1 6 年 4 月 第 1 8 卷 第 4 期中国现代中药 ModChi nMedAp r .20 1 6V o l .1 8N o .4
来 , 贵州罗甸地区大面积种植艾纳 香 , 使得该地区2 方法与结果
的土地资源 匮乏问题更加 凸显 。 为此 , 迫切需要拓21
宽艾纳補材种植区 , 以满足 日益扩大 的市场需求 。
? =毛细管柱 ( 30m x 0_ 32 圓 , 0 . 25 ⑷ ,
目前对艾 纳 香药 材 的 研 究多 集 中 在化 学成并 .p ,,^
质里标, , 仅有夏稷子,以 贝 , 艾纳香为 主要研允 2 Sc. m in - 丨升 温 至 1 〇8¥ , 以 !丨 升 温 至对象进行了GC 指巧 图谱研光 、 薄层色谱法定性研 1 1 :2 ^ , 以代如“ 升温至允 、 常规检查等 , 未见 涉及海南和贵州产区艾 升温至 1 8〇 <^ , 保持 6 min , 以 5 <t . m in - i 升温至纳香指纹图谱研兄的报道 。 基于此 , 为进-步合理 2 2〇 sc
, 保持 1 〇 m in ;_ 检测器 温度 : 24〇 丈 ,开发艾纳香 材资源并缓解艾纳香原料供^矛盾 , 进样 口 温 度 : 24〇 qc ; 载 气 : 高 纯 氮 气 , 流速 :作者对 1 2 批采 自 贵州 和海南的艾纳香药材进行 了 中旨
6 .5‘—不分流 进样量 : 〇L 。纹图谱 比较研究 , 以期为艾纳香药材在贵州道地产^
区外的海南广泛浦提供科学腿。
%取左旋 龙脑对照 品 约 1 0mg , 精 密 称定 , 置
1 仪il与材料 10mL 棕色容量瓶中 , 加 乙 酸 乙酯定 容 , 摇 匀 , 即
1 . 1 仪器 彳辱质量浓 度 为 1 . 0 1 2mg _mL
_
1 的左旋龙脑对照 品
Agi l eiu 7890A 气相色谱仪 ( 配有氢火焰离子化检溶液 。


、
测器 FID ),OpenLA BCDS 工作站 , G45 1 3 A 自 动进 2. 3 供试品溶液的制备
样器 。 电子天平 ( Sartorius 公司 ) , KQ -500DB 型数控取艾纳香供试品约 2g , 精密称定 , 置于 1 0mL
超声波清洗器 ( 昆山市超声仪器有限公司 ) 。具塞三 角瓶中 , 加人 乙 酸 乙 酯 1 0mL , 称定质量 ,
L 2 材料在频率 40kH z 、 功 率 400W 的 条件下 超声 提取
碰龙脑对照品 ( AlfaAesar 公司 , 批号 : 10147015 , 二^ 放 称^量 , 减失曰的 质纯度 >9 8% , ) ; 试剂均为国产分析纯 , 水为蒸溜水 。 匀 ’ 滤过 , —祕J滤膜滤过 , 即侍 。
-艾纳香采 自 海南 、 贵州 , 均 由 中 国热带农业科学 院
热带作物 品种 资源研究所庞玉新副研究员鉴定为菊2 . 4 _1 精密度试验 取同一供试品 ( 样品编号 : S4 ) ,
科艾纳香属植物艾纳香 历 (L. )DC .按照 2 . 1 项下方法 , 连续进样 6 次 。 以左旋龙 脑为
的地上 叶部位 。 样品信息见表 1 。参照 峰 , 计算各共 有峰相 对 峰 面 积的 RSD 小 于
卽 艾纳香样品来-源 L 2 1 % , 猶保留 时间 的 RSD 小 于 〇. 〇2% , 表明仪
—?
碰期/器精密度 良好 , 符合指纹图谱测定要求 。東源-mmtL年 _月二 曰2 . 4 . 2 重复性试验 取供试 品 ( 样品 编号 : S4 ) , 按
S I 贵州安 龙野生 、 栽培 嫩叶 、 功能 叶 2〇〗 3 - 1 丨 - 丨 7'照 2. 1 项下方法平行制备 6 份供试品溶液 , 分别进样 。
S2 贵州 黎平野生嫩叶 、 功能叶 2〇 i 3 -u -n以左旋龙脑为参照峰 , 计算各共有峰相对峰面积的
S3 贵州龙 坪野生嫩叶 、 功能叶 2〇 [ 3 -i 2  ̄〇6RSD 小于 2 . 08% , 相对保留时间 的 RSD 小于 0 . 05% ,
S4 贵州 罗甸红水河 野生 、 栽培 功能叶2〇 丨 3 - 1 1 -29 _表明实验重复性 良好 , 符合指纹图谱测定要求 。
S5 贵州 罗甸红 水河 野生 , 栽培 功能叶2〇m i -292 . 4. 3 稳定性试验 取同一供试品 溶液 (样品 编号 :
S6 贵州罗 苏栽培嫩叶 、 功能叶 20 1 3 - 1 1 - 1 8S4 ) , 分别于 0 、 2 、 4 、 8 、 1 2 、 24h 按 照 2 . 1 项下
S7 贵州望漠野生嫩叶 、 功能叶 20 1 3 - 1 1 - 1 7方法进样分析 。 以左旋龙脑为参照峰 , 计算各共有
S8 贵州兴义野生嫩叶 、 功能叶 20 1 3 - 1 1 - 1 9峰相对峰面积 RSD 小于 1 . 68% , 相 对保 留 时间 的
S9 海南儋州栽培功能 叶20 1 3 - 1 244RS D 小于 0?〇3% , 表明供试品在 24h 内稳定 , 符合
S 1 0 海南琼 中野生 、 栽培 嫩叶 、 功能叶 20 1 3 ^09 -26指纹图谱的要求 。
S 1 1 海南五指山野生嫩叶 、 功能叶 2〇 丨 3必^〇32. 5 样 品测定
S 1 2 胃舶 '沙酸■ 、柳十 20 1 3124取不同产地 的艾纳香药材 , 按 2 .3 项下方法制
. 436?
2〇 1 6 年 4 月 第 1 8 卷 第 4 期中 国现代 中药 ModCh i nMedAp r.20 1 6Vo l . 1 8No. 4
备供试品溶液 , 按照 2 . 1 项下 色谱条件测定 , 分别纳 香色谱图采用国 家药典委 员会颁布 的 “ 中药色谱
得到 丨 2 批样品的指纹图谱 。 见 图 1 。指纹图谱相似度评价 系统 A 版 ” 进 行分析 , 以 S 1
为参照图谱 , 采用 中位数 , 时间窗宽度 0 . 1 , 生成艾
纳香药材共有模式的对照指纹图谱 , 标定 2 1 个共有
峰 , 共有峰峰 面积 占 总峰 面积 85% 以 上 , 见 图 2 。
1 2 批所测供试品色谱图与对照指纹图谱相似度结果
见表 4 。 结果表明 , S2 、 S6 和 S7 样品 的相似度小于
0 .9 00
, 其他批艾纳香药材样品 的相似度均在 〇 .900
以上 。
2.7 艾纳香药材聚类分析
0481 2 1620242^ 323 640444 85 25 660运用 S PSS1 6 .0 软件对 1 2 批艾纳香药材的指纹
图 1 不同产地艾纳香药材指纹图谱图谱进行聚类分析 。 其中数据源为 2 丨 个共有峰的峰
面积 , 所有数据经过标准化处理 , 聚类方法采用类
2 .6 指纹图谱的建立及相似度分析内平均链锁 及平方欧式距离 , 结果见 图 3 。 根据树
以参照物峰保 留时间 作 为 1 , 计算其他各共有形图 , 1 2 批样品 被划分为 4 类 , 其 中 S2 、 S6 和 S7
峰与参照物峰间 保留 时间 的 比值 , 从而得 出各共有为一类 , 聚类分析所得到的 样品 之间 的相关性 , 与
峰的相对保留 时间 , 结果见表 2 和表 3 。 将 1 2 批艾相似度计算得到 的样品之 间的相关性结果较一致 。
表 212 批艾纳香共有峰的相对保 留 时间
 / m in
峰号S IS2S3S4S5S6S7S8S9S I O S I 1S 1 2^RS D( % )
10 . 5 3 80 . 54 50 . 5420 . 5 400 . 53 80 . 5440 . 5430 . 5420 . 5 430 . 53 80 . 5430 . 5 3 80 . 54 10 . 49
20 . 8 330 . 84 00 . 83 70 . 8 3 30 . 8 290 . 8400 . 8400 . 8 3 60 . 8 3 80 . 8300 . 83 70 . 8 3 10 . 8350 . 48
30 . 9260 . 93 50 . 93 10 . 9270 . 92 20 . 9 360 . 9340 . 93 10 . 9320 . 9 260 . 9330 . 9260 . 9300 . 46
4 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 11 〇
51
. 3 75 1 . 38 81 . 3 8 21 . 3 75 1 . 3 681 . 3 88 1 . 38 6 1 . 3 8 1 1 . 3 831 . 3 73 1 . 38 2 1 . 372 1 . 3790 . 48
6 1 . 42 1 1 . 4 34 1 . 428 1 . 422 1 . 4 141 . 4 341 . 43 2 1 . 427 1 . 4 291 . 4 1 9 1 . 429 1 . 4 1 9 1 . 4260 . 47
7 1 . 6341 . 649 1 . 643 1 . 63 5 1 . 6261 . 6491 . 6471 . 642 1 . 6441 . 63 4

. 644 1 . 632 1 . 6400 . 46
8 1 . 8 541 . 87 2 1 . 8 601 . 855 1 . 8451 .8 7 21 . 866 1 . 8621 . 8651 . 8 5 2 1 . 8 65 1 . 85 11 . 8600 . 45
9 1 . 8 901 . 90 8 1 . 899 1 . 8 9 1 1 . 8 8 11 . 9081 . 905 1 . 898 1 . 9021 . 8 88 1 . 90 1 1 . 88 7 1 . 8970 . 47
1 02 .1 752 . 1952 .1 8 52 . 1 752 . 1 642 . 1 952 . 1 922 . 1 842 .1 8 82 . 1 7 22 . 1 872 .1 7 12. 1 8 20 . 47
1 12 . 30 12 . 32 32 . 3 1 32 . 3022 . 29 12 . 3 232 . 3 202 . 3 1 22 . 3 1 52 . 29 92 . 3 1 52 . 2982 . 3090 . 46
1 22 . 3422 . 3652 . 3 542 . 3402 . 3302 . 3 602 . 36 12 . 3 5 22 . 3 5 72 . 33 72 . 35 22 . 33 72 . 3490 . 48
1 32 . 62 12 . 6462 . 63 32 . 62 12 . 6082 . 6452 . 6422 . 63 32 . 63 72 . 6 1 82 . 63 52 . 6 1 82 . 63 00 . 46
1 42 . 6772 . 7032 . 6902 . 6782 . 6642 . 7 032 . 6992 . 68 92 . 694 2 . 6742 . 6922 . 6732 . 68 60 . 48
1 52 . 7082 . 7342 . 7222 . 7 1 02 . 6952 . 7362 . 7302 . 72 12 . 7252 . 7052 . 7 242 . 7042 . 7 1 80 . 48
1 62 . 7352 . 7622 . 7502 . 73 72 . 7232 . 7 622 . 75 82 . 7482 . 7532 . 73 22 . 75 12 . 73 12 . 7450 . 48
1 72 .8442 . 8722 . 8 5 92 . 8452 . 83 1 2 . 87 12 . 8 682 . 8 582 . 86 22 . 84 1 2 . 8 602 . 8402 . 8 540 . 4 7
1 83 . 0 623 . 09 13 . 0773 . 0633 . 0473 . 0903 . 08 73 . 0763 . 0793 . 05 83 . 0783 . 0573 . 0720 . 4 7
1 93 . 1 523 .1 8 23 . 1 663 .1 5 63 . 1 383 . 1 8 13 . 1 773 . 1693 . 1 723 . 1 503 . 1 693 . 1473 . 1 630 . 4 5
203 . 1 823 . 2 1 23 . 1 973 . 1 8 53 . 1 763 . 2 1 13 . 2073 . 2063 . 2023 . 1 793 . 1993 . 1773 . 1940 . 4 3
2 13 . 3 823 . 4 1 73 . 3993 . 3 833 . 3 663 . 4 1 53 . 4 1 03 . 3973 . 4043 . 3 783 . 40 13 . 3773 . 3940 . 4 8
?437?
20 1 6 年 4 月 第 1 8 卷 第 4 期中 国现代中药ModChinMedAp r .2 0 1 6V ol. 1 8N o . 4

表 312 批艾纳香共有峰的相对峰面积

峰号 S IS2S3 S4 S5S6S7S8S9S 1 0S l lS1 2xRSD (% )
10 . 0090 . 0040 . 0 10 0. 0020 . 00 10 . 0 1 90 . 0 140 . 0070 . 0050 . 0040 . 00 10 . 0020 . 00 78 5 . 95
20 . 0030 . 0080 . 006 0 . 0040 . 0020 . 0 1 40 . 0050 . 0090 . 03 20 . 0070 . 0020 . 0 1 90 . 00994 .1 7
30 . 0 3 10 . 1 1 60 . 0200 . 0280 . 0570 . 0320 . 02 80 . 1 1 70 . 0 1 90 . 0320 . 05 70 . 0 1 70 . 04 676 . 23
4 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 10
50 . 0 1 20 . 0220 . 05 00 . 0 1 20 . 0080 . 0300 . 03 10 . 0300 . 0070 . 0220 . 0080 . 0 1 90 . 02 1 60 . 46
60 . 0250 . 03 30 . 1 060 . 0250 . 0 1 70 . 0640 . 0700 . 0640 . 0 1 30 . 0500 . 0 1 70 . 0400 . 04464 . 47
70 . 06 10 . 0680 . 2200 . 05 50 . 0 290 . 1 1 50 . 1 270 _1 1 10 . 0860 .1 1 00 . 0290 .1 600 . 09857 .1 6
80 . 0 1 50 . 0 1 20 . 02 10 . 0 1 20 . 0070 . 02 10 . 03 30 . 0200 . 0 1 40 . 0 1 40 . 0080 . 0220 . 0 1 74 3 . 45
90 . 0 1 40 . 0 1 1 0 . 0 1 20 . 0 1 10 . 0070 . 0 1 90 . 0 1 30 . 0 1 90 . 0 1 40 . 0 1 10 . 0070 . 0230 . 0 1 334 . 7 1
1 00 . 0 1 10 . 0780 . 0260 . 0060 . 0 1 00 . 0090 . 0 1 30 . 0 1 70 . 0 1 60 . 0 2 10 . 0 1 10 . 0230 . 020 95 . 26
1 10 . 0430 . 08 30 . 0520 . 03 10 . 03 50 . 0440 . 0430 . 0700 . 0620 . 0 560 . 03 50 . 09 10 . 054 3 5 . 95
1 20 . 09 10 . 1 620 . 0890 . 0600 . 0540 . 08 30 . 0 9 10 .1 400 . 1 3 00 . 1050 . 05 50 . 1 760 .1 033 9 . 67
1 30 . 0560 . 1 280 . 0590 . 0370 . 0360 . 0440 . 0 660 . 0920 . 0840 . 0890 . 0380 . 0930 . 06842 . 27
140 . 0080 . 0200 . 0290 . 0070 . 0060 . 0260 . 0 1 50 . 0 3 10 . 0040 . 0 160 . 0060 . 0 1 30 . 0 1 563 .1 0
1 50 . 03 60 . 0490 . 0340 . 0080 . 0080 . 0200 . 0 400 . 0670 . 0 1 20 . 0200 . 0090 . 0 1 10 . 026 72 . 94
1 60 . 0200 . 0330 . 0270 . 0 1 20 . 0070 . 0 200 . 0 1 60 . 03 60 . 0 1 00 . 0 190 . 0060 . 0 1 30 . 0 1 85 3 . 54
1 70 . 0050 . 0 1 00 . 0 1 20 . 0030 . 0040 . 0060 . 0 1 00 . 0 1 60 . 0040 . 0 1 10 . 0040 . 0 1 00 . 0085 1 . 2 5
1 80 . 0 1 60 . 0500 . 0 1 50 . 0 1 30 . 0070 . 0 1 50 . 0250 . 0280 . 0060 . 0 1 80 . 0070 . 0050 . 0 1 774 . 7 7
1 90 . 08 20 . 14 20 . 0800 . 0060 . 0090 . 0600 . 0940 . 0300 . 09 10 . 2480 . 0090 . 1 170 . 08 18 5 . 4 5
200 . 04 80 . 0550 . 0660 . 0060 . 0 1 70 . 04 10 . 0590 . 0260 . 0440 .1 200 . 0 1 70 . 05 80 . 04664 .80
2 10 . 03 30 . 1 850 . 0590 . 02 10 . 0 1 70 . 0290 . 07 10 . 0540 . 0270 . 0800 . 0 1 80 . 0460 . 05 38 6 . 9 1
4
051 01 5 2025
+ +- H h 1 h

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S ̄
1 0 -p|
71 Q^
1 2I hI S 9 10 ' l l lj1 7
rrTTrr;VriVrr7rY 、    ■ .■r.图 31 2 批艾 纳香样 品聚类 分析树状 图
0481 21 6202 428 323 64 0444 8525 6 60

3 讨论注 : 4 . 左旋龙脑 。
3 .W谱条件的选择
輔fe i普 侧旨細 i普樹■撕雜气相色谱法中 常常会遇到宽沸程多组分样品 难
_^ ^ ?以分开的 问题 , 而选择恒定柱温无法兼顾不 同沸点
3 1 ° - 98 1 87° - 8 8 8 组分的分离 。 低沸点组分 由 于柱 温太高 , 色谱峰出
52° - 8 84S8 ° - 93 1柱过快 , 峰窄而相互重叠 ; 而高沸点组分 因柱温太
53° ' 95039° - 978 低 、 出柱慢 、 峰宽而平 , 有 的组分 甚至不能 流出 。
54° - 9778 1 0 ° - 92 3鉴于此 , 本实验设计了 多个升温程序和不同载气流
55° - 976S 1 1° - 976 速 , 而以 2 . 1 项下的 色谱条件所得到 的 色谱峰分离
860 . 7 1 18 1 2
 度较好 , 保 留 时间适中 , 故选择此条件 。
?438 ?
20 1 6 年 4 月 第 1 8 卷 第 4 期中 国现代中药 ModCh in MedApr.20 16Vol.1 8No .4
3. 2 供试品溶液的制备 可

对■海南产艾纳香年采收:两次提供一定的数据支撑 。
分别考察 了0 . 5 、 h 〇 、 1 . 5 、 2 . 0g 等不 同样 品 此外 , 根据相似度和聚类分析结果还发现 , 贵州黎
提取量 , 结果麵 2 _ 0 g 的样品量效果较理想并且峰 ¥ 、 罗苏 、 望谟等地产艾纳香与道地产区罗店红水
形 、 峰 数 目 较 为 稳 定 。 分别 考察 了10 、 20 、 30 、 河相似性较差 ’ 分析原 因可 能与 当地气候 、 土壤 、
60min 提取的样品 , 结果表明 , 20min 时样品 的提海拔等 因素有关 。
取较充分且各色谱峰分离縣较好 , 响应鎌大 。 0
' 合艾纳香种植气候条件等先天优势 , 课题研究可在
中药材化学成分复杂 , 其議雖亦常有多# _定雛上为后謙_■ 、 琼 中 、 自沙 、 五指
成分共同起作膨成 , 导致 了全酿制 中药材质量 山等地建立艾纳香的 GAP 种植基地以减缓贵州土地
的难度很大 。 中药材的 gc 指纹 图谱中各色谱峰形胃 了
成 “指纹图谱” 的峰面积 , 保留时间 、 峰与峰间 的…八°
相对比例等综合参数构成了指纹图谱。
通过本实验发现 , 1 2 批黔琼产艾纳香 中 9 批药
[ 丨 ] 中 国 科 学 院 《 中 国植物 志 》 编委会 . 中 国植物 志 : 第 75
材指纹图谱整体图与其共有模式相 比相似度均达到卷 [ M ] . 北 京 : 科学 出版社 , 1979 : 1 3 , 75 .
0 . 90 以上 , 因此确定 了黔琼产艾纳香的指纹 图谱 。[ 2 ] 中 国 药材公 司 . 中国 中 药 资源 志要 [ M ] . 北京 : 科学 出版
对艾纳香药材指纹 图谱的 比较发现 , 各产地药材指社 , 1"4 : 1 266 .
纹图谱具有基本相 同 的色谱峰数 目 , 各峰相对保 留[ 3 ]Ctsak iN , Koyan。 T , Kowi t hayakomT , e ta l -
时间符合程度较好 , 但各峰之 间相对峰面积的 比值Sesqui terpend dsan dPlasm ib lnh ibi tarynav_id Sfrom
相差较大 , 这说明 艾纳香药材 的各化学成分基本相 m_abal sam ifcra tH_alPd ue ts ’ 2005 ’
同 。 通过对药材产地 、 采收期等因 素进行 比较可以「 4 17j ,

_ 」
N es sa1"

Ism a i lZ
,M ohamedN , etal .t reerad i c al -发现 , 龄琼产艾纳香野生种与栽培种在相似度±未scavengingac t iv i tyof organi cext ract sand of pureflavono ids有显者差异 ; 从以上 不同采收期艾纳香药材的 相似 of 6a /sam i/eTODC leaves U l .FVxxlChem is try ,
度 ( 高于 0 . 90 )评价可以看出 , 黔产艾纳香采收期在2004

8 8 ( 2 ) :243 -252 .
1 1? 1 2月 与琼产艾纳香5月 、 9月 、 1 2月 米收期相[ 5 ]NoorRa inA ,Khoz i rahS ,MohdR idzuanMA ,eta l .
似性较高 , 与庞玉新等 [ 1 7 ] 研究齡琼产艾纳香主要成Anti pl asmodi alpr opertiesof someM alaysi anmed i c ina l
分含量分析结果相符 。p lan ts [ J ] . TropB iomed , 2007 , 24 ( l ): 29-35 .
研究人员 [ , 8 1 对罗甸艾纳香生长适宜气候条件和[ 6 ] 江兴龙 ,潘俊锋 , 司 健 , 等 ? 贵 州 艾纳 香产地采收提取艾
罗 甸县的气候条件分析 比较 , 发现艾纳香药材最适 粉技术研 ? 生 化 学 工程 ,屢卯」


17

20 .
宜种植区主要分布在雛 4〇〇 m 以 下的河 谷低洼地 [ 7 ] 严敏 ’石 成?祕敏 . 气质联用 法对艾纳 香 中龙脑含量u的 测定 [ J ] . 湖北农业科学 ,20 14 ,5 3 ( 2 1 ): 5256 -5259 .区 , 年平均气温 20 . 0  ̄ 20 . 8 T : , 最冷月均温 1 0 _ 3  ̄⑷ 卫亚丽 ,场 洪敏 , 莫 珊凤 , 等 . 不 同 产地释艾 纳香 中 左旋
1 1 _ 0T:
, 年极 端最低温度 &-1 .1T: 的保证率为 龙脑含量 测 定 [ J ] . 中 华 中 医 药 杂 志 , 20 1 5 , 30 ( 丨 ) :
80%, 日 平均气 温 &1 0 丈 的 活动 积温 6400 . 3 ̄27 8-280 .
7000U , 无霜期 彡 350d , 无 日均温 矣 0t 的轻霜[ 9 ] 刘进涛 ,靳凤云 ,章誉 ,等 . 贵州 罗 甸艾纳香 中左旋龙脑 的
冻及 日 均温 矣 - 2T 的重 霜冻 , 年降雨量 859 .8 ̄含量 测定 [ J ] . 贵阳 中医 学 院学报 ,2〇 1 3 ,35 ( 丨 ) : 丨 6 - 1 8 .
1H6 . 9mm , 年总 日 照时数 1227 . 5 ̄ 139 8 . 8h 。 与[ 1〇 ] 夏稷子 , 陈贵 , 安 军 , 等 ? 艾 纳香挥发 油和左 旋龙脑在 不
之相比 , 海南省属热带季风气候 , 是我国最具有热同叶型及不 同 部 位 的 分 布 [ J ] ? 中 成 药 , 2〇 丨4 , 36 ( 8 ) :
带海洋气候特色的地方 , 全年暖热 , 雨量充沛 , 干 1 7 1 9 _ 1 72 1 _
? 宏 廿 昍 曰 尔 冰 眧 斗 丨 ?u[ 1 1 ] 严敏 , 王玉凤 , 汤 洪敏 . 释产 艾纳香 生物城的提取及含量湿季 P 月显 , 年光 , 、 、 、 为?

, 光 , 、 、 、率为测定 [ J ] . 湖北农业科学 , 2〇 14 , 53 ( 1〇 ) : 233 6 _2339 .
50% ̄ 60% , 光温充足 , 光合潜力 筒 , 与艾纳香最
[ 12 ] 王远辉 , 田 洪芸 , 何思佳 , 等 ? 不 同 方法提取 艾纳 香 叶挥
适宜种植气候条 件较为接近 , 海南岛 全年无霜冻 ,发性成分 的 气相 色 谱-质谱分析 [ J ] . 食品 工 业科技 ,
冬季温暖 , 且海南产艾纳香药材 5 月 、 9 月 、 12 月 20 12
, 33 ( 1 2 ): 97 - 10 1 , 105 .
采收与黔产艾纳香具有极高的 相似性 , 在此基础上 ( 下转第 4475 )
?439?
20 1 6 年 4 月 第 1 8 卷 第 4 期中 国现代 中药 ModC hinMedApr .20 1 6Vol . 1 8No .4
的川楝 子中 川楝素含量均超过 限量要求 , 不能直不能直接作为饮片 “ 川楝子” 入药 。 有文献报道通
接入药 , 必须经过炮制 处理将川楝 素降低 到规定过炮制可以 适当降低川楝素 的 含量 [ 6 ] , 因 此 , 应通
范围方可使用 。 过诸如 “清炒 法” ( 《 中 国 药典 》 20 1 5 年 版通 则
3^02 1 3 )等相关炮制手段而使其饮片符合要求 , 从而达
到充分利用川楝子资源的 目的 。
3.1 方法适用性分析
由 于川楝素紫外特征吸收为 208nrn , 接近末端参考文献
吸收 , 若采用 紫外检测器进行检测 , 容易受提取物 [ 丨 ] 国 家 药 典委 员 会 . 中华人 民共 和 国 药 典 : 一 部 [ S ] . 北
中其他杂质干扰 , 且紫外检测器在低波长时基线容京 : 中 国 医药科技出 版社 ,2〇 10 : 39 .
易产生漂移 , 因此采用 HPLC -UV 法进行川楝素含量 [ 2 ] 钟 炉' 昌 ,谢 晶 曦 , 陈淑凤 , 等 . 川 棟素 的 化学 结 构 [ J ] . 化
测定 的 结果 往往不够准 确 。 采 用本实验的 HPLC - f^g. , 1 975 ,3 3 ( l ) : 35^7 .
ELSD 法进行分析 , 相 比于 《 中 国药典 》 20 1 0 年版 [ 3 ] 舒 国欣 ’ 梁晓 天 . 关于川 棟素化 学结 构 的修正⑴ . 化 学
一部 “ 川楝子 ’ ’ 项下所规定 的 HPLC-MS 法 , 本法同H^'I [4 ] 陈 强 , 周 浓 , 王荣繁 . HPLC 测定 川 棟子不 同采收期及 不样具有简便快速 、 结果准确 、 重现性好的卜 , 、 、 、 ’ 并3部位 中 川 棟素 的含量 [ J ] . 资源 开发 与 市场 , 20 1 2 , 2 8
且相对于质谱仪 , 蒸发光散射检测器具有价格低廉 、
操作简单的优点 , 适用于各科研 、 企业单位 的配备 。
[ 5 ] 刘红亚 , 崔红梅 ,周 绚 . RP -HPLC 法测定川 楝子药 材 中川
3. 2 川楝子资源开发棟素 的含量 [ J ] . 世界科 学技术一中 医 药 现代 化 , 2〇〇 8 ,
根据 《 中 国药材产地生态适宜性区划 》 一书介HH3 h 52 _54 '
绍 , 编者根据川楝子生态适宜性数值分析结果 , 并 [ 6 ] 周 乐华 ’ 李迎春 ’ 窦 志英 . 川 棟子及其抱制 品 中 川 棟素含
结合其生物学特性 , 并考虑 自 然 条件 、 社会经济 条
「 7 1
,丄 叶丄丄 、 士 _ L + ,、 L*w—卞斗上 地 、 、 , 、小 丨 ] 聂 映 , 李志格 ,姚卫峰 . 基于液相 色谱飞 行时 间质谱 的 炒件 、 药材王产地栽培和米 收加工技木 , 建议选择 弓 丨 轉子化 学 成 分 分 析⑴ . 安 徽 医 药 ,則 , 1 7 ( 6 ) :种栽培区 域主要 以 四川 、 云南 、 贵州 、 湖南 、 湖北943 _945
一带为宜 [ 1 ° ] , 本研究再次验证 了 四川产川楝子的质
[ 8 ] 罗 文汇 , 毕 晓黎 , 孙冬梅 . LC -M S 法测 定 川 棟 子 中 川 棟
量较好的说法 。 但是川楝素具有一定 的毒性 , 摄人素 [ J ] . 中成药 , 20 14 , 36 ( 7 )= 1 556 - 1 558 .
过量可对 胃肠道产生刺激作用 , 并且对肝脏有损害 , [ 9 ] 赵宇新 , 李 曼玲 . 蒸发光散射检测 器 在 中 药 成分 分析 中
所以 《 中 国 药 典 》 2 0 1 0 年 版 限定 其 含量 不 得 过的 应 用 [ J ] . 中 国 中 药杂 志 , 2〇〇3 , 28 ( 1 0 ) :9 丨 3 -9 17 .
0 . 20% 。 本研究中 , 来 自 四 川 中江 、 雅安 以及凉 山[ 10 ] 陈 士林. 中 国 药材 产地 生 态 适宜性 区划 [ M ] . 北 京 :科学
的川楝子中川 楝素含量均超过相关限量要求 , 所 以 ibl社 , 2〇 1 1 :5 64 -56 6 _
( 收稿 日 期 20 154 )9 -25 )
( 上接第 43 9 页 )
[ 1 3 ] 胡蕖 , 周 家维 . .贵州 省 艾纳 香植物 资 源现状及适生 区 区[ 1 6 ] 夏稷子 , 赵 智 , 邓 言 欢 , 等 . 黔 产 艾纳 香 药 材 质 量研
划初步研究 [ J ] . 贵 州林业科技 , 1999 , 27 (1 ): 4448 . 究 [ J ] . 时珍 国 医 国 药 , 20 1 2 , 23 ( 9 ) :2244-2245 .
[ 1 4 ] 罗夫来 ,王振 , 张云 淋 , 等 . 苗 药 艾 纳 香不 同居群及不 同 [ 1 7 ] 庞 玉新 , 黄梅 , 于福来 , 等 . 黔 琼产 艾纳 香 中 主要化 学 成
部位的 质 量研 究 [ J ] . 中 国 当 代 医 药 , 20 1 3 , 2 0 ( 3 1) : 分含量 差异 分析 [ J ] . 广 东 药 学 院 学报 , 20 14 , 30( 4 ) :
5 1 -5 3 .44 8 -45 2 .
[ 1 5 ] 夏稷子 ,赵智 ,安 军 ,等 . 不 同 产地艾纳香药材 的 GC 指 纹[ 1 8 ] 刘 朝英 , 谭清波 ,顾欣 . 罗 甸县艾纳 香种植气候适 宜性区
图谱研究 [ J ] . 中 国 药事 , 20 1 1 , 25 ( 1 2 ): 1 丨 9卜 1 1 94 .划 [ J ] . 贵州 气 象 , 20 13 , 37 ( 4 ) : 3840 .
( 收稿 日 期20 1549-2 1 )
?447?