全 文 ：术思想传承者。如邓铁涛在中医诊断方面的传承人陈群，
在中医诊断学方面继承了邓铁涛的学术思想和教学理念，
其主编教材多于发表论文;中医养生经验方面传承人陈瑞
芳，其学术成果多为养生保健专栏性文章而非学术论文，均
未能纳入此次研究。因此，后续研究将进一步考虑论文外
研究成果的纳入和量化。
在研究方法上虽已尝试将传承关系和影响力进行量
化，但未涉及到具体传承方向、不同研究主题和各个研究团
队的深入探讨。下一步将以不同传承主题和方向为切入
点，利用社团分析和凝聚子群分析对各个传承分支进行描
述;结合等价结构分析研究传承体系的核心 －边缘结构，分
析邓铁涛学术理论的传播路径和学术流派传承脉络。
参考文献
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CHINESE AＲCHIVES OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
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DOI:10． 13193 / j． issn． 1673-7717． 2016． 09． 062
大孔吸附树脂富集纯化艾纳香废渣中总黄酮的工艺研究
王秋萍1，2，吴竹1，2，何珺1，2，陈伟2
(1．贵州大学药学院，贵州 贵阳 550025;2 贵州省生化工程中心，贵州 贵阳 550025)
摘 要:目的:探究大孔吸附树脂富集纯化艾纳香废渣总黄酮的最佳工艺。方法:采用 UV 法测定总黄酮含
量，以吸附率和解吸率为指标，采用静态吸附试验对 8 种大孔树脂进行筛选，优选出吸附解吸性能最佳的大孔树
脂，并优化纯化条件，确定最佳工艺参数。结果:LX － 17 型树脂对艾纳香废渣中总黄酮有较好的吸附和解吸附效
果。最佳纯化工艺为:50%乙醇提取 2 次，上柱液总黄酮浓度为 3． 03 mg·mL －1，洗脱溶剂为 50%乙醇，洗脱速度
为 2 BV·h －1，纯化后总黄酮量高达 20． 03 %。结论:LX － 17 型树脂适合富集纯化艾纳香废渣中的总黄酮。
关键词:艾纳香废渣;总黄酮;大孔吸附树脂;纯化;资源回收
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标志码:A 文章编号:1673-7717(2016)09-2268-04
Purification Process of Total Flavonoids from Slag of Blumea
balsamifera by Macroporous Ｒesin
WANG Qiuping1，2，WU Zhu1，2，HE Jun1，2，CHEN Wei2
(1． College of Pharmacy，Guizhou University，Guiyang 550025，Guizhou，China;
2． Ｒesearch Center of Biochemistry Engineering of Guizhou，Guiyang 550025，Guizhou，China)
收稿日期:2016 － 04 － 10
基金项目:贵州省中药民族药制药工程研究生工作站创新基金项目(黔教研合 JYSZ字［2014］002 － 04)
作者简介:王秋萍(1991 －) ，女，天津人，硕士研究生，研究方向:提取物中试研究。
通讯作者:何珺(1974 －) ，女，贵州湄潭人，副教授，硕士研究生导师，研究方向:天然产物活性成分分离提取及分析测试。E-mail:hejun1016
@ 163． com。
Abstract:Objective:A method for purification of total flavonoids from slag of Blumea balsamifera with macroporous
resin was studied． Methods:The content of total flavonoids was determined by UV． By using adsorption rate and desorp-
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tion rate as the indices，eight kinds of macroporous resins were screened by the static adsorption test． Preferably the ad-
sorption and desorption properties of the best macroporous resin，and the optimal purification conditions of resin were ob-
tained based on dynamic adsorption and static adsorption． Ｒesults:Experiment results showed that LX － 17 resin pos-
sessed high absorption capacity． The optimal purification process was 50% ethanol extracting for two times，the concentra-
tion of flavonoids 3． 03 mg·mL －1 and 50% ethanol，the elution rate 2 BV·h －1 and the total flavonoids 20． 03% ． Con-
clusion:The LX － 17 macroporous adsorption resin has the best enrichment and purification efficiency for total flavonoids
from slag of Blumea balsamifera．
Key words:slag of Blumea balsamifera;total flavonoids;macroporous resin;purification;recycling
艾纳香(Blumea balsamifera)系菊科艾纳香属多年生木
质草本植物，有着悠久历史的重要民族药，贵州分布最为广
泛［1 － 3］。近年来，以艾片、艾油为成分的药品层出不穷，如
咽立爽滴丸、金骨莲胶囊、心胃止痛胶囊、金喉健喷雾剂、万
金香气雾剂成分、心胃丹胶囊、咽康含片(咽特佳)、今来烧
烫伤膏(霜)等。另外，因艾油有独特香气，镇定消炎，被添
加在化妆品和卷烟中，研制了艾纳香晒后修复睡眠面膜和
加香卷烟［4 － 5］。
艾纳香提取艾片、艾油后产生大量废渣，且经调查民间
土法提取后艾纳香废渣均丢弃在河边、田地，给生态环境带
来了巨大的压力［6］。因此，艾纳香废渣资源化回收利用迫
在眉睫。丁映等［7］分析测定出艾纳香残渣含蛋白质
21. 10%、粗纤维 19． 45%、粗脂肪 5． 00%、水分 15． 70%、无
氮浸出物 15． 65%和粗灰分 22． 10%，并将其用作食用菌生
产基料培养平菇。黄酮类成分是艾纳香的主要活性成分之
一，具有抗肿瘤、促凝血、抗氧化、抗肥胖、抑菌等作
用［8 － 12］。夏嬿等［13 － 14］研究结果发现艾纳香叶渣在抗炎、
镇痛、止血方面有一定的药理作用，其表明艾纳香叶渣中可
能具有较高含量的黄酮类物质;艾纳香叶废渣乙酸乙酯部
位(BBE)对类风湿性关节炎有一定的治疗作用。且笔
者［15］研究了艾纳香废渣中总黄酮提取工艺表明，在 60%
乙醇、温度 90℃、1:20 料液比、提取 3h的最优工艺条件下，
艾纳香废渣总黄酮含量高达 2． 29%。
本文旨在通过大孔树脂富集纯化艾纳香废渣中的总黄
酮，为艾纳香产业持续发展及艾纳香废渣中黄酮类物质的
有效回收再利用提供技术依据。
1 实验材料
1． 1 仪器
T6新世纪紫外 －可见分光光度计(北京普析通用仪器
有限公司) ，高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公
司) ，KQ2200DE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司) ，Buchi Ｒ ― 210 旋转蒸发仪(瑞士 BUCHI) ，BSA124S
型电子分析天平(上海良平仪器仪表有限公司) ，SHA －
CA型水浴恒温振荡器(金坛市宏华仪器厂) ，202 － 1 型电
子恒温干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司) ，其他为一般
常规仪器。
1． 2 材料
艾纳香叶渣，为 2014 年 11 月采于贵州省罗甸县的已
水蒸馏提取过艾片的叶。
1． 3 试剂
芦丁:批号:14H05521，(西格玛化工有限公司) ;95%
乙醇(分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)、甲醇(分
析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司) ，无水三氯化铝
(分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)。HPD722、
HPD600、HPD826、HPD417、ADS － 17、LX － 17、DM130、聚酰
胺(沧州宝恩化工公司)。
2 方法
2． 1 总黄酮含量测定
2． 1． 1 线性关系考察 准确称取干燥至恒重的芦丁对照
品 5． 4 mg，置于 10 mL 容量瓶中，用甲醇溶解、定容，得到
0． 54 mg·mL －1的对照品溶液。分别取对照品溶液 0、0． 1、
0． 2、0． 3、0． 4、0． 5 mL 于 10 mL 试管中，加显色剂振荡摇
匀，静置 10 min后，于 420 nm处测定吸光度值，记录数据。
以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回
归方程为 y = 21． 907x + 0． 106 7 (Ｒ2 = 0． 999 5) ，表明浓度
在 0． 005 4 ～ 0． 027 0 mg·mL －1之间与吸光度成良好的线
性关系。
2． 1． 2 样品溶液的制备 将已水蒸馏提取过艾片的叶经
60℃干燥至恒重、粉碎、过 40 目筛，得到待测样品，置于密
封袋中密封保存。称取 1 g粉末于 10 mL具塞试管中按料
液比 1:10 加入 60%乙醇溶液，70℃恒温水浴 2 h，提取 1
次。冷却，过滤，得待测艾纳香样品溶液。
2． 1． 3 含量计算 艾 纳 香 总 黄 酮 含 量 (%) =
C标 × V标 × A样 ×稀释倍数
A标 × m样
× 100(C标:标样溶液浓度，单位:
mg·mL －1;V标:吸取的标准溶液体积，单位:mL;A样:样品
溶液的吸光度;A标:标准溶液吸光度;m样:样品重量，单位:
mg)。
2． 1． 4 叶渣中总黄酮含量 吸取 2． 1． 2 项下的样品溶液，
按 2． 1． 1、2． 1． 3 方法显色计算，叶渣中总黄酮含量为
1. 25%。
2． 2 静态吸附筛选大孔吸附树脂型号
2． 2． 1 树脂预处理 精确称取 8 种树脂各 1 g，在树脂柱
内分别加入高于树脂层 10 cm 的乙醇浸泡 4 h，放出浸液，
加入纯净水进行洗涤，至洗涤液在试管中加水稀释不浑浊，
且洗涤液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰为止，再用水洗
涤至乙醇含量少于 1%，即可使用。
2． 2． 2 吸附原液的制备 称取 50 g 2． 1． 2 项下艾纳香叶
渣加 500 mL水，70℃水浴 2 h，抽滤得滤液，备用。
2． 2． 3 树脂型号的筛选 分别精密称取 HPD722、
HPD600、HPD826、HPD417、ADS － 17、LX － 17、DM130、聚酰
胺 8 种树脂各 1 g 分别置于具塞瓶子中，贴好标签待用。
分别向具塞瓶子中加入 50 mL 样品液。置电动震荡器中
(温度为 25℃) ，转速为 160 r·min －1，连续不间断振摇 24
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h，使提取液中总黄酮被树脂充分吸附，过滤得滤液，按
2. 1. 1、2． 1． 3 法测定并计算总黄酮的含量。再向具塞瓶子
中加入 30 mL 70%乙醇，置水浴恒温(25℃)震荡器中，转
速为 160 r·min －1连续震摇 48 h，使艾纳香叶中的总黄酮
充分被解吸，过滤得滤液，按 2． 1． 1、2． 1． 3 法测定并计算续
滤液中总黄酮的含量。
2． 3 最佳大孔树脂对艾渣总黄酮动态吸附―洗脱参数考察
2． 3． 1 洗脱剂浓度的确定 准确称取 50 g 的艾纳香叶
渣，于 1000 mL烧杯，按 1 ∶ 15 的比例加入 750 mL 60 %乙
醇，70 ℃水浴 2 h，过滤得到提取液，量取滤液体积，留样
①;将滤液用旋转蒸发仪旋至无醇味，加水静置一夜，将静
置的浓缩液抽滤去沉淀，量取滤液体积，即得上样液，滤液
留样②。按 2． 2． 1 法处理 50 g树脂，湿法装柱，先用蒸馏水
以 3 BV·h －1的流速除杂至流出液为无色，上样液上样，调
整控制流速，记下流出液总体积，留样③;水洗至流出液澄
清。分别用 10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %乙
醇按照 2 BV·h －1这个速度进行动态洗脱，分别收集各洗
脱液，量取各乙醇体积分数洗脱液体积，留样，按 2． 1． 1、
2. 1. 3 法测定并计算洗脱液中总黄酮的含量。
2． 3． 2 不同流速对艾纳香废渣中总黄酮吸附率的影响
按 2． 2． 1 法分别处理 50 g LX － 17 树脂 4 份，湿法装柱，水
洗至中性。按 2． 3． 1 法制得上柱液，上柱液上柱，控制吸附
流速分别为 1、2、3、4 BV·h －1进行动态吸附，分别收集洗
脱液 300 mL，按 2． 1． 1、2． 1． 3 法测定并计算流出液中总黄
酮含量。
2． 3． 3 提取溶剂浓度的确定 分别称取 50 g 艾纳香叶
渣，分别加 750 mL水、30%乙醇、50%乙醇、60%乙醇，按 2．
3． 1、2． 1． 1 操作，留样测溶液中总黄酮含量。
2． 3． 4 上柱液浓度的影响 分别称取 50 g 艾纳香叶渣 6
份，加 750 mL 50%乙醇，按 2． 3． 1、2． 1． 1 操作，留样测溶液
中总黄酮含量计算吸附量及吸附率。
2． 3． 5 不同洗脱流量对解吸量的影响 按 2． 2． 1 法分别
处理 50 g LX － 17 树脂 4 份，湿法装柱，水洗至中性。按
2. 3. 1 法制得上柱液，上柱液上柱，按最佳吸附流速 2 BV·
h －1进行吸附，水洗至流出液无颜色，记下水用量为 3 BV。
用 50%乙醇，分别以 1、2、3、4 BV·h －1进行动态洗脱，分别
收集 300 mL，按 2． 1． 1、2． 1． 3 法测定洗脱液中艾纳香废渣
总黄酮含量，记录数据，绘制洗脱曲线。
2． 4 工艺验证
按 2． 2． 1 法处理 50 g树脂 3 份，湿法装柱水洗至中性。
按 2． 3． 4 法处理原料，提取两次，滤液合并浓缩、去醇去杂
至上柱液浓度为 3． 03 mg·mL －1，以 2 BV·h －1的流速进行
动态洗脱，先以 3 BV·h －1的流速水洗至流出液澄清，再用
5 BV的 50%乙醇洗脱，收集洗脱液。洗脱液减压浓缩至
干，加 95%乙醇精制，刮下称重、编号。按 2． 1． 1、2． 1． 3 法
测定洗脱液中艾纳香废渣总黄酮含量。
回收率(%)= (产品重量 ×产品含量)/(原料重量 ×
原料含量)
3 结果与分析
3． 1 不同树脂静态吸附量和解吸率的比较
由表 1 可知，艾纳香叶渣中总黄酮在 HPD722、
HPD600、HPD826、HPD417、ADS － 17、LX － 17、DM130、聚酰
胺这 8 种极性不同、型号不同的大孔树脂中，HPD722、
HPD600、HPD826、LX － 17、DM130 对艾渣总黄酮的吸附率
较大，但解吸率 LX － 17 较好，通过综合比较 8 种吸附树脂
中 LX － 17 具有较好的静态吸附率和解吸率，故选择 LX －
17 型大孔树脂来富集纯化艾纳香废渣中总黄酮。
表 1 不同树脂静态吸附量和解吸率的比较
树脂名称 树脂极性
吸附量
(mg·g － 1)
吸附率
(%)
解吸量
(mg·g － 1)
解吸率
(%)
HPD722 弱极性 12． 61 49． 98 6． 43 51． 00
HPD600 极性 12． 53 49． 68 5． 20 41． 45
HPD826 氢键 13． 27 52． 59 5． 83 43． 95
HPD417 非极性 7． 60 30． 13 3． 69 48． 56
ADS － 17 极性 8． 05 31． 91 3． 44 42． 73
LX － 17 极性 11． 78 46． 68 6． 54 55． 54
DM130 中等极性 12． 91 51． 19 5． 25 40． 68
聚酰胺 极性 7． 37 29． 20 4． 50 61． 04
3． 2 LX － 17 大孔树脂对艾渣总黄酮动态吸附―洗脱参数
考察
3． 2． 1 洗脱剂浓度的确定 由表 2 可知，随着洗脱剂浓度
的增大，洗脱液中的总黄酮含量总体呈先增后减的趋势。
而 40 %和 50 %乙醇洗脱效果相对其他体积分数的乙醇
洗脱液来说是最好的，故筛选出最佳洗脱溶剂为 50 %乙
醇。
表 2 梯度洗脱筛选洗脱剂浓度
留样 A平均
C
(mg /mL)
V
(mL)
溶液中黄酮
含量(mg)
解吸率
(%)
①60%醇提液
②上柱液
③流出液
④10%乙醇洗脱
⑤20%乙醇洗脱
⑥30%乙醇洗脱
⑦40%乙醇洗脱
⑧50%乙醇洗脱
⑨60%乙醇洗脱
⑩70%乙醇洗脱
0． 797
0． 694
0． 301
0． 210
0． 455
0． 638
0． 671
0． 583
0． 359
0． 319
0． 019 0
0． 016 5
0． 007 2
0． 005 0
0． 010 8
0． 015 2
0． 016 0
0． 013 9
0． 008 5
0． 007 6
605
325
320
206
195
201
194
200
205
200
573． 524
268． 275
15． 275
5． 146
10． 553
30． 506
61． 933
55． 475
35． 014
15． 177
84． 508
3． 2． 2 不同流速对艾纳香废渣中总黄酮吸附率的影响
由图 1 可知，随着流速的增高，流出液中含量也随之增高，
换言之，树脂柱中吸附的黄酮在逐渐减少，因当流量为 1、2
BV·h －1时，流出液总黄酮含量相差不大，考虑到时间问
题，故选择吸附流速为 2 BV·h －1。
图 1 不同流速对艾纳香废渣中总黄酮吸附率的影响
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3． 2． 3 提取溶剂浓度的确定 由表 3 可知，提取溶剂浓度
不同，提取液中黄酮含量就不同，随乙醇浓度的增加而增
加，但在真空减压浓缩、过滤去醇去杂后，溶液中的黄酮含
量均有所下降，综合比较提取溶剂浓度与去醇去沉后的溶
液中黄酮含量，50%乙醇作为提取溶剂最佳。
表 3 提取溶剂浓度的确定
提取溶剂
①提取液中黄
酮含量(mg)
②去醇去沉后
黄酮含量(mg)
③流
出液
④水
洗液
⑤40%
乙醇
⑥50%
乙醇
水 302． 50 － 43． 35 12． 70 73． 60 34． 95
30%乙醇 393． 79 252． 53 30． 74 11． 05 70． 02 39． 83
50%乙醇 465． 92 290． 25 15． 97 13． 91 64． 35 50． 21
60%乙醇 573． 52 268． 27 15． 28 10． 36 61． 93 55． 48
3． 2． 4 上柱液浓度的影响 由表 4 可知，选用 50%乙醇
作为提取溶剂，需要真空减压浓缩、去醇去沉的过程，故上
柱液中黄酮含量随上柱液浓度的升高而降低。当艾纳香废
渣总黄酮浓度为 3． 03 mg·mL － 1时，LX － 17 树脂对其
吸附能力最好。因此，确定 3． 03 mg·mL － 1为最佳上柱
液浓度。
表 4 上柱液浓度的影响
上柱液浓度
(mg·mL －1)
上柱液
(mg)
流出液
(mg)
水洗液
(mg)
吸附量
(mg·g － 1)
吸附率
(%)
1． 04 465． 02 160． 79 18． 51 285． 72 61． 44
1． 52 404． 75 89． 12 38． 60 277． 03 68． 44
2． 01 369． 50 77． 93 17． 53 274． 04 74． 17
2． 78 320． 43 48． 25 15． 04 257． 14 80． 25
3． 03 290． 25 15． 97 13． 71 260． 57 89． 77
3． 57 270． 33 16． 50 17． 04 236． 79 87． 59
3． 2． 5 不同洗脱流量对解吸量的影响 由图 2 可知，比较
不同洗脱流量对艾纳香废渣中总黄酮解吸量的影响。随着
流速的增高，洗脱液中含量逐渐降低，当流量为 1、2 BV·
h －1时，洗脱液总黄酮含量相差不大，考虑到时间问题，故选
择吸附流速为 2 BV·h －1。
图 2 不同洗脱流量对解吸量的影响
3． 3 工艺验证
表 5 验证试验结果
编号
提取液黄酮
含量(%)
精制产品黄
酮含量(%)
产品重
量(g)
回收率
(%)
① 1． 26 20． 63 1． 68 55． 08
② 1． 25 19． 67 1． 81 57． 17
③ 1． 23 19． 80 1． 71 54． 99
平均 1． 25 20． 03 1． 73 55． 75
ＲSD% 1． 21 2． 61 3． 93 2． 21
由表 5 可知，最佳纯化工艺条件下，富集纯化艾纳香废
渣中总黄酮平均含量达到 20． 03%，平均回收率为
55. 75%。
4 小结与讨论
艾纳香废渣回收再利用是一个亟待解决的问题，且是
当前农村生态文明建设的热难点问题。需要广大学者进行
深入研究，改善环境，变废为宝。大孔树脂富集和纯化艾纳
香废渣总黄酮的研究尚未见报道，本试验通过静态吸附和
解吸附试验研究了 8 种极性不同、型号不同的大孔树脂富
集纯化艾纳香废渣中的总黄酮，结果表明，LX － 17 型树脂
对艾纳香废渣总黄酮的吸附和解吸附能力较好，具有良好
的富集和纯化作用。纯化工艺筛选表明，最佳的为:50%乙
醇提取 2 次、上柱液总黄酮浓度为 3． 03 mg·mL －1、洗脱溶
剂为 50%乙醇、洗脱速度为 2 BV·h －1，其纯化后总黄酮量
高达 20． 03 %。
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