全 文 ：紫玉盘提取物体外抗肿瘤活性的实验研究
卢汝梅，李 兵，苏 醒，钟振国，张雯艳
(广西中医学院，广西 南宁 530001)
摘要:目的 研究紫玉盘提取物的体外抗肿瘤活性。方法 紫玉盘乙醇总提取物用系统溶剂分离法分得极性不同部位，采
用 MTT法测定总提取物及各部位对宫颈癌细胞株 Hela、人胃癌细胞株 SGC7901、人肝癌细胞株 Bele7404 增殖的抑制活
性。结果 紫玉盘总提取物及各部位随着浓度不同，对 3 种肿瘤细胞株增殖的抑制率各不同。结论 紫玉盘总提取物及
各部位有显著的体外抗肿瘤活性。
关键词:紫玉盘; 提取物; 抗肿瘤活性
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2010． 10． 048
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2010)10-2530-02
紫玉盘 Uvaria microcarpa Champ． ex Benth是番荔枝科紫玉盘
属植物，药用全株，具有祛风除湿、行气健胃、止痛、化痰止咳之功
效，广西民间用其根来治疗风湿痛、跌打损伤和腰腿痛等症，其叶
用于止痛消肿［1，2］。近二十年来的研究表明，紫玉盘同属植物有
显著的抗肿瘤作用，但关于紫玉盘的研究报道较少，仅报道从其
种子中分得几个番荔枝内酯类和生物碱类成分 ［3，4］，对药材的主
要药用部位茎的药理作用研究报道甚少，因此很有必要对其药理
作用进行系统深入的研究。本实验采用 MTT法测定紫玉盘乙醇
总提取物及各部位对宫颈癌细胞株 Hela、人胃癌细胞株
SGC7901、人肝癌细胞株 Bele7404 增殖的抑制活性。
1 材料与仪器
1． 1 紫玉盘提取物 紫玉盘采于广西南宁，经广西中医学院刘寿
养副教授鉴定为番荔枝科植物紫玉盘 Uvaria microcarpa Champ．
ex Benth。紫玉盘茎用乙醇提取得其总提取物(以下简称
UAAE) ，总提取物经系统溶剂分离法处理得到石油醚部位(以
下简称 UPE)、氯仿部位(以下简称 UCE)、醋酸乙酯部位(以下简
称 UEE)、正丁醇部位(以下简称 UBE)和乙醇部位(以下简称
UAE)。临用前以蒸馏水溶解，无菌过滤后备用。
1． 2 肿瘤细胞株 宫颈癌细胞株 Hela、人胃癌细胞株 SGC7901
购自上海细胞生物研究所细胞库，人肝癌细胞株 7404 由广西医
科大学药学院药理教研室提供。
1． 3 试剂 MTT(四甲基噻唑蓝)为德国 Sigma公司产品;FBS(胚
胎牛血清)为美国 Hyclone公司产品;RPMI1640 和 DEME培养基
为 GIBCO公司产品;Trypsin(胰蛋白酶)由天津市灏洋生物制品
有限责任公司提供;DMSO由天津汇英化学试剂有限公司提供。
1． 4 仪器 Thermo Forma 型 CO2 培养箱，美国赛默飞世尔科技。
Clympus型倒置显微镜，日本产。Biocell 型酶标仪，奥地利产。
3001 型培养皿，美国产。HV －50 自动高压灭菌器，日本产。
2 方法
2． 1 MTT法测定 在 96 孔培养板(NUNC)中每孔加入 200 μl
(含有 5 000 个 /ml肿瘤细胞)含 10% FBS 的 RPMI1640 培养液，
细胞置 37℃，10%CO2 培养 24 h后，实验组分别加入最终浓度为
10，20，40 μg /ml提取的培养液，对照组则加入等体积溶剂的培养
液，每组 4 孔。置 37℃，10% CO2 培养 5 d 后，弃去上清液，加入
200 μl /孔新鲜配置的含 0． 2 mg /ml MTT 的无血清培养液，37℃
继续培养 4 h，弃上清液，加入 200 μl DMSO，振荡混匀后，在酶标
仪上以波长为 550 nm，参比波长为 450 nm 测定 OD 值，重复 3
次，按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。
2． 2 药物对肿瘤细胞生长的抑制率的计算方法［5］ 肿瘤细胞生
长抑制率(%)=(1 －实验组平均 OD 值 /对照组平均 OD 值)×
100%。
2． 3 统计学方法 所有的测定指标均采用均数加减标准差表示，
用 PEMS软件进行分析，计算相应的统计参数，两组间的均数比
较采用 t检验。以 P ＜ 0． 05，P ＜ 0． 01 表示有统计意义。
3 结果
3． 1 总提取物(UAAE)对肿瘤细胞的抑制作用 UAAE对宫颈癌
细胞株 Hela、人胃癌细胞株 SGC7901、人肝癌细胞株 Bele7404 的
增殖均有显著的抑制作用，且抑制作用呈剂量依赖关系。UAAE
对人胃癌细胞株 SGC7901 增殖的抑制作用最强。结果见表 1。
3． 2 石油醚部位提取物(UPE)对肿瘤细胞的抑制作用 UPE对
3 种肿瘤细胞株的增殖均有抑制作用。在浓度为 40 μg /ml时，对
人胃癌细胞株 SGC7901 和人肝癌细胞株 Bele7404 的抑制率达到
50%以上。但对宫颈癌细胞株 Hela 的抑制作用较弱。结果见
表 2。
3． 3 氯仿部位提取物(UCE)的抑制作用 UCE 对 3 种肿瘤细胞
株的增殖均有显著的抑制作用。在浓度为 10 μg /ml 时，对 3 种
肿瘤细胞株的抑制率均达到 41%以上，在浓度为 40 μg /ml时，抑
制率均达到 60%以上。结果见表 3。
3． 4 醋酸乙酯部位提取物(UEE)的抑制作用 UEE 对 3 种肿瘤
细胞株的增殖均有抑制作用。在浓度为 10 μg /ml 时，对宫颈癌
细胞株 Hela和人胃癌细胞株 SGC7901 的抑制率达到 50%以上。
但对人肝癌细胞株 Bele7404 的抑制作用较弱。结果见表 4。
收稿日期:2009-09-25; 修订日期:2010-06-10
基金项目:广西壮族自治区教育厅面上项目(No． 200510048) ;广西中医学院高层次人才科研启动基金资助项目(No． G05014)
作者简介:卢汝梅(1969-) ，女(汉族) ，广西陆川人，现任广西中医学院壮医药学院教授，博士学位，主要从事中药民族药化学成分研究工作．
表 1 不同浓度 UAAE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0 μg /ml
OD值
10 μg /ml
OD值 抑制率(%)
20 μg /ml
OD值 抑制率(%)
40 μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 203 ± 0． 009＊＊ 40． 29 0． 171 ± 0． 009＊＊ 49． 71 0． 143 ± 0． 004＊＊ 57． 94
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 159 ± 0． 008＊＊ 58． 38 0． 125 ± 0． 018＊＊ 67． 27 0． 100 ± 0． 014＊＊ 73． 82
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 411 ± 0． 006＊＊ 29． 14 0． 342 ± 0． 012＊＊ 41． 03 0． 184 ± 0． 006＊＊ 68． 28
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
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时珍国医国药 2010 年第 21 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2010 VOL． 21 NO． 10
表 2 不同浓度 UPE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0 μg /ml
OD值
10 μg /ml
OD值 抑制率(%)
20 μg /ml
OD值 抑制率(%)
40 μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 282 ± 0． 008* 17． 06 0． 266 ± 0． 009＊＊ 21． 75 0． 250 ± 0． 004＊＊ 26． 47
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 314 ± 0． 008＊＊ 17． 80 0． 244 ± 0． 010＊＊ 36． 13 0． 189 ± 0． 013＊＊ 50． 52
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 437 ± 0． 019* 24． 66 0． 335 ± 0． 022＊＊ 42． 24 0． 221 ± 0． 018＊＊ 61． 90
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
表 3 不同浓度 UCE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0 μg /ml
OD值
10 μg /ml
OD值 抑制率(%)
20 μg /ml
OD值 抑制率(%)
40 μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 199 ± 0． 012＊＊ 41． 47 0． 173 ± 0． 017＊＊ 49． 12 0． 133 ± 0． 014＊＊ 60． 88
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 160 ± 0． 003＊＊ 58． 12 0． 108 ± 0． 005＊＊ 71． 73 0． 095 ± 0． 006＊＊ 75． 13
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 286 ± 0． 018＊＊ 50． 69 0． 207 ± 0． 008＊＊ 64． 31 0． 168 ± 0． 009＊＊ 71． 03
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
表 4 不同浓度 UEE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0 μg /ml
OD值
10 μg /ml
OD值 抑制率(%)
20 μg /ml
OD值 抑制率(%)
40 μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 169 ± 0． 004＊＊ 50． 29 0． 138 ± 0． 006＊＊ 59． 45 0． 120 ± 0． 009＊＊ 64． 71
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 168 ± 0． 002＊＊ 56． 02 0． 147 ± 0． 009＊＊ 61． 52 0． 123 ± 0． 008＊＊ 67． 80
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 503 ± 0． 005＊＊ 13． 28 0． 418 ± 0． 014＊＊ 27． 93 0． 365 ± 0． 011＊＊ 37． 07
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
3． 5 正丁醇部位提取物(UBE)的抑制作用 UBE 对 3 种肿瘤细
胞株的增殖均有抑制作用。但对人肝癌细胞株 7404 的抑制作用
不强。结果见表 5。
表 5 不同浓度 UBE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0 μg /ml
OD值
10 μg /ml
OD值 抑制率(%)
20 μg /ml
OD值 抑制率(%)
40 μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 219 ± 0． 009＊＊ 35． 59 0． 180 ± 0． 004＊＊ 47． 06 0． 168 ± 0． 005＊＊ 50． 59
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 227 ± 0． 005＊＊ 40． 58 0． 165 ± 0． 004＊＊ 56． 81 0． 152 ± 0． 003＊＊ 60． 21
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 507 ± 0． 004* 12． 59 0． 463 ± 0． 013* 20． 17 0． 352 ± 0． 019＊＊ 39． 31
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
3． 6 乙醇部位提取物(UAE)的抑制作用 UAE 对 3 种肿瘤细胞
株的增殖均有直接的抑制作用。在浓度为 40 μg /ml 时，对 3 种
肿瘤细胞株的增殖有显著的抑制作用。结果见表 6。
表 6 不同浓度 UAE对肿瘤细胞的抑制作用(珋x ± s)
瘤株
0μg /ml
OD值
10μg /ml
OD值 抑制率(%)
20μg /ml
OD值 抑制率(%)
40μg /ml
OD值 抑制率(%)
Hela 0． 340 ± 0． 012 0． 195 ± 0． 004＊＊ 42． 65 0． 177 ± 0． 008＊＊ 47． 94 0． 155 ± 0． 005＊＊ 54． 41
SGC7901 0． 382 ± 0． 007 0． 236 ± 0． 014＊＊ 38． 22 0． 198 ± 0． 005＊＊ 48． 17 0． 139 ± 0． 006＊＊ 63． 61
Bele7404 0． 580 ± 0． 015 0． 472 ± 0． 018* 18． 62 0． 335 ± 0． 025＊＊ 42． 24 0． 284 ± 0． 009＊＊ 51． 03
与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;n = 3
4 讨论
MTT法具有经济、快速、高效的优点，是目前最常用的体外抗
肿瘤药物筛选方法，我们采用 MTT 法，选用宫颈癌细胞株 Hela、
人胃癌细胞株 SGC7901 和人肝癌细胞株 7404，对紫玉盘总提取
物及 5 个不同极性部位进行体外抗肿瘤活性的实验研究。结果
表明以亲脂性成分为主的石油醚部位对人肝癌细胞株 Bele7404
抑制作用较强;以极性较大成分为主的醋酸乙酯部位、正丁醇部
位、乙醇部位提取物对宫颈癌细胞株 Hela 和人胃癌细胞株
SGC7901有显著的抑制作用，而氯仿部位则对上述 3 种肿瘤细胞
株的增殖均有显著的抑制作用，是紫玉盘提取物中抗肿瘤活性最
强的部位，我们已从中分得 6 个化合物，其抗肿瘤活性筛选研究
正在进行中，这些研究结果将为紫玉盘药效学研究及抗肿瘤活性
成分的寻找提供了科学依据。
参考文献:
［1］ 中华本草编委会．中华本草，第 3 册［M］．上海:上海科学技术出版
社，1999，3:11．
［2］ 中国药材公司．中国中药资源志要［M］． 北京:科学出版社，1994:
275．
［3］ 陈文森，姚祝军，吴毓林．紫玉盘种子中的番荔枝内酯类成分研究
［J］．化学学报，1997，55(7) :723．
［4］ 余冬蕾，郭 剑，廖永红，等．紫玉盘中的新内酰胺［J］．植物学报，
1999，41(10) :1104．
［5］ 徐叔云，卞如濂，陈 修． 药理实验方法学，第 2 版［M］． 北京:人
民卫生出版社，2002:1785．
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2010 VOL ． 21 NO． 10 时珍国医国药 2010 年第 21 卷第 10 期