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千里光总黄酮的抗炎作用研究



全 文 :主要含甾体生物碱 , 其性味苦 、辛 、微寒。从中药药理功能分析 ,
ST具有清热利湿 、解毒消肿 、祛风化痰和抗癌等功效。本实验发
现 , STE对 A549细胞具有较强的细胞增殖抑制作用 ,且呈一定的
时间剂量依赖性;STE处理组的细胞凋亡率明显高于正常对照
组。提示一定浓度的 STE对人肺癌 A549细胞具有较强的杀伤
能力 , 并能诱导癌细胞凋亡。
与正常对照组比较 , ★P<0.05, ★★P<0.01;n=3
图 4 FasLmRNA表达结果(fasL/β -actin)
Fas/fasL系统是肿瘤细胞凋亡的重要途径之一 , 许多化疗
药物和中药诱导肿瘤细胞凋亡的机制是通过在不同水平参与
fas/fasL凋亡信号级联反应来实现的。同时 , Fas/fasL系统也是
细胞免疫中 T淋巴细胞和 NK细胞杀伤肿瘤细胞的途径之一。
大多数肿瘤细胞都同时表达fas和fasL, 当外界fasL和肿瘤细胞表
面的 fas结合之后 ,可使 caspase家族成员以类似于酶原激活的方
式相互激活 ,并形成级联放大效应 , 效应性 caspase酶被激活后 ,
可裂解一些重要蛋白 ,从而引起细胞凋亡 [ 3] 。细胞 fas基因表达
越高 , 其通过与自身的 fasL相互作用引起细胞的凋亡 , 即自杀的
能力越强。而肿瘤细胞表达 fasL可能与其逃脱机体免疫细胞杀
伤有关 ,已知 B淋巴细胞 、T淋巴细胞及 NK细胞都有 fas表达 ,
特别是活化的 T淋巴细胞其 fas表达的水平更高 ,当这些表达 fas
的免疫细胞与表达 fasL的肿瘤细胞结合后可能会激活 fas/fasL
信号传导途径 , 引起免疫细胞的凋亡 ,从而使肿瘤细胞逃避了免
疫杀伤 ,许多肿瘤细胞通过 fas表达下调和(或)fasL上调实现免
疫逃避 [ 4] 。本实验中发现 , STE可明显地上调 A549细胞 fasmR-
NA和下调 fasLmRNA表达。提示 ST可影响 A549细胞的 fas和
fasL基因表达 ,从而通过 fas/fasL细胞凋亡系统促使癌细胞发生
凋亡 , 这可能是白英抑制肺癌 A549细胞增殖作用的机制之一。
参考文献:
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性 [ J] .国外医学.植物药分册 , 2001, 16(6):245.
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FasL基因表达的影响 [ J].中药材 , 2006, 29(11):1203.
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[ 4 ]  高德宗.Fas系统与肿瘤治疗 [ J] .国外医学· 肿瘤学分册 , 2005,
32(5):368.
收稿日期:2007-04-28; 修订日期:2007-08-18
基金项目:江西省教育厅资助项目(No.2006-253)
作者简介:张文平(1969-),男(汉族),江西南城人 ,现任赣南医学院副教
授 ,硕士学位 ,主要从事中草药抗感染与免疫研究工作.
千里光总黄酮的抗炎作用研究
张文平1 ,陈惠群 2 , 张文书1 ,曹镐禄 1 , 黄 真1
(1.赣南医学院 ,江西 赣州 341000; 2.赣南医学院附属市立医院 ,江西 赣州 341000)
摘要:目的 探讨千里光总黄酮的抗炎作用。方法 通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验 、腹腔注射醋酸致小鼠腹腔毛细血
管通透性增高实验以及小鼠棉球肉芽肿实验 ,观察千里光总黄酮的抗炎作用;制作小鼠气囊滑膜炎模型 , 测定炎症渗出
物中白细胞数(WBC)和前列腺素 E2(PGE2)含量。结果 千里光总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀 、醋酸致小鼠毛细血管通透性的增加以及小鼠棉球肉芽肿的形成均有明显的抑制作用;千里光总黄酮高中低剂量组炎症渗出液中白细胞数和
PGE2含量明显低于空白对照组。结论 千里光总黄酮对多种炎症模型均有明显的对抗作用 , 为千里光抗炎作用的主要
有效部位之一 , 且此作用部分是与炎症因子 PGE2的产生和释放受抑制有关。关键词:千里光; 总黄酮; 抗炎作用
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)03-0605-02
StudyoftheAntinflammatoryEffectofTotalFlavonoidsfrom SenecioscandensBuch-Ham
ZHANGWen-ping1 , CHENHui-qun2 ,ZHANGWen-shu1 ,CAOgao-lu1 ,HUANGZhen1(1.GannanMedicalColege, Gangzhou341000, China;2.AfiliatedMunicipalHospitalofGannanMedical
Colege, Gangzhou341000, China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanti-inflammatoryefectofthetotalflavonoidsinSenecioscandensBuch-Ham.Meth-odsVariousinflammatorymodels, includingtheswelingofearinducedbyxyleneinmice, thepermeabilityincreaseofbloodcap-
ilarybyaceticacidinmice, andthecoton-pelletgranulomaofthemicewereusedtoexploretheanti-inflammationofthetotal
flavonoids.Airsacmodelsofsynovitisinmiceweresetupandtheamountofwhitebloodcel(WBC)andthecontentofprostaglan-dinE2(PGE2)weremeasuredininflammatoryexudan.ResultsThetotalflavonoidshadsignificantinhibitoryactiononaurisswelinducedbyxyleneinmiceandpenetrationofcapillaryvesselinmice.Thegeneralflavonoidsalsodecreasedtheproliferationof
granulomacausedbyimplantationcotonpeletinmicesignificantly.TheamountofWBCandcontentofPGE2 intheexperimental
groupswereobviouslylowerthanthoseinthecontrolgroups.ConclusionThetotalflavonoidshassignificantanti-inflammation,whichisrelevanttotheinhibitionoftheproductionandreleaseoftheinflammatoryfactorPGE2.
Keywords:SenecioscandensBuch-Ham; Totalflavonoids; Anti-inflammatoryefect
  千里光又名千里及 、九里明等 , 系多年生菊科植物千里光 Se-
necioscandensBuch-Ham之全草 , 我国南方各省均有分布 ,主要
生长于山坡 、林缘 、灌木丛中。 该药性凉味苦 , 具有清热解毒 、消
炎凉血 、明目止痛 、去腐生肌之功效 ,临床上主要用于治疗上呼吸
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道感染 、急性扁桃体炎 、急性菌痢 、急性阑尾炎 、急性肠炎 、眼结膜
炎等 [ 1] 。植物化学研究表明 , 黄酮类是该药物的主要成分之
一 [ 2] , 而黄酮类化合物在抗炎 、抗变态反应 、抗微生物 、抗肿瘤等
多方面都有一定的药理作用 [ 3]。 本研究采用多种炎症模型观察
了千里光总黄酮(TotalflavonoidsofSenecioscandensBuch-Ham,
TFS)的抗炎作用。现报道如下。
1 器材
1.1 药物及试剂 千里光购于赣南医学院附属医院中药房。千
里光全草切成小段 , 以体积分数为 95%乙醇回流提取 3次 , 提取
液合并后减压浓缩除去乙醇 ,水溶液以 50 g· L-1碳酸钠处理后
以氯仿萃取 3次 , 碱水层以 1mol· L-1HCl酸化至 pH2后以醋酸
乙酯萃取 3次 , 水洗至中性 , 醋酸乙酯层浓缩成浸膏即得千里光
总黄酮(totalflavonoids, TF), 实验时用灭菌生理盐水(NS)溶解
成适当浓度的药液供用。醋酸地塞米松 ,张家口云峰制药厂(批
号 20040403);伊文思蓝 , 瑞士 Fluka公司进口分装 (批号
20001014),其他试剂均为分析纯。
1.2 动物 昆明种小鼠 , 体重 20 ~ 22 g, 雌雄不限 , 由江西省实
验动物中心提供。
1.3 仪器 752紫外光栅光度仪由上海分析仪器总厂生产 ,高速
离心机由上海精密仪器仪表有限公司生产 ,净化工作台由苏州净
化设备厂生产 , 电子分析天平由上海奇鸿仪器仪表有限公司生产。
2 方法与结果
2.1 千里光总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 健康小鼠
50只随机分成 5组 , 即 TFS高 、中 、低剂量组 、阳性对照组和空白
对照组 , 每组 10只。 TFS高 、中 、低剂量组 , 分别灌胃给药 200,
100, 50 mg/kg,阳性对照组给地塞米松组 1.8 mg/kg, 空白对照组
给同体积生理盐水 , 1次 /d,连续 7d,末次给药 1h后在小鼠右耳
用注射器涂 0.02 ml的二甲苯 , 左耳作为自身对照 ,涂耳 1 h后处
死 , 沿耳廓基线剪下两耳 , 用直径为 9 mm的打孔器分别在两耳
相应部位打孔 , 电子天平称重 ,左耳为对照 ,以两耳重量差为肿胀
程度 , 并求肿胀度抑制率(%)。肿胀度抑制率(%)=(给药组肿
胀度 -对照组肿胀度)/对照组肿胀度。 结果显示:与空白对照
组相比 , TFS各剂量组(200, 100和 50 mg· kg-1)对小鼠耳廓肿
胀有明显抑制作用 , 且随剂量增加抑制作用加强 , 地塞米松阳性
对照组(1.8 mg· kg-1)对小鼠耳廓肿胀亦有极强的抑制作用。
结果见表 1。
表 1 千里光对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 肿胀程度 抑制率(%)
空白对照 - 25.71±4.17 -
阳性对照 1.8 10.66±3.49* 58.52
TFS高剂量 200 13.59±3.36* 47.11
TFS中剂量 100 15.95±4.22* 37.98
TFS低剂量 50 20.52±4.34** 20.17
  与空白对照组比较 , *P<0.01, **P<0.05;n=10
2.2 千里光总黄酮对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
取健康小鼠 50只 ,分组给药方法同 “ 2.1”项 , 连续 5 d,末次给药
1 h后各鼠均尾静脉注射 0.5%伊文斯兰生理盐水溶液 0.1 ml/
10 g,随即腹腔注射 0.6%冰醋酸溶液 0.1ml/10g, 20 min后脱臼
处死 , 腹腔注射 6ml生理盐水 , 轻揉小鼠腹部 , 剪开腹部 , 用吸管
吸出洗涤液 , 加入生理盐水 10 ml, 3 000 r/min离心 15 min, 取上
清液用紫外分光光度计(λ=590 nm)测 OD值。腹腔注射稀醋酸
能引起毛细血管通透性增加 ,使尾静脉注入的伊文思蓝染色液渗
出至腹腔内 , 测定腹腔炎性渗出液的 OD值可反映毛细血管通透
性情况。结果显示:TFS高剂量组和阳性对照组动物腹腔炎性渗
出液的 OD值明显低于空白对照组(P<0.01), 中剂量组与空白
对照组 OD值的差异有显著性(P<0.05), 低剂量组毛细血管通
透性有降低趋势 ,但无统计学意义(P<0.05)。结果见表 2。
表 2 千里光对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1 上清液 OD值 抑制率(%)
空白对照 - 0.377±0.085 -
阳性对照 1.8 0.152±0.037* 59.59
TFS高剂量 200 0.187±0.056* 50.44
TFS中剂量 100 0.278±0.074** 26.25
TFS低剂量 50 0.321±0.077# 14.75
  与空白对照组比较 , * P<0.01, **P<0.05, #P>0.05;n=10
2.3 千里光总黄酮对小鼠棉球肉芽肿的影响 50只小鼠随机分 5
组 , 在乙醚浅麻醉下, 左右两侧腋下皮下各埋入一灭菌棉球(重量
为 5 mg),缝合皮肤 ,庆大霉素涂抹表面。 4h后给药 , 1次 /d, 连续
7 d,剂量同 2.1项。 8 d后脱颈臼处死小鼠 , 剥离棉球肉芽组织,
80℃烘 2h, 称重 , 减去棉球重量即为肉芽组织重量 ,按 mg/100g体
重表示。结果显示:阳性对照组和 TFS高剂量组小鼠棉球肉芽肿
重量与空白对照组比较 , 差异有非常显著意义(P<0.01), TFS中
剂量组与空白对照组比较, 差异亦有显著意义(P<0.05), 而低剂
量组与空白对照组比较 ,差异无显著意义(P>0.05)。
表 3 千里光总黄酮对小鼠棉球肉芽肿影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
肉芽肿重
C/mg· (100g)-1
抑制率(%)
空白对照 - 50.18±15.28 -
阳性对照 1.8 28.75±6.37* 42.71
TFS高剂量 200 1.40±9.48* 37.43
TFS中剂量 100 34.37±9.84** 31.51
TFS低剂量 50 41.78±8.16# 16.74
  与空白对照组比较 , *P<0.01, **P<0.05, #P>0.05;n=10
2.4 千里光总黄酮对小鼠气囊滑膜炎的影响 小鼠 50只 ,于背
部皮下注射空气 5 ml,第 3d及第 6d再次注入空气各 3ml, 维持
气囊的膨胀。于首次注入空气的当天开始 ,连续灌胃 7 d, 剂量同
“ 2.1”项 , 末次给药后 2 h囊内注射 30%蛋清 1 ml, 6 h后处死动
物 , 于气囊内注入冰生理盐水(含肝素 50 u/ml)2.5 ml, 轻轻按
压 , 吸出 1 ml, 1 000r/min离心 10 min, 计数白细胞数 , 上清液用
紫外分光光度法检测前列腺素 E2含量 , 以 OD278表示。结果显示
阳性对照组和千里光总黄酮高中低剂量均能明显减少小鼠气囊
中白细胞数量和 PGE2含量。结果见表 4。
表 4 千里光总黄酮对炎症小鼠气囊内白细胞数和 PGE2的影响
组别 剂量C/mg· kg-1 气囊渗出液中WBC数 /个· L-1 气囊渗出液中OD278
空白对照 - 6.33×108±0.682×108 0.483±0.103
阳性对照 1.8 1.99×108 ±0.583×108* 0.219±0.055*TFS高剂量 200 2.87×108 ±0.783×108* 0.256±0.068*TFS中剂量 100 4.16×108 ±0.624×108* 0.306±0.061*TFS低剂量 50 5.25×108±0.857×108** 0.371±0.080**
  与空白对照组比较 , *P<0.01, **P<0.05;n=10
3 讨论
炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子发生的防御反应 ,
是感染及其许多疾病的最基本病理过程。炎症的发生发展过程一般
被认为分为 3期 ,早期以毛细血管扩张 、通透性亢进为主 ,中期为血
小板吸附及白细胞游走,晚期为肉芽组织增生 [ 4] 。二甲苯致小鼠耳
肿胀模型和毛细血管通透性试验属于炎症反应的早期 ,小鼠气囊滑
膜炎模型属炎症反应的中期 ,棉球肉芽肿试验属于炎症反应的晚期。
本实验结果显示,千里光总黄酮既可抑制由于毛细血管扩张造成的
肿胀 、渗出增加的早期炎症 ,又可抑制白细胞游走的中期炎症 ,并对
肉芽组织的增生的晚期炎症也有一定抑制作用,即具有明显的抗炎
作用 ,且抗炎作用呈现明显的剂量依赖性。前列腺素E2是炎症过程
重要的炎症介质,可引起血管扩张 ,并可加强组胺和缓激肽升高血管
通透性的作用。通过本实验研究发现千里光总黄酮可抑制体内炎性
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 3期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.3 
介质前列腺素 E2的合成,因此千里光的抗炎作用机制之一可能是抑
制前列腺素 E2的合成 ,使炎症反应减轻。
参考文献:
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科技出版社 , 199:1390.
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收稿日期:2007-07-03; 修订日期:2007-11-13
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(No.0630002-2A);
     广西自然科学基金项目(No.0640084)
作者简介:张绪东(1967-),男(汉族),黑龙江牡丹江人 ,现任牡丹江医学
院生理学教授 ,广西医科大学药理学博士研究生 ,硕士学位 ,主要从事心
血管药理学研究工作.
*通讯作者简介:黄仁彬(1955-), 男(汉族),广西南宁人 , 现任广西医科
大学药学院教授 ,硕士学位 ,主要从事生化药理学研究工作.
龙眼参黄酮抗心肌缺血再灌注
引起的脂质过氧化损伤的研究
张绪东 , 蒋伟哲 , 焦 阳 , 黄仁彬*
(广西医科大学 ,广西 南宁 530021)
摘要:目的 探讨龙眼参黄酮(Longyanshenflavonoids, LF)对大鼠心肌缺血再灌注(myocardialischemiareperfusion, MIR)引
起的脂质过氧化损伤的影响。方法 60只健康 SD大鼠 ,随机分为假手术(Sham)组 、缺血再灌注(MIR)组 、生理盐水(nor-
malsaline, NS)组和 3个预处理组(LF低剂量组 、LF中剂量组 、LF高剂量组), 各组大鼠雌 、雄各半。结扎冠状动脉左前降
支 30min后 ,再灌注 60min,建立 MIR模型。用不同剂量 LF在结扎冠状动脉左前降支前 30min分别做预处理。再灌注结
束后采血 , 测定血浆中谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶 MB(CK-MB)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱
甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)和丙二醛(MDA)的改变 , 测量心肌梗塞范围。结果 与 MIR组比较 , LF预处理能明显降低
血浆中 AST, CK, CK-MB和 MDA含量 , 能提高 SOD, GSH-Px活性 ,降低心肌梗塞范围。结论 LF对大鼠 MIR引起的脂
质过氧化损伤具有显著的保护作用。
关键词:龙眼参; 黄酮; 心肌缺血再灌注; 脂质过氧化损伤
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)03-0607-02
TheStudyofLongyanshenFlavonoidsonAnti-lipidPeroxidationInjuryInducedbyMy-
ocardialIschemiaReperfusioninRats
ZHANGXu-dong, JIANGWei-zhe, JIAOYang, HUANGRen-bin*
(DepartmentofPharmacology, GuangxiMedicalUniversity, GuangxiNanning530021, China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofLongyanshenflavonoids(LF)onlipidperoxidationinjuryinducedbymyo-
cardialischemiareperfusion(MIR)inSpragueDawley(SD)rats.MethodsSixtyhealthySDratswererandomlydividedinto
shamoperation(Sham)group, MIRgroup, normalsaline(NS)group, andthreepretreatedgroups(LFlowdosegroup, LFmedium
dosegroupandLFhighdosegroup), withhalffemaleandhalfmaleratsineachgroup.MIRmodelwasestablishedbyligatingleft
anteriordescendingcoronaryarteryfor30 minfolowedbyreperfusionfor60mininrats.DifferentdosagesofLFwereadministered
30 minbeforeligatingleftanteriordescendingcoronaryarteryineverypretreatedgroup.Bloodwascollectedattheendofreperfu-
sionfordetectingthechangesofaspartateaminotransferase(AST), creatinekinase(CK), creatinekinaseisoenzymeMB(CK-
MB), superoxidedismutase(SOD), glutathioneperoxydase(GSH-Px), malondialdehyde(MDA).Themyocardialinfarctsize
wasmeasuredafterreperfusion.ResultsLFpreconditioningcouldsignificantlydecreasethecontentsofAST, CK, CK-MBand
MDA, andthemyocardialinfarctsize, andincreasetheactivitiesofSODandGSH-Px.ConclusionLFhasasignificantprotec-
tiveefectagainstlipidperoxidationinjuryinducedbymyocardialischemiareperfusioninrats.
Keywords:Longyanshen; Flavonoids; Myocardialischemiareperfusion; Lipidperoxidationinjury
  龙眼参 Longyanshen, LYS原植物经考证为蝶形花科植物疏
叶崖豆 MilettiapulchraKurzvar-laxior(Dunn)Z.Wei的块根 ,是
广西民间广泛应用的壮药。本课题组对龙眼参进行了大量的研
究工作 , 发现龙眼参水提取物具有减轻心肌缺血再灌注性损伤 、
抗羟自由基和氧自由基等 [ 1, 2]作用 ,而龙眼参提取物龙眼参总黄
酮是否具有抗心肌缺血再灌注引起的脂质过氧化损伤作用未见
报道。现将其抗心肌缺血再灌注引起的脂质过氧化损伤作用及
可能的作用机制报道如下。
1 器材与方法
1.1 动物 60只健康 SD大鼠 , 广西医科大学实验动物中心提
供 , 体重(230±20)g,雌雄各半。
1.2 试剂与仪器 龙眼参黄酮 , 广西医科大学药理教研室自行
提取制备。伊文思蓝(Evanblue)和氯化三苯基四氮唑(triphenyl
tetrazoliumchloride, TTC)购自 Sigma公司。 MDA, SOD, GSH-Px
试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 AST, CK, CK-MB购自
英国朗道(RANDOX)公司。动物呼吸机 ALC-V8, 上海奥尔科
特生物科技有限公司产品。日本日立(HITACHI)7170生化分析
仪 , 日本日立公司产品。 TGL-16G-A高速冷冻离心机 , 上海安
亨科学仪器厂产品。 722N可见分光光度计 , 上海精密科学仪器
有限公司。 MS4000U生物信号定量记录分析系统 , 广州市龙飞
达科技有限公司。
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