全 文 ：第 28 卷 第 6 期 吉林工程技术师范学院学报 Vol. 28 No. 6
2012 年 6 月 Journal of Jilin Teachers Institute of Engineering and Technology Jun. 2012
收稿日期:2011-11-09
基金项目:吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(2012)。
作者简介:张 敏(1971-) ，女，吉林长春人，吉林工程技术师范学院食品工程学院助理研究员，主要从事食品科学研究。
蓝靛果总黄酮的超声波提取研究
张 敏，张雁南，刘 刚 ，彭 爽
(吉林工程技术师范学院 食品工程学院，吉林 长春 130052)
［摘 要］采用超声波辅助法提取蓝靛果总黄酮。采用单因素试验探讨提取温度、提取时间、料液比、乙
醇溶液体积分数、提取次数对蓝靛果总黄酮提取量的影响，采用正交试验优化提取工艺。结果表明:蓝
靛果总黄酮的最佳提取工艺条件为提取温度 75 ℃、提取时间 30 min、料液比1∶ 15(g /mL)、乙醇溶液体
积分数 65%、超声波功率 100 W、提取次数 1，此条件下总黄酮提取量为 15． 14mg /g。
［关键词］蓝靛果;总黄酮;超声波辅助提取
［中图分类号］ Q944． 59 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009-9042(2012)06-0077-04
Study on Extracting Technology of Lonicera Edulis Total Flavonoids
ZHANG Min，ZHANG Yan-nan，LIU Gang，PENG Shuang
(College of Food Engineering，Jilin Teachers Institute of Engineering and Technology，Changchun Jilin 130052，China)
Abstract:The total flavonoids of Lonicera edulis were extracted through the ultrasonic-assisted
method． Discussed the influence of extracting temperature，extracting time，solid-liquid ratio，
ethanol concentration，extraction times to total flavonoids extraction rate by single factor experi-
ment，optimized the extraction process by the orthogonal test． The result indicate:optimum ex-
traction conditions are the extracting temperature 75℃，extracting time 30min，solid-liquid ra-
tio 1:15(g /mL) ，ethanol concentration 65%，ultrasonic power 100W，extraction times 1，to-
tal flavonoids is 15． 14mg /g．
Key words:Lonicera edulis;total flavonoids;ultrasonic-assisted extraction
黄酮类化合物广泛存在于植物中，是植物长期
自然选择过程中产生的次级代谢产物，研究表明，黄
酮类化合物具有较强的生物活性，具有抗自由基、抗
氧化、抗癌、抗肿瘤、抗炎抑菌、降血糖以及抗衰老等
作用，广泛应用于医药、食品等领域。
蓝靛果忍冬(Lonicera edulis) ，又名蓝靛果、黑瞎
子果、山茄子、羊奶子等，是忍冬科忍冬属植物，落叶
灌木，在我国，蓝靛果主要分布在东北、华北和西北
的一些地区，其中东北的大、小兴安岭和长白山地区
的野生资源贮量最大。蓝靛果具有较高的营养价值
和药用功能，其主要活性成分之一就是黄酮类化合
物。蓝靛果中富含黄酮类化合物。
黄酮类化合物的提取方法有水提法、有机溶剂
浸提法、超声波法、微波法等。目前关于蓝靛果总黄
酮提取工艺研究的报道很少，本论文采用超声波辅
助提取法对蓝靛果总黄酮的提取工艺进行了研究，
旨在为我国丰富的蓝靛果资源的开发和利用提供一
定的理论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料与试剂
蓝靛果，采自吉林省蛟河长白山地区的野生鲜
果，挑选除杂后速冻贮藏。
无水乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝(均为分
析纯)北京化工厂;芦丁标准品(纯度≥98)中国药
品生物制品检定所。
吉 林 工 程 技 术 师 范 学 院 学 报 2012 年 6 月
1． 2 仪器与设备
SHZ-D(Ⅲ)循环水式多用真空泵 巩义市予华仪
器有限责任公司;AL104 电子天平 梅特勒-托利多仪
器(上海)有限公司;Spectrumlab53 型紫外可见分光
光度计 上海棱光技术有限公司;KQ-100DB 型数控
超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司。
1． 3 方法
1． 3． 1 芦丁标准曲线的绘制
精密称取芦丁对照品 10 mg，置 50 ml 容量瓶
中，用体积分数为 75%的乙醇稀释至刻度，配制成浓
度 0． 2 mg /mL 的标准溶液，闭光保存。精密吸取芦
丁标准溶液 0，1，1． 5，2，2． 5，3，3． 5 mL于 7 只 10 mL
容量瓶中，用 75%乙醇补充至 5 mL，分别加入 5%的
亚硝酸钠溶液 0． 3 mL，摇匀，放置 6 min 后加入 5%
硝酸铝溶液 0． 3 mL，6 min后再加入 4%的氢氧化钠
溶液 4 mL，混均，用 75%的乙醇稀释至刻度，放置
15 min，在波长为 510 nm处测定吸光度，试剂为空白
参比。以吸光度 A(y)为纵坐标、芦丁的含量
(x，g /mL)为横坐标绘制标准曲线，并得出回归方程
y = 0． 011x + 0． 0509，如图 1 所示。
图 1 芦丁标准曲线
1． 3． 2 样品溶液的制备及总黄酮含量的测定
准确称取 5． 00 g 冷冻蓝靛果，置于研钵中研磨
破碎，用一定量的乙醇溶液转移至 250 mL 锥形瓶
中，浸泡 1 h，然后在一定温度和 100 W 超声功率下
提取一定时间，提取 1 次，过滤，用相应浓度的乙醇
定容至 250 mL。精密吸取 1 mL样品液，按标准曲线
的制备操作测定吸光度，根据回归方程计算样品液
中总黄酮的含量，用下面的公式计算总黄酮的提
取量:
黄酮提取量(mg /g)=提取液中黄酮质量(mg)
原产质量(g)
通过单因素试验研究提取温度、提取时间、料液
比、乙醇溶液体积分数和提取次数对黄酮提取量的
影响。在单因素试验的基础上，采用 4 因素 3 水平
进行 L9(3
4)正交试验，优化黄酮的提取工艺。
2 结果与分析
2． 1 影响总黄酮提取量的单因素试验
2． 1． 1 乙醇溶液体积分数对总黄酮提取量的影响
在料液比 1 ∶ 15(g /mL)、超声波功率 100 W、
65℃条件下，分别用 35%、45%、55%、65%、75%、
85%等不同体积分数乙醇溶液提取总黄酮，提取
40 min，提取 1 次，过滤，稀释至 250 mL，在 510 nm
处测定黄酮溶液的吸光度，计算各处理的总黄酮提
取量，如图 2 所示。
图 2 乙醇溶液体积分数对总黄酮提取量的影响
由图 2 可知，乙醇溶液体积分数为 35% ～ 65%
时，随着乙醇溶液体积分数的提高总黄酮提取量增
加，65%的乙醇溶液提取效果最好;随后，随乙醇溶
液体积分数的增加总黄酮提取量下降。说明蓝靛果
总黄酮提取物的极性与体积分数 65%的乙醇溶液相
似。因此乙醇体积分数选择在 65%较为适宜。
2． 1． 2 提取温度对总黄酮提取量的影响
在料液比1∶ 15(g /mL)、超声波功率 100 W、乙醇
溶液体积分数 65%的条件下，分别在 35、45、55、65、
75℃等不同温度下提取 40 min，提取 1 次，过滤，稀
释至 250 mL，在 510 nm 处测定黄酮溶液的吸光度，
计算各处理的总黄酮提取量，如图 3 所示。
由图 3 可知，随着超声温度的提高总黄酮提取
量增加，65 ℃以后总黄酮提取量增加不大。因此提
取温度在 55℃ ～75℃范围内较为适宜。
2． 1． 3 提取时间对总黄酮提取量的影响
在乙 醇 溶 液 体 积 分 数 65%、料 液 比 为
1∶ 15(g /mL)、超声波功率 100 W、65 ℃条件下提取
10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、60 min、
·87·
第 28 卷 第 6 期 张 敏等:蓝靛果总黄酮的超声波提取研究
70 min，提取 1 次，过滤，稀释至 250 mL，在 510 nm
处测定黄酮溶液的吸光度，计算各处理的总黄酮提
取量，如图 4 所示。
图 3 提取温度对总黄酮提取量的影响
图 4 提取时间对总黄酮提取量的影响
从图 4 可知，超声提取时间在 10 min ～ 30 min
之间时，黄酮类化合物的提取量随超声波时间增加
而增大，超声波作用时间在 30 min以上时，黄酮类化
合物的提取量随超声波时间的增加而减小。这可能
是由于超声时间过长使黄酮类化合物的结构发生变
化而被降解，并且随着时间的延长，杂质的含量会增
加，不利于纯化。
2． 1． 4 料液比对总黄酮提取量的影响
在超声波功率 100 W、65 ℃、乙醇溶液体积分数
65%、提取时间 40 min 的条件下，以 1 ∶ 9、1 ∶ 12、
1∶ 15、1∶ 18、1∶ 21 及 1∶ 24(g /mL)等不同料液比提取
总黄酮，提取 1 次，过滤，稀释至 250 mL，在 510 nm
处测定黄酮溶液的吸光度，计算各处理的总黄酮提
取量，如图 5 所示。
由图 5 可知，料液比在 1∶ 9 ～ 1∶ 15 时，总黄酮提
取量随着料液比的减小而增大，当料液比小于 1:15
以后，黄酮提取量有下降趋势。原因可能是随提取
剂用量增加，杂质溶出量增加，对总黄酮的测定有干
扰。从提取效果、减小溶剂用量等方面综合考虑，选
择料液比为 1∶ 12 ～ 1∶ 18(g /mL)较为合理。
图 5 料液比对总黄酮提取量的影响
2． 1． 5 提取次数对黄酮提取量的影响
在乙 醇 溶 液 体 积 分 数 65%、料 液 比 为
1∶ 15(g /mL)、超声波功率 100 W、提取温度 65 ℃、提
取时间 40 min的条件下提取总黄酮，分别提取 1 次、
2 次、3 次，过滤，合并滤液，分别稀释至 250 mL，在
510 nm处测定黄酮溶液的吸光度，计算各处理的总
黄酮提取量，如图 6 所示。
图 6 提取次数对总黄酮提取量的影响
由图 6 可知，提取 1 次基本可以将总黄酮提取
完全，提取 2 次黄酮提取量增加不大，因此，从减少
溶剂用量等方面综合考虑，提取次数确定为 1 次。
2． 2 提取工艺条件的优化
在单因素试验的基础上，采用 L9(3
4)正交试验，
在超声波功率 100 W、提取 1 次条件下，以提取温
度、提取时间、料液比和乙醇溶液体积分数 4 因素 3
水平进行正交试验，优化总黄酮的提取工艺，因素水
平设计见表 1，试验结果见表 2。
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吉 林 工 程 技 术 师 范 学 院 学 报 2012 年 6 月
表 1 正交试验因素水平表
水 平
因素
A温度 /℃
B提取时间
(min)
C料液比
(g /mL)
D乙醇体积分数
(%)
1 55 20 1∶ 12 55
2 65 30 1∶ 15 65
3 75 40 1∶ 18 75
表 2 L9(3
4)正交试验结果
试验号
因 素
A B C D
提取量
(mg /g)
1 1 1 1 1 10． 58
2 1 2 2 2 13． 25
3 1 3 3 3 10． 79
4 2 1 2 3 11． 77
5 2 2 3 1 12． 39
6 2 3 1 2 12． 26
7 3 1 3 2 13． 82
8 3 2 1 3 14． 67
9 3 3 2 1 14． 35
k1 11． 540 12． 340 12． 220 12． 440
k2 12． 140 13． 153 13． 123 13． 393
k3 14． 280 12． 467 12． 617 12． 127
R 2． 740 0． 813 0． 903 1． 267
由极差 R值可知，各因素对蓝靛果黄酮提取率
的影响程度为提取温度 ＞乙醇溶液体积分数 ＞料液
比 ＞提取时间，通过 k 值和 R 值分析可得出最佳提
取条件为 A3B2C2D2，这与正交表中提取率最大的试
样 8 条件不相符，重复 A3B2C2D2 试验，提取量为
15． 14 mg /g。因此蓝靛果总黄酮的最佳提取条件为
超声功率 100 W、提取温度 75 ℃、乙醇溶液体积分
数 65%、料液比 1 ∶ 15(g /mL)、提取时间 30 min、提
取 1 次。
3 结论
本论文采用超声波辅助法提取蓝靛果总黄酮，
通过正交试验得出各因素影响蓝靛果总黄酮提取量
的主次顺序为提取温度 ＞乙醇溶液体积分数 ＞料液
比 ＞提取时间，总黄酮的最佳提取条件为超声功率
100 W、提取温度 75 ℃、乙醇溶液体积分数 65%、料
液比 1∶ 15(g /mL)、提取时间 30 min、提取 1 次，此条
件下蓝靛果总黄酮的提取量为 15． 14 mg /g。该提取
方法操作简单，提取量高。
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［责任编辑 刘福满］
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