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蒲公英口服液的研制及功能性成分的测定



全 文 :蒲公英口服液的研制及功能性成分的测定
王艳萍,曹发昊* ,李 希 (运城学院生命科学系,山西运城 044000)
摘要 [目的]研究蒲公英口服液研制的最佳工艺参数,并对其黄酮和多糖含量进行测定。[方法]以蒲公英汁为主要原料,添加多糖、
黄酮、蔗糖等辅料,研究蒲公英口服液的制作工艺。通过单因素、正交试验研究影响蒲公英口服液的因素,以感官评分标准以及口服液
中黄酮和多糖含量作为指标,确定蒲公英口服液研制的最佳工艺参数。[结果]蒲公英口服液的最佳工艺参数:蒲公英汁 35%,多糖添
加量 6%,黄酮添加量 5%,蔗糖添加量 10%。在此条件下,制作的蒲公英口服液呈天然红棕色,无分层和杂质,液体均匀且无沉淀。蒲
公英口服液总黄酮和多糖的含量分别为 6. 71和 15. 00 mg /mL,以此作为保健功能的参考指标。[结论]在该工艺条件下研制的口服液
基本保留了蒲公英中的营养物质和功能性成分,能充分体现蒲公英的营养价值和药用价值。
关键词 蒲公英;多糖;黄酮;口服液
中图分类号 R944. 1 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2016)15 -127 -03
Development of Dandelion Oral Liquid and Determination of Its Functional Components
WANG Yan-ping,CAO Fa-hao* ,LI Xi (Life Sciences Department,Yuncheng University,Yuncheng,Shanxi 044000)
Abstract [Objective]The aim was to study the optimal technical parameters for the development of dandelion oral liquid,and determine the
content of flavonoids and polysaccharides.[Method]Taking dandelion juice as the main raw material,adding polysaccharides,flavonoids,sugar
syrup and other materials to study the production process of dandelion oral solution. Through single factor,orthogonal experiment,factors influen-
cing dandelion oral liquid were studied. With sensory evaluation criteria and content of flavonoids and polysaccharides as indicators,the optimal
technical parameters were determined.[Result]The results showed that the optimum parameters for dandelion oral liquid were dandelion juice
35%,polysaccharides 6%,flavonoids 5%,sugar 10% . Under this condition,dandelion oral liquid was natural red brown,no stratification and
impurities,homogeneous liquid and no precipitation. The content of polysaccharides and flavonoids was 6. 71 and 15. 00 mg /mL,which can be
used as reference indicators of health care function.[Conclusion]Under the conditions,the oral liquid can keep the nutrients and functional com-
ponents in dandelion,and it can fully realize the nutritional value and medicinal value of dandelion.
Key words Dandelion;Polysaccharides;Flavonoids;Oral liquid
基金项目 运城学院院级项目(CY -2012005)。
作者简介 王艳萍(1980 - ) ,女,河南商丘人,讲师,硕士,从事天然产
物研究与开发、食品分析检测方面的教学和科研。* 通讯作
者,讲师,博士,从事天然活性成分应用研究。
收稿日期 2016-04-06
蒲公英属菊科多年生草本植物,又名婆婆丁、地丁、苦
碟子,含有蒲公英醇、蒲公英素、胆碱、有机酸、菊糖等多种营
养成分,有利尿、缓泻、退黄疸、利胆等功效,同时含有蛋白
质、脂肪、碳水化合物、微量元素及维生素等,营养价值丰富,
可生吃、炒食、做汤,是药食兼用的植物[1 -2]。
目前,世界各国都在研制蒲公英保健品,日本已形成了
蒲公英系列产品,如利用蒲公英根生产的罐装蒲公英茶和蒲
公英糖果、蒲公英糕点、蒲公英饮料等系列保健品,欧美一些
国家已开发出蒲公英酒,德国把切成碎片的蒲公英根和须煮
水当咖啡饮用。我国对蒲公英保健产品的开发研究较少,且
一直以来作为人们普通食用的时令野菜或医用药材,用途较
单一,造成大量蒲公英资源浪费。蒲公英含有十分丰富的营
养和药用成分,是开发绿色天然植物型营养保健品的理想资
源,在众多领域具有广阔的应用前景和商业开发价值,市场
发展潜力巨大[3]。
笔者以蒲公英为原料,采用水提醇沉工艺制成口服液,
采用单因素和正交试验分析法,研究了蒲公英汁添加量、多
糖添加量、黄酮添加量、蔗糖添加量 4 个因素对蒲公英口服
液的影响,用感官评分方法对口服液气味、色泽、滋味、组织
状态进行评分,并对口服液的功能性成分进行测定从而选择
出最佳配方,以期为我国新型保健食品的开发提供理论
依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 原辅料。蒲公英、蔗糖。
1. 1. 2 试剂。盐酸、苯酚、硫酸、氢氧化钠、葡萄糖、芦丁、无
水乙醇、95%乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠,以上试剂均为分析纯。
1. 1. 3 仪器与设备。101A - 1E 电热恒温鼓风干燥箱,
FW100粉碎机,RE52CS 旋转蒸发器,B - 220 恒温水浴锅,
SHZ - D III循环水式多用真空泵,UV759CRT紫外可见分光
光度计,FA124电子天平,KQ500DE数控超声波清洗器,BCD
-216SDX海尔冰箱
1. 2 蒲公英口服液研制的工艺流程 蒲公英口服液研制的
工艺流程见图 1。
图 1 工艺流程
Fig. 1 Technical process
1. 2. 1 操作要点。
1. 2. 1. 1 蒲公英汁的制备方法。取蒲公英粉末 40 g,加水
320 mL,加热微沸1. 5 h,过滤;向滤渣中再加入240 mL水,加
热微沸 1 h,合并滤液,利用旋转蒸发器浓缩液体至 40 mL;加
安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2016,44(15):127 - 129,168 责任编辑 李占东 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.15.045
入 40 mL 95%乙醇[4],静置,过滤;滤液再次减压浓缩至
20 mL,得到蒲公英汁,置于冰箱冷藏备用。
1. 2. 1. 2 减压浓缩。过滤后的汁液再进行适当浓缩,其浓
缩程度以每日服用量 10 ~15 mL为宜。
1. 2. 1. 3 蔗糖浆的制备方法。蒸馏水 80 mL,煮沸,加蔗糖
110 g,搅拌溶解后,继续加热至 100 ℃,趁热用无菌纱布过
滤,添加蒸馏水至 100 mL,搅匀,即得含蔗糖 83%(g /mL)的
蔗糖。
1. 2. 1. 4 蒲公英多糖的提取方法。取蒲公英粉 3 g,放入
60 mL蒸馏水(料液比1∶ 20)中,热水浴热浸5 h,冷却后过滤,
从滤液中精确量取 20 mL,用无水乙醇定容至 100 mL,混匀
后静置1 h;以4 000 r /min离心15 min;沉淀用适量80%乙醇
洗涤 2遍,沉淀用蒸馏水溶解定容至 100 mL,即得样液[5]。
1. 2. 1. 5 蒲公英黄酮的提取方法。取蒲公英粉3 g,加入
40 mL 95%的乙醇,超声波提取 2. 5h,抽滤;滤渣再加入
40 mL 95%的乙醇,超声波提取 2. 5 h,抽滤;合并 2 次滤液,
利用旋转蒸发器减压回收乙醇至滤液 5 ~ 7 mL为止;后将滤
液置于 100 mL 容量瓶中,用 60% 乙醇稀释至刻度,得
样液[6]。
1. 2. 1. 6 混合调配。依次加入多糖、黄酮等溶化后,加入蔗
糖糖浆,以不同配比进行混合调配,通过感官评价确定最佳
配方。
1. 2. 1. 7 均质。在 30 ~ 40 MPa压力下采用胶体磨均质,使
混合调配后的颗粒进一步变小,并形成稳定均匀的分散
体系。
1. 2. 1. 8 杀菌。将封口后的口服液及时置于 75 ℃杀菌锅
中杀菌 30 min。
1. 3 影响口服液感官品质的因素分析
1. 3. 1 感官评分方法。以香气、色泽、滋味、组织状态 4 项
作为评定指标,采用百分制对产品感官质量进行评定,评分
标准见表 1。由 20位评定员对试验产品进行感官评定,评价
试验时,每个人分别对样品进行单独评价,品尝环境在室内
无其他气味条件下进行,以确保结果的精确性。
表 1 蒲公英口服液感官评定标准
Table 1 Sensory evaluation criterion of dandelion oral liquid
项目 Item 标准 Standard 分值 Score
香气 Aroma
(25分)
具有蒲公英的清香味,无异味
无香气,有明显异味
15 ~25
0 ~15
色泽 Colour
(25分)
具有蒲公英原有的红棕色
浅金色或者深红色,颜色过浓
或过淡
15 ~25
0 ~15
滋味 Taste
(25分)
蒲公英味突出,香甜味、无异味
蒲公英味不突出,甜味缺乏或
过重,有涩味,稍有异味
15 ~25
0 ~15
组织状态
Tissue state
(25分)
组织均匀,无浑浊,无沉淀
组织不均匀,浑浊,出现大量沉
淀或分层
15 ~25
0 ~15
1. 3. 2 单因素试验。选取蒲公英汁、多糖、黄酮、蔗糖 4 个
因素,以多糖添加量 5%、黄酮添加量 5%、蔗糖添加量 10%、
蒲公英汁 35%为基础进行影响蒲公英口服液品质的单因素
试验。
1. 3. 3 正交试验。在单因素试验的基础上,采用 L9(3
4)正
交设计,研究蒲公英汁、多糖、黄酮、蔗糖 4 个因素对蒲公英
口服液感官品质的影响,确定最佳配方,因素水平见表 2。
1. 4 功能性成分的测定 总黄酮和多糖的测定均采用分光
光度法。
表 2 正交试验因素水平
Table 2 Factors and levels of orthogonal experiment %
水平
Levels
因素 Factors
蒲公英汁(A)
Dandelion
juice
多糖(B)
Polysacch-
arides
黄酮(C)
Flavonoids
蔗糖(D)
Sucrose
1 25 4 5 7. 5
2 35 5 6 10. 0
3 45 6 7 12. 5
2 结果与分析
2. 1 单因素试验结果
2. 1. 1 蒲公英汁添加量对蒲公英口服液品质的影响。由图
2可知,在多糖、黄酮和蔗糖添加量相同的情况下,当蒲公英
汁添加量为 35%时,口服液呈红棕色透明状,无分层和杂质,
液体均匀且无沉淀,具有蒲公英清香,苦甜适中,口服液的品
质最好。当蒲公英汁添加量低于 35%时,口服液呈浅橙色透
明状,溶液甜味较重,蒲公英味过于清淡,口服液不具有蒲公
英特有的香气。当蒲公英汁添加量高于 35%时,口服液呈深
红色透明状,蒲公英味过于浓烈,口服液口感过于苦涩。
图 2 蒲公英汁添加量对蒲公英口服液品质的影响
Fig. 2 Effects of dandelion juice adding amount on oral liquid
2. 1. 2 多糖添加量对蒲公英口服液品质的影响。由图 3 可
知,在蒲公英汁、黄酮和蔗糖添加量相同的情况下,当多糖添
加量为 6%时,口服液呈红棕色透明状,无分层和杂质,液体均
匀且无沉淀,具有蒲公英清香,苦甜适中,口服液的品质最好。
2. 1. 3 黄酮添加量对蒲公英口服液品质的影响。由图 4 可
知,在蒲公英汁、多糖和蔗糖添加量相同的情况下,当黄酮添
加量为 5%时,口服液呈红棕色透明状,无分层和杂质,液体
均匀且无沉淀,具有蒲公英清香,苦甜适中,口服液的品质最
好。当黄酮添加量低于 5%时,口服液颜色变化不大,但口服
液口感稍甜,且口味较差,无明显的蒲公英香气。当黄酮添
加量高于 5%时,口服液颜色仍变化不大,清苦味浓烈,口感
略苦涩,原因是黄酮类化合物呈苦味[7],使口服液产生苦涩
821 安徽农业科学 2016 年
图 3 多糖添加量对口服液品质的影响
Fig. 3 Effects of polysaccharides adding amount on oral liquid
味,添加黄酮过多时降低口服液的口感。
图 4 黄酮添加量对蒲公英口服液品质的影响
Fig. 4 Effects of flavonoids adding amount on oral liquid
2. 1. 4 蔗糖添加量对蒲公英口服液品质的影响。由图 5 可
知,在蒲公英汁、多糖和黄酮添加量相同的情况下,当蔗糖添
加量为 10%时,口服液呈红棕色透明状,无分层和杂质,液体
均匀且无沉淀,具有蒲公英清香,苦甜适中,口服液品质最
好。当蔗糖添加量低于 10%时,口服液呈浅黄色透明状,苦
味浓重,涩味浓重,口服液品质明显下降。当蔗糖添加量高
于 10%时,口服液呈深红色透明状,口感过甜,而添加蔗糖过
多时,蒲公英苦香味完全被甜味掩盖,使口服液失去蒲公英
原有的风味。
图 5 蔗糖添加量对口服液品质的影响
Fig. 5 Effects of surcose adding amount on oral liquid
2. 2 正交试验结果分析 由表 3 可知,影响因素由大到小
依次为 A、B、C、D,即蒲公英汁添加量对口服液品质影响最
大,其次是多糖和黄酮的添加量,蔗糖添加量影响最小。最
优组合为 A2B3C1D2,实际评分最高 89分,单因素分析最优组
合为 A2B3C1D2,两者结果相符,得到的口服液组织状态均
匀,口感柔和,苦甜适口。因此,口服液最佳配方为蒲公英汁
35%,多糖含量 6%,黄酮含量 5%,蔗糖含量 10%。
2. 3 蒲公英口服液多糖和总黄酮含量 通过分光光度法测
定,口服液中多糖含量为 15. 00 mg /mL,总黄酮含量为
6. 71 mg /mL。
2. 4 感官指标评定结果 色泽:红棕色均匀液体,晶莹透
明;气味:具有蒲公英特有的清香,香气柔和;滋味:苦甜适
中,微涩,无不良滋味;组织状态:组织均匀,无浑浊;杂质:无
肉眼可见的杂质。
表 3 正交试验 L9(3
4)结果
Table 3 L9(3
4)orthogonal test result
试验号
Test No.
因素 Factors
A B C D
感官得分
Sensory
coring∥分
1 1 1 1 1 74. 00
2 1 2 2 2 74. 00
3 1 3 3 3 76. 00
4 2 1 2 3 82. 00
5 2 2 3 1 85. 00
6 2 3 1 2 89. 00
7 3 1 3 2 77. 00
8 3 2 1 3 76. 00
9 3 3 2 1 78. 00
k1 74. 67 77. 67 79. 67 79. 00
k2 85. 33 79. 00 78. 00 80. 00
k3 77. 00 80. 67 79. 33 78. 67
R 10. 66 3. 00 1. 67 1. 33
3 结论
(1)采用水提取和醇沉淀法制作口服液,多羟基黄酮和
多糖可溶于热水。用乙醇沉淀,虽然多糖含量可能会降低,
但提高和增强了口服液的稳定性,降低了在贮存期间产生沉
淀[8]的可能。
(2)在多糖含量测定中,为了防止和避免糖浆对试验结
果的干扰,仅测定加糖浆前口服液的多糖含量[8],然后按照
稀释倍数换算出口服液中多糖的含量。
(3)该研究结果表明,蒲公英口服液的最佳工艺参数:蒲
公英汁 35%,多糖添加量 6%,黄酮添加量 5%,蔗糖添加量
10%。
(4)该研究口服液中多糖和黄酮含量分别为 15. 00 和
6. 71 mg /mL,接近于蒲公英提取物中 2项成分的含量[9]。相
比于以往的传统工艺,在该工艺条件下研制的口服液基本保
留了蒲公英中的营养物质和功能性成分。
参考文献
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(下转第 168页)
92144卷 15期 王艳萍等 蒲公英口服液的研制及功能性成分的测定
由表 2可知,3个种源朝鲜黄杨种子从播种到发芽一般
需要 20余 d,丹东种源最少(22 d) ,沈阳种源最多(27 d) ,大
连种源居中(24 d)。3 个种源朝鲜黄杨种子在千粒重、发芽
率上存在不同程度差异,沈阳种源千粒重最小(18. 9 g) ,发
芽率为 76%;大连种源千粒重最大(22. 3 g) ,发芽率为 85%;
丹东种源千粒重和发芽率分别为20. 6 g和82%,可见千粒重
越大,发芽率越高。在当年高和当年地径上表现也存在差
异。就当年高来看,沈阳种源幼苗表现最好(3. 04 cm) ,丹东
次之(2. 70 cm) ,大连最差(2. 19 cm) ;就当年地径来看,沈阳
种源分别大于丹东和大连种源 0. 020、0. 032 cm。
表 2 不同种源朝鲜黄杨播种指标统计
Table 2 Statistics of B. microphylla seed sowing index with different provenances
种源地
Provenances
播种日期
Sowing date
月 -日
发芽日期
Germination
date∥月 -日
千粒重
1 000-grain
weight∥g
发芽率
Germination
rate∥%
当年高
Plant height
cm
当年地径
Ground diameter
cm
沈阳 Shenyang 08 -20 09 -15 18. 9 76 3. 04 0. 104
丹东 Dandong 08 -20 09 -10 20. 6 82 2. 70 0. 084
大连 Dalian 08 -20 09 -12 22. 3 85 2. 19 0. 072
方差分析和 LSD 多重比较结果表明(表 3) ,在 0. 05 显
著性水平下,3个种源朝鲜黄杨幼苗在当年高和当年地径上
差异显著。从当年高和当年地径来看,沈阳种源最好,丹东
次之,大连最差。
表 3 播种试验多重比较结果
Table 3 Multiple comparison of sowing test
指标
Index
(I)种源地
Provenances
(J)种源地
Provenances
平均值差
Mean difference
标准误
Standard error Sig.
当年高 Plant height 沈阳 丹东 . 340 5* . 074 83 . 000
大连 . 846 0* . 074 83 . 000
丹东 沈阳 - . 340 5* . 074 83 . 000
大连 . 505 5* . 074 83 . 000
大连 沈阳 - . 846 0* . 074 83 . 000
丹东 - . 505 5* . 074 83 . 000
当年地径 Ground 沈阳 丹东 . 020 0* . 004 56 . 000
diameter 大连 . 031 4* . 004 56 . 000
丹东 沈阳 - . 020 0* . 004 56 . 000
大连 . 011 4* . 004 56 . 015
大连 沈阳 - . 031 4* . 004 56 . 000
丹东 - . 011 4* . 004 56 . 015
注:* 表示在 0. 05水平下差异显著。
Note:* indicated significant differences at 0. 05 level.
3 小结
(1)3个种源在千粒重、发芽率上存在不同程度差异,
千粒重越大,发芽率越高。沈阳种源千粒重最小(18. 9 g)、
发芽率为 76%,大连种源千粒重最大(22. 3 g)、发芽率为
85%。
(2)3个种源幼苗当年高和当年地径差异显著(P <
0. 05)。从当年高和当年地径来看,沈阳种源最好,丹东次之,
大连最差。
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49 -52.
(上接第 129 页)
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