全 文 ：　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
2004　Vol.16　No.2 NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 　　　　　　　　　　
　
　
　
　
　　收稿日期:2003-09-10　　　接受日期:2003-11-17
　　基金项目:云南省科委应用基础研究基金(98C 067M)
　＊通讯作者 Tel:86-871-6955490;E-mail:qinjian3337@sina.com
三种鼠尾草注射液对大鼠心肌缺血
再灌注损伤的保护作用
秦　剑1＊　李惠兰1 　张荣平2 　胡建林2
(1.昆明医学院药理教研室　昆明　650031;2.昆明医学院药学院植化室　昆明　650031)
摘　要　本文研究了云南产鼠尾草属药物滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾对急性心肌缺血再灌注损伤的保
护作用 , 并与丹参进行对比其疗效的相似性。结扎大鼠冠脉左前降支 , 30 分钟后剪断结扎线造成心肌缺血再
灌注模型 , 经股静脉给药。测定再灌注 60 分钟后血清中 CK 、LDH 、SOD、GSH-Px 和 MDA 含量。结果滇丹
参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾可以显著降低心肌缺血再灌注后血清 CK 、LDH 和 M DA 含量 ,升高血清 SOD和
GSH-Px 活力(P<0.01 , P<0.05),与丹参有相似的抗心肌缺血再灌注损伤作用。
关键词　滇丹参;甘西鼠尾;褐毛甘西鼠尾;心肌缺血;再灌注损伤
RESEARCH EFFECTS OF SALVIA YUNNANENSIS C.H.WRIGHT ,
SALVIA PRZERWALSKII MAXIM , SALVIA PRZEWALSKII MAXIM
VAR MANDARINORUM STIB DURING ACUTE MYOCARDIAL
ISCHEMIA AND REPERFUSION INJURY IN RATS
QIN Jian1＊ ,LI Hui-lan1 ,ZHANG Rong-ping 2 ,HU Jian-lin2
(1.Department of phyarmacology of Kunming Medical College , Kunming　650031 , China;
2.Faculty of Pharnacy of Kunming Medical College , Kunming　650031 , China)
Abstract　Objective:To observe the anti-myocardial ischemia reperfusion injury ef fects in rats of
three herbal drugs:Salvia yunnanensis C.H.Wright , Salv ia przerwalski i Maxim and Salvia
przewalsk Max im var mandarinorum st ib compared w ith that of Salv ia mi lt iorhhiza
Bunge.Methods:We made the model of myocardia ischemia/ reperfusion injury in rats by ligating
the LAD for 30 minutes and follow ed reperfusion 60 minutes.After that , the concentrations of
CK , LDH , SOD , GSH-Px and MDA in rats serum were tested.Results:All the t reatment
groups in doseage of 4 g/kg can decrease the concentration of CK , LDH and MDA , and can
heighten the concentration of SOD and GSH-Px (P <0.01 , P<0.05)in serum af ter acute my-
ocardial ischemia/ reperfusion.Conclusion: The three herbal drugs , Salvia yunnanensis
C.H.Wright , Salv ia przerwalskii Maxim , Salvia przewalsk ii Maxim var mandarinorum st ib
have the cardioprotective effects in myocardial ischemia/ reperfusion in rat hearts , just as Salvia
m il tiorhhiza Bunge has.
Key words　Salvia yunnanensis C.H.Wright;Salvia przerwalski i Max im ;Salvia przewalskii
Maxim var mandarinorum stib;myocardial ischemia;reperfusion injury ;hemodynamics
　　中药丹参系唇形科(Labiatae)鼠尾草属(Salvi-
a)植物丹参 Salvia mi ltiorrhiza Bunge 的干燥根及
根茎 ,具有祛瘀止痛 、活血通经 、清心除烦 ,凉血消肿
和排脓生肌的作用 。
143
DOI :10.16333/j.1001-6880.2004.02.014
现代研究表明:丹参药理作用主要表现在:心血
管系统 、消化系统 、血液系统 、免疫系统及神经系统 ,
并具有抗菌和抗肿瘤作用。丹参 、滇丹参 、甘西鼠
尾 、褐毛甘西鼠尾中均发现了二萜醌类化合物 。此
类化合物具有抗菌消炎 、扩张冠脉 、抗血小板聚集等
作用 。近来又发现丹参酮 ⅡA有消除超氧自由基和
羟自由基的作用 ,并具有较强的消除脂质自由基的
能力[ 1 , 2] 。目前《中华人民共和国药典》中规定中药
丹参的 唯一来源是丹 参(Salvia mi ltiorrhiza
Bunge),而民间广泛应用的丹参代用品有滇丹参 、甘
西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾。有研究表明:滇丹参 、甘西
鼠尾 、褐毛甘西鼠尾注射液在体内 、体外均能显著抑
制ADP 、血小板激活因子(PAF)、花生四烯酸(AA)
诱导的兔血小板聚集;增加豚鼠离体心脏冠脉流量;
减轻心肌缺血时超微结构的病理变化和心肌细胞凋
亡;能对抗冠脉结扎所引起的红细胞压积升高 ,加快
血流速度 ,增加毛细血管开放数目 ,对血液流变学异
常有改善作用[ 5 , 6 , 7] 。本文研究三种鼠尾草注射液
对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用 。
1　材料
1.1　药品 　丹参注射液:生药含量 1.5 g/mL ,批
号:000604 ,上海制药厂;滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘
西鼠尾注射液 ,生药 2.0 g/mL 由昆明医学院药学
院植物化学教研室提供。
1.2　试剂　MDA试剂盒 ,批号:20020305 ,南京建
成生物工程研究所;SOD试剂盒 ,批号:20020315 ,
南京建成生物工程研究所;GSH-Px 试剂盒 ,批号:
20020318 ,南京建成生物工程研究所;CK -NAC 试
剂盒 ,批号:000202 ,北京中生生物工程高科技公司;
LDH 试剂盒 ,批号:000925 ,北京中生生物工程高科
技公司。
1.3　仪器　岛津 Cl770 临床生化分析仪;LD4-2A
型低速离心机;江湾 Ⅰ型微型人工呼吸机。
1.4　实验动物　Sprague-Daw ley(SD)大鼠 ,体重
250 ～ 300 g ,雌雄兼用。
2　实验方法
健康 SD大鼠 ,体重 250 ～ 300 g ,雌雄兼用 ,110
只 ,随机分为 11 组。生理盐水组 、丹参注射液组和
用药组 ,每组 10只。受试药物高 、中 、低剂量分别为
4 g/kg 、2 g/kg 和 1 g/kg 。在冠脉结扎前 5 min经
股静脉给总药量的三分之二 ,在再灌注前 5 min经
股静脉给剩余药量 。SD大鼠用 25%乌拉坦(1 g/kg
体重)腹腔麻醉后 ,背位固定在手术台上。气管插管
并连接呼吸机进行人工呼吸(20 mL , 25次/min),在
4 、5 肋间隙开胸 ,暴露心脏 ,剪开心包膜 ,轻压将心
脏挤出胸腔 ,以冠状动脉主干为标志 ,左心耳根部下
方 2 mm 处 ,在冠状动脉左前降支(LAD)表面放置
一小硅胶管连同冠脉用无创伤缝合线一起结扎 ,造
成左心室室壁缺血。30 min后 ,把结扎线连同硅胶
管一起剪断 ,使冠状动脉重新灌注。再灌注 60 min
后 ,自大鼠颈动脉取血 ,3000 r/min离心 10分钟 ,分
离血清 ,测定血清中的 CK 、LDH 、SOD 、GSH-Px 和
MDA 含量[ 3 , 4] 。
3　结果
实验表明:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾高 、
中 、低剂量组均能显著降低大鼠心肌缺血再灌注后
血清中 CK 、LDH 、和 MDA 的含量(P <0.05 , P <
0.01);同时使血清中 SOD 和 GSH-Px 的含量升高
(P<0.05 , P<0.01)。说明:滇丹参 、甘西鼠尾 、褐
毛甘西鼠尾可以减少心肌缺血引起的 CK 和 LDH
释放 ,可以提高内源性抗氧化剂 SOD和 GSH-Px 的
活性 ,减少脂质过氧化产物 MDA 的生成。而且滇
丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾高剂量组与丹参具有
相同或略优于丹参的对心肌缺血再灌注损伤的保护
作用 ,见表 1。
4　讨论
心肌缺血再灌注损伤的主要原因是氧自由基的
大量生成 ,组织内抗氧化能力下降 ,氧自由基与细胞
膜上的多聚不饱和脂肪酸反应 ,发生脂质过氧化 ,其
过氧化产物 MDA 对细胞膜有很强的破坏作用 ,使
其流动性和通透性发生变化 ,细胞内 、外离子分布异
常 ,细胞内 Ca2+严重超负荷 ,使线粒体合成三磷酸
腺苷(ATP)的量明显减少 ,进而抑制心功能 ,最终导
致心肌细胞从可逆性损伤发展为细胞死亡 ,大量的
CK 、LDH 从坏死的心肌细胞中漏出 。SOD对机体
的氧化和抗氧化平衡起着重要的作用 ,并具有清除
超氧阴离子自由基(O-2 )保护细胞免受损伤的功能。
GSH-Px 是体内广泛存在的一种重要的催化过氧化
物分解的酶 ,它在细胞内能消除有害的过氧化代谢
产物 ,阻断脂质过氧化链锁反应 ,从而起到保护细胞
144　　　　　　　　　 天然产物研究与开发 2004　Vol.16　No.2
表 1　滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾注射液对心肌缺血再灌注后血清 CK 、LDH 、SOD、GSH-Px 和 MDA的影响
Table 1　CK , LDH , SOD and GSH-Px in rats serum w ere tested as fo llows , after the three injections w ere given during ischemia/
reperfussion
组别
Group
剂量Dose
(g/ kg)
CK　
(u/mL)　
LDH
(u/mL)
SOD
(u/mL)
GSH-Px
(u/mL)
MDA
(nmol/mL)
NS - 3156.9±159.8　 1065.2±143.0 105.6±10.0 560.7±33.1　 6.8±0.6
SM 4 2217.0±108.6＊＊ 725.7±106.6＊＊ 200.1±8.8＊＊ 670.3±22.8＊＊ 3.5±0.6＊＊
SY 1 2884.1±187.0＊＊ 910.1±153.4＊＊ 124.4±11.7＊＊ 619.6±25.2＊ 5.4±0.7＊＊
2 2460.0±136.6＊＊ 786.8±134.7＊＊ 145.4±13.2＊＊ 670.1±24.4＊＊ 4.8±0.5＊＊
4 2095.3±112.6＊＊# 614.7±85.8＊＊#　196.6±14.5＊＊ 714.3±11.4＊＊## 3.1±0.6＊＊
SP 1 2556.9±84.5＊＊ 921.6±82.5＊＊　 125.8±9.6＊＊ 597.4±20.9 6.0±0.4＊＊
2 2196.3±101.3＊＊ 708.7±130.7＊＊ 163.3±8.2＊＊ 650.9±20.8＊＊ 4.9±0.7＊＊
4 1962.1±134.2＊＊## 528.9±108.5＊＊## 221.5±5.2＊＊## 735.1±25.5＊＊## 3.2±0.7＊＊
SPM 1 2678.5±103.1＊＊ 863.8±136.8＊＊ 131.4±7.6＊＊ 614.8±20.7＊ 6.4±0.5
2 2312.9±87.3＊＊ 649.9±69.6＊＊ 178.1±10.7＊＊ 691.4±13.8＊＊ 4.9±0.6＊＊
4 2104.5±118.6＊＊## 530.8±89.3＊＊## 209.9±5.7＊＊# 726.8±16.6＊＊## 3.5±0.7＊＊
SM:丹参注射液(Injection of Sa lvia mi lt ior rhiza Bunge);
SY:滇丹参注射液(Injection of Salvia yunnanensis C.H.Wright);
SP:甘西鼠尾注射液(Inject ion of Salvia p rzerwa lskii Maxim);SPM:褐毛甘西鼠尾注射液(Inject ion of Salvia przewa lskii Max-
im.Var.mandarinorum st ib.)
Compared wi th NS g roup(as cont rol):＊P<0.05 , ＊＊P <0.01;Compared w ith SM group:#P <0.05 , ##P<0.01与 NS 组比较:＊P <0.05 , ＊＊
P <0.01;与丹参注射液组比较:#P<0.05 , ##P<0.01
膜和细胞功能完整性的作用。本试验采用了在体心
肌缺血再灌注模型来观察丹参 、滇丹参 、甘西鼠尾和
褐毛甘西鼠尾对心肌缺血再灌注损伤的作用 。实验
表明:丹参 、滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾可以降
低大鼠缺血 30分钟再灌注 60分钟后血清中 CK 、
LDH和 MDA 的含量;提高 SOD 和 GSH-Px 的活
力。丹参 、滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾均能对
抗心肌细胞缺血引起的 CK和 LDH 的升高;能提高
内源性抗氧化剂 SOD和 GSH-Px 的活力 ,减少脂质
过氧化产物 MDA 的生成 。而且在滇丹参 、甘西鼠
尾 、褐毛甘西鼠尾高剂量下 ,降低血清 CK 、LDH 和
MDA ,升高血清 SOD 和 GSH-Px 的能力较丹参略
强。说明:四种药物通均能抑制再灌注过程中自由
基的生成和提高机体内源性抗氧化系统的活性 ,发
挥对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。
参考文献
1　 肖小河 ,方清茂 , 夏文娟等.药用鼠尾草属数值分类与丹
参药材地道性.植物资源与环境 , 1997 , 6(2):17-21
2　 薛明 ,史彦斌 ,崔颖等.甘西鼠尾草化学成分的研究.天
然产物研究与开发 , 1999 , 12(6):27-31
3　 徐叔云 , 卞如濂 ,陈修.药理实验方法学 , 第三版.北京:
人民卫生出版社 , 2002.976-1059
4　 邓汉武.大鼠心肌缺血再灌注损伤实验法.中国药理学
通报 , 1989 , 5(5):317-320
5　 闫彩珍 , 李惠兰 ,张荣平等.滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西
鼠尾对离体豚鼠心脏的影响.昆明医学院学报 , 2002 , 23
(1):14-17
6　 闫彩珍.滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾药效学研究.
昆明医学院硕士研究生学位论文 , 2001
7　 何洪静.滇丹参 、甘西鼠尾 、褐毛甘西鼠尾注射液对大鼠
血液流变性 、血栓形成及微循环的影响.昆明医学院硕
士研究生学位论文 , 2002
1452004　Vol.16　No.2 秦剑等:三种鼠尾草注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用