全 文 :HPLC测定蒲公英中槲皮素含量的研究
肖奇志 (贵阳护理职业学院 ,贵州贵阳 550003)
摘要 [目的 ]建立蒲公英中槲皮素含量的测定方法。 [方法]采用高效液相色谱法 , AgilentC18柱(150.0mm×4.6mm, 5.0μm), 流动相为甲醇 -乙腈(63∶26),紫外检测波长为 370 nm。 [结果]槲皮素在 0.1~ 1.0mg/ml范围内线性关系良好 ,平均回收率为 98.37%。
[结论]该方法分离好、快速 、重复性好 ,可作为蒲公英的质量控制方法。
关键词 蒲公英;槲皮素;高效液相色谱法
中图分类号 S682.1+1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)30-16871-02
DeterminationofQuercetinContentinDandelionbyHPLC
XIAOQi-zhi (GuiyangNursingVocationalCollege, Guiyang, Guizhou550030)
Abstract [ Objective] Theresearchaimedtoestablishamethodfordeterminingthecontentofquercetinindandelion.[ Method] Thecontent
ofquercetinindandelionwasdeterminedbyHPLC.TheanalysiswasperformedonAgilentC18 column(150.0mm×4.6mm, 5.0μm), with
themixtureofmethanolandacetonitrile(63∶26)asmobilephase.Thedetectionwavelengthwas370nm.[ Result] Thelinearrangeofquer-
cetinwas0.1-1.0mg/ml.Theaveragerecoverywas98.37%.[ Conclusion] Themethodissimple, sensitiveandaccurateforHPLCtocon-
trolthequalityofdandelion.
Keywords Dandelion;Quercetin;HPLC
蒲公英为菊科植物蒲公英(TaraxacummongolicumHand-
Mazz.)的干燥全草 ,具有清热解毒 、抗炎功效。据报道 ,蒲公
英含有丰富的化学成分 ,包括胡萝卜素类 、三萜类 、甾醇类 、
黄酮类等 [ 1] 。这些都与蒲公英的药理作用关系密切 ,具有一
定的开发价值 。为此 ,笔者对蒲公英中槲皮素含量进行了
探讨。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药 Agilent110高效液相色谱仪 , G2170AA
色谱工作站(美国安捷伦公司);槲皮素标准品 (批号:
1187190910,纯度≥98%)由北京药品生物制品检定所提供;
甲醇和乙腈色谱纯 ,其余试剂均为分析纯;蒲公英购自张仲
景大药房 ,经贵州大学专家鉴定为药用蒲公英(T.oftcinale
F.H.Wigg.)。
1.2 溶液的制备
1.2.1 供试品溶液。秤取干燥过 30目蒲公英 5 g,置于 100
ml锥形瓶中 ,加甲醇溶解至刻度 ,超声辅助 2 h,提取 2次 ,过
滤 ,合并提取液 ,浓缩定容到 50 ml容量瓶中 ,即得供试品溶
液 , 2~ 3 ℃保存 ,备用。
1.2.2 对照品溶液。精密称取槲皮素标准品 0.01 g,置 10
ml容量瓶中 ,加甲醇溶解至刻度 ,即得对照品溶液 。
2 结果与分析
2.1 色谱条件 色谱柱:AgilentC18柱(150.0 mm×4.6
mm, 5.0 μm),流动相为甲醇 -乙腈(63∶26),检测波长 370
nm,流速 1.0 ml/min,柱温 30 ℃,进样量 10 μl。理论塔版数
按槲皮素计算应不低于 3 000。该色谱条件下对照品和供试
品 HPLC色谱见图 1。
注:A.槲皮素对照品;B.供试品;1-槲皮素。
A.referencesubstanceofquercetin;B.sample;1-quercetin.
图 1 高效液相色谱
Fig.1 HPLCchromatograms
2.2 线性范围试验 分别吸取槲皮素对照品溶液 1、4、6、
8、10 ml于 10 ml容量瓶中 ,甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,按照上述
色谱条件测定 ,以峰面积积分值为纵坐标 ,对照品进样量为
横坐标绘制标准曲线 ,计算得回归方程:Y=83 257X+19 686
(r=0.999 7),表明槲皮素在 0.1~ 1.0 mg/ml范围内呈良好
作者简介 肖奇志(1973-),女 ,贵州贵阳人 ,讲师 ,从事化学教学及相
关研究。
收稿日期 2010-08-02
的线性关系。
2.3 稳定性试验 取供试品溶液 10 μl,分别于 5、10、15、
20、24 h时进样 ,测定峰面积 ,计算 RSD为 1.17%,表明样品
在 24h内稳定。
2.4 精密度试验 精密吸取槲皮素对照品溶液 10μl,注入
液相色谱仪 ,重复进样 5次 , 槲皮素峰面积 RSD为 1.21%,
表明精密度良好 。
2.5 重现性试验 精密取样品 2g,测定 5份 ,按 “1.2.1”制
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(30):16871-16872 责任编辑 刘月娟 责任校对 李岩DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.30.142
备供试品溶液 ,进样 10 μl,按照色谱条件测定槲皮素含量 。
结果表明 ,蒲公英中槲皮素平均含量为 0.876 mg/g, RSD为
1.21%,重现性良好 。
2.6 加样回收率试验 取已知含量的蒲公英(0.876mg/g)
约 2g于 25 ml锥形瓶中 ,共 6份。每份精确加入槲皮素对
照品溶液适量(1.5mg),按 “1.2.1”制备供试品溶液 ,并按
色谱条件测定 ,计算回收率。结果表明 ,平均回收率为
98.37%, RSD为 1.12%。
2.7 样品测定 按 “1.2.1”制备样品 ,在色谱条件下测定
样品中槲皮素含量 ,平行测定 3次。结果表明 ,蒲公英中槲
皮素的平均含量为 0.875mg/g, RSD为 1.21%。
3 讨论
3.1 检测波长的选择 应用二极管阵列检测器在 190 ~
400nm对槲皮素进行扫描 ,在 370 nm有最大吸收 ,故检测波
长选择为 370nm。
3 2 流动相的选择 试验过程中考察了甲醇 -乙腈不同比
例的流动相 ,并参考了其他方法 ,即流动相为磷酸 (0.4%):
甲醇(5∶6, V∶V)[ 2] ,最终确定流动相甲醇∶乙腈(63∶26, V∶V),
分离情况良好。
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定 ,应从中药药理学角度出发 ,加强微量元素与机理方面的
相关性研究。 ②从不同产地 、不同部位 、不同生长年限和不
同炮制方式对微量元素含量的影响进行研究 ,使龙胆资源得
以充分利用。③对中药龙胆中微量元素形态与药理 、毒理等
方面深入研究 ,为开发新的保肝和消炎利胆药物提供理论依
据 。④对微量元素与药物成分 、功效之间的协同和拮抗作用
展开研究。⑤加强微量元素与植物生理病害 、生长势等方面
的研究 ,为龙胆育种 、规范化高产栽培技术提供基础资料。
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16872 安徽农业科学 2010年