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反相高效液相色谱法测定香青兰中槲皮素的含量



全 文 :民 族 医 药
EthnomedicineandEthnopharmacy
作者简介:周明明 (1981-), 女 , 新疆喀什市人 , 药师 , 本科 , 研究方向为中药质量控制。
反相高效液相色谱法测定香青兰中槲皮素的含量
周明明 1 葛 亮 2
1.新疆维吾尔自治区人民医院药剂科 , 新疆 乌鲁木齐 830001; 2.新疆名医名方与特色方剂学重点实验室 , 新疆 乌鲁木齐 830011
【摘 要】 目的:建立测定香青兰中槲皮素含量的方法。方法:色谱柱为 KromasilC18 (4.6×150mm, 5um), 流动相为乙腈 -5%甲酸
(31:69), 检测波长:280nm, 流速:1.0mL· min-1 , 柱温:30℃。结果:香青兰中槲皮素的线性关系良好, 其线性范围为 0.02mg· mL-1 ~
0.10mg· mL-1 (r=0.9990)。其回收率为 97.2% (RSD=1.2%)。结论:所建方法准确、 简便 , 为科学评价香青兰的质量提供了依据。
【关键词】 香青兰;高效液相色谱法;槲皮素
【中图分类号】R284.1    【文献标识码】A     【文章编号】 1007-8517 (2010) 17-0001-02
DeterminationofQuercetincontentinDracoephalummololarieaLbyRP-HPLC
ZHOUMing-ming1 , GELiang2
(1.XinjiangautonomouspeopleHospital, Urumqi, 830001, China;
2.XinjiangKeyLaboratoryofFamousPrescriptionandScienceofFormulas, Urumqi, 830011, China)
Abstract:Objective:ToestablishamethodfordeterminationofthecontentofquercetininDracoephalummololarieaL.
Metheds:KromasilC18 (4.6×150mm, 5um)wereused, Acetonitrile-5% Formicacid(31:69)wasservedasmobilephase,
andflowratewas1.0ml· min-1 , wavelengthfordeterminewas280 nm.Results:Thecalibrationcurveswerelinearintherangeof
0.02mg· mL-1 ~ 0.10mg· mL-1 (r=0.9990), TheaveragerecoveryrateswiththeRSDwere97.2 % (1.2%), respectively.
Conclusion:Themethodisaccurate, andsuitableforthedeterminationofthecontentofquercetininDracoephalummololarieaL.The
methodcanbeadoptedforqualitycontrolofDracoephalummololarieaL.
Keywords:DracoephalummololarieaL;HPLC;Quercetin
  香青兰为唇形科植物 DracocephalummoldavicalL.的干
燥根。夏季盛花期采割 , 阴干 , 系维吾尔族习用药材。主
要分布于华北 、 东北 、 西北等省区 , 新疆以南疆和东疆栽
培较多 [ 1] 。维医认为香青兰具有益心护脑 , 保肝健胃 , 开
通脑中闭塞之功 , 用于心悸心痛 , 头晕脑胀 , 反应迟钝 ,
感觉低下 , 思维不敏 , 胃虚肝弱 , 机体自然力下降。 中医
认为其具有泻火 、 清热 、 止痛 、 止血等作用 , 用于气管炎 、
感冒 、 头痛 、 咽痛 、 黄疸 、 吐血等 [ 2-4] 。香青兰主要含有
黄酮类 、 挥发油 、 萜类 、 氨基酸 、 微量元素 、 多糖等成
分 [ 5] 。香青兰具有缓解心绞痛症状 , 改善心肌缺血 , 降低
血粘度和血小板聚集率 , 抗脂质过氧化损伤及轻度降低胆
固醇作用 [ 6] 。我们在参考诸多文献及实验研究的基础上建
立了香青兰中槲皮素的含量测定方法 , 其样品处理简单 、
重现性好 , 采用灵敏度高的高效液相色谱法 , 为维吾尔药
材香青兰的质量标准建立提供参考依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
岛津半制备高效液相色谱仪 (LC-6AD高压泵 , SPD
-20A型紫外检测器 , CBM-20A色谱工作站)。
1.2 样品与试剂
槲皮素对照品 (中国药品生物制品检定所)批号 100081
-200406, 供含量测定用;乙腈为色谱纯;水为超纯水;其
它试剂均为分析纯。香青兰采自吉木萨尔县二宫乡维吾尔药
种植基地 , 经自治区中医院李永和主任药师鉴定为唇形科植
物香青兰 DracocephalummoldavicalL.的干燥根。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:KromasilC
18
(4.6×150mm, 5um), 流动相:
乙腈 -5%甲酸 (31∶69), 检测波长:280nm, 流速:
1.0mL· min-1 , 柱温:30℃。进样量:10uL, 槲皮素与其
他组分基线分离 , R>1.5。以槲皮素峰计算柱效 , 其理论
塔板数应≥3000, 拖尾因子为 0.98。
2.2 对照品溶液制备
精密称取槲皮素对照品适量 , 加甲醇制成 0.1mg·
mL-1槲皮素对照品溶液。
2.3 样品溶液制备
称取香青兰粗粉约 5.0g, 精密称定 , 加水 100mL, 回
流提取 3次 , 每次提取 1.0h, 过滤 , 合并滤液 , 滤液浓缩 ,
减压干燥成干浸膏。加甲醇适量 , 定容至 10mL量瓶中 , 摇
匀 , 用 0.45um微孔滤膜过 , 即得。采用高效液相色谱仪测
定香青兰中槲皮素的含量 , 色谱图如下。
2.4 线性关系考察
分别精密吸取槲皮素对照品溶液 (0.1mg· mL-1) 2,
4, 6, 8, 10uL, 分别进样 , 以浓度 (x)为横坐标 , 峰面
积 (y)为纵坐标 , 进行线性回归。经回归分析 , 槲皮素在
0.02mg· mL-1 ~ 0.10mg· mL-1内有良好的线性关系 , 回归
方程为 Y=22935140x-82226r=0.9990。
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   中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy
    民 族 医 药
EthnomedicineandEthnopharmacy
藏药外敷治疗压疮的效果观察
张 措 尕藏本
青海省藏医院 , 青海 西宁  810000
【关键词】 藏药;外敷治疗;压疮
【中图分类号】R758.73+3    【文献标识码】A     【文章编号】 1007-8517 (2010) 17-0002-01
  压疮是身体局部组织长期受压 , 血液循环障碍 , 组织
营养缺乏 , 致使皮肤失去正常功能 , 而引起的组织破坏和
坏死。压疮是临床常见的并发症 , 一旦发生压疮 , 不仅给
患者带来痛苦 , 而且对原发病的治愈也非常不利 , 延长康
复时间 , 严重时可因继发感染引起败血症而危及生命。我
院自 2002年以来 , 采用麝香 、 熊胆和藏红花外敷治疗压疮
取得满意疗效 , 现报告如下。
1 一般资料
采用藏药外敷治疗压疮患者 12例 , 其中男性 7例 , 女
性 5例 , 年龄 21— 71岁 , 院前带入 8例 , 住院期间发生 4
例 , 12例患者共 21处压疮均属压疮溃疡期 , 其中骶尾部
14例 , 髋部 5例 , 内踝 1例 , 肩胛部 1例 , 压疮面积最大
的 10×12cm, 最小的 3×3cm。
2 方法
2.1 药物配制
麝香 0.5g、 熊胆 3g、 藏红花 3g研磨成粉 , 装入消毒瓶
中备用。
2.2 用药方法
暴露疮面 , 用 0.5%的碘伏常规消毒 , 清除坏死组织后
用 5%或 10%的葡萄糖反复清洗创面 , 再将备好的药粉从
里向外均匀涂抹于疮面 , 用红外线照射 20分钟 , 再用无菌
敷料包扎 , 换药每日一次 , 直至愈合 , 如分泌物过多时 ,
可换药每日二次。
3 结果
12例患者根据疮面大小 、 治疗时间最短 14d, 最长
28d, 全部治愈。
4 讨论
4.1 用葡萄糖清洗疮面 , 在清除脓性分泌物 、 清洁疮面的
同时 , 给局部组织及时供给一定的营养支持 , 有利于组织
生长和恢复。
4.2 藏药麝香 、 熊胆和藏红花具有解毒 、 抗炎 、 止痛 、 止
血和祛腐生肌的作用 , 对疮面的愈合起到了关键性的作用。
4.3 红外线照射具有促进血液循环和药物吸收的作用 , 可
显著缩短创面愈合时间 , 大大降低压疮并发感染的危险性 ,
收到良好的效果。
(收稿日期:2010.05.26)
2.5 精密度实验
精密吸取槲皮素对照品溶液 5uL, 连续进样 6次 , 测定
槲皮素峰面积 , RSD为 1.43%。
2.6 稳定性实验
精密吸取香青兰样品溶液 5uL, 分别在 0, 2, 4, 8,
12, 24h进样 , 测定槲皮素峰面积 , 其 RSD值为 1.27%,
表明样品溶液在 24h内稳定。
2.7 重复性实验
精密称取香青兰粗粉 5.0g, 共 6份 , 按样品测定法测
定 , 槲皮素的平均含量为 4.32mg· g-1 , RSD为 1.74%。
2.8 加样回收率实验
精密称取已知含量的香青兰粗粉 2.5g, 共 6份 , 分别
精密加入一定量的槲皮素对照品 2.16mg, 以下按样品溶液
制备 , 照上述色谱条件进样测定 , 其平均回收率为 97.2%,
RSD为 1.2%。
2.9 样品的测定
按 “ 2.3” 方法制备样品溶液 3份 , 精密吸取槲皮素对
照品溶液 10uL, 样品溶液 10uL, 分别注入高效液相色谱
仪 , 测定色谱峰峰面积 , 计算其含量。 测得香青兰药材
(采自吉木萨尔县二宫乡维吾尔药种植基地)中槲皮素的平
均含量为 4.48mg· g-1 , RSD为 1.59%。
3 讨论
经对采集的香青兰药材进行含量测定 , 并且通过方法
学考查验证 , 本试验具有较好的精密度 、 稳定性。本方法
可作为香青兰药材的含量测定 , 并可对香青兰药材进行质
量控制 , 对维吾尔药材香青兰有效成分研究提供依据。
参考文献
[ 1] 麦路德木·麦麦吐逊 , 李敏 , 胡君萍 , 等.益心巴迪然吉布亚 (香青
兰)颗粒中总黄酮含量测定 [ J] .新疆医科大学学报 , 2009, 32 (5):568
-569.
[ 2] 新疆药用植物志 [ M] .第一册.新疆人民卫生出版社 , 1977:130
-131.
[ 3] 内蒙古药材标准 [ M] .内蒙古科学技术出版社 , 1987:400.
[ 4] 中药志 [ M] .第四册 (Ⅵ ).人民卫生出版社 , 1988:61-64.
[ 5] 药典委员会.中华人民共和国卫生部药典—维吾尔药分册 [ S] .乌鲁
木齐:新疆科技卫生出版社 , 1999:73.
[ 6] 冯长根 , 李琼.香青兰化学成分与药理活性研究综述 [ J] .中成药 ,
2003, 25 (2):154-156.
(收稿日期:2010.06.08)
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