全 文 ：第 2 8 卷 第 5 期
2 0 0 7 年
玉林师范学院学报 (自然科学 )
JO U R N A L O F Y U L I N N O R M A L U N I V E R S IT Y
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2 8
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5
S e l e n e e
一点红提取物抑菌活性研究
口卢海啸 ’ , 廖莉莉 2
l(
. 玉 林师范学院 化学与生物 系 讲师 硕士 ,广西 玉林 5 37 ( )( )
(2
. 玉林师范学院 化学与生物 系 本科生 , 广西 玉 林 5 3 7() () )
【摘 要】采用滤纸片法测 定 了一点 红 乙 醉提取 物对各种供试菌种的抑菌圈直径 , 同时就
一 点红提取物浓度以及加 热 处理对一点 红提取物抑菌效 果 的影响进行 了初步研 究 . 结果表明 :
一 占、 红 乙醉提取物对 G 一 和 ( ; 一 细菌有较强的抑制作用 , 而对霉菌抑菌效 果不 明显 .一 占、 红提取
物抑菌作用 因菌种不 同而 最低抑菌质量浓度有所不 同 , 大肠 杆菌为 (川飞 · , 11「, 、 金黄色葡萄球
菌为 ( ) . ( )( 2 5 9 · m l一 , 、 枯草芽袍杆菌为 () . 1 2地 · 川 r l , 其抑菌圈直径 分别为 : 大肠杆菌 12 . l m m 、 金黄
色菊萄球 菌 15 .加 :川 、枯草芽袍杆菌 1 4 .知 1。 : ,表明对常见细 菌有较好的抑制作用 , 其在 7 }。 时抑
菌效果最好 . 而对于真菌 , 黑根霉和米曲霉的最佳抑菌质量浓度分别为 () . 1 2袍 · m 犷, 和 () )袍 · m l , .在
1 21 ℃ 湿热条件 下 2() 111 il : 后一 点红提取物抑菌效果基本不 变 , 说明一 点红提取物其有良好的热
稳定性 ,
【关键词】一点红提取物 ; 抑菌作用 ; 热稳定性
[ 中图分类号 IQ 93 s [ 文献标识 码 1 , [文章编号 J l ( ) ( )4一 4 6 7 2 ( 2 ( )、 )7 )。 ): 一 ( )( )7 7一 、 )3
S t u d y o n A n t im i e r o b i a l A ct iv i ty
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卫z万卫逻万 77
DOI : 10. 13792 /j . cnki . cn45 -1300 /z. 2007. 05. 023
2 0 07 年 玉 林师范学院学报 第 5 期
下 点红 ( H eb ro El i li ne a) , 又名 叶 下红 、 羊蹄草 、 红 背叶 , 为菊科植物一 点红 lE 爪 ila功 lcI h扣 il a (L . )D C . 的 全草 , 是我 国 名优
蔬菜 , 也是我 国传 统 中药之一我国 医药曾用一点
红治疗呼吸道感染 、 急性肠 炎 、 细 菌性痢疾 、 泌尿系
统感染 、 辜九炎 、 乳腺炎等 ,这证明一点红具有良好
的杀菌作用 }’川 .本文对一点红 乙醇提取物的抑菌作
用进行 了初步的研究 , 希望为天然防腐剂的开发 以
及一点红的综合利用开辟一条新的途径 .
1 材料与方法
1
.
1 材料与试剂
( l) 原料 一 点红采于玉 林师 范学院 附近 , 样品
经风干 、 粉碎 ,装入 塑料袋备用 .
(2 ) 供试 菌种 大肠 杆菌 (& e八e r ic八i a e o l i ) 、 金黄
色葡萄球 菌 (S r即 h〕· lo e o c c u s a u er “ s ) 、 枯草芽袍杆菌
渭a e i zzu s s u吞r i zis ) 、 黑根霉 (Rh i z叩 u s , : ig 汀 e a , : s ) 、 米曲
霉 (A sP o gr il us o 3’z ae ) 由玉林师范学院微生物实验
室提供 .
(3) 实验 设 备 E sJ 6() 一 4 型 电 子 分 析 天 平 、
1() 1一 3 A 型 数 显 式 电 热 恒 温 干 燥 箱 、 H H 一 B l .
6() o 一 S一 H 型 电热 恒 温 培养箱 、 R E一 5 2 A 旋 转蒸发
器 、 H H 一 S 型数显 恒温水浴锅 、 循环水式真空泵 、 生
物洁净工作台 .
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 一点红 乙醇提取物的制备
采用冷浸 法进行提取 ,提取液 为 乙醇 , 浓缩提
取液得浸 膏状提取物并置冰箱中备用 .
1
.
2
.
2 抑菌效果测定方法
将已灭菌的滤纸 片浸 于乙 醇提取物纯液 ( 乙醇
提取浓缩液 )中 4 个小 时 , 风 干 , 制成样品滤纸 片 .
将各种待试菌悬液各取 o . l iln 与相应 固体培养基
制成含菌平板 , 用无菌镊子取样品滤纸片贴在固体
平板上 .每菌做三次重复 . 细 菌置 于 37 ℃培养 , 霉菌
置于 28 ℃培养 , 定时观察测 定滤纸片的抑菌圈直
径大小 .
1
.
2
.
3 一点红提取物浓度对抑菌效果的影响
用 丙 酮 分 别 配 制质 量 浓度 为 。 . 25 g’ 耐一 , ,
0
.
18 7 5 9
·
!il1
一 , ,
0
.
12 5 9
·
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一 , ,
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一 , ,
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.
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·
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一 , ,
.() 03 125 9
’
il
一 , ,
.0 25 g’ iln 一 , 的 一 点红提取物样 品液 ,
将灭菌好的空白滤纸 片分别浸入上 述不 同浓度的
一点红样品液中 , 制成样品滤纸 片 , 无菌条件 下风
干 , 另取滤纸 片放入 丙酮 中作空 白对照 . 分 别按上
述滤纸 片法定 时测定抑菌圈大小
1
.
2
.
4 加热处理对一点红提取物抑菌作用 的影
,向
将一 点红提取物浓缩液在 121 ℃条件 下进行灭
菌 2( )m in , 然后在无菌条件下将灭菌后 的干净滤纸
片浸泡 于浓缩液 中 , 2() 而 n 后 风干 , 重 复三次 . 然后
将样品滤纸 片贴 于菌板上 , 细菌置 于 37 ℃培养 , 霉
菌置于 28 ℃培养 , 定 时观察生长情况 , 以 空白干燥
灭菌滤纸片作对照 .
2 结果与分析
2
.
1 一点红提取物的抑菌效果
一点红提取物对供试菌抑菌效果如 图 1 所 示 .
杭菌素抑菌圈实验结果的判定标 准是 :抑菌圈
直径 > ls m n : 为 最敏 感 、 10 一 15 m m 为 中度敏感 ,
7 一 g m m 时为低度敏感 , 无抑菌者为不敏感 15] . 由图
1 可知 , 一点红提取物对金黄 色葡萄球菌的抑菌圈
直径 > 15 n二 , 为最敏感 , 对大肠杆菌和枯草芽饱杆
菌的抑菌圈直径在 1() 一 巧~ 之间
, 属于 中度敏
感 , 对霉菌的抑菌圈直径 为 7 一 9~
, 为低度敏感 .
表明一点红提取物对细菌和真菌均有抑制作用 . 相
对而 言 , 一点红提取物对供试细菌的抑制作用明显
要大于霉菌 , 尤其是一点红提取物对枯草芽袍杆菌
和金黄 色葡萄球 菌的抑菌圈直径 可达到 14 0~以上 , 抑制作用最强 ;对大肠杆菌的抑菌圈也达到
了 12 . l m m , 效果明显 .
直径 ( m m )
图 1 一点红提取物 对供试困 的抑制 作 +}J 枉衫 图
月万里万刀 78
卢海啸 , 廖莉莉 一点红提取物抑菌活性研究
2
.
2 一点红提取物浓度对各供试菌的抑菌效果
的影响
不 同浓度一点红提取物对供试菌的抑制 效果
见图 2 .
一 大肠杆菌
~ 枯草杆菌一 金黄 色葡萄球菌一 黑根霉
~ 米曲霉
64,ó()nC厂才坏
ǎ-日尸工à州哪
l ~ 一冷- -口
《) . 25
图 2
( )
.
1 8 7 5 ()
.
1 25 ( )
.
( ) () 2 5 ( )
.
( )5 ( ) J川 2: ( ) ( ,25 浓度 ( g / ,: 1 1 )
不 同浓度的一点红提取物对供试菌的抑菌作用曲线图
由图 2 的结果可见 , 随着样品液浓度的
逐渐降低 , 在同等条件 下一点红提取物对
细菌的抑制作用也越来越弱 , 进一步表现
出来的抑菌圈直径也越来越 小 . 大肠杆菌的
最低抑菌浓度为 0 . ()5 g’ m l一 , , 枯草芽袍杆菌
的最低抑菌浓度为 ( ) . 12 5 g’ 间一 , , 金黄 色葡萄
球菌的最低抑菌浓度为 0 . 0 6 2 5 9 ·耐 一 , . 对于
霉菌来说 , 黑根霉最佳抑菌浓度为 () . 1 25 g’
m l
一 , , 而 米 曲 霉的 最佳 抑 菌质量 浓 度 为
(川 59 · n il 一 1.
从图 2 我们可以 清楚地看出 ,在浓度为 图 3
()
.
2 5g’ 闹一 ’ 时 , 一点红提取物 对供试菌的抑菌作用
强弱依次为 : 金黄色葡萄球菌 、 枯草芽袍杆菌 、 大肠
杆菌 、 黑根霉 、 米曲霉 ;在浓度为 0 . 18 7 5 9 · 111 一 , 时 , 其
抑菌作用强弱为 : 枯草芽袍杆菌 、 金黄色葡萄球菌 、
大肠 杆菌 、 黑根霉 、 米 曲霉 ;在浓度 为 0 . 12 59 · il 一 1
时 , 三种细 菌与 黑根霉的抑菌效果 差不 多 , 从这 里
我们可推知 , 0 . 12 59 · iln 一 , 是一 点红提取物抑制 大多
数菌种的最低浓度 .从 图 2 我们也可看 出低于这一
浓度 , 对大多数菌种 的抑菌效果 欠佳 ,但对某些菌
种却有相 当好的抑菌效果 . 如 米曲霉 , 只 在浓度为
()
.
()5 g’ 间 一 , 时有抑菌圈 , 而且抑菌效果还相当不错 .
因此我们可根据 不 同的 浓度对不 同菌种进行抑制
和杀灭 .
2
.
3 加热处理对一点红提取物抑菌作用的影响
在加 热处理实验中发现 ,在有一点红提取物的
培养基中均有明显的抑菌圈出现 , 且活性与未被高
温 处理过的 差别 不 大 . 说 明一 点 红提 取物 经过
12 1℃的高温处理 , 其抑菌效果并未受到太大的影
五种不 同观察时间得出的抑菌圈直径柱形 图
其抗菌成分具备良好的热稳定性 .
2
.
4 不同观测时间的抑菌效果
不 同观测时间一点红提取物的抑菌效果见图 3 .
从 图 3 中可知 , 一点红提取物样品液对细菌的
抑制作用随 时间变化产生不 同的作用结果一般在
h() 一 s h 内 , 不管样品液浓度有多大 , 由于没有菌落
生长 , 不能准确判断样品液是否发生 T 效应 . h7 时
能得出抑菌圈的直径 大小 , 且其为最佳抑菌时间 .
大于 7 h 或小于 7 h 抑菌圈都不 明显 .
3 讨论
实验证明一 点红提取物具有良好的抑菌作用 ,
而且 对细菌 、 霉菌均表现出较好 的效果 , 但抑菌效
果 却有不 同程度的差异 . 一 点红提取物 对 大肠 杆
菌 、 枯草芽饱杆菌和葡萄球菌具有较强的抑制和杀
灭作用 , 而对黑根霉和米 曲霉的抑制和 杀灭作用相
对较弱 .这种情况的 出现可能是一点红提取物 中的
(下转第 86 页 )
卫乙￡卫逻泞 79
2 0 0 7 年 玉林师范学院学报 第 5 期
[参考文献 ]
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[收稿 日期 2 00 7一 07 一 19 】
【责任编辑 谢明俊 ]
(上接第 79 页 )
有效成分对 细菌细胞壁的破坏作用大于霉菌的细
胞壁 , 即对肤聚糖的破坏作用大于几丁质 . 另外 , 对
于三种 细菌来说 , 一点 红提取物对枯草芽饱杆菌和
金黄色葡萄球菌具有较强的抑制和杀灭作用 , 而 对
大肠杆菌的杀灭作用相对较弱 .
在不 同一点红提取物样 品液 浓度对抑菌效果
影响的 实验 中 , 抑菌情况 出现 了很大的差异 . 大肠
杆菌的最低抑菌浓度为 0 . 0 5 9 ·间 一 , , 枯草芽抱杆菌
的最低抑菌浓度为 0 . 12 5 g’ iln 一 , , 金黄 色葡萄球菌的
最低抑菌浓度为 0 . ()6 25 g’ 耐 一 , . 而对于霉菌来说 , 一
点红提取物抑菌活性存在一个最佳抑制浓度 . 对黑
根霉的最佳抑制浓度为 0 . 1 2 59 ·耐一 , .
在加 热处理对一点 红提取物抑菌作用的影响
的实验中 , 一点红提取物抑菌成分具有很好的热稳
定性 .
一点红提取物 的抑菌效果除与浓度有关外 , 还
与时间有一定的关 系 .其最佳 时间为 7 h .
由于本实验采用的是一点红粗提物 , 无法确定
其具体起作用的成分 ,还 需对一点红的抑菌成分进
行深层 次分离 、 纯化 、 鉴定 , 并进一步开发成一种 可
综合应用的天然 药物 , 是下一步有待开展的工作 ,
也具有广阔的发展前景二[参考文献 ]「1 ]钟正贤 ,周桂芬 ,李燕蜻一点红提取物药理作用的实验研究口」, 云南中医 中药杂志 , 2 )` () 6 , 2 7 , (4 ) : 3 6一 3 7 ·回魏红 . 花红片治疗急性盆腔炎 1 ()0 例临床观察川 .黑河科技 , 2 () ( )2 , (0 2 ) .
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[ 收稿日期 2 0 07 一 0 7一 15 】
【责任编辑 谢文海】
尹乙￡里万召 86