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第 31 卷 第 2 期 玉林师范学院学报（自然科学） Vol.31 No.2
2010 年 JOURNAL OF YULIN NORMAL UNIVERSITY (Natural Science)
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田基黄提取物抑菌作用的研究
□赖洁玲1，方金韩2
（1. 玉林师范学院 化学与生物系 助教，广西 玉林 537000）
（2. 玉林师范学院 化学与生物系 本科生，广西 玉林 537000）
【摘 要】该实验以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、酿酒酵母菌、
苏云金芽孢杆菌和变形杆菌为供试菌种，采用采用滤纸片扩散法对田基黄水提取液进行抑菌实验研
究，并测定其最低抑菌浓度（MIC），其结果表明：田基黄水提取物对供试菌种普遍有抑制作用，
黑曲霉除外；MIC也因菌种不同而不同，金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和青黄链霉菌为
0.25 g/mL，酿酒酵母菌为0.5 g/mL，苏云金芽孢杆菌和变形杆菌均为0.125 g/mL. 实验还采用不同有
机溶剂的提取物对选取的五种供试菌种进行抑菌作用研究，其结果表明：田基黄有机溶剂提取物对金
黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌均有抑制作用，且抑菌效果
均比水提取物的抑菌效果明显.
【关键词】田基黄；最低抑菌浓度；滤纸片扩散法；抑菌作用
【中图分类号】Q949.96【文献标识码】 A 【文章编号】1004-4671（2010）02-0058-04
Study on the Antimicrobial Activity of Hypericum
japonicum Thunb Extract
LAI Jie-ling1，FANG Jin-han2
(1. Teaching Assistant, Mac, Dept. of Chemistry & Biology, Yulin Normal
University, Yulin, Guangxi 537000)
(2. Student of Grade 2005, Dept. of Chemistry & Biology, Yulin Normal
University, Yulin, Guangxi 537000)
Abstract: This experiment used filter-paper method to study the antimicrobial
activity and MIC of Hypericum japonicum Thunb extract against Staphylococcus
aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptomyces Huang, Bacillus thuringiensis,
Saccharomyces cerevisiae and Proteus vulgatia. The results showed that the extract
from Hypericum japonicum Thunb showed the good effect for Staphylococcus aureus,
Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptomyces Huang, Saccharomyces cerevisiae, Bacillus
thuringiensis and Proteus vulgatia. But no effect for Aspergillus niger. The MIC for every
kind of microorganism was respectively as fllows: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Streptomyces Huang were 0.25g/ml, Saccharomyces cerevisiae was 0.5
g/ml, Bacillus thuringiensis and Proteus vulgatia were 0.125g/ml. In this study, we used
different organic solvents, the extract to detected antimicrobial activity against the same
microorganism, the result showed that the organic solvents, the extract also can inhibit
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Streptomyces Huang, Bacillus
thuringiensis and the antimicrobial activity effect were better than the extract of water.
Key words: Hypericum japonicum Thunb; MIC; filter-paper method; antimicrobial
effect
DOI:10.13792/j.cnki.cn45-1300/z.2010.02.014

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基黄(Hypericum japonicum Thunb)原名地
耳草，别名雀舌草，是藤黄科金丝桃属植
物，其主要的化学成分有槲皮甙，异槲
皮甙，槲皮素-7-鼠李糖甙，3，5，7，3’，4’-
五羟基黄酮-7-O-鼠李糖甙，田基黄灵素，田基
黄棱素A、B，湿生金丝桃B，绵马酸BBB，双脱氢
GB1a，田基黄绵马素A、B、C，白绵马素iBiB，田
基黄灵素G，地耳草素A、B、C、D等[1]. 20世纪90
年代后Ishiguro等又从中分离得到：色原烯类，二氢
黄酮醇鼠李糖苷，缩二氨酸衍生物，咕吨酮类，间
环己三醇衍生物等化合物[2].
在药用上，田基黄具有清热利湿、解毒止痛的
功效，在保护肝脏、治疗肝炎等方面有较好的疗效[3].
目前，许多学者致力于田基黄药理作用的研究特别
是在治疗肝炎和抗病毒方面的临床体外的研究[4]、
田基黄化学成分的研究[5]、田基黄注射液的研究和
田基黄中微量元素的研究[6、7]等，但田基黄的抗菌
研究未见有报道. 因此本文就田基黄提取物的抑菌
作用进行体外试验研究，为田基黄的抗菌效用提供
实验依据，同时也为田基黄的应用及研究提供一定
的参考.
1 材料与方法
. 实验材料
1.1.1 田基黄 购于中药店，粉碎，装于干净的
瓶中备用.
1.1.2 主要试剂：乙醇、丙酮、乙酸乙酯
1.1.3 供试菌种
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、
大肠杆菌（Escherichia coli）、枯草芽孢杆菌
（Bacillus subtilis）、苏云金芽孢杆菌（Bacillus
thuringiensis）和变形杆菌（Proteus vulgatia）；
青黄链霉菌（Streptomyces Huang）；酿酒酵母菌
（Saccharomyces cerevisiae）；黑曲霉（Aspergillus
niger），以上菌种均由我学院微生物实验室提供.
1.1.4 仪器
101-3A型数显式电热恒温干燥箱（上海沪越
实验仪器有限公司沪越实验仪器厂），FW100型高
速万能粉碎机（天津市泰斯特有限公司），双层双
速振荡器（上海康华生化仪器制造厂）， 18升不锈
钢手提式压力蒸汽灭菌锅（上海博迅实验有限公司
医疗设备厂），YP102N电子天平（上海精密科学
仪器有限公司），恒温磁力搅拌器（江苏金坛医疗
仪器厂），HH·BH-600-S-Ⅱ电热恒温培养箱(上
海跃进医疗器械厂)，RE-52D旋转蒸发器（上海青
浦泸西仪器厂），SⅡZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵（巩
仪市予华仪器有限公司），金属罩壳数显卡尺（桂
林量具刀具厂 分辨(0.01mm).
. 实验方法
1.2.1 田基黄水提取物的制备
称取干燥粉碎的田基黄50 g, 加蒸馏水300 mL，
浸泡30 min，用砂锅煎煮,煮沸后用文火煮1 h，滤
出煎液，第二次加蒸馏水100 mL，煎煮30 min，2
次煎液合并，再浓缩定容至50 mL，使田基黄提取
物相当于物质的含量为1 g/mL，置于4℃以下保藏
备用.
1.2.2 田基黄有机溶剂提取物的制备
称取10 g干燥田基黄粉碎物置于带玻璃塞的三
角瓶中加100 mL 的有机溶剂（乙醇、丙酮、乙酸
乙酯）常温下在摇床上摇动冷浸提取24h，过滤，
滤液用旋转蒸发器在75℃以下减压浓缩，置于4℃
以下保藏备用.
1.2.3 抑菌实验
（1）圆形滤纸片的制备:用圆规在滤纸片上画
个圆,半径为3 mm，滤纸片的直径为6 mm，置于培
养中，高压蒸汽灭菌（121℃下灭菌30 min）后，备
用.
（2）培养基的配制：牛肉膏蛋白胨培养基、
查氏培养基、淀粉琼脂培养基、马铃薯葡萄糖培养
基[8].
（2）供试菌株的制备：将所有供测试的菌种
移接入相对应的试管斜面培养基上，细菌用牛肉膏
蛋白胨培养基在37℃下培养18～24 h，霉菌用查氏
培养基，25～28℃培养48 h，放线菌用淀粉琼脂培
养基在37℃下培养36 h，酵母菌用马铃薯葡萄糖培
养基培养，25～28℃培养48 h，活化后置于4℃冰箱
中保藏，备用.
（4）菌悬液的制备：在无菌条件下, 用移液枪
吸取取10 mL无菌水分别加入无菌培养皿中，并用
接种环取少量已活化的待测菌各1环，分别加入培
养皿中，用恒温磁力搅拌器，使其与无菌水混匀，
备用.
（5）含菌平板的制作：在无菌操作下，在已
凝固后的培养基中用移液枪加入0.1mL菌悬液，然
后用无菌涂布棒将菌悬液均匀的涂布，即制成含菌
平板，待用.
田
赖洁玲，方金韩 田基黄提取物抑菌作用的研究
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玉林师范学院学报2010 年 第 2 期
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（6）抑菌圈的测定：抑菌圈的测定采用滤纸
片扩散法[9]. 在无菌条件下，将圆形滤纸片浸入供
试样品溶液中2 h后取出,自然沥干后贴在含菌平板
上，每皿放入3片，并用无菌水、乙醇、丙酮和乙
酸乙酯作空白对照. 将细菌培养皿于恒温培养箱中
在37℃条件下培养7～24 h，酵母菌、霉菌在28℃恒
温培养箱中培养44～48 h，放线菌在37℃下培养36
h，用数显卡尺测量各抑菌圈直径大小（mm），求
其平均值以此评价其抑菌效果. 试验重复3次.
1.2.4 最低抑菌浓度(MIC)实验
（1）样品液的制备：用六根刻度为10mL的试
管，将水提取物用无菌水稀释成各种梯度的浓度.
（2）菌悬液的制备：方法同2.2.3.4
（3）最低抑菌浓度(MIC)的测定：MIC的测定
也采用滤纸片扩散法. 在无菌条件下，将圆形滤纸
片浸入已配好的六个梯度的样品溶液中2 h后取出,
自然沥干后贴在含菌平板上，每皿放入3片，并用
无菌水作空白对照. 将细菌培养皿于恒温培养箱中
在37℃条件下培养24 h，放线菌培养36 h，最后一
个有抑菌圈的浓度，即为最低抑菌浓度. 试验重复3
次.
2 结果与分析
. 田基黄水提取物的抑菌效力
采用滤纸片扩散法对田基黄水提取物的抑菌活
性进行测定，结果表明，田基黄水提取物对大部分
供试菌种均有抑制作用，但对试验菌的抑菌效果是
有差异的. 抑制作用从大到小依次为：苏云金芽孢
杆菌＞变形杆菌＞大肠杆菌＞青黄链霉菌＞金黄色
葡萄球菌＝枯草芽孢杆菌＞酿酒酵母菌，而黑曲霉
则没有明显的抑菌效果. （见表1）
. 田基黄水提取物的最低（MIC）抑菌浓度
采用滤纸片扩散法对田基黄水提取物的最低抑
菌浓度进行测定，其结果表明，随着样品液浓度的
逐渐降低，表现出来的是抑菌圈直径的越来越小，
说明在同等条件下田基黄水提取物对供试菌的抑制
作用越来越低. 田基黄水提取物对不同的试验菌的
最低抑菌浓度是不同的，金黄色葡萄球菌、枯草芽
孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌的最低抑菌浓度均
为0.25 g/mL；变形杆菌、苏云金芽孢杆菌的最低抑
菌浓度均为0.125 g/mL；而酿酒酵母菌最低抑菌浓
度为0.5 g/mL. （见表2）
. 不同溶剂提取物对受试菌的抑菌圈与水提
取物的比较
用不同有机溶剂的提取物对选取的五种供试菌
种（金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、
表1 田基黄水提取物对各试验菌的抑菌能力
(直径mm)
Table 1 The antimicrobial activity of Hypericum
japonicum Thunb extraction
供试菌种
金黄色葡萄球菌
枯草芽孢杆菌
大肠杆菌
青黄链霉菌
酿酒酵母菌
苏云金芽孢杆菌
变形杆菌
黑曲霉
抗菌圈直径
10.0±0.3
10.0±0.4
10.2±0.2
10.1±0.2
9.9±0.0
11.2±0.8
10.6±0.1
—
空白对照
—
—
—
—
—
—
—
—
注：表中数据为抑菌圈直径平均值，其中“—”表示
无抑菌圈形成，滤纸片直径为6.0mm
表2 田基黄水提取物对7种供试菌的MIC值
Table 2 Minimum inhibitory concertration (MIC) of Hypericum japonicum Thunb extraction against 7
utilized strains
实验号
水提物浓度
g/mL
金黄色葡
萄球菌
枯草芽孢
杆菌
大肠杆菌
青黄链
霉菌
苏云金芽
孢杆菌
酿酒酵母菌 变形杆菌
1 0.5(1/2) ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
2 0.25(1/4) ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ — ＋
3 0.125(1/8) — — — — ＋ — ＋
4 0.0625(1/16) — — — — — — —
5 0.03125(1/32) — — — — — — —
6 0.0156(1/64) — — — — — — —
注：表中“—”表示无抑菌圈；“＋”表示有抑菌圈

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青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌）进行抑菌作用研
究，其结果表明：田基黄水提取物和有机溶剂提取
物对于相同的供试菌种均有不同程度的的抑制作用.
从不同提取溶剂来看，总体上乙醇提取物的抑菌效
果效果最好，其次是丙酮，最后是乙酸乙酯，而水
提取物的抑菌效果最差. （见表3）
【参考文献】
[1] 林久茂，陈小峰.田基黄的现代研究进展[J]. 福建中医药,
2004，35（6）:53.
[2] 傅苊，田红丽，张卫东. 田基黄研究进展[J]. 药学实践杂
志, 2004，22（2）:98.
[3] 张素芹，邱海霞. 田基黄的研究概况[J]. 中国中医药科技,
1999，6（5）：351
[4] 苏 娟，傅苊等. 田基黄提取物保肝作用的实验研究[J]. 药
学实践杂志，2005，23（6）：342-344.
[5] 吕洁，孔令义. 田基黄的化学成分研究[J]. 中国现代中药,
2007，9（11）：12-14.
[6] 虞金宝, 吕武清, 李才堂, 李晶, 宋友昕. HPLC测定田基黄
注射液中槲皮素含量[J]. 中成药，2005，27（1）：100-101.
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业科学，2008，36（10）：4135.
[8] 范秀荣，李广武，沈萍. 微生物学实验[M]. 第2版. 北京：
高等教育出版社，1983．
[9] 李军红，田胜尼，魏兆军等. 加拿大一枝黄花的抑菌性研
究[J]. 安徽农业科学, 2007,35(34):10975～10976.
[10] 俞佩芳．三种常见药用植物抗菌作用的探讨[J]. 华东师
范大学学报(自然科学版)，1994,1(3) :89～92.
[11] 林久茂，陈小峰.田基黄的现代研究进展 [J].福建中医药,
2004，35（6）:54.
3 讨论
4种试剂提取物对本研究所用的供试菌株均有
一定的抑制作用，说明4种试剂均能提取到田基黄
的抑菌成分，但各种溶剂提取液对不同菌种的抑菌
能力有所不同，说明溶剂影响田基黄提取液的抑菌
能力，总体来说乙醇提取液的抑菌效果最好，而水
提取液的抑菌效果最差，其原因可能是：田基黄中
含有多种化学成分，包括黄酮类、间苯三酚类、内
酯、香豆素、蒽醌、维生素、咄酮类等，其中黄酮
类、间苯三酚类、咄酮类为主要成分，这些成分与
田基黄的抗菌能力密切相关，而黄酮类化合物也
是许多药用植物的一大类有效成分，具有抗菌或是
杀菌的作用[10]. 天然黄酮类化合物多以苷类形式存
在，黄酮苷一般易溶于极性的溶剂中，所以乙醇、
丙酮、乙酸乙酯中所提取的黄酮类的效率高些. 不
变种有机溶剂田基黄提取液抑菌效果有差异，这可
能与抑菌成分的极性有关，并且抑菌成分的水溶性
或脂溶性各有不同，也可以说明抑菌的有效成分并
不是单一的，应该是多种有效成分协同作用的结果.
因此，寻找一种能将田基黄抗菌有效成分尽可能提
取的溶剂，对提高田基黄药用性能有重要作用，也
是做成中成药成品的关键.
田基黄分布较广且较易于采集，可以通过提取
其抑菌活性成分来制成中成药的成品，用于肝炎的
治疗. 有文献报道田基黄特别是对降低谷丙转氨酶
效果很显著[11]，所以其成品也可用于做保肝的药物.
现在全球没有治疗肝炎的有效药物，市场上的保肝
药物很多且价格较贵，因此，田基黄具有广泛的开
发和利用价值，值得综合利用，可以加强资源的开
发. ■
表3 田基黄不同提取物（1g/mL）对供试菌的抑制效果(直径mm)
Table 3 The effect of different extracts（1g/mL）against utilized strains
供试菌种
不同溶剂提取物（1g/mL）
乙醇 丙酮 乙酸乙酯 水提取物
金黄色葡萄球菌 14.4±0.3 15.8±1.5 14.0±0.3 10.0±0.3
枯草芽孢杆菌 15.6±0.2 15.3±0.8 12.3±0.2 10.0±0.4
大肠杆菌 14.7±0.6 14.3±0.5 13.3±0.6 10.2±0.2
青黄链霉菌 12.1±0.3 17.0±1.1 9.8±0.1 10.1±0.2
苏云金芽孢杆菌 15.1±0.3 13.9±0.6 15.9±1.2 11.2±0.8
【收稿日期 2009-10-15】
【责任编辑 谢明俊】
赖洁玲，方金韩 田基黄提取物抑菌作用的研究