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峨眉千里光对小鼠急性毒性及蓄积毒性研究



全 文 :J TCVM
年第 6 期2014
峨眉千里光对小鼠急性毒性及蓄积毒性研究
刘秋妍 1,2,何丽霞 1,邓向东 1,曹光秀 1,高彤彤 1,林居纯 1,2
(1.四川农业大学动物医学院,四川雅安 625014;2.四川农业大学国家级动物类实验教学示范中心,
四川雅安 625014)
摘 要:评价峨眉千里光毒性作用,采用机率单位法(Bliss 法)和固定剂量蓄积系数法考察了峨眉千里
光叶和全草水提物对小鼠经口急性毒性及蓄积毒性。急性毒性结果显示,不同剂量的峨眉千里光叶和全草
水提物均能导致小鼠发生中毒和死亡,引起小鼠肺和肝脏损伤;叶水提物 LD50为 62.28 g/kg,95%可信限为
52.68-73.65 g/kg;全草水提物 LD50为 81.65 g/kg,95%可信限为 70.15-94.53 g/kg。蓄积毒性结果显示,峨眉
千里光叶和全草的蓄积系数 K>5。结果表明,峨眉千里光叶和全草水提物对小鼠有急性毒性作用,叶的毒性
比全草强,肺和肝脏为毒性靶器官;两种水提物均有轻度蓄积毒性。
关键词:峨眉千里光;小鼠;急性毒性;蓄积毒性
中图分类号:S859.82 文献标志码:A 文章编号:1000- 6354(2014)06- 0055- 03
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2014.06.019
收稿日期:2014- 08- 11
基金项目:四川农业大学大学生科研兴趣培养(2013054)
作者简介:刘秋妍(1993-),女,在读本科生,药学专业, E- mail:1024
124722@qq.com
通讯作者:林居纯(1968- ),女,副教授,主要从事兽医药理与毒理
学教学与研究,E- mail:juchunlin@126.com
峨眉千里光(Senecio faberii Hemsl)是菊科千里光属植
物,主要分布于四川、云南、贵州等地,生长于海拔 690-
2 450 m地区,多生于干旱草地及岩石山坡。该植物有健胃、
消炎等功效,主治喉炎、扁桃体炎、胃痛、外治湿疹等[1]。千里
光属的大部分植物主要含吡咯里西啶生物碱、黄酮类、萜
类、有机酸、挥发油等化学成分 [2],其中吡咯里西啶生物碱
可引起人畜中毒甚至死亡,如动物不断摄入会对肝脏造成
危害,甚至引发肝癌,导致母畜流产等 [3]。我国药典收载的
千里光在临床上未见中毒病例报道,对其毒性的研究报道
也较少 [4]。为保证千里光用药安全,为中毒机制研究提供
基础,笔者等研究了峨眉千里光叶和全草水提物的急性毒
性和蓄积毒性。
1 材料与方法
1.1 实验动物
清洁级、健康昆明种小白鼠,质量为 18-22 g,雌雄各
半,购自成都达硕生物科技有限公司。
1.2 药物
峨眉千里光系从四川省雅安市宝兴县神木垒风景区
采集样品,经四川农业大学国家级动物类实验教学示范中
心鉴定为峨眉千里光。将上述药材室温晾干,按传统水煎
方法制备千里光叶和全草提取物,加入 10倍量水,煎煮 0.5 h,
过滤,收集滤液,如此重复 3 次,合并 3 次滤液,浓缩为 3 g
生药/mL 提取液,4 ℃保存备用。
1.3 峨眉千里光叶和全草水提物对小白鼠急性毒性试验
根据预试验结果得知,峨眉千里光叶水提物的小白鼠灌
胃 0%和 100%死亡剂量估计值分别为 30 g/kg和 110 g/kg。正
式试验剂量组设为 6组,组间比值 r为 0.8。将 70只昆明小白
鼠按体重随机分为 7组,10只/组,雌雄各半。1-6组为峨眉千
里光叶水提物组,第 7组为空白对照组。供试药液按倍比稀
释法配制成所需浓度,按 0.3 mL/kg 质量灌胃,连续给药
2次(间隔 6 h),空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃。给药后
连续观察 14 d,每天观察 2次,记录动物中毒症状(动物精神
状态、行为活动、食欲、饮水、排泄等)、死亡情况及死亡大致
时间,对死亡动物做大体解剖,未死亡小鼠于第 14天捕杀后
进行解剖。根据各组动物死亡率,采用 SPSS17.0统计软件进
行机率单位加权回归法(Bliss法),计算峨眉千里光对小鼠的
半数致死量(LD50)及 95%可信限[5,6]。
根据预实验结果可知,峨眉千里光全草水提物的小鼠
灌胃 0%和 100%死亡剂量估计值分别为 50 g/kg和 150 g/kg。
峨眉千里光全草水提物的急性毒性试验方法与叶水提物
相同。
1.4 峨眉千里光叶和全草水提物对小白鼠蓄积毒性试验
将 60 只健康小白鼠按质量随机分为峨眉千里光叶试
验组、全草试验组及蒸馏水对照组,20 只/组,雌雄各半。
叶和全草试验组小白鼠每天分别按 12.46 g/kg、16.33 g/kg
(1/5 LD50)剂量连续灌胃给药,对照组灌服蒸馏水。在试验
期内观察记录动物死亡数,当试验组累计一半动物死亡,
即可终止试验。按公式计算蓄积系数,并对结果进行评价。
其中 LD50(n)为固定剂量引起受试动物半数死亡的累计剂
量。若累积接触剂量达到 5 个 LD50剂量,试验组死亡动物
数未达到一半,可终止试验,此时计算出 K>5[6]。
K=LD50(n)/LD50
2 结果
2.1 峨眉千里光叶和全草水提物对小鼠的急性毒性
小鼠灌胃给予峨眉千里光叶、全草水提物后,均表现
精神萎靡,自主活动减少,饮水及采食量减少。给药 10 min




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Studies on the acute and accumulative toxicity of aqueous extract from Senecio
faberii Hemsl leaves and whole herb in mice
LIU Qiu-yan1,2, HE Li-xia1, DENG Xiang-dong1, CAO Guang-xiu1, GAO Tong-tong1, LIN Ju-chun1,2
(1.College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Yaan Sichuan 625014;2.National Experimental Teaching
Demonstration Center of Animal Science, Sichuan Agricultural University, Yaan Sichuan 625014, China)
Abstract:To evaluate the toxicity of Senecio faberii Hemsl, the acute and the accumulative toxicity tests in mice were
后,叶和全草的最高剂量组小鼠发生死亡,随后各剂量组
小鼠陆续死亡,小鼠濒死前出现惊厥、抽搐。小鼠死亡多在
给药后 0.5-8 h,叶和全草组小鼠死亡情况分别见表 1、表
2。耐过 48 h小鼠不再死亡,但精神较差,饮水及采食量减
少。对照组小鼠精神状态及活动未见异常,无小鼠死亡。
叶和全草组小鼠尸体解剖可见,小鼠肺脏表面出现不
同程度瘀血;胃肠严重胀气,肠壁变薄;肝呈深暗红色,表
面点状出血;其余脏器未见肉眼可见的病理变化。上述病
变严重程度随给药剂量的增加而增加。对照组小鼠尸检无
肉眼可见的明显病变。
根据死亡率,用 Bliss法计算峨眉千里光叶水提物的小
鼠经口 LD50为 62.28 g/kg,95%可信限为 52.68-73.65 g/kg;全草
水提物 LD50为 81.65 g/kg,95%可信限为 70.15-94.53 g/kg。
表 1 峨眉千里光叶水提物对小鼠灌胃急性毒性试验结果
Table 1 Results of acute toxicity test of Senecio faberii
Hemsl leaves in mice
表 2 峨眉千里光全草水提物对小鼠灌胃急性毒性试验结果
Table 2 Results of acute toxicity test of Senecio faberii
Hemsl whole herb in mice
2.2 峨眉千里光叶和全草水提物对小鼠的蓄积毒性
叶和全草组小鼠分别以 12.46 g/kg 和 16.33 g/kg 固定
剂量连续经口染毒 28 d 后,叶组和全草组小鼠死亡率分
别为 5%和 20%,计算两组蓄积系数 K 均大于 5,表明峨
眉千里光叶和全草水提物对小鼠有轻度蓄积毒性。试验期
间,给药组小鼠表现出精神萎靡、活动量减少、被毛粗乱、
无光泽、食欲不振等症状。剖解给药组小鼠可见尸体消瘦,
肺瘀血;肝肿大,严重瘀血,部分肝有斑块状坏死灶;其余
脏器未见明显病理变化。在试验期间,对照组小鼠全部存
活,尸检无明显的肉眼可见病理变化。
3 讨论
千里光作为药用始于唐代《本草拾遗》,有关文献对其
毒性的记载并不统一。《本草拾遗》称其“味苦,平,小毒”[7]。
《本草图经》称其“味苦甘,寒,无毒”[8]。1977 年版《中国药
典》(一部)记载“千里光性味苦,寒,归肝、肾二经”,未言其
毒性。本次试验中峨眉千里光叶和全草水提物急性毒性试
验结果显示,小鼠经口灌胃不同剂量千里光叶和全草水提
物,均出现精神萎靡,濒死前出现惊厥、抽搐等中毒症状,且
最高剂量组小鼠在给药 10 min后发生死亡。这与张秀坤等
观察千里光小鼠急性中毒症状相似[4],说明峨眉千里光水提
物能引起小鼠急性中毒乃至死亡。病理学检查结果显示,峨
眉千里光叶和全草水提物能引起小鼠肝色泽暗、表面点状
出血,并未观察到其他文献报道的小鼠肝出现发硬的黄色
斑点、斑块。此外,本次试验还观察到千里光能引起小鼠肺
瘀血,在其他文献中尚未发现有相似报道[4]。造成上述不同于
其他报道病理变化的原因可能与药材来源不同有关。峨眉千
里光叶子和全草水提物对小鼠急性 LD50分别为 62.28 g/kg
和 81.65 g/kg,可见叶水提物毒性比全草高。
蓄积毒性试验结果显示,峨眉千里光叶和全草水提物
均有轻度蓄积毒性,小鼠肺脏和肝脏为其靶毒器官。
参考文献:
[1] 北京科学院植物研究所.中国高等植物科属检索表[M].
北京:科学出版社,1987:387-388.
[2] 梁爱华,叶祖光 .千里光属植物的毒性研究进展 [J].中
国中药杂志,2006,31(2):93-97.
[3] Li N, Xia Q, Ruan J, et al. Hepatotoxicity and tumorigenicity
induce by metabolic activation of pyrrolizidine alkaloids in
herbs [J].Curr Drug Metab,2011,12(9):823-834.
[4] 王秀坤,赵 雍,梁爱华,等.不同产地千里光急性毒性
实验研究[J].药物不良反应杂志,2008,10(2):81-85.
[5] 中华人民共和国卫生部.GB15193.1-15193.21 食品安全
性毒理学评价程序和方法[S].2003:19-31.
[6] 刘 雄,陈宗道.食品质量与安全[M].北京:化学工业出
版社,2009:111-118.
[7] 宋·苏颂 .本草图经 [M].合肥:安徽科学技术出版社,
1994:653-658.
[8] 梅全喜.蕲州药志[M].北京:中医古籍出版社,1993:118.
组别 鼠数 /只 剂量 /mg·kg-1 死亡数 /只 死亡率 /%
1
2
3
4
5
6
10
10
10
10
10
10
112 500
90 000
72 000
57 600
46 200
36 900
10
8
6
3
2
2
100
80
60
30
20
20
组别 鼠数 /只 剂量 /mg·kg-1 死亡数 /只 死亡率 /%
1
2
3
4
5
6
10
10
10
10
10
10
150 000
120 000
96 000
76 800
61 440
49 152
10
8
7
4
2
1
100
80
70
40
20
10




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!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
carried out by Bliss method and continuous exposure at a fixed dose method. The results of acute toxicity test showed that toxic
reactions, deaths, damage of lung and liver in mice were observed in groups of different dose; LD50 of Senecio faberii Hemsl
leaves to mice was 62.28 g/kg with 95% confidence interval of 52.68 g/kg-73.65/kg; LD50 of whole herbs was 81.65 g/kg with
95% confidence interval of 70.15 g/kg-94.53 g/kg. The results of accumulative toxicity test of leaves and whole herbs showed
that the accumulative coefficient K were both above 5. The conclusions were followed: aqueous extract of Senecio faberii
Hemsl leaves and whole herb could cause acute toxic effects to mice; the toxicity of leave was higher than that of whole herb;
lung and liver were toxic target organs; both of the aqueous extracts were mild accumulation toxicity.
Key words: Senecio faberii Hems; mouse; acute toxicity; accumulative toxicity
金石翁芍散对仔猪大肠杆菌病治疗试验
李锦宇,王贵波,罗超应,谢家声,王东升,汪晓斌,郑继方,罗永江,辛蕊华
(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,甘肃兰州 730050)
摘 要:为了评价金石翁芍散对仔猪大肠杆菌病的临床疗效,设立金石翁芍散高、中、低 3个剂量组及药物
对照组,通过混饲给药方式治疗仔猪大肠杆菌病,进行临床治疗效果比较。结果表明, 金石翁芍散对仔猪大肠杆菌
病有较好的治疗效果,高剂量组治愈率为 91.6%,总有效率为 94.4%;中剂量治愈率为 88.9%,总有效率为 94.4%;
低剂量组治愈率为 72.2%,总有效率为 77.8%。高剂量组、中剂量组在降低死亡率、提高治愈率等方面均优于恩诺
沙星可溶性粉(治愈率为 72.2%,总有效率为 77.8%)。低剂量组的治疗效果低于高、中剂量组;中、高剂量组死亡
率、治愈率和总有效率均无显著性差异。
关键词:金石翁芍散;大肠杆菌病;治疗;仔猪
中图分类号:S853.7 文献标志码:A 文章编号:1000- 6354(2014)06- 0057- 03
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2014.06.020
收稿日期:2014- 08- 18
基金项目:甘肃省科技支撑计划(1104NKCA094);科技部农业科
技成果转化资金项目(2012GB23260560);科技部科研
院所技术开发研究专项(2013EG134236)
作者简介:李锦宇(1973-),男,副研究员,主要从事中兽医学研
究,E- mail:jinyu_li120@163.com
通讯作者:王贵波,男,助研,主要从事中兽医学研究,E- mail:
wangguibo2005@163.com
仔猪大肠杆菌病主要表现为仔猪黄痢和白痢,是 30
日龄前仔猪临床最常见的传染病之一,其发病率、致死率
高,给养猪业带来极大危害和经济损失。其病原是大肠杆
菌,其中仔猪黄痢常发生于仔猪出生后 1 周以内,以 1-3
日龄居多,常整窝发病,发病率在 90%以上,死亡率可达
100%。仔猪白痢多发生于 10-30 日龄仔猪,以 10-20 日龄
者居多,发病率可达 30%~80%。
目前,已知大肠杆菌菌体(O)抗原 171 种,表面(K)抗原
接近 80 种,鞭毛 (H)抗原 56 种,因其血清型复杂,使动物
临床症状表现复杂多样 [1]。其治疗手段主要是使用抗菌化
学药物和抗生素,但耐药性问题使其疗效每况愈下。中药
治疗效果受菌株耐药性的影响较小,且毒副作用小,几乎
无残留。金石翁芍散是基于中兽医学对感染性疾病的认
知,结合现代免疫学机理和临床药效学方法组方,具有清
热解毒、除湿止痢、扶正祛邪、活血化瘀等功效。为探讨其
在仔猪生产中应用的可行性,笔者等应用金石翁芍散对仔
猪大肠杆菌病进行比较治疗试验,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
金石翁芍散,四川巴尔动物药业有限公司,批号为
20120918;恩诺沙星可溶性粉,绵阳市邦威药业有限公司,
批号为 20130105。
1.2 试验动物
试验猪只源于榆中县某养殖场。
1.2.1 发病情况 2013年 4月,榆中县某养殖场自场繁育
的 300头 3-15日龄仔猪相继发病,以腹泻为主要特征。
1.2.2 临床症状 患病仔猪主要表现为精神不振,畏寒,
脱水,吮乳减少或不食,有时见有吐奶。腹泻水样稀粪、黄
色或灰黄色、内含凝乳小片和小气泡。有的猪甚至出现瘫
痪和较轻微的神经症状。
1.2.3 病理变化 一般表现消瘦和脱水等外观变化。剖
检肝、肺见有瘀血;胃肠呈卡他性炎症;肠系膜淋巴结水
肿;其他未见明显肉眼可见的病理变化。
1.2.4 实验室检查
1.2.4.1 细菌分离培养 无菌采取心、肝、肺、肾组织涂
片,革兰氏染色,镜检,在肝、肺组织涂片发现红色、单个、




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