全 文 ：本实验结果显示，索拉非尼３，１０和３０μｍｏｌ·
Ｌ－１对甲状腺癌细胞株８５０５Ｃ的增殖具有显著抑制
作用，且随着浓度升高和作用时间延长其抑制作用
增强；对甲状腺癌细胞株８５０５Ｃ迁移和侵袭具有抑
制作用，并且随浓度升高抑制作用增强。ＦＡＫ是细
胞内多条信号转导通路的交汇点，ＦＡＫ自身磷酸
化可使其激活，ｐ－ＦＡＫ是ＦＡＫ分子Ｎ－末端的磷酸
化活化位点［１９］。ＦＡＫ活化后可通过ＥＲＫ途径引
起级联反应，最终影响细胞内相关的基因表达，促进
细胞增殖、转移和侵袭，对细胞的生物学行为具有重
要影响［５］。索拉非尼３，１０和３０μｍｏｌ·Ｌ
－１对甲状
腺癌细胞株８５０５Ｃ的ＦＡＫ　ｍＲＮＡ表达具有抑制
作用，其作用随索拉非尼浓度升高抑制作用增强。
因此，索拉非尼对甲状腺癌细胞株８５０５Ｃ的作用可
能与索拉非尼抑制ＦＡＫ信号通路有关。
总之，索拉非尼对甲状腺未分化癌的增殖、迁移
和侵袭具有显著的抑制作用，其作用可能与索拉非
尼抑制ＦＡＫ信号通路有关。
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［收稿日期］２０１４－０３－０１
［基金项目］国家科技重大新药创制专项资金项目（编号：２００９ＺＸ０９１０２－１３４）；南京军区医学科技创新经费资助项目（编号：１２ＭＡ０２７）　［作者
简介］李霞，女，硕士，药学研究一级工程师，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｘ６８０４８０６＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］孙连娜，女，博士，副教授，硕士生导师，电话：０２１－
８１８７１３０８，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｓｓｎｍｒ＠１６３．ｃｏｍ．ｃｎ
甘西鼠尾草药材和提取物中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ的含量测定
李霞１，２，杨阳１，３，黄豆豆１，黄光辉１，孙连娜１　 （１．第二军医大学药学院生药学教研室，上海２００４３３；２．华润三九医药股
份有限公司研发中心，广东 深圳５１８０２９；３．解放军第九七医院药剂科，江苏 徐州２２１００４）
［摘要］　目的：建立高效液相色谱法测定甘西鼠尾草药材和提取物中迷迭香酸和丹酚酸Ｂ的含量，并进行品质评价。方法：
色谱柱为Ｄｉｋｍａ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８柱，流动相为乙腈－０．０５％磷酸水梯度溶液，流速为１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１，检测波长２８８　ｎｍ，柱温为３０
·４３６１· 中国医院药学杂志２０１４年１０月第３４卷第１９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｏｃｔ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１９
℃。结果：测定了１６个产地的甘西鼠尾草药材和１５个批次的提取物中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ的含量。结论：不同产地之间的甘
西鼠尾草药材和不同批次之间的提取物中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含量均具有显著差异。本测定方法简单快速、精密准确，适用
于甘西鼠尾草药材及提取物中水溶性酚酸类成分的含量测定，能够对药材及提取物进行质量控制。
［关键词］　甘西鼠尾草；提取物；迷迭香酸；丹酚酸Ｂ；含量测定；品质评价
［中图分类号］Ｒ９２７．２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）１９－１６３４－０５　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．１９．０５
Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｆｒｏｍＳａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉ　ａｎｄ　ｉｔｓ
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ＬＩ　Ｘｉａ１，２，ＹＡＮＧ　Ｙａｎｇ１，３，ＨＵＡＮＧ　Ｄｏｕ－ｄｏｕ１，ＨＵＡＮＧ　Ｇｕａｎｇ－ｈｕｉ　１，ＳＵＮ　Ｌｉａｎ－ｎａ１（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒ－
ｍａｃｏｇｎｏｓｙ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｓｅｃｏｎｄ　Ｍｉｌｉｔａｒｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００４３３，Ｃｈｉｎａ；２．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
Ｃｅｎｔｅｒ，Ｃｈｉｎａ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　Ｓａｎｊｉｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｓｈｅｎｇｚｈｅｎｇ５１８０２９，Ｃｈｉｎａ；３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ
ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｈｅ　９７ｔｈ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＰＬＡ，Ｊｉａｎｇｓｕ　Ｘｕｚｈｏｕ　２２１００４，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｆｒｏｍＳａｌ－
ｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅｉｒ　ｑｕａｌｉｔｙ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗａｓ　Ｄｉｋｍａ　Ｄｉａ－
ｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８，ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｗａｓ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ　ａｎｄ０．０５％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｋｅｐｔ
ａｔ　１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１，ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅ　ｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　２８８　ｎｍ，ａｎｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ
ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｉｎ　Ｓ．ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　ｆｒｏｍ１６　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｈａｂｉｔａｔｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｉｔｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ１５　ｄｉｆ－
ｆｅｒｅｎｔ　ｂａｔｃｈｅｓ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｉｎ　Ｓ．
ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｈａｂｉｔａｔｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｉｔｓ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂａｔｃｈｅｓ．Ｔｈｉｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｆａｓｔ，ｐｒｅ－
ｃｉｓｅ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ．Ｉｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｗａｔｅｒ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍＳ．ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ；ｅｘｔｒａｃｔ；ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ；ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ；ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ｑｕａｌｉｔｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ
　　甘西鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　Ｍａｘｉｍ．）为
唇形科（Ｌａｂｉａｔａｅ）鼠尾草属（Ｓａｌｖｉａ）植物，又名大紫
丹参、紫丹参、甘肃丹参，多年生草本，主要产自我国
甘肃西部、四川西部、云南西北部及西藏等地，生于
林缘、路旁、沟边、灌丛下，根和根茎入药，味微苦，性
微寒，具有调经、活血、散淤、镇静止痛的功效［１－２］。
作为区域性药材，药用历史远久，品质优良且资源丰
富，具有十分诱人的研究及开发应用前景［３］。
甘西鼠尾草与常用中药丹参（Ｓ．ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ
Ｂｇｅ．）同属，含有的丹参酮类、酚酸类化学成分与丹
参类似［４］。本题组对甘西鼠尾草进行了较为系统的
研究，制备了对血清病性肾小球肾炎模型大鼠具有
较好治疗作用的甘西鼠尾草提取物（Ｓ．ｐｒｚｅｗａｌ－
ｓｋｉｉ　ｅｘｔｒａｃｔ，ＳＰＥ）［５］，并从中首次分离鉴定了４个新
的二萜化合物［６－８］和１个新的单萜苷化合物［７］。为
对甘西鼠尾草药材及提取物进行质量控制，本研究
运用高效液相色谱法测定甘西鼠尾草药材及提取物
中迷迭香酸和丹酚酸Ｂ的含量，并考察其品质差
异，现报道如下。
１　材料
１．１　仪器与试剂　Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ电光分析天平（最大
载荷２１０　ｇ，分度值０．０１　ｍｇ）；Ｗａｔｅｒｓ液相色谱仪
（ＰＤＡ检测器），Ｅｍｐｏｗｅｒ工作站。乙腈为色谱纯，
水为重蒸水，其他试剂为分析纯。
１．２　试药
１．２．１　药材　甘西鼠尾草药材于２００９年９—１０月
采购于甘肃、四川、青海、云南等１６个市县地区（编
号ＳＰ－０１～ＳＰ－１６），经第二军医大学药学院生药学
教研室张汉明教授鉴定为唇形科鼠尾草属植物甘西
鼠尾草（Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　Ｍａｘｉｍ．）的干燥根和
根茎，标本存放于第二军医大学药学院生药学教研
室标本室。
１．２．２　提取物［９］　甘西鼠尾草干燥根和根茎药材５
ｋｇ，粉碎后过１０目筛，常温下经５０％乙醇溶液浸泡
４８　ｈ后，用５０％乙醇溶液７５　Ｌ渗漉提取３次，合并提
取液，减压浓缩得流浸膏０．６　ｋｇ。流浸膏加水溶解，
离心后上清液进行大孔吸附树脂柱色谱，先用１００　Ｌ
纯水洗脱除去糖分及杂质，再用１００　Ｌ的５０％乙醇溶
液进行洗脱，洗脱液浓缩干燥后，即得棕褐色粉末状
甘西鼠尾草提取物９０　ｇ。选取甘肃临夏、甘肃康乐、
甘肃文县产地的甘西鼠尾草药材，共制备１５个批次
的提取物（编号ＳＰＥ－ｂ０１～ＳＰＥ－ｂ１５）。
１．２．３　对照品　迷迭香酸（ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ）对照品、
丹酚酸Ｂ（ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ）对照品，本课题组自制，
经高效液相色谱检查（面积归一化法），纯度均大于
９９％。
·５３６１·中国医院药学杂志２０１４年１０月第３４卷第１９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｏｃｔ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１９
２　方法
２．１　色谱条件　色谱柱为Ｄｉｋｍａ　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ　Ｃ１８柱
（４．６　ｍｍ×２５０　ｍｍ，５μｍ）；流动相为乙腈－０．０５％
磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为１．０ｍｌ·ｍｉｎ－１；检测
波长２８８　ｎｍ；柱温３０℃；峰面积按外标法计算。流
动相梯度洗脱条件见表１。色谱图见图１。
表１　流动相梯度洗脱条件
Ｔａｂ　１　Ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
时间／ｍｉｎ 乙腈／％ ０．０５％磷酸水溶液／％
０～２０　 １２→２０　 ８８→８０
２０～６０　 ２０→３０　 ８０→７０
６０～６５　 ３０→１２　 ７０→８８
图１　高效液相色谱图
Ａ．迷迭香酸、丹酚酸Ｂ对照品；Ｂ．甘西鼠尾草药材（ＳＰ－０５）；Ｃ．甘西
鼠尾草提取物（ＳＰＥ－ｂ１５）；１－迷迭香酸；２－丹酚酸Ｂ
Ｆｉｇ　１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
Ａ．ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ，ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｃｏｎｔｒｏｌ；Ｂ．Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌ（ＳＰ－０５）；１－ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ；２－ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　Ｂ
２．２　对照品溶液的制备　取迷迭香酸、丹酚酸Ｂ
对照品适量，精密称定质量，置于１０　ｍｌ量瓶中，
３０％甲醇溶解并定容，配制成迷迭香酸、丹酚酸Ｂ
质量浓度分别为７３５．０，４４８．０μｇ·ｍｌ
－１的对照品溶
液。
２．３　供试品溶液的制备
２．３．１　药材溶液　分别取１６个产地的甘西鼠尾草
药材粉末约１．２　ｇ，精密称定质量，分别置于１００　ｍｌ
具塞锥形瓶中，精密加入３０％甲醇１５　ｍｌ，称定质
量，放置过夜后，超声３０　ｍｉｎ，再次称定质量，用
７０％甲醇补足质量，过滤，续滤液过０．４５μｍ微孔滤
膜后备用。
２．３．２　提取物溶液　分别取１５个批次的甘西鼠尾
草提取物粉末约１５　ｍｇ，精密称定，分别置于１０　ｍｌ
量瓶中，３０％甲醇溶解并定容，摇匀，过滤，续滤液过
０．４５μｍ微孔滤膜后备用。
２．４　标准曲线的制备　精密量取上述对照品溶液，
倍比稀释，配制成迷迭香酸质量浓度为２２．９７，
４５．９４，９１．８８，１８３．７５，３６７．５，７３５．０μｇ·ｍｌ
－１，丹酚
酸Ｂ质量浓度为２２．４，４４．８，８９．６，１７９．２，３５８．４，
４４８．０μｇ·ｍｌ
－１的系列溶液。各取２０μｌ注入高效
液相色谱仪中，按照上述色谱条件进行测定，以质量
浓度（μｇ·ｍｌ
－１）为横坐标Ｘ 轴，峰面积（Ａ）为纵坐
标Ｙ 轴，分别进行回归分析。迷迭香酸溶液回归方
程为：Ｙ＝４３　０９５　Ｘ＋６９　４８２（Ｒ２＝０．９９９　９，ｎ＝６），
在２２．９７～７３５．０μｇ·ｍｌ
－１的范围内呈线性。丹酚酸
Ｂ 溶 液 回 归 方 程 为：Ｙ ＝１５　５０８．４０７　３　Ｘ －
３９　６１０．７０７　３（Ｒ２＝０．９９９　４，ｎ＝６），在２２．４～４４８．０
μｇ·ｍｌ
－１的范围内呈线性。
２．５　精密度试验　取迷迭香酸、丹酚酸Ｂ质量浓
度分别为７３５．０，４４８．０μｇ·ｍｌ
－１的对照品溶液，按照
上述色谱条件进行测定。连续测定６次，考查日内
精密度。测得迷迭香酸对照品溶液的质量浓度为
（７３１．１７±５．０３）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为０．６９％；丹酚酸Ｂ
对照品溶液的（４４４．０５±１．６５）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为
０．３７％。连续３　ｄ，每天测定１次，考查日间精密度。
测得迷迭香酸对照品溶液质量浓度为（７３４．６９±
８．３６）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为１．１４％；丹酚酸Ｂ对照品溶
液浓 度 为 （４４５．１８±３．７９）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ 为
０．８５％。
２．６　稳定性试验　取迷迭香酸、丹酚酸Ｂ质量浓
度分别为７３５．０，４４８．０μｇ·ｍｌ
－１的对照品溶液，按照
上述色谱条件，每隔２　ｈ测定１次，分别连续测定６
次。测得迷迭香酸对照品溶液质量浓度为（７３８．３２
±６．７５）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为０．９１％；丹酚酸Ｂ对照品
溶液质量浓度为（４４６．９５±２．８５）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为
０．６４％。分别取甘西鼠尾草药材（ＳＰ－０５）、提取物
（ＳＰＥ－ｂ１５）的供试品溶液，按照上述色谱条件，每隔
２　ｈ测定１次，分别连续测定６次。测得ＳＰ－０５中迷
迭香酸质量浓度为（４８０．８１±６．０３）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ
为１．２６％；丹酚酸Ｂ质量浓度为（１４０．７５±１．３４）μｇ
·ｍｌ－１，ＲＳＤ为０．９５％。测得ＳＰＥ－ｂ１５中迷迭香酸
质量浓度为 （４６８．８９±６．２８）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ 为
１．３４％；丹酚酸Ｂ质量浓度为（８１．２２±０．９９）μｇ·
ｍｌ－１，ＲＳＤ为１．２１％。
２．７　重复性试验　分别取甘西鼠尾草药材（ＳＰ－
０５）、提取物（ＳＰＥ－ｂ１５）的供试品溶液，按照上述色
谱条件分别连续测定６次。测得ＳＰ－０５中迷迭香酸
质量浓度为 （４８１．４４±５．４９）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ 为
１．１４％；丹酚酸Ｂ质量浓度为（１４１．００±１．１０）μｇ·
ｍｌ－１，ＲＳＤ为０．７８％。测得ＳＰＥ－ｂ１５中迷迭香酸质
量浓度为（４６８．１６±５．７７）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ为１．２３％；
丹酚酸Ｂ质量浓度为（８１．２７±０．９１）μｇ·ｍｌ
－１，ＲＳＤ
为１．１２％。
２．８　加样回收率试验　取已测定含量的甘西鼠尾
草药材（ＳＰ－０５）粉末约０．５　ｇ，精密称定６份，分别加
入含量约为８０％，１００％，１２０％的迷迭香酸、丹酚酸
Ｂ对照品，以“２．３．１”项下方法处理，按照上述色谱
条件进行测定，计算加样回收率。取已测定含量的
·６３６１· 中国医院药学杂志２０１４年１０月第３４卷第１９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｏｃｔ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１９
提取物（ＳＰＥ－ｂ１５）粉末约１０　ｍｇ，精密称定６份，分
别加入含量约为８０％，１００％，１２０％的迷迭香酸、丹
酚酸Ｂ对照品，以供试品溶液的制备中提取物溶液
的制备方法处理，按照上述色谱条件进行测定，计算
加样回收率。结果见表２。
表２　甘西鼠尾草药材及提取物加样回收试验结果（ｎ＝６）
Ｔａｂ　２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌ－
ｓｋｉｉ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔ（ｎ＝６）
样品
测定
成分
供试品中含有量
／ｍｇ
对照品加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均回收率
／％
ＲＳＤ
／％
甘西鼠尾草
药材
（ＳＰ－０５）
迷迭
香酸
３．１１　 ２．４５　 ５．５５　 ９９．５９
３．０９　 ２．４５　 ５．４６　 ９６．７３
２．９８　 ３．０６　 ６．０３　 ９９．６７
３．１０　 ３．０６　 ６．１２　 ９８．６９
３．００　 ３．６７　 ６．６０　 ９８．０９
３．０６　 ３．６７　 ６．７０　 ９９．１８
９８．６６　 １．１３
丹酚
酸Ｂ
０．９２　 ０．７２　 １．６１　 ９５．８３
０．９１　 ０．７２　 １．６１　 ９７．２２
０．８８　 ０．９０　 １．７６　 ９７．７８
０．９１　 ０．９０　 １．７９　 ９７．７８
０．８９　 １．０８　 １．９７　１００．００
０．９　 １．０８　 １．９７　 ９９．０７
９７．９５　 １．４８
甘西鼠尾草
提取物
（ＳＰＥ－ｂ１５）
迷迭
香酸
３．１４　 ２．５４　 ５．６６　 ９９．２１
３．２０　 ２．５４　 ５．７５　１００．３９
３．１８　 ３．１６　 ６．２９　 ９８．４２
３．１５　 ３．１６　 ６．２５　 ９８．１０
３．１６　 ３．８０　 ６．９３　 ９９．２１
３．１７　 ３．８０　 ６．８９　 ９７．８９
９８．８７　 ０．９４
丹酚
酸Ｂ
０．５５　 ０．４４　 ０．９８　 ９７．７３
０．５６　 ０．４４　 ０．９９　 ９７．７３
０．５６　 ０．５５　 １．０９　 ９６．３６
０．５５　 ０．５５　 １．０９　 ９８．１８
０．５５　 ０．６６　 １．２０　 ９８．４８
０．５５　 ０．６６　 １．２２　１０１．５２
９８．３３　 １．７５
３　结果
按照上述方法测定１６个产地的甘西鼠尾草药
材，以及１５个批次的甘西鼠尾草提取物样品中的迷
迭香酸、丹酚酸Ｂ含量，结果见表３，４。
表３　甘西鼠尾草药材中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含量测定结果
（ｎ＝３）
Ｔａｂ３　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ，
ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｉｎ　Ｓａｌｖｉａ　ｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ
（ｎ＝３）
药材编号 迷迭香酸／％ 丹酚酸Ｂ／％ 产地
ＳＰ－０１　 ０．７４　 ０．０９ 甘肃兰州
ＳＰ－０２　 ０．７７　 ０．２３ 甘肃临夏
ＳＰ－０３　 ０．７０　 ０．２９ 甘肃康乐
ＳＰ－０４　 ０．４５　 ０．０５ 甘肃陇南
ＳＰ－０５　 ０．６１　 ０．１８ 甘肃文县
ＳＰ－０６　 ０．１６　 ０．０８ 甘肃礼县
ＳＰ－０７　 ０．５６　 ０．１１ 甘肃定西
ＳＰ－０８　 ０．１３　 ０．０５ 甘肃漳县
ＳＰ－０９　 ０．４２　 ０．１４ 甘肃岷县
ＳＰ－１０　 ０．１２　 ０．０３ 甘肃渭源
ＳＰ－１１　 ０．１１　 ０．０４ 四川阿坝
ＳＰ－１２　 ０．３２　 ０．０３ 四川甘孜
ＳＰ－１３　 ０．５０　 ０．０７ 青海贵德
ＳＰ－１４　 ０．６２　 ０．０４ 青海同仁
ＳＰ－１５　 ０．７０　 ０．１０ 云南中甸
ＳＰ－１６　 ０．６４　 ０．１１ 云南丽江
表４　甘西鼠尾草提取物中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含量测定结
果（ｎ＝３，％）
Ｔａｂ４　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｏｓｍａｒｉｎｉｃ　ａｃｉｄ，
ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｉｎ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ（ｎ＝３，％）
提取物编号 迷迭香酸／％ 丹酚酸Ｂ／％
ＳＰＥ－ｂ０１　 ２２．９３　 ９．９０
ＳＰＥ－ｂ０２　 １５．１７　 ７．７２
ＳＰＥ－ｂ０３　 ５．９２　 ２．９７
ＳＰＥ－ｂ０４　 ５．９１　 ２．６２
ＳＰＥ－ｂ０５　 ５．００　 ２．３６
ＳＰＥ－ｂ０６　 ４．３９　 １．８１
ＳＰＥ－ｂ０７　 ６．２２　 ３．３１
ＳＰＥ－ｂ０８　 ５．７６　 ２．７４
ＳＰＥ－ｂ０９　 １５．７２　 ８．３３
ＳＰＥ－ｂ１０　 ９．２４　 ５．６２
ＳＰＥ－ｂ１１　 １９．２４　 １１．５５
ＳＰＥ－ｂ１２　 １９．８３　 １０．９１
ＳＰＥ－ｂ１３　 １６．７２　 １０．３７
ＳＰＥ－ｂ１４　 ５．１８　 ３．７５
ＳＰＥ－ｂ１５　 ３１．５８　 ５．５２
４　讨论
　　在提取溶剂选择上，课题组分别考察了甲醇、
７０％甲醇、５０％甲醇、３０％甲醇和水等５种不同的提
取溶剂对甘西鼠尾草药材中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含
量的提取影响，其中，采用３０％甲醇提取时迷迭香
酸、丹酚酸Ｂ的含量均为最高，故确定３０％甲醇为
药材及提取物提取溶剂。
在色谱流动相选择上，课题组分别考察了甲醇－
水、乙腈－水、甲醇－０．０５％磷酸水和乙腈－０．０５％磷酸
水等４种流动相系统，发现乙腈－０．０５％磷酸水系统
的分离效果最好，在合适的分析时间内各色谱峰均
得到了较好分离，故采用乙腈－０．０５％磷酸水系统为
色谱流动相。由于课题组制备的甘西鼠尾草提取物
与中国药典收载的丹参总酚酸提取物［１０］所含的主
要水溶性酚酸类成分相似，故两者的含量测定色谱
流动相系统一致。
含量测定结果显示，１６个产地的甘西鼠尾草药
材中迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含量均具有较大差异，说
明地域条件是影响甘西鼠尾草药材化学成分含量的
重要因素，近而影响生药药材品质。以产自甘肃临
夏、甘肃康乐、甘肃文县的甘西鼠尾草药材品质为较
佳。课题组选取以上产地的甘西鼠尾草药材，按照
固定工艺进行处理，得到的甘西鼠尾草提取物中的
迷迭香酸、丹酚酸Ｂ含量相对原生药材中的含量具
有了较大的提高，但不同批次之间的含量仍存在着
较大差异，说明了药材的品质差异能够直接导致提
取物的质量差异，突显了药材采购时对其进行品质
鉴定的重要性。
此外，１６个产地的甘西鼠尾草药材以及１５个
批次的提取物中迷迭香酸含量均高于丹酚酸Ｂ含
·７３６１·中国医院药学杂志２０１４年１０月第３４卷第１９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｏｃｔ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１９
量，无一例外；而中国药典收载的丹参中要求丹酚酸
Ｂ含量不得少于３．０％、迷迭香酸含量不作要求，丹
参总酚酸提取物中要求丹酚酸 Ｂ含量不得少于
５．０％、迷迭香酸含量不得少于０．５％［１０］。仅就迷迭
香酸、丹酚酸Ｂ的含量而言，两药材及提取物之间
具有显著区别，说明迷迭香酸与丹酚酸Ｂ之间的含
量差异可以作为鉴别甘西鼠尾草与丹参药材及总酚
酸提取物的必要条件。
本文建立的高效液相色谱法能够使甘西鼠尾草
药材及提取物中迷迭香酸和丹酚酸Ｂ２种水溶性成
分达到基线分离，且分离度良好，样品前处理快捷，
测定方法简单快速、精密准确，适用于甘西鼠尾草药
材及提取物中水溶性酚酸类成分的含量测定，能够
对药材及提取物进行质量控制，对于甘西鼠尾草药
材资源的开发利用具有重要意义。
参考文献：
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［１０］中国药典．一部［Ｓ］．２０１０：７０－７１，３７３－３７４．
［收稿日期］２０１３－０５－２０
［基金项目］国家自然科学基金面上项目（编号：８１１７３５３７）；广西中医药科技专项项目（编号：ＧＺＢＺ１４－２１）；广西自然科学基金项目（编号：
２０１０ＧＸＮＳＦＡ０１３２６４）　［作者简介］苏本伟，研究生，工程师，研究方向：中药质量标准研究、中药制剂研发，电话：０７７７－２８７８４４３，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｏ－
ｓｕｂｅｎｗｅｉ＠１６３．ｃｏｍ　［通讯作者］李永华，博士，研究员，研究方向：中药质量标准研究、民族医药分子鉴定，电话：０７７１－３１３７５３５，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｙｏｎ－
ｇｈｕａ１８５＠１２６．ｃｏｍ
桑寄生中槲皮素的提取工艺
苏本伟１，２，３，张协君１，朱开昕２，赵明惠２，李永华３　 （１．钦州市中医药研究所，广西 钦州５３５０００；２．钦州市中医医院，广
西 钦州５３５０００；３．广西中医药大学药学院，广西 南宁５３０００１）
［摘要］　目的：优选桑寄生中槲皮素的提取工艺。方法：采用正交试验方法，以槲皮素含量为考察指标进行试验。结果：优选
的提取工艺条件为取桑寄生药材粉末加５０倍量甲醇－盐酸（２３∶２）溶液回流提取１次，每次２　ｈ。结论：优选的提取方法操作简
单、方便，工艺稳定可行，提取率较高，可作为桑寄生生产工艺及质量控制的参考。
［关键词］　桑寄生；槲皮素；提取工艺；正交试验
［中图分类号］Ｒ９４３　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）１９－１６３８－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．１９．０６
Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｏｆ　Ｔａｘｉｌｉ　Ｈｅｒｂａ
ＳＵ　Ｂｅｎ－ｗｅｉ　１，２，３，ＺＨＡＮＧ　Ｘｉｅ－ｊｕｎ１，ＺＨＵ　Ｋａｉ－ｘｉｎ２，ＺＨＡＯ　Ｍｉｎｇ－ｈｕｉ　２，ＬＩ　Ｙｏｎｇ－ｈｕａ３（１．Ｑｉｎｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｑｉｎｚｈｏｕ５３５０００，Ｃｈｉｎａ；２．Ｑｉｎｚｈｏｕ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ
Ｑｉｎｚｈｏｕ　５３５０００，Ｃｈｉｎａ；３．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｎａｎｎｉｎｇ，５３０００１，
Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｔａｘｉｌｉ　Ｈｅｒｂａ．ＭＥＴＨＯＤＳ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｔｅｃｈｎｏｌ－
ｏｇｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｃａｒｒｙｉｎｇ　ｏｕｔ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｗａｓ　ａｓ　ｆｏｌｏｗｓ：
ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｌａｓｔｅｄ　ｆｏｒ　２　ｈ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈａｎｏｌ－ｈｙｄｒｏｃｈｌｉｒｉｃ　ａｃｉｄ（２３∶２），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｓｏｌｉｄ　ｔｏ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｗａｓ　１∶５０．ＣＯＮＣＬＵ－
ＳＩＯＮ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ，ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｓ　ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｆｅａｓｉｂｌｅ，ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ，ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｐｒｏｄｕｃ－
ｔｉｏｎ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｏｆ　Ｔａｘｉｌｉ　Ｈｅｒｂａ　ａｎｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｔａｘｉｌｉ　Ｈｅｒｂａ；ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
·８３６１· 中国医院药学杂志２０１４年１０月第３４卷第１９期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ｏｃｔ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．１９