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千里光与甲氧苄氨嘧啶联用抗菌作用实验研究



全 文 :表 1 加样回收率实验结果


样品重量
m/g
样品含量
m /mg
加对照品量
m/mg
实测浓度
C/mg· ml-1
测定量
m /mg
计算量
m/mg
回收率
(%)
1 1.250 3 1.017 1.006 0.401 2.005 0.988 4 98.2
2 1.255 0 1.020 1.006 0.399 1.977 0.976 7 98.2
3 1.254 0 1.020 1.006 0.398 1.990 0.970 5 96.5
4 1.252 8 1.019 1.006 0.397 1.985 0.966 5 96.1
5 1.259 9 1.024 1.006 0.408 2.039 1.014 7 100.9
2.8 稳定性实验 取同一供试品溶液 , 分别于 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16,
20, 24h进样 , 测定 , RSD=2.1%。
2.9 3批中试样品测定 按拟定的含量测定方法对 3批中试样
品进行测定。结果见表 2。
表 2 样品中黄芪甲苷的测定结果 mg· g-1
批号 含量测定值 1     2     3  平均含量
031017 0.809 0.813 0.820 0.814
031021 0.819 0.823 0.816 0.819
031025 0.833 0.834 0.829 0.832
  n=3
3 讨论
3.1  黄芪为本方的君药 , 皂苷类成分为黄芪的有效成分 , 黄芪
甲苷为皂苷类成分的主要组分 ,故选择黄芪甲苷为控制本品质量
的指标成分 , 黄芪中黄芪甲苷的测定 ,已报道的有薄层扫描法 、高
效液相色谱法等 。本标准对照有关文献 ,建立高效液相色谱一蒸
发光散射检测的黄芪甲苷含量的测定方法 , 具有分离效果好 、灵
敏 、准确等优点。
3.2  在进行黄芪甲苷色谱条件优化试验中 ,我们选择了不同的
流动相:不同配比的乙腈∶水;甲醇∶水。 发现乙腈∶水为较优
组合 , 经过比较 , 确定乙腈∶水(36∶64)为最佳流动相。在运用
ELSD-2000选择漂移管温度 、气体流量 , 经过筛选 , 确定漂移管
温度 110℃,气体流量为 2.3 L/min, 为最佳色谱条件 , 在此条件
下黄芪甲苷峰与相邻成分达到基线分离 ,理论塔板数以黄芪甲苷
计可达 5 000。
3.3  根据 3批中试结果 , 本品中黄芪甲苷含量的下限暂定为平
均含量下浮 20%,即为 0.60 mg/g。
3.4  根据本品为颗粒剂 , 在本品前处理方法的确定中 , 选择通
过比较最终确定了用水直接浸泡的前外理步骤。
3.5  本文建立的含量测定方法 , 能有效地控制童喘清颗粒的质
量 , 方法简便 、回收率好 、精度高 、重现性好。
参考文献:
[ 1 ]  国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2000:249.
[ 2 ]  钱广生 ,刘三康 ,李章方.HPLC测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量
[ J] .华西药学杂志 , 2002, 17(1):41.
收稿日期:2005-07-25; 修订日期:2006-01-16
作者简介:张文平(1969-),男(汉族),江西南城人 ,现任赣南医学院副教
授 ,硕士学位 ,主要从事中草药抗感染。
千里光与甲氧苄氨嘧啶联用抗菌作用实验研究
张文平 , 张文书 , 曾雪英
(赣南医学院 ,江西 赣州 341000)
摘要:目的 探讨甲氧苄氨嘧啶(TMP)对千里光抗菌增效作用。方法 采用琼脂稀释法对比研究了千里光 、TMP及千里
光与 TMP联用对种 5种不同细菌的体外抗菌作用。结果 千里光与甲氧苄氨嘧啶配伍后 ,对实验所用 4种细菌均有增效
作用。结论 TMP与千里光联用具协同作用。
关键词:千里光; 甲氧苄氨嘧啶; 联用; 抗菌作用
中图分类号:R2-031  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2006)06-0944-01
  千里光 SenecioscandensBuch-Ham系菊科千里光属植物 ,
我国南方各省均有分布 , 该药性凉味苦 , 具有清热解毒 、消炎凉
血 、明目止痛 、去腐生肌之功效。近代药理研究表明 [ 1] , 千里光
对多种细菌均有抑制作用。 甲氧苄氨嘧啶(TMP)是一种广谱抗
菌增效剂 , 临床上常与磺胺类药联用以增强磺胺类药的抗菌作
用。此外 , 它与其他多种抗生素和一些单味中药或复方合用 ,也
可产生协同作用 [ 2] 。为了探讨 TMP对千里光抗菌活性的影响 ,
实验采用琼脂稀释法对比研究了千里光 、TMP及千里光与 TMP
联用对 5种不同细菌的体外抗菌作用。
1 材料
1.1 药品及配制
1.1.1 千里光 购于江西赣南医学院附属医院中药房。 取干燥
生药 10g, 常规煎煮浓缩成 50 ml。取 10 ml浓缩成浸膏状 ,加入
无菌普通肉汤培养基 10 ml, 微热使溶 ,摇匀即得 200 mg/ml的
千里光供试药液。
1.1.2 TMP购自山东淄博新达制药有限公司 , 批号:0202018。
称取 TMP50 mg于试管中 ,加入肉汤 10 ml, 微热使溶 ,摇匀即得
5 mg/ml的 TMP供试药液。
1.1.3 千里光 TMP复方 取上述千里光煎剂 10 ml浓缩成浸膏
状 , 再加入 TMP100mg及肉汤培养基 10 ml,微热使溶 , 摇匀即得
含千里光与 TMP分别为 200mg/ml, 5 mg/ml的复方供试药液。
1.2 实验菌种 金黄色葡萄球菌(47-1800A+)、福氏痢疾杆菌
(F2a51573)、乙型福伤寒杆菌(50602 -5)、大肠杆菌(44814 -
3)、绿脓杆菌(10102)均为中央标准株 , 购于中国药品生物制品
检定所 。分别取上述菌株的普通琼脂平板 18 h培养物(对数
期),通过比浊法 , 用无菌生理盐水调整菌液浓度 1×108cfu/ml,
备用。
2 方法
2.1  采用试管内药液稀释法(二倍稀释法)试验。无菌试管 3
排 , 每排 15管。除每排的第 14管外 , 其余各管中均加入无菌肉
汤 5 ml,然后于每排试管的第 1管分别加入上述 3种供试药液 5
ml, 然后于每排试管的第 1管分别加入上述 3种供试药液 5 ml,
混匀 , 吸取 5 ml加至第 2管中 , 混匀 ,同法依次稀释至第 13管 , 混
匀后吸出 5ml于第 14管中。每排的第 14管作无菌阴性对照管 ,
第 15管作无药阳性对照管。然后于各管中加 5 ml热无菌肉蛋
白胨琼脂 ,摇匀 , 趁热依次倾入到同一型号的无菌培养皿中 ,放置
使琼脂冷凝。
2.2  第 14号培养皿外 , 1 ~ 15号培养皿分别划分为 5分近等的
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.6 
区域 , 并分别编号 ,然后在每个区域中分别加入 5种经 8 h培养
的各含菌培养液 0.01 ml, 37℃培养 18 ~ 24 h左右 , 以细菌生长
的有无作为判断指标。具抗菌作用指接种区光滑无可见菌落;无
抗菌作用指接种区可见大片细菌生长。为便于直观比较分析 ,实
验结果以抗菌作用最大稀释试管号表示。
3 结果
千里光 、TMP及千里光 TMP复方对 5种细菌的抗菌作用见
表 1。
表 1 各供试液抗菌作用结果(试管号)
分组 金葡萄菌 绿脓杆菌 大肠杆菌 福氏痢疾杆菌 乙副伤寒杆菌
TMP 4 3 0 0 0
千里光 5 2 4 7 4
TMP+千里光 8 3 9 10 8
  1~ 13管药物稀释倍数依次为原浓度的 1/2, 1/4, 1/8, 1/16, 1/32 , 1/64, 1/128,
1/256, 1/512, 1/1024, 1/2048, 1/4096, 1/8192。 0:表示第 1管(1/2倍原浓度)即无
抗菌作用
4 讨论
文献报导千里光是一种抗菌谱广 、临床疗效显著的植物抗菌
药 , 体外对金黄色葡萄球菌 、福氏痢疾杆菌 、乙型副伤寒杆菌 、大
肠杆菌 、绿脓杆菌等细菌均有抑制作用 , 本文用琼脂稀释法所得
千里光抗菌作用结果与此相符 [ 1] 。 TMP是人工合成的的二氨基
嘧啶类抗菌药 ,为二氢叶酸还原酶抑制剂 , 可选择性地抑制细菌
二氢叶酸还原酶的活性 ,其单独应用时抗菌作用较弱 , 但与许多
抗菌药物合用时 ,显示出强大的抗菌增效作用。本文实验结果表
明 , 对金黄色葡萄球菌 、千里光与 TMP两者。联用较单用千里光
增大 8倍;对绿脓杆菌 , 千里光与 TMP均有较强的抗菌作用 , 两
者联用后抗菌作用无明显增强。 对大肠杆菌 , 千里光联用 TMP
后抗菌活性较单用千里光增大 32倍。对痢疾杆菌 , 千里光有抗
菌作用最强 ,而 TMP在 1∶2稀释度时不显示抗菌作用 , 但两者
联用 , 抗菌活性较单用千里光增大 8倍。对伤寒杆菌 ,千里光有
一定的抗菌作用 , TMP在 1∶2稀释度时不显示抗菌作用 , 两者
联用 , 抗菌活性较单用千里光增大 16倍。以上结果表明 , 千里光
联用 TMP后 ,对实验的 4种细菌(除绿脓杆菌)抗菌活性均大大
增强 , 说明千里光与 TMP联用具有协同作用。
参考文献:
[ 1 ]  高学敏.中药学 ,上册 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 2000:557.
[ 2 ]  李素民 ,王淑梅.TMP对中药的抗菌增效作用 [ J] .临床荟萃 , 1998,
13(5):223.
收稿日期:2005-07-25; 修订日期:2006-01-15
作者简介:原红果(1980-),女(汉族),河南武陟人 ,现在读成都中医药大
学硕士研究 ,主要从事中药制剂与药物分析研究工作.
感冒清热颗粒中葛根素的含量测定研究
原红果 , 王 万 , 陈 博 , 吴纯洁
(成都中医药大学 ,四川 成都 610075)
摘要:目的 建立了高效液相色谱法(HPLC)测定感冒清热颗粒中葛根素含量的方法。方法 采用 HPLC测定制剂中葛根
素的含量。结果 葛根素含量在 0.027 04 ~ 0.405 6 μg范围内 , 线性关系良好(r=0.999 9), 平均回收率为 97.81%, RSD
=1.87%(n=5)。结论 所用方法专属性强 、重复性好 ,可用于该制剂的质量控制。
关键词:感冒清热颗粒; 葛根素; 高效液相色谱
中图分类号:R284.2  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2006)06-0945-02
  感冒清热颗粒处方收载于 《中国药典 》[ 1] ,由荆芥穗等 11味
药组成 , 主要为黄酮类 、皂苷类 、挥发油类等有效成分。具有疏风
散寒 , 解表清热的功效 ,主要用于风寒感冒 ,头痛发热 , 恶寒身痛 ,
鼻流清涕 , 咳嗽咽干。在感冒初起时及时服用 、效果更为理想;同
时 , 它亦可用于预防感冒 ,驱邪而不伤正。由于原质量标准无含
量测定项 , 为有效控制药品内在质量 , 本实验采用高效液相色谱
法对葛根素的含量测定方法进行了研究 ,结果表明该方法简便 、
准确 , 重现性好。
1 仪器 、试药与样品
1.1 仪器 岛津 LC-10ATvp液相色谱仪 , SPD-10Avp紫外检
测器 , 浙江大学 2010色谱数据工作站;sartoriusBP211D电子天平
(感量 0.1 mg;0.01 mg。载量 210 g;80 g);autoscienceAS5150A
超声波清洗器;TGL-16G高速离心机。
试剂:甲醇为色谱纯(FisherChemicals), 水为重蒸馏水 , 其
余试剂均为分析纯。
1.2 试药 葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供 , 批
号:752-200108, 供含量测定用)。
2 方法
2.1 含量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱:Diamonsil(钻石)C18柱(5 μm, 150 mm
×4.6 mm),柱温:30℃。流动相为甲醇-水-冰醋酸(25∶75∶1),
流速 1.0 ml/min。检测波长:250 nm。
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取葛根素对照品 13.52 mg, 置
50 ml量瓶中 , 加 30%乙醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,精密吸取 1
ml置 20 ml量瓶中 ,加 30%乙醇稀释至刻度 , 即得(每毫升中含
葛根素 13.52 μg)。
2.1.3 供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物 , 研细 , 取
0.8 g(有糖型), 精密称定 ,置具塞锥形瓶中 , 精密加入 30%乙醇
50 ml, 密塞 , 称定重量 , 超声处理(功率 250 W, 频率 33 kHz)20
min,放冷 , 再称定重量 , 用 30%乙醇补足减失的重量 , 摇匀 , 滤
过 , 取续滤液 ,离心 ,即得。
2.1.4 缺葛根阴样品溶液的制备 取缺葛根阴性样品 0.8 g, 按
供试品溶液的制备方法缺葛根阴性溶液。
2.1.5 对照品 、供试品 、阴性样品的 HPLC图谱 按上述色谱条
件 , 精密吸取供试品溶液 、对照品溶液各 10 μl, 注入液相色谱仪
中 , 绘制液相色谱图 , 由色谱图提示 , 在对照品色谱相应的位置
上 , 供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰 ,而阴性样品却无相
同保留时间的色谱峰。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.6 时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期