全 文 ：冬青卫矛茎内寄生链格孢属真菌生物学特性分析
邢顺林， 段双全， 许鹏辉
（西藏大学理学院，西藏 拉萨 850000）
摘 要：对从新鲜冬青卫矛茎内分离得到的链格孢属真菌菌株进行培养。结果表明：（1）菌落在 PDA 培养基和改良 KB 培养基
上舒展，白色、垫状，后期菌落变暗褐色，孢子黑色，基质呈黑色；（2）菌株在 25℃培养 14 d 后，在白色菌落表面形成暗褐色菌落，为
菌株分生孢子所形成，并有黑色色素分泌；（3）菌株属于丝孢纲丝孢目链格孢属的一种；（4）对菌株孢子观察后，发现多型现象，即
发现了有性与无性生殖过程，将其有性态定为子囊菌的李维菌属。
关键词：寄生； 冬青卫矛； 链格孢属； 孢子形态
中图分类号：Q949.32 文献标识码：A 文章编号：1004-874X（2012）19-0131-03
Analysis of the biological characteristics of the parasitic
Alternaria in Euonymus japonicus Stem
XING Shun-lin, DUAN Shuang-quan, XU Peng-hui
（School of Science, Tibet University, Lhasa 850000, China）
Abstract: The research studied Alternaria which was separated from the fresh stem of Euonymus japonicas.The results showed that:
(1) fungal colonies thriving in the PDA medium and KB medium features stretched, white-colored, cushion-shaped, became black brown
in later period with spore and stroma being black-colored; (2) black brown fungal colonies formed and covered with the white-colored
fungal colonies after bacterial strain being cultivated for 14 days under a temperature as high as 25℃, which was developed by conidium
strains with black pigment secreting; (3) the bacterial strain in the catalogue of Alternaria, hyphomycete head, hyphomycete gang if
relevant data referred to; (4) the observation on the spores reveals the co-existing of sexual and asexual reproductive processes as the
polymorphism phenomenon, which leads to the conclusion that teleomorph belongs to Lewia.
Key words:parasitism; Euonymus japonicus; Alternaria; spore morphology
链格孢属真菌是一类适应性强、 寄主范围和地理分
布广泛的常见真菌。 一方面， 其能引发多种经济作物病
害，造成产后和田间经济损失，部分链格孢小孢子是动物
和人的条件致病菌，可引发皮癣、甲癣和颚骨髓炎等多种
疾病 [1-2]，某些真菌毒素甚至是引发癌症的重要因素 [3]；另
一方面，链格孢属真菌也具有良好的应用前景，如部分真
菌的次生代谢产物具有灭菌、 杀虫和减弱原生生物活性
的作用 [4]。目前，许多真菌在自然条件下尚未发现有性阶
段，可能是缺乏相对性系的异宗配合菌丝，也可能是失
去功能性的雄性菌系， 导致不能进入有性生殖并产生有
性孢子， 也可能是其发育的不同阶段是在不同的时间和
地点， 目前人们仅发现无性阶段而没有发现有性时期，
只了解其生活史的一半， 通常称这类真菌为半知菌或不
完全菌 [5]。
目前， 链格孢属真菌种级分类主要依据分生孢子和
产孢结构的形态。 由于链格孢属真菌形态特征易受营养
基质和光、温、湿、pH值等条件的影响[1]。 本研究通过对从
新鲜冬青卫予茎内分离得到链格孢属菌株进行培养温
度、菌丝形态和孢子形态观察等手段，探讨西藏半知菌类
丝孢纲丝孢目暗梗孢科链格孢属真菌的生物学特性，以期
进一步了解该属真菌特征。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试新鲜冬青卫矛茎采自拉萨市西藏大学老校区。用
70%乙醇表面消毒后，4℃保存。
供试培养基包括 PDA培养基 （10 g 葡萄糖、200 g 马
铃薯、15 g 琼脂、少量链霉素、1 L 蒸馏水，调 pH 值至 5.5）
和改良 KB培养基[6]（10 g葡萄糖、10 g蛋白胨、1 g酵母膏、
1 g 磷酸二氢钾、0.5 g 硫酸镁、20 g 琼脂、1 L 蒸馏水，调
pH值至 5.5）。
1.2 试验方法
1.2.1 菌株分离和培养 在接种箱内去除冬青卫矛茎的
表皮并切成数块， 放入盛有次氯酸钠溶液的烧杯中 15
min，再依次用硫代硫酸钠、乙醇、无菌水冲洗。将茎用消毒
过的医用手术刀从中切取薄片，接入 PDA 培养基中，25℃
培养 3 d后得到白色真菌菌落，转接到新的平皿中纯化。
1.2.2 菌株鉴定 将分离得到的菌株分别接种于 PDA 培
养基和改良 KB培养基上，25℃培养 14 d 后观察真菌菌丝
生长情况、 孢子颜色、PDA培养基和改良 KB 培养基基质
颜色等变化。
1.2.3 菌株孢子形态观察 将 PDA培养基中培养好的菌
收稿日期：2012-07-05
作者简介：邢顺林（1975-），男，硕士，讲师，E-mail:znbgg@163.com
通讯作者：段双全（1962-），男，副教授，E-mail:dshq2007@yahoo.
com.cn
广东农业科学 2012 年第 19 期 131
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DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2012.19.002
株在接种箱内挑取少许， 以点接方式接入 PDA 培养基和
改良 KB培养基内，25℃培养。 待培养基表面菌丝开始生
长时， 用已消毒好的医用手术刀切取长宽为 2 cm×2 cm
的培养基移到灭菌的载玻片，盖上盖玻片后于 25℃，湿度
86.6%的恒温箱内继续培养， 在显微镜下每 2 d 观察 1次
孢子的发育情况。
2 结果与分析
2.1 菌株形态观察
25℃培养 14 d 后从冬青卫矛茎内分离到得菌株，在
PDA培养基和改良 KB培养基上，形成分散、黑色、子囊座
（图 1）。 菌丝体在两种培养基上起初均为埋生，14 d 后大
部分表生，少数埋生；菌丝的颜色较自然寄主有所加深，无
色至深褐色（图 2A）；分生孢子梗褐色，不分支，具分隔，表
面光滑（图 2B）。
2.2 菌株在培养基上的特性
菌株在 PDA 培养基上菌落舒展，初为白色、垫状，后
期菌落变为暗褐色，孢子黑色，基质呈黑色（图 1A）。 在改
良 KB培养基上菌落舒展，初为白色、垫状，后期菌落变为
暗褐色，孢子黑色，基质呈黑色（图 1B）。
2.3 菌株菌丝形态及孢子形态
2.3.1 菌株菌丝形态 菌株菌丝初为纯白色，生长后期
为深褐色 ，菌丝向外生长迅速 ，菌丝结构紧密 ，不易挑
起。 菌丝呈线形具隔，菌丝体在两种培养基上起初均为
埋生，14 d 后大部分表生，少数埋生 ；菌丝细长 ，分支 ，
幼时无色渐变至深褐色，表面光滑，宽 0.25 ~ 3.7 μm。
在 PDA 分离培养基上菌落平展，初白色，不产生分生孢
子，生长后期分泌黑色色素，开始出现深色的分生孢子
（图 2）。
2.3.2 菌株分生孢子梗、子囊座和孢子形态 （1）无性
态。 菌株分生孢子梗比菌丝粗，颜色较菌丝深，在改良型
KB 培养基和 PDA 培养基中颜色依次加深， 生于菌丝侧
面或顶端，具隔膜，不分枝，6.2～9.4 μm × 4.5～5.5 μm。产
孢细胞以全壁芽生式产生分生孢子，合轴式延伸，分生
孢子为单生的倒梨形， 幼时近椭圆形， 褐色，0.23～0.38
μm×0.39～0.66 μm，成熟时具纵隔，分隔处隘缩明显，孢
身基部钝圆，至顶部渐窄，喙是颜色较孢身淡的丝状真
喙（图 3）。
A：PDA 培养基；B：改良 KB培养基
图 1 菌株在 PDA 培养基、改良 KB 培养基的形态
A B
B
A：营养菌丝形态；B：繁殖菌丝形态
图 2 菌株菌丝形态（400×）
BA
C
A、B：分生孢子形态（1000×）；C：散生的分生孢子（100×）
图 3 菌株无性态分生孢子形态
BA
（2） 有性态。 产孢细胞以全壁外生方式形成单壁子
囊，子囊果为子囊座，近球形或梯形（近球形半径 7.5 μm
左右，梯形 6.91～20.08 μm×7.53 μm～9.40 μm），深褐色，顶
部具乳突状孔口部，表面光滑，砖格状，乳突状孔口部有
子囊孢子溢出（图 4、图 5）。
3 结语
通过安斯沃斯分类系统与中国真菌志第十六卷等资
料的查阅，根据菌株营养体是发达的菌丝体，具隔，分生
孢子着生于裸露、散生的分生孢子梗或菌丝上，分生孢子
梗基部不联合成孢梗束等特点， 我们将该菌株归为半知
菌类丝孢纲丝孢目的 1 种真菌。 参考张天宇等 [7]、林晓民
等 [8]、邢来君等 [5]将分生孢子链作为一个分类特征的方法，
将其归类到链格孢属的 1 种真菌。 但在该菌的多型现象
中子囊座发现了梯形形状， 与先前论述的链格孢属真菌
的有性模式种有区别。
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大类群（A、C、E、F、G、B）和 1 个小类群 （D），其中大类
群又可以分为 3 个小类群， 第 1 个小类群为俄贤岭的
3 个样地 A、C、E，第2 个小类群为 F、G，第 3 个小类群
为 B。
3 讨论
Cossitra等[5]通过对烟草的 RAPD 分析指出，类群和地
理位置密切相关，本研究得到与其一致的研究结果。 剑叶
龙血树属于异花授粉植物，主要的虫媒为蛾类，基因交流
仅限于一个有限的地域，不同群间基因交流很少。 本研究
聚类分析表明，剑叶龙血树类群与地理分布密切相关，在
地理上，千龙洞与其他 6个地方距离较远，俄贤岭 1、俄贤
岭 2、俄贤岭 3 同属于俄贤岭自然保护区，皇帝洞和白查
村距离比较近， 而燕窝岭在千龙洞和其他几个分布地的
中间区域。使用 NTSYS-pc软件计算剑叶龙血树在种间的
遗传相似系数变化范围在 0.6442~0.994 之间， 平均值为
0.8011，说明其遗传基础较窄。 因此要大力保护剑叶龙血
树的野生资源， 在保护其资源时不应只采取简单的就地
保护、迁地保护等，应同时增加不同类群的基因交流，如人
工授粉、幼苗移栽等。
参考文献：
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A B
A：子囊座形态（100×）；B：子囊座着生方式（40×）
图 5 菌株子囊座形态及子囊座着生方式
参考文献：
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C
A：子囊座（400×）；B：产孢方式（400×）；C：子囊孢子(1000×)
图 4 菌株子囊座形态、产孢方式及子囊孢子形态
A B
（上接第 125页）
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