全 文 :摘 要:黄酮类化合物能提高饲料转化率,促进动物生长,提高畜禽机体免疫力,具有抗菌消炎、
提高抗氧化应激能力和保健等作用。试验选用 375只 1日龄艾维茵肉仔公鸡,采用随机分组的方法分
成 5组,每组 3个重复,每个重复 25只鸡,用于研究添加不同水平(0、5、10、20、40 mg/kg)的元宝枫黄酮
对免疫机能的影响。结果表明:与对照组相比,添加适当剂量的元宝枫黄酮能够极显著提高胸腺指数
(P<0.01)、法氏囊指数(P<0.01)及 T淋巴细胞转化率(P<0.01),但对脾脏的发育影响不大(P>0.05),对
3周龄和 5周龄血清新城疫抗体水平有显著影响(P<0.05)。这些结果表明,日粮中添加元宝枫黄酮可
提高肉鸡的细胞免疫和体液免疫功能。
关键词:黄酮;元宝枫;免疫;肉鸡
中图分类号:S816.32 文献标识码:A 文章编号:1001-991X(2012)02-0005-03
Effect of flavonoids from acer truncatum on the immune function of broilers
Zhao Sujun, Xie Jing, Lin Yi, Yang Xiaomei, Li Xingyu, Tang Huazhao, Liao Dangjin
Abstract:Flavonoids can improve the feed conversion rate, and it plays an important role in promoting
animal growth, improving animal immunity, anti-bacterial and anti-inflammatory, anti-oxidative stress
capacity and improving the health and so on. In the present work, 375 1-day-old AA male broilers were
randomly divided into five treatment groups, and each group contained 3 repeats with 25 broilers in order to
determine the effects of different levels of flavones from acer truncatum supplement (0, 5 mg/kg, 10 mg/kg,
20 mg/kg, 40 mg/kg) on the growth performance and immune function. The flavones could improve the
thymus index, bursa of fabricius index and lymphocyte transformation rate (P<0.01); It had no obvious
effect on spleen growth; and had significant effect on the antibody titers to newcastle disease virus in
3-week-old and 5-week-old broilers (P<0.05). The results showed that dietary flavones supplement
could improve the function of cellular immunity and humoral immunity.
Key words:flavones;acer truncatum;immunity;broilers
赵素君,四川大学生命科学院,四川省畜牧科学研究院兽
医与生物技术研究所,博士,610064,四川成都。
谢晶、林毅、杨晓梅、李兴玉、廖党金,四川省畜牧科学研
究院兽医与生物技术研究所。
汤华钊,四川大学轻纺与食品学院。
收稿日期:2011-12-02
黄酮类化合物广泛存在于植物体中,是自然界分
布较广泛的一类次生代谢产物,是药用植物中主要的
活性成分之一[1],在畜牧业生产中的研究应用发现,该化
合物能提高饲料转化率,促进动物生长[2];提高畜禽机
体免疫力[3],具有抗菌消炎、提高抗氧化应激能力和保
健等作用[4-6]。
元宝枫是槭树科落叶乔木,元宝枫树叶、果仁、果
壳等均具有较高的经济开发价值[7]。元宝枫叶中含有
糖、氨基酸、蛋白质、黄酮、有机酸、强心甙和酚等各类
化学成分,其中黄酮类含量较高,一年中,8月份叶中
黄酮含量最高;就不同树龄而言,5年生植株叶中黄
酮含量最高(7.26%)[8]。研究表明,元宝枫叶黄酮同银杏
叶黄酮成分、药理相类似,可广泛用于食品、医药、保
健品行业。本文研究元宝枫黄酮对肉鸡免疫器官发
育、T淋巴细胞转化率和新城疫抗体效价的影响,旨
在探讨其对肉鸡的免疫调节作用,为其在生产中的应
用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物选择与试验设计
试验选用 1日龄艾维茵商品代肉仔公鸡 375只,
试验开始时采用随机分组的方法,各组体重差异不显
著(P>0.05)。试验共分 5个处理,1组为空白对照,2、
3、4、5 组分别在基础日粮中添加 5、10、20、40 mg/kg
元宝枫黄酮,每个处理 3个重复,每个重复 25只鸡。
元宝枫黄酮对肉鸡免疫机能的影响
赵素君 谢 晶 林 毅 杨晓梅 李兴玉 汤华钊 廖党金
饲料添加剂《饲料工业》·2012年第 33卷第 2期
5
1.2 试验日粮
试验采用如下方法制备黄酮:称取元宝枫干叶
50 g,粉碎,置于 1 000 ml烧杯中,加水 450 ml,搅拌下
加入石灰乳,调 pH值 8~9,倾出上清液,过滤;残渣用
450 ml水重复提取一次,弃去残渣,合并滤液,放冷;用
稀盐酸调节 pH值 4~5,静置过夜,过滤,干燥,粉碎,
得黄酮粗品;计算提取率,并测定提取物中黄酮的含
量。分别称取不同剂量的黄酮,加入少量基础日粮混
匀作为预混料,然后逐级放大,混匀于备用的基础日
粮中。基础日粮以玉米、豆粕为主,参照肉鸡的营养标
准配制,基础日粮组成及营养水平见表1。
表 1 基础日粮组成及营养水平
原料
日粮组成(%)
玉米
豆粕
棉粕
进口鱼粉
钙粉
磷酸氢钙
蛋氨酸
赖氨酸
预混料
油脂
合计
营养水平
代谢能(MJ/kg)
粗蛋白(%)
钙(%)
磷(%)
赖氨酸(%)
蛋氨酸(%)
1 阶段(1~21 日龄)
60.6
30
-
5
0.8
0.5
0.05
0.05
1
2
100
12.54
22.18
1.03
0.73
1.22
0.48
2 阶段(22~49 日龄)
64
25.5
2.5
3.5
0.7
0.8
-
-
1
2
100
12.58
20
0.92
0.62
1.01
0.37
2 试验方法
2.1 饲养管理
采用笼养。第 1周每日喂料 8次,第 2周 6次,第
3周以后每日喂料 4次,自由饮水;光照前 3 d为 24 h,
以后每天 23 h,强度随鸡日龄增加而递减;每天记录
鸡舍内温、湿度,观察鸡群健康状况并记录发病死亡
情况;试验期间定期进行饮水消毒;7日龄、21日龄滴
鼻、点眼免疫新支二联苗,14日龄、28日龄口服免疫
传染性法氏囊中等毒力活疫苗。
2.2 检测指标及测定方法
在 21、35和 49日龄时,每个重复随机抽取两只
鸡,无菌心脏采血 12 ml,其中 2 ml肝素抗凝,剩余 10 ml
进行离心制备血清。2 ml抗凝血采用微量全血培养法
测定淋巴细胞转化率[9],血清用于测定新城疫 HI抗体
效价。采用口腔屠宰法致死,解剖分离胸腺、脾脏和法
氏囊,用滤纸吸净组织表面血液后称重,计算免疫器
官与体重的相对重量(免疫器官指数)。
2.3 数据处理与统计分析
试验数据分析采用 SPSS13.0进行处理。采用 One-
way ANOVA进行方差分析,LSD法进行组间比较。
3 结果与讨论
3.1 对免疫器官发育的影响(见表 2)
免疫器官称重法是目前研究机体免疫状况的方
法之一。一般认为,免疫器官重量降低为免疫抑制所
致,而免疫器官重量增加则为免疫增强的表现 [2]。由
表 2可看出,元宝枫黄酮对胸腺发育的影响,在 3周龄
时除了试验 2组外,胸腺指数均极显著高于对照组
表 2 肉鸡免疫器官指数变化
胸腺指数
0.304 2aA
0.316 7aA
0.327 3abAB
0.366 8bcAB
0.379 7cB
法氏囊指数
0.245 2aA
0.249 0aA
0.333 5bB
0.235 7aA
0.325 3bB
脾脏指数
0.103 7
0.090 2
0.098 2
0.093 0
0.089 0
胸腺指数
0.149 8A
0.361 2B
0.366 8B
0.329 8B
0.330 2B
胸腺指数
0.186 2aA
0.402 2bcB
0.431 2cB
0.380 3bB
0.396 2bcB
法氏囊指数
0.207 2aA
0.264 2bB
0.273 2bB
0.192 8aA
0.198 0aA
脾脏指数
0.118 8A
0.136 8A
0.117 2A
0.118 8A
0.183 3B
1 组
2 组
3 组
4 组
5 组
项目
法氏囊指数
0.157 0aA
0.175 2aAB
0.159 3aA
0.215 8bB
0.174 5aAB
脾脏指数
0.127 0
0.141 5
0.145 5
0.145 7
0.147 7
5 周龄3 周龄 7 周龄
注:同列数据肩标小写字母不同者为差异显著(P<0.05),大写字母不同者为差异极显著(P<0.01),无字母标识或字母相同为差异不显著
(P>0.05);下表同。
(P<0.01),并且随剂量增加呈现显著增长的趋势;当
到第 5周龄时,所有试验组仍然极显著高于对照组
(P<0.01),其中中等添加剂量对胸腺发育促进作用明
显;7周龄时各试验组间差异不显著,但都极显著高
于对照组(P<0.01)。对法氏囊发育的影响表明,3周龄
时试验 3、5组极显著高于对照组和其它试验组 (P<
0.01),5周龄时试验 2、3组法氏囊指数极显著高于其
它组(P<0.01),到了 7周龄时试验 4组极显著高于对
照组和其它试验组(P<0.01),不同添加剂量的黄酮对
不同时期法氏囊发育存在不同程度的影响。对于脾脏
的影响,除了 5周龄时试验 5组的脾脏指数与对照组
相比差异极显著外,其他不同添加量对肉公鸡脾脏发
饲料添加剂 赵素君等:元宝枫黄酮对肉鸡免疫机能的影响
6
育影响不大。
3.2 对 T淋巴细胞转化率的影响(见表 3)
表 3 元宝枫黄酮对肉鸡T淋巴细胞转化率的影响
项目
1 组
2 组
3 组
4 组
5 组
3 周龄
0.734 2aA
0.861 5bB
0.888 3bcB
0.913 3cB
0.909 2cB
5 周龄
0.730 0aA
0.850 0bB
0.907 5cB
0.923 3cB
0.854 0bB
7 周龄
0.616 7aA
0.880 0bB
0.914 5bB
0.901 7bB
0.872 7bB
注:淋巴细胞转化率=转化的淋巴细胞数/(转化的淋巴细胞数+
未转化的淋巴细胞数)。
在第 3、5、7周龄,与对照组相比,各试验组都极
显著提高了 T淋巴细胞的转化率(P<0.01),并且在 3
周龄时高剂量组优势较明显,5周龄时第 4组(20 mg/kg)
能较显著地提高 T淋巴细胞转化率,到了第 7周龄,
添加量的多少对 T淋巴细胞转化率的影响不显著。
3.3 对新城疫免疫后抗体效价的影响 (见表 4)
表 4 元宝枫黄酮对肉鸡新城疫 HI抗体效价的影响
项目
1
2
3
4
5
3 周龄
3.000 0ab
2.666 7a
2.833 3ab
3.500 0b
3.500 0b
5 周龄
5.166 7ab
5.666 7b
4.500 0a
4.500 0a
5.333 3ab
7 周龄
3.000 0
3.333 3
3.500 0
3.333 3
3.166 7
试验发现,3 周龄时试验 2、3 组 HI 抗体效价低
于对照组,4、5组高于对照组,差异显著(P<0.05);5周
龄时 3、4组低于对照组,而 2组明显高于对照组,差
异显著(P<0.05),高剂量的 5组与对照组相比差异不
显著 (P>0.05);7周龄时试验组与对照组相比差异不
显著。结果表明,肉公鸡在生长前期添加高剂量的黄
酮能有效促进体液免疫,而在生长中后期则以低剂量
的添加效果较好。
胸腺是免疫系统的重要器官,参与机体的非特异
性免疫功能,对细胞免疫及体液免疫也有重要调节作
用,胸腺指数变化反应胸腺参与机体免疫、提高机体
抗病能力。脾脏是体内产生抗体的重要器官,其指数
增加对机体细胞免疫过程中致敏 T细胞的产生和抗
体的形成都有促进作用,只是本试验中脾脏指数变化
和 T淋巴细胞转化率之间似乎不存在这种促进关系,
元宝枫黄酮在不提高脾脏指数的情况下仍可促进 T
淋巴细胞转化率。法氏囊是禽类特有的中枢免疫器
官,其重量增加可促进 B细胞的诱导分化和成熟,促
进机体的体液免疫,但是和新城疫抗体效价变化比
较,ND-HI 抗体效价并不随法氏囊的发育增长而提
高,元宝枫黄酮是通过什么方式影响 ND-HI抗体效
价还需要进一步研究讨论。
综上所述,元宝枫黄酮能够不同程度地提高肉公
鸡的免疫机能,但是不同添加剂量对不同生长期的免
疫机能的促进程度不同,如果从提高免疫机能方面进
行饲料添加,还需根据不同生长期进行深入讨论。
参考文献
[1] 高锦明,张鞍灵,王株清. 黄酮类化合物的分布及开发利用[J]. 西
北林学院学报,2000,15(1):69-74.
[2] 王国杰,韩正康,陈杰,等. 大豆黄酮对肉鸡生长影响及其作用机
制研究[J]. 广东畜牧兽医科技,1994,19(3):4-6.
[3] 王亚菊,赵茹茜,陈杰. 大豆黄酮的营养生理功能与应用[J]. 中国
饲料,2002(1):28-29.
[4] Wang W N, Yang X B, Liu H Z, et al. Effect of Oenanthe javanica
flavone on human and duck hepatitis B virus infection [J]. Acta
Pharmacol. Sin., 2005,26(5):587-592.
[5] Tormakangas L, Vuorela P, Saario E, et al.In vivo treatment of
acute Chlamydia pneumoniae infection with the flavonoids
quercetin and luteolin and an alkyl gallate, octyl gallate, in a
mouse model[J]. Biochem. Pharmacol.,2005,70(8):1222-1230.
[6] Sezik E, Aslan M, Yesilada E, et al. Hypoglycaemic activity of
Gentiana olivieri and isolation of the active constituent through
bioassay-directed fractionation techniques[J]. Life Sci.,2005,76(11):
1223-1238.
[7] 王兰珍,马希汉,王姝清. 元宝枫研究进展[J]. 西北林学院学报,
1998,13(1):96-100.
[8] 王兰珍,马希汉,王姝清,等.元宝枫叶有效成分动态变化的研究[J].
西北林学院学报,1997,12(4):68-71.
[9] 余贺,谢少文,杨贵贞,等.临床免疫技术[M]. 上海科学技术出版
社,1982:309-314. (编辑:高 雁,snowyan78@163.com)
饲料添加剂赵素君等:元宝枫黄酮对肉鸡免疫机能的影响
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