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竹节参总皂苷成分的抗疲劳活性



全 文 :表 3 甲氨蝶呤及多聚谷氨酸甲氨蝶呤的精密度和回收率
( x±s , n=6)
Tab 3 The precision and recoveries of M TX &MTXPG( x
±s , n=6)
组分 回收率/ % 精密度(RSD/ %)低浓度 中浓度 高浓度 日内 日间
MTXPG5 91.8±2.8 96.6±2.8 101.2±1.5 2.37 15.31
MTXPG4 93.4±3.2 98.5±1.4 101.4±0.8 1.81 10.66
MTXPG3 93.6±5.7 101.4±1.2 100.9±1.7 2.89 6.71
MTXPG2 100.2±3.5 101.7±3.8 101.0±1.3 2.86 5.65
M TX 99.1±3.8 101.1±1.5 99.8±1.2 2.15 6.34
增加磷酸盐的浓度 ,并加大缓冲液所占流动相的比
例[ 2] ,延长了 MTXPG 5 、MTXPG 4 的保留时间 , 避
免了流路的阻塞 ,达到了 HPLC 检测的要求。采用
梯度洗脱程序 ,逐渐加大流动相的甲醇比例 ,缩短了
MTXPG 3 、MTXPG 2及 MTX的保留时间 ,改善了色
谱峰形 ,加快了分析速度。洗脱程序开始时流动相
中缓冲盐的比例及保持时间的长度是获得良好
MTXPG 3色谱峰形的关键。通过不断调整和优化
色谱条件 ,使 MTX及 MTXPG n 5 种组分获得良好
的分离。
另外 ,反应液中的水解蛋白虽然经过灭活处理 ,
但仍然对 MTXPG 5 、MTXPG 4 的含量影响较大 ,这
可以从日间精密度的数据看出 。随着放置时间的延
长 , MTXPG 5 、MTXPG 4 的含量有明显的降低 ,因此
反应液样品处理后最好尽快测定 。而纯水溶液中的
MTX及 MTXPG n 浓度则很稳定 ,分别测定了放置
10 , 20 ,30 d的混合标准 ,含量误差小于 3%。
本方法通过对反应液中 MTX 及 MTXPG n 各
组分浓度的测定来分析不同酶的反应活性和特点 ,
应用在药动学研究中如检测体液中的 MTX 及
MTXPG n含量 ,体液样品可以采用“2.2”项下方法
处理 ,但是色谱条件(如流动相比例及梯度条件)应
根据空白体液所含的杂质不同而加以变动 , 调整
MTX及 MTXPG n 各组分的出峰时间 ,使体液中的
杂质不干扰目标分析物的测定 。本方法操作简单 、
快速 、方便 ,检测结果重复性好 ,是 MTX 及 MTX-
PG n 药动学研究的有效手段。
参考文献:
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[收稿日期] 2008-02-14
[ 基金项目] 国家科技部十五科技攻关项目(编号:02C26214200695) [ 作者简介] 钱丽娜 ,女 ,硕士研究生 ,电话:13037110772 , E-mail:qianli-
na2006@163.com [ 通讯作者] 陈平 ,女 ,教授 ,电话:027-83943842, E-mail:chen pingvip24@163.com
竹节参总皂苷成分的抗疲劳活性
钱丽娜1 ,陈平1 ,李小莉2 ,肖晏婴1  (1.武汉工业学院生物与制药工程系 ,湖北 武汉 430023;2.湖北工业大学 , 湖北武汉
430068)
[ 摘要]  目的:比较竹节参地上部分和根茎部分中总皂苷成分的抗疲劳活性 , 开发竹节参药材新的药用部位 。方法:将昆明
种小鼠按体质量随机分组 ,分别给予注射用水 、香菇菌多糖片阳性对照药 、竹节参地上部分总皂苷提取物 、根茎部分总皂苷提
取物 ,观察小鼠的体质量变化情况 、负重游泳时间 、血乳酸 、血清尿素氮和肝糖元含量等指标。结果:竹节参地上部分总皂苷
提取物中 、高剂量组及根茎部分总皂苷提取物低 、中剂量组均可不同程度地延长小鼠负重游泳时间 , 降低运动后小鼠血乳酸
和血清尿素氮的含量 ,提高小鼠肝糖元值。结论:竹节参地上部分总皂苷提取物具有与根茎部分总皂苷提取物相似的抗疲劳
活性。
[ 关键词]  竹节参总皂苷;小鼠;抗疲劳活性
[中图分类号] R285.6  [ 文献标识码] A  [文章编号] 1001-5213(2008)15-1238-03
Study on the antifatigue function of total saponins from Panax j aponicus
QIAN Li-na1 ,CHEN Ping1 ,LI Xiao-li2 , XIAO Yan-ying 1(1.Bio log ical and Pharmaceutical Engneering Depa rtment
of Wuhan Poly technic Univ ersity , Hubei Wuhan 430023 , China;2.Hubei Unive rsity o f Technolo gy , H ubei Wuhan 430068 , Chi-
na)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the antifatigue function of to ta l saponins in g round pa rts and ro ots o f Panax japonicus , to
·1238· 中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 15期 Chin H osp Pharm J , 2008 Aug , Vol 28 , No.15
develop its new bo tanical pa rts for medical use.METHODS Random groups we re prepa red by w eight and were gavaged ultra-
pure w ater , letinan and to tal saponins in g round parts and roo ts o f Panax japonicus.The weight , lo ading sw imming time , the
content o f blood lactic acid , blood urea nit rog en and liv er g ly cogen in mice we re determined.RESULTS The middle and high
do sage o f total saponins in g round parts and the low and middle do sage of total saponins in r oo ts of Pana x japonicus could sig-
nificantly pro long swimming time fo r mice , decr ea se the content of blood lactic acid and blood urea nitrog en after str enuous ex-
er cise , and increase the reserve s of liver g ly cogen.CONCLUSION Total saponins in g round par ts of Panax japonicus has
similar antifatigue function as the ro ots.
KEY WORDS:to tal saponins of Panax japonicus;mice;antifatigue func tion
  竹节参为五加科植物竹节参 Panax japonicus
C.A.Mey 的干燥根茎 ,是我国名贵中药材之一 ,
为中国药典收载品种 。具有滋补强壮 、活血化淤 、
消肿止痛 、止血袪痰等功效[ 1] 。历史上主要以其
根茎作为药用部位 ,近年来 ,国内外学者从竹节参
的根茎中得到的主要化学成分有皂苷类 、挥发油 、
多糖和氨基酸等[ 2] ,对竹节参地上部分的研究目
前尚未见报道 。为进一步开发竹节参新的药用部
位 ,本试验对其地上部分和根茎部分总皂苷提取
物进行了抗疲劳活性的比较研究 ,为有效利用竹
节参药用资源提供依据。
1 材料
WFZ-UV2000紫外可见分光光度计(尤尼科
上海仪器有限公司 , H0511012);竹节参地上部分及
根茎部分总皂苷提取物(本实验室自制 ,药材采自湖
北恩施州中药材研究所竹节参种植基地 ,经武汉工
业学院陈平教授鉴定为五加科人参属植物竹节参
Panax japonicus C.A.Mey ,采用常规醇提 、水饱
和正丁醇萃取及丙酮精制的方法分别制得地上部分
及根茎部分总皂苷提取物 ,用香草醛高氯酸法测定
其含量分别为 93%和 90%。以纯化水为溶剂配制
不同浓度样品 , 4 ℃低温保存 ,备用);乳酸试剂盒 、
尿素氮试剂盒和肝糖元试剂盒(南京建成生物工程
研究所 ,批号 20071220 , 20071220 , 20071220);香菇
菌多糖片(湖北广仁药业有限公司 ,批号 070502);
昆明种系实验小白鼠 , ♂,体质量 22 ~ 27 g(华中科
技大学同济医学院实验动物中心 , 鄂医动管证字:
19-052。所有试验动物均食用全价混合饲料 ,自由
摄食 、取水)。
2 方法与结果
2.1 方法 按卫生部发布的《保健食品检验与评价
技术规范实施手册》中《功能学评价程序与检验方
法》[ 3] ,缓解体力疲劳作用功能检验方法中动物体质
量 、负重游泳实验 、血乳酸测定 、血清尿素氮测定(二
乙酰肟法)和肝糖元测定(蒽酮法)的规定方法执行 。
2.1.1 分组及给药 选用♂小鼠 80只随机分为 8
组 ,即空白组(给予等量纯化水);阳性对照组(给予
香菇菌多糖片);竹节参地上部分总皂苷提取物
100 ,200 ,400 mg·kg-1剂量组;根茎部分总皂苷提
取物 100 , 200 , 400 mg·kg-1剂量组 。按 0.2 mL·
(10 g)-1 , ig ,连续给药 21 d 。
2.1.2 小鼠负重游泳实验[ 4-6]  第 22天 ,小鼠尾根
部负荷 6%体质量的铅皮 ,在水温为(25±0.5)℃的
水中游泳 ,记录小鼠力竭游泳时间(从小鼠被投入水
至其头部沉入水中 8 s不能浮出水面的时间)。
2.1.3 小鼠血乳酸 、血清尿素氮含量测定 立即取
出力竭小鼠 , 用脱脂棉擦干身体上的水 , 休息 30
min ,眼眶取血 ,分离血清 。按乳酸试剂盒说明书操
作。于 530 nm 测定各管吸收度值 ,计算血清中血
乳酸含量 、[血清中乳酸含量(mmol·L-1)=(测定管
吸收度-空白管吸收度)/(标准管吸收度-空白管
吸收度)×标准浓度×样本测试前稀释倍数] 。按二
乙酰-肟法于 520 nm 测定各管吸收度值 ,计算血清
尿素氮含量[尿素氮(mmol·L-1)=测定管吸收度/
标准管吸收度×280.1] 。用二乙酰-肟-硫胺尿法测
定血清尿素氮含量 。
2.1.4 小鼠肝糖元含量测定 将小鼠颈椎脱位处
死 ,迅速取肝脏 ,剔去结缔组织 、称重 、匀浆器研磨 、
离心 ,加预冷的生理盐水制备成 10%的组织匀浆。
冷冻离心(2 ~ 4 ℃),分离上清液 ,用肝糖元试剂盒
测定肝糖元含量。
2.1.5 数据统计处理 采用 SPSS 软件13.0版进
行单因子方差分析 ,用 LSD-t检验进行各试验组与
空白组的比较 。
2.2 结果
2.2.1 体质量  小鼠试验前后的体质量见表 1。
试验前小鼠体质量差异无显著性 。试验后阳性对照
组及地上部分高剂量组与空白组比较小鼠体质量差
异有极显著性(P<0.01)。
2.2.2 小鼠负重游泳时间 地上部分高剂量组和
根茎部分低 、中剂量组与空白组比较小鼠负重游泳
时间差异有极显著性(P<0.01),见表 2。
2.2.3 对运动后小鼠血乳酸含量的影响 见表 3。
地上部分中 、高剂量组和根茎部分中剂量组与空白
·1239·中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 15期 Chin H osp Pharm J , 2008 Aug , Vol 28 , No.15
表 1 小鼠试验前后的体质量变化( x±s , n=10)
Tab 1 Weight variation before and after expe rinments of all
gr oups of mice( x ±s , n=10)
组别 剂量/m g·kg -1
试验前
/ g
试验后
/ g
空白组 — 27.1±4.7 34.5±0.9
阳性对照组(香菇多糖) 200 25.5±4.0 26.9±2.9a
地上部分低剂量 100 26.5±3.2 33.3±3.1
地上部分中剂量 200 26.3±2.5 31.5±1.7
地上部分高剂量 400 25.5±3.2 29.5±4.4a
根茎部分低剂量 100 25.6±1.9 32.1±2.2
根茎部分中剂量 200 26.6±2.4 34.1±2.4
根茎部分高剂量 400 26.2±3.3 31.6±3.8
注:与空白组比较 , a P<0.01
表 2 小鼠负重游泳时间( x ±s , n=10)
Tab 2 Loading sw imming time o f a ll g roups o f mice( x±s ,
n=10)
组别 剂量/mg·k g -1 游泳时间/min
空白组 — 86.4±11.4
阳性对照组(香菇多糖) 200 179.4±16.2a
地上部分低剂量 100 97.5±17.9
地上部分中剂量 200 105.3±13.2
地上部分高剂量 400 137.5±23.0a
根茎部分低剂量 100 150.4±11.8a
根茎部分中剂量 200 118.2±21.8a
根茎部分高剂量 400 91.5±14.2
注:与空白组比较 , a P<0.01
组比较小鼠血乳酸含量差异有极显著性(P <
0.01)。地上部分低剂量组和根茎部分高剂量组与
空白组比较差异有显著性(P <0.05)。
2.2.4 对运动后小鼠血清尿素氮含量影响 见表
3。地上部分和根茎部分中 、高剂量组与空白组比较
小鼠血清尿素氮含量差异有极显著性(P <0.01)。
根茎部分低剂量组与空白组比较差异有显著性(P
<0.05)。
2.2.5 对运动后小鼠肝糖元含量的影响 见表 3。
根茎部分低剂量组与空白组比较小鼠肝糖元含量差
异有极显著性(P<0.01)。地上部分高剂量组和根
茎部分中剂量组与空白组比较差异有显著性(P <
0.05)。
表 3 小鼠血乳酸 、血清尿素氮及肝糖元含量( x±s , n=10)
Tab 3 The content of blood urea nitro gen , blood lactic and
liver glycogen( x ±s , n=10)
组别 剂量/mg·kg-1
血乳酸含量
/ mmo l·L-1
血清尿素氮含量
/mmo l·L -1
肝糖元含量
/mg·g -1肌肉组织
空白组 — 9.0±1.5 6.2±0.9 15.3±2.2
阳性对照组
(香菇多糖) 200 4.6±1.1b 3.9±0.5b 31.3±6.6b
地上部分低剂量 100 6.9±1.3a 5.5±1.1 15.7±2.3
地上部分中剂量 200 3.7±1.0b 4.7±0.3b 15.8±2.7
地上部分高剂量 400 5.8±3.3b 4.8±0.5b 22.7±7.0a
根茎部分低剂量 100 9.7±1.8 5.0±0.8a 24.5±3.8b
根茎部分中剂量 200 4.4±1.6b 4.4±0.7b 22.3±3.1a
根茎部分高剂量 400 6.8±1.4a 3.4±0.3b 15.7±3.3
注:与空白组比较 , aP<0.05 , bP<0.01
3 讨论
实验结果表明 ,竹节参地上部分中所含总皂苷
成分与其根茎部分中总皂苷成分具有同样的抗疲劳
活性 。地上部分中 、高剂量组及根茎部分低 、中剂量
组均可不同程度延长小鼠负重游泳时间 ,降低运动
后小鼠血乳酸和血清尿素氮含量 ,提高小鼠肝糖元
含量 。前期实验测得竹节参地上部分和根茎部分总
皂苷提取物的得率分别为6.7%, 22.6%。表明总皂
苷成分主要存在于根茎中 ,地上部分也含有一定量
的皂苷成分。且 2种不同部位中的总皂苷提取物均
具有一定的抗疲劳作用 。
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[收稿日期] 2007-12-13
[ 基金项目] 军队“十五”课题面上项目(编号:MB083) [ 作者简介] 徐风华 ,女 ,硕士 ,研究员 ,电话:010-66937817 , E-mail:xufh@yahoo.com
硫酸庆大霉素可溶性止血纱布创伤敷料的质量控制
徐风华1 ,胡坤2 ,郭代红1 ,陶胜源3  (1.解放军总医院药品保障中心 , 北京 100853;2.蚌埠医学院 , 安徽 蚌埠 233000;3.
总后卫生部药品仪器检验所 ,北京 100071)
[ 摘要]  目的:研究硫酸庆大霉素可溶性止血纱布创伤敷料的质量控制方法。方法:利用 H antzsh 反应使硫酸庆大霉素形成
二氢吡啶衍生物 ,在紫外 330 nm 波长处测定吸收度 ,进行定量分析 。结果:硫酸庆大霉素衍生化反应后 ,用紫外测其含量 ,线
性范围为 10 ~ 125 mg·L-1 ,标准曲线方程为 A=0.034 5C-0.014 2 , r=0.999 9。含药敷料中硫酸庆大霉素的测定回收率为
·1240· 中国医院药学杂志 2008年第 28卷第 15期 Chin H osp Pharm J , 2008 Aug , Vol 28 , No.15