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竹节参多糖对高血脂模型小鼠的影响作用



全 文 :·研究论文 ·
[ 基金项目] 国家科技部十五科技攻关项目(编号:02C26214200695) [ 作者简介] 杨小林 ,女 ,硕士 , 电话:027-83943842 , E-m ail:xiaolinysn@
126.com  [ 通讯作者] 陈平 ,教授 ,硕士生导师 , E-m ail:chenpingvip24@163.com
竹节参多糖对高血脂模型小鼠的影响作用
杨小林 ,陈平 ,王如锋 ,贾放 (武汉工业学院生物与制药工程学院 , 湖北 武汉 430023)
[ 摘要]  目的:研究竹节参多糖(D1)降血脂的药理活性。方法:腹腔注射 75%蛋黄生理盐水溶液0.02 mL·g-1建立小鼠高血
脂动物模型。随机分为空白对照组 、高脂模型组 、2 个阳性对照组(血脂康组及辛伐他汀组)和 2 个试验组(D1 高剂量组及 D1
低剂量组)。空白对照组给予生理盐水 , 高脂模型组给予蛋黄乳溶液和生理盐水 , 阳性对照组和试验组以羧甲基纤维素钠混
悬 ,配成混悬药液样品。测定给药后动物血浆中 TG、TC 、LDL-C 、HDL-C 的浓度。结果:阳性对照组和试验组各项指标与模
型组比较 ,差异均有显著性。结论:竹节参多糖具有一定的降血脂的作用 , 并存在量效关系。
[ 关键词]  竹节参多糖;小鼠;降血脂
[中图分类号] R965  [ 文献标识码] A  [ 文章编号] 1001-5213(2011)06-0433-03
Experimental study on the antihyperlipidemia effect of the polysaccharides of Panax j aponicus
in mice
YANG Xiao-lin ,CHEN Ping ,WANG Ru-feng , JIA Fang (Department o f Bio technolog y and Chemical Engineering ,
Wuhan Poly technic Univ ersity ,H ubei Wuhan 430023 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study if the poly saccha rides o f Pana x japonicus could influence on high blood lipid level and to
provide evidence for developing new antihyperlipidemic drug s.METHODS Hyper lipidemic mice model wa s established by celiac
injection o f 75% egg-yolk emulsion.Then the animals w ere administrated w ith samples comprising equal poly saccharide s of dif-
fer ent doses from P anax japonicus.The to tal cho lestero l(TC), t rig ly ce ride(TG), low density lipoprotein-chole ste rol(LDL-C)
and high density lipopr otein-chole ster ol(HDL-C)in serum w ere measur ed.RESULTS As comparison with control g r oups ,
TC , TG , LDL-C levels in the g roups of po ly saccharides o f Panax japonicus w ere significantly decreased;HDL-C levels were
significantly increased.CONCLUSION Bo th the two ex tracts show notable antihyperlipidemia effect on serum lipids o f mice ,
but the results of high do se s w ere better than those of the low doses.
KEY WORDS:po ly saccharides in Pana x japonicus;mice;antihyperlipidemic effect
  竹节参为五加科人参属多年生草本植物 Pa-
nax japonicus CA.Mey 的干燥根。原是一种名贵
的民间中草药 ,现已收载于中国药典[ 1] ,药用功能类
似人参和三七。竹节参主要含有多种皂苷 、挥发油 、
糖类和多种氨基酸等成分 。本课题组从竹节参中分
离得到了竹节参多糖成分[ 2-4] ,并采用高血脂模型小
鼠首次研究和评价竹节参多糖成分降血脂的活性 。
1 材料
1.1 药品及试剂 羧甲基纤维素钠(CMC-Na ,分
析纯);辛伐他汀片(上海信谊万象药业股份有限公
司 ,批号 080301);血脂康胶襄(北京北大维信生物
科技有限公司 ,批号 20080608);甘油三酯测定试剂
盒(北京北化康泰临床试剂有限公司 , 批 号
20080510);总胆固醇试剂盒(北京北化康泰临床试
剂有限公司 ,批号 20080410);低密度脂蛋白测定试
剂盒(北京北化康泰临床试剂有限公司 , 批号
20080510);竹节参药材经武汉工业学院陈平教授鉴
定为五加科人参属竹节参(Panax japonicus CA.
Mey);实验用竹节参多糖(D1)为本实验室自制。
1.2 动物 昆明种小鼠 ,体质量(18 ~ 22 g)(♀♂
各半 ,健康状况良好 ,华中科技大学同济医学院实验
动物中心 ,鄂医动管证字:19-052 ,所有试验动物均
食用全价混合饲料 ,自由摄食 、取水)。
2 方法
2.1 竹节参多糖的提取 、纯化和制备 取竹节参粗
粉 ,加入 10倍量的水 ,浸泡 2 h ,提取 1.5 h ,滤过 ,得
滤液 。药渣再用 10倍量的水煎煮提取 2次 ,每次
1.5 h ,滤过。合并 3次滤液 ,减压浓缩至适量体积。
加乙醇至体积分数为 70%进行醇沉 ,室温下放置 12
h以上 ,滤过 ,收集沉淀物 ,醇沉 2 次 ,合并沉淀物 ,
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经65 ℃减压干燥 ,得到竹节参多糖样品。
2.2 试验样品液的配制
2.2.1 75%蛋黄乳溶液制备 取新鲜鸡蛋若干只 ,
在其底部开一小口空出蛋清 ,将蛋黄轻放于空烧杯
中 ,把针管探入蛋黄薄膜内 ,吸取蛋黄液 ,置 100 mL
的量瓶中 ,量取 75 mL 蛋黄液 ,以生理盐水稀释至
100 mL ,用磁力搅拌器搅拌蛋黄乳溶液 10 min ,使
蛋黄乳溶液均匀 ,以便减小误差 ,使用时临时配制 。
2.2.2  CMC-Na 溶液的配制  精密称取 5.00 g
CMC-Na 置于烧杯中 ,加入 800 mL 纯化水 ,搅拌均
匀 ,置于1 000 mL 量瓶中 ,加纯化水至刻度 。配制
成0.5%的 CMC-Na溶液。
2.2.3 血脂康药液的配制 精密称取5.00 g内容
物 ,置于 100 mL 烧杯中 ,以0.5%CMC-Na 溶液混
悬 ,定容至刻度。配制成质量浓度为 0.05 g·mL-1
的药液样品。
2.2.4 辛伐他汀药液的配制 精密称取14.00 g辛
伐他汀片粉末(含辛伐他汀 70 mg),置于 100 mL 烧
杯中 ,以0.5%CMC-Na溶液混悬 ,定容至 100 mL。
配制成0.000 7 g·mL-1的药液样品 。
2.2.5 高剂量竹节参多糖药液的配制 精密称取
3.00 g竹节参多糖 ,置于 100 mL 烧杯中 ,以 0.5%
CMC-Na 溶液混悬 ,定容至 100 mL。配制成0.03 g
·mL-1的药液样品 。
2.2.6 低剂量竹节参多糖药液的配制 精密称取
1.50 g竹节参多糖 ,置于 100 mL 烧杯中 ,以 0.5%
CMC-Na 溶液混悬 ,定容至 100 mL。配制成0.015
g·mL-1的药液样品。
2.3 小鼠高血脂动物模型的建立 将小鼠随机分
成 6组 ,每组 12只 。分为正常空白对照组 、高脂模
型组 、辛伐他汀阳性对照组 、血脂康阳性对照组 、竹
节参多糖高剂量组 、竹节参多糖低剂量组。灌胃给
药。正常对照组和高脂模型组每日按 0.02 mL·
mL -1灌胃 0.5% CMC-Na , 给药组每日灌胃给予
0.02 mL·mL-1体积的相应药物 ,给药剂量分别为:
血脂康对照组为 1 g ·kg-1 、辛伐他汀对照组为
0.014 g·kg-1 、竹节参多糖高剂量组为0.6 g·kg -1 、
竹节参多糖低剂量组为0.3 g·kg-1 。共给药 14 d 。
最后一次给药 2 h后 ,各组均腹腔注射 75%蛋黄乳
生理盐水溶液0.02 mL·mL-1造成实验性高脂血
症[ 2] 。小鼠造模 20 h 后 ,采用摘眼球采血法 ,离心
分离血清 ,分别测定 TC 、TG 、LDL-C 和 HDL-C 的
含量 。
2.4 数据处理 用 SPSS 10.0软件进行 t检验 。
3 结果
给药 14 d ,测定 TC 、TG 、LDL-C 和 HDL-C 的
含量 ,测定结果见表 1。
表 1 竹节参多糖(D1)对 TG 、TC 、LDL-C 和 HDL-C 的影响
( x±s , n=12, mmol·L-1)
Tab 1 Results o f effec ts of po ly saccharides in pana x ja-
ponicus on TG 、TC 、LDL-C and H DL-C in mice( x ±s , n=
12 ,mmo l·L-1)
组别 TG T C LDL-C HDL-C
空白对照 1.3±0.4 4.2±1.2 1.4±0.3 5.8±1.0
高脂模型 15.3±3.3b 14.2±1.0b 5.9±1.3b 4.3±2.1a
血脂康 7.6±1.0d 12.4±1.7c 4.4±0.8d 4.6±1.5
辛伐他汀 6.8±0.9d 8.6±1.5d 3.0±0.9c 5.6±1.3
D1低剂量 11.4±1.6c 12.5±1.9c 4.4±2.1c 4.7±0.8
D1高剂量 9.8±1.9d 9.6±1.8d 4.0±0.6d 6.5±7.2c
注:与空白相比 , a P <0.05 , bP <0.01;与模型组相比 , c P <0.05 ,
d P <0.01
4 讨论
实验结果显示:模型与空白组相比 , TG 、TC 、
LDL-C 的浓度均有极显著性升高(P<0.01), HDL-
C浓度有显著性降低(P <0.05),结果表明实验动
物造模成功。在 TG 的浓度变化方面 ,与模型组相
比 ,血脂康组 、辛伐他汀组 、竹节参多糖高剂量组 ,均
有极显著的降低(P <0.01);竹节参多糖低剂量组
有显著的降低(P <0.05)。在 TC 的浓度变化方
面 ,与模型组相比 ,辛伐他汀组 、竹节参多糖高剂量
组 ,均有极显著的降低(P <0.01);而血脂康组 、竹
节参多糖低剂量组 ,具有显著的降低(P <0.05)。
在 LDL-C 的浓度变化方面 ,与模型组相比 ,血脂康
组 、辛伐他汀组 、竹节参多糖高剂量组 ,均有极显著
的降低(P <0.01),竹节参多糖低剂量组具有显著
的降低(P<0.05)。在 HDL-C的浓度变化方面 ,与
模型组相比 ,竹节参多糖高剂量组具有显著的升高
(P<0.05);血脂康组 、辛伐他汀组 、竹节参多糖低
剂量组不具有显著性的升高作用(P >0.05)。
竹节参多糖具有确切的降低高血脂实验动物
TG 、TC 和 LDL-C的显著性作用 ,同时具有升高高
血脂实验动物 HDL-C 的显著性作用。因此 ,竹节
参多糖具有一定的降血脂作用。本实验仅是对竹节
参多糖降血脂作用的初步研究 ,采用的是蛋黄乳急
性造模模型 ,与临床高血脂的形成有一定的差异 ,使
用本模型采用先给药后造模的方法 ,实验结果主要
显示该药对于高血脂的预防作用 ,竹节参多糖的降
脂作用有待深入研究。
参考文献:
[ 1]  中国药典.一部[ S] .2010:129.
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·434· 中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 6期 Chin H osp Ph arm J , 2011 Mar , Vol 31 , No.06
中国中药杂志 , 2008 , 33(13):1549-1551.
[ 4]  许彬 ,陈平.竹节参粗多糖的初步纯化工艺研究[ J] .武汉工业
学院学报.2008 , 27(4):5-8.
[收稿日期] 2010-07-19
[ 作者简介] 张伟东 ,男 ,博士 ,主管药师 ,电话:029-83253889 , E-mail:zw d20082009@yahoo.com.cn [ 通讯作者] 王晓娟 ,女 ,主任药师 ,电话:
029-83253889
射干的化学成分研究
张伟东 ,王晓娟 ,杨万军 ,王荣华 ,顾宜 ,王荣 (第四军医大学口腔医院药剂科 ,陕西 西安 710032)
[ 摘要]  目的:研究射干的化学成分。方法:用 70%乙醇回流提取 ,利用硅胶 、Sephadex LH-20 和反相柱层析等方法对射干中
化学成分进行研究。结果:分离得到 11 个化合物 ,其结构经波谱方法解析鉴定为 5-羟甲基糠醛(5-Hydroxyme thy l-2-furalde-
hyde , 1)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(4-Hydroxyl-3-me thoxy l-benzoic acid , 2)、白藜芦醇(resve ratro l , 3)、芹菜素(apig enin , 4)、腺
苷(adeno sine , 5)、次野鸢尾黄素(irisflo re tin , 6)、 白射干素(dicho tomitin , 7)、野鸢尾苷(irig enin , 8)、野鸢尾苷元(irigenin , 9)、
射干苷(tecto ridin , 10)和射干苷元(tecto rig enin , 11)。结论:化合物 1-5 均首次在射干化学成分研究中报道。
[ 关键词]  射干;化学成分;分离;结构鉴定
[中图分类号] R965  [ 文献标识码] A  [ 文章编号] 1001-5213(2011)06-0435-02
Study on chemical constituents from Belamcanda chinensis
ZHANG Wei-dong ,WANG Xiao-juan , YANG Wan-jun ,WANG Rong-hua ,GU Yi ,WANG Rong(Co llege of
pharmacy of Shaanx i Univ ersity of Chinese Medicine , shanxi Xian 710032 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the chemical constituents of Belamcanda chinensis.METHODS The pure products were
isolated by colum n chroma to g raphy of silica g el , Sephadex LH-20 , and ODS.RESULTS Eleven constituents were iso la ted from
Belamcanda chinensis , and their chemica l structure s were elucidated as 5-hydroxymethy l-2- fur aldehyde (1), 4-hydroxy l-3-me-
tho xy l-benzoic acid (2), resve ratro l(3), apig enin(4), adeno sine(5), irisflo retin(6), dichotomitin (7), iridin(8), irigenin (9),
tecto ridin(10)and tecto rig enin(11), by NMR spectr oscopic ev idences.CONCLUSION Compounds 1-5 a re obtained from this
plant for the first time.
KEY WORDS:Belamcanda chinensis;chemical constituents;iso lation;structural identifica tion
  射干为鸢尾科射干属植物射干(Belamcanda
chinensis(L .)DC.)的干燥根茎 。射干的药理作用
明显 ,具有清热解毒 、利咽消痰 、散淤消肿的功效[ 1] 。
临床主要用于治疗流感及上呼吸道感染 ,有进行深
入研究的价值[ 2] 。目前对射干的化学成分研究有较
多报道[ 2-7] ,主要化合物类型为异黄酮类 、甾类 、三萜
类 、核苷类等类型化合物。以往研究中主要针对的
是脂溶性成分 ,据文献报道射干中大极性成分具有
较好的抑菌抗病毒活性[ 6] ,而且其活性成分至今没
有确切的报道 ,所以阐明其活性成分具有很重要的
意义 。由此本课题组对其活性成分进行全面研究 ,
现对其化学成分分离和鉴定进行报道 ,共分离得到
11个化合物 ,根据波谱学数据鉴定了 11 个化合物
的化学结构 ,其中化合物 1 ~ 5均首次在射干化学成
分研究中报道。
1 材料
熔点用 X-4型显微熔点仪测定(温度计已校
正);Bruke r -500 型核磁共振仪(1H NMR , 500
MHz;13C NMR ,125 MHz);四甲基硅烷(TMS)为
内标;高效硅胶薄层板(青岛海洋化工厂);薄层显色
剂为 5%硫酸乙醇;柱层析用硅胶(200 ~ 300 目 ,青
岛海洋化工厂);反相分离材料 RP-C18 (50 μm ,
YMC 公司);Sephadex LH-20(上海安玛西亚生物
技术有限公司)。射干 2009年 9 月采自甘肃静宁
县 ,由陕西中医学院生药学教研室雷国莲教授鉴定
为 Belamcanda chinensis (L .)DC.的干燥根茎 ,标
本保存在第四军医大学口腔医院药剂科。
2 方法与结果
2.1 提取分离 射干 5 kg 干燥 ,粉碎 ,用乙醇提取
3 h(2 L × 3),合并提取液 ,减压回收得提取物约
0.5 kg ,硅胶柱色谱分离 ,以氯仿-甲醇梯度洗脱 ,得
到 11个组分 ,每个组分经硅胶 、葡聚凝胶 Sephadex
LH-20 、反相分离材料 RP-C18等柱色谱分离 ,分离
得到化合物 1(5 mg)、2(30 mg)、3(60 mg)、4(20
·435·中国医院药学杂志 2011年第 31卷第 6期 Chin H osp Pharm J , 2011 Mar , Vol 31 , No.06