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竹节参总皂苷抗炎机制的研究



全 文 :竹节参总皂苷抗炎机制的研究
闵 静
(湖北职业技术学院医学院 ,湖北 孝感 432000)
摘要:目的 观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(TSPJ)的抗炎作用并探讨其抗炎机理。 方法 采用小鼠
巴豆油耳肿胀实验 、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验及小鼠角叉菜胶足肿胀实验观察 TSPJ的抗
炎作用 , 检测小鼠腹膜炎时血清 MDA、SOD、GSH-PX值。结果 TSPJ(75、150、300mg· kg-1)灌胃能显著抑制巴
豆油所致的小鼠耳肿胀 、冰醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增强和角叉菜胶所致的小鼠足肿胀 ,可减少
血中 MDA的生成 ,恢复小鼠胸膜炎血清 SOD、GSH-PX的活力。结论 TSPJ具有明显的抗炎作用 , 其机制可能
与减少炎症部位自由基生成 ,抑制脂质过氧化反应的生成有关。
关键词:竹节参总皂苷;抗炎作用;谷胱甘肽过氧化物酶;超氧化物歧化酶;丙二醛
中图分类号:R284.2     文献标识码:A     文章编号:1008-0635(2009)06-0464-04
Anti-inflammatoryEfectofTotalSaponinsofPanaxJaponicus
MINJing
(HubeiVocational-TechnicalColege, XiaoganHubei432000, China)
ABSTRACT:ObjectiveToobservetheanti-inflammatoryefectoftotalsaponinsofPanaxjaponicus
(TSPJanditspossiblemechanism.MethodsTheanti-inflammatoryefectofTSPJwasobservedbycrotonoil-
inducedmiceearedematest, aceticacid-inducedabdominalcapilaryheperpermeabilitytestandcarrageenin-
inducedpawedematest.AndThebloodplasmaGSH-PX、SOD、MDAcontentwasdetermined.ResultsTSPJ
(75, 150, 300mg· kg-1)caninhibitremarkablycrotonoil-inducedearedema, aceticacid-inducedabdominal
capilaryheperpereabilityandcarageenin-inducedpawedema.TSPJcanenhanceactivitiesofGSH-PX、SOD
anddecreasetheconcentrationofMDA.ConclusionTSPJexertsadefiniteanti-inflammatoryefectonmice.It
maybeTSPJcanstrengthentheanti-oxidation, clearupfreeradicalsinmousebodyeficiently.
KEYWORDS:SaponinsofPanaxjaponicus;Anti-inflammatoryefect;GSH-PX;SOD;MDA
  竹节参别名竹根七 、萝卜七 、峨三七(四川),
以其根茎状如竹节而得名 。其无臭 、味苦 、后微 、
性温 ,有滋补强壮 、散瘀止痛 、止血 、祛痰功能 ,用
于病后虚弱 、肺结核咯血 、咳嗽痰多 、跌打损伤。
我们采用小鼠巴豆油耳肿胀实验 、冰醋酸致小鼠
腹腔毛细血管通透性增高实验及小鼠角叉菜胶足
肿胀实验观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷
(totalsaponinsofPanaxjaponicus, TSPJ)的抗炎作
用 ,探讨 TSPJ的抗炎机理。
1 材料与方法
1.1 动物
清洁级小鼠 ,雄雌不拘 ,湖北省动物实验中
心 ,合格证号:SCXK(鄂)2003-0005。
1.2 药品与试剂
TSPJ:由华中科技大学药理学实验室从竹节
参的干燥根茎中提取 ,纯度 50%;角叉菜胶(cara-
geenan, Car, Sigma公司);消炎痛片(天津太平洋
制药有限公司 ,批号:030801);注射用青霉素钠
(华北制药股份有限公司 ,批号:U0303024);巴豆
油由华中科技大学药理学实验室提供;冰醋酸(中
国医药上海化学试剂公司);SOD检测试剂盒(南
京建成生物工程研究所 , 批号:20081027);MDA
测定试剂盒 (南京建成生物工程研究所 , 批号:
20081025);GSH-PX测定试剂盒 (南京建成生物
工程研究所 ,批号:2008102);其他试剂均为分析
464 咸宁学院学报(医学版)2009年第 23卷第 6期〔JournalofXianningUniversity(MedicalSciences)〕 DOI :10.16751/j.cnki.2095-4646.2009.06.006
纯 。
1.3 仪器
uNICO紫外可见分光光度计由 uNICOWFZ-
2100尤尼柯(上海)仪器有限公司生产 , CENTRI-
FuGETDL-5型离心机(上海手术器械厂生产),旋
转蒸发器 RE-52A(上海荣光生化仪器厂), SHZ-
Ⅲ型循环水真空泵(上海伊利仪器制造有限公
司), 723分光光度计 (上海仪器厂), 电子天平
(SARTOR2uS, BP211D)上海第三分析仪器厂生
产 , SN-695B型放射免疫 γ计数器(上海原子核研
究所 ,日环仪器厂), GF-D200半自动生化分析仪
(山东高密彩虹分析仪器有限公司)。
1.4 实验方法
1.4.1 分组给药
随机分为 5组 ,每组 10只 。 Ⅰ组为空白对照
组 ,给等量蒸馏水;Ⅱ组为消炎痛 6.5mg· kg-1灌
胃;Ⅲ 、Ⅳ、Ⅴ组为 TSPJ25、50、100mg· kg-1灌胃 ,
即为低 、中 、高剂量组 。
1.4.2 TSPJ对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的抑制作用
每组连续灌胃给药 10d,第 10天给药后 1h,
各鼠右足趾皮下注射 1%角叉菜胶 (50μl/只)致
炎 ,在致炎后 0.5、1、2、3、4、5h时采用容量法测其
右足趾厚度 , 计算各组的肿胀度和肿胀抑制
率 [ 1, 2] 。
肿胀度 =右足容量 -左足容量
肿胀抑制率 =(对照组平均肿胀度 -给药组
平均肿胀度)/对照组平均肿胀度 ×100%
1.4.3 TSPJ对巴豆油所致小鼠耳肿胀的抑制作用
每组连续灌胃给药 10d,第 10d给药后 1h,以
2%巴豆油 50μl均匀涂于小鼠右耳正反两面致
炎 , 4h后将小鼠脱臼处死 ,沿耳廓剪下左右两耳 ,
用直径 8mm的不锈钢圆冲沿耳缘相同部位冲下
(以左耳为自然对照),天平称重 ,计算药物对小鼠
耳肿胀的抑制率(算法同上)[ 1, 2] 。
肿胀度 =右耳重 -左耳重
1.4.4 TSPJ对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透
性增高的影响
每组连续灌胃给药 10d,第 10d给药后 1h,各
鼠尾静脉注射 1%伊文斯蓝生理盐水溶液 0.1ml
· 10g-1 ,随即腹腔注射 0.7%冰醋酸溶液 0.1ml
· 10g-1 , 30min后脱颈椎处死 ,每鼠分别用 5ml生
理盐水分数次洗涤腹腔 ,吸出洗涤液 ,合并多次清
洗液加生理盐水至 8ml,离心 10min(3000r/min),
取上清液 ,分光光度计 590nm处测定吸光度 A
值 。另做 0.7%冰醋酸溶液标准曲线[ 1, 2] 。
Y=0.27X+1.8881×10-2
1.4.5 检测小鼠血清 GSH-PX、SOD活性及 MDA含量
每组连续灌胃给药 10d,第 10d给药后 1h,摘
眼球取血 ,分离血清 , -20℃保存。按试剂盒方法
操作。
1.5 统计方法
数据均以 x±s表示 ,应用 SPSS12.0统计软
件包进行分析。
2 结 果
2.1 TSPJ对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的抑制作用
与空白对照组相比 ,消炎痛组在致炎后 0.5 ~
4h减轻足肿胀 ,差异有显著性 (P<0.01、P<0.
05), TSPJ中 、高剂量均能明显减轻角叉菜胶所致
小鼠右后足的红 、肿等症状 ,与空白对照组相比 ,
50 mg· kg-1 TSPJ组在致炎后 1 ~ 3h, 100mg·
kg-1 TSPJ组在致炎后 0.5 ~ 4h减轻足肿胀 ,差异
有显著性 (P<0.01、P<0.05),可见 TSPJ对小鼠
足肿胀有减轻作用 ,见表 1。
表 1 各组对角叉菜胶引起的小鼠足肿胀的抑制作用比较 (n=10, x±s)
组别 剂量(mg· kg-1)
足肿胀(cm)
0.5h 1h 2h 3h 4h 5h
空白组 - 0.39±0.08 0.41±0.05 0.40±0.04 0.38±0.04 0.34±0.02 0.33±0.03
消炎痛组 6.5 0.26±0.06** 0.29±0.05** 0.28±0.05** 0.28±0.04** 0.29±0.05* 0.28±0.04
TSPJ组 25 0.37±0.07 0.36±0.07 0.35±0.07 0.36±0.06 0.35±0.07 0.33±0.04
50 0.31±0.08 0.33±0.07* 0.32±0.05* 0.32±0.05* 0.30±0.04 0.30±0.04
100 0.30±0.06* 0.32±0.05* 0.31±0.05** 0.31±0.05* 0.30±0.03* 0.30±0.03
    与空白对照组比较 , *P<0.05、**P<0.01
2.2 TSPJ对巴豆油所致小鼠耳肿胀的抑制作用
与空白对照组比较 , TSPJ中 、高剂量均能明
显减轻巴豆油所致小鼠右耳的红 、肿等症状 ,显著
抑制巴豆油所致的小鼠耳肿胀 , TSPJ高剂量组的
465 咸宁学院学报(医学版)2009年第 23卷第 6期〔JournalofXianningUniversity(MedicalSciences)〕
抑制率可达 23.8%,作用强度与剂量呈正相关 ,见
表 2。
表 2 各组对巴豆油所致耳肿胀的
抑制作用比较 (n=10, x±s)
组别 剂量 /(mg· kg-1) 肿胀(mg) 抑制率(%)
空白组 - 8.62±1.26 -
消炎痛组 6.5 3.61±0.55** 58.12
TSPJ组 25 7.36±1.17 14.70
50 7.06±0.87* 18.12
100 6.57±0.84* 23.83
  与空白对照组比较 , *P<0.05、**P<0.01
2.3 TSPJ对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性
增高的影响
与空白对照组相比 , TSPJ中 、高剂量均能明
显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管痛透性的增
高 ,作用强度与剂量呈正相关 ,见表 3。
表 3 各组对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管
通透性增高的影响比较 (n=10, x±s)
组别 剂量(mg· kg-1)
尤文斯兰
(mg· ml-1)
抑制率
(%)
空白组 - 4.77±0.16 -
消炎痛组 6.5 1.88±0.04** 60.48
TSPJ组 25 3.98±0.34* 16.98
50 3.22±0.51* 32.70
100 2.43±0.833** 48.64
  与空白对照组比较 , *P<0.05、**P<0.01
2.4 各组小鼠血清中 GSH-PX、SOD、MDA变化
与空白对照组相比 ,消炎痛组和 TSPJ中 、高
剂量组能恢复 GSH-PX、SOD活力和 MDA含量(P
<0.05),见表 4。
表 4 各组对冰醋酸致小鼠腹膜炎模型血清中 SOD、GSH-PX、MDA水平的影响比较 (n=10, x±s)
组别 剂量(mg· kg-1) GSH-PX(U· ml-1) SOD(U· ml-1) MDA(nmol· ml-1)
空白组 - 424.19±45.04 59.49±5.91 5.08±1.10
消炎痛组 6.5 887.04±122.83** 104.12±5.44** 1.55±0.46**
TSPJ组 25 487.28±35.24* 72.71±3.63* 2.91±1.22*
50 594.99±95.89* 82.97±5.10** 2.69±0.64*
100 739.83±113.69** 91.92±5.46** 2.22±0.85*
  与空白对照组比较 , *P<0.05、**P<0.01
3 讨 论
炎症是在致炎因素作用下 ,具有血管系统的
活体组织对损伤因子所发生的防御反应 。在炎症
反应中 ,致炎因素引起毛细血管扩张 、通透性增
加 、中性粒细胞趋化 、游走至炎症反应灶 ,释放炎
症介质参与炎症反应 [ 3] 。巴豆油 、冰醋酸和角叉
菜胶是常用的急性炎症诱导剂。巴豆油涂于小鼠
的耳部 ,能增加毛细血管的通透性引起组织水肿;
冰醋酸小鼠腹腔注射 ,可以使其腹腔毛细血管的
通透性增加;角叉菜胶注射于小鼠足跖皮下 ,可诱
导 PGE、组胺 、5-HT等炎症介质的释放 ,引起足肿
胀 [ 2] 。本研究结果表明 ,与空白对照组比较 , TSPJ
组能减轻小鼠足肿胀;对小鼠巴豆油性耳肿胀 ,
100mg· kg-1 TSPJ组的抑制率可达 23.8%;对冰
醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高 , TSPJ组
均能明显抑制作用 , 100mg· kg-1TSPJ组的抑制
率可达 48.6%。以上均提示 TSPJ对急性炎症渗
出过程具有一定的抑制作用。如同文献资料所
述 ,复方竹节三七片可明显抑制二甲苯致小鼠耳
肿胀[ 4] ,竹节三七提取物对蛋清 、甲醛或右旋糖酐
所致大鼠关节炎及棉球肉芽肿均有明显的抗炎作
用 [ 5] ,复方竹节三七片对角叉菜胶所致小鼠足肿
胀有明显抑制作用[ 6] 。
在炎症过程中 ,炎症部位的中性粒细胞活化 ,
发生呼吸暴发产生 O-2 等活性氧自由基 ,引起脂
质过氧化 ,造成生物膜损伤[ 7, 8] , TSPJ能增加体内
自由基清除剂如 GSH-PX、SOD而清除自由基 ,抑
制脂质过氧化产物 MDA水平 ,能恢复小鼠血清中
GSH-PX、SOD的活力 ,因而达到抗炎效果。
总之 , TSPJ具有一定的抗炎功能 ,而减少炎
症自由基生成 、抑制脂质过氧化反应可能是其抗
炎作用的重要机制。
参考文献:
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maformationbyendogenousnitricoxide[ J] .EurJPhar-
macol, 1994, 265(122):89
(收稿日期:2009-05-04)
· ·
35例霉菌性阴道炎的中药治疗体会
文瑞华1 ,刘学敏 2
(1.咸宁市职业技术学院医务部 ,湖北 咸宁 437100;2.咸宁市中医医院药剂科)
中图分类号:R711.73     文献标识码:B     文章编号:1008-0635(2009)06-0467-01
  霉菌性阴道炎是常见的妇科病之一 ,最常见
的症状为外阴瘙痒 ,白带增多 ,继发泌尿系感染时
则会有尿频 、尿急 、尿痛等症状。霉菌性阴道炎的
发生与个人卫生关系密切 。现将 65例霉菌性阴
道炎的中药治疗结果报告如下 。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本组 65例均系门诊患者 ,按就医顺序随机分
成两组 。治疗组(治疗组)35例 ,年龄 20 ~ 30岁 ,
平均 25.8岁。对照组 30例 ,年龄 22 ~ 30岁 ,平
均年龄 26岁 。两组患者均有皮肤瘙痒或烧灼感 ,
情况具有可比性 。
1.2 治疗方法
治疗组:用参百洗剂(将雄黄水飞制成细粉 ,
明矾乳化成细粉备用 ,再将苦参 40g、蛇床子 28g、
雄黄 20g、黄柏 20g、百部 40g、明矾 14g、地肤子
28g等加水煎煮 2次 ,每次 1.5h,合并滤液沉降
24h,过滤取出上清液浓缩后加入雄黄 、明矾细粉
搅匀即得。咸宁市中医院制剂室生产)50ml加温
开水 1450ml,混匀坐浴 ,每次清洗 5 ~ 10min, 2次 /
d,并注意保洁 、干燥等。对照组:采用温开水
1500ml坐浴 ,每次清洗 5 ~ 10min, 2次 /d,并注意
保洁 、干燥。两组均不使用抗生素 ,疗程均为 3 ~
5d。
2 结 果
两组治疗后症状 、体征消失率比较 ,见表 1。
表 1 两组治疗后症状 、体征消失率比较
组别 例数(n)皮肤搔痒 n(%)烧灼感 n(%)
治疗组 35 32(91.4*) 31(88.6*)
对照组 30 15(50.0) 11(36.7)
   与对照组比较 , *P<0.01
3 讨 论
霉菌性阴道炎多由白色念珠菌引起 ,外阴瘙
痒系因湿热毒邪外侵肌肤所致 ,治宜清热利湿 、解
毒 、止痒 。参百洗剂方中 ,苦参清利湿热杀虫;蛇
床子 、地肤子散寒祛风 ,能燥湿杀虫;雄黄具有清
热化湿 、解毒之功效;花椒散寒湿止痛;黄柏泻火
解毒 ,能清下焦湿热;白藓皮清热泻火解毒。用以
上中药煎水熏洗外阴 ,既可减轻症状 ,又能抑制消
灭念球菌 ,熏洗后患者的外阴痒痛 、灼热症状较对
照组明显减轻 ,表明该洗剂疗效肯定 。
(收稿日期:2009-11-05)
467 咸宁学院学报(医学版)2009年第 23卷第 6期〔JournalofXianningUniversity(MedicalSciences)〕