全 文 :峨参对食醋所致小鼠脾虚模型的作用观察
马超英 李 莉
西南交通大学生命科学与工程学院 (四川 成都 614202)
摘要:目的:观察峨参对食醋所致脾虚模型小鼠的影响。方法:昆明系雄性小白鼠 60 只 , 随机分成 6组 , 除空
白组灌胃生理盐水外 , 其余各组灌食醋造模 8 天 , 然后各组分别以生理盐水 、 峨参水煎液 、 白术水煎液灌胃 , 测定摄
食量 、 活动次数 、 游泳时间 、 耐寒机能及脏器指数。结果:高 、 中 、 低剂量组的峨参及阳性药物白术组 , 均能不同程
度地提高脾虚小鼠的体重及其脏器指数 、 延长脾虚小鼠的游泳时间 、 增强食欲 、 提高其耐寒能力 、 增加其活动次数 、
提高其存活率。结论:峨参水煎液对食醋所致小鼠脾虚有一定的改善作用。
关键词:峨参 脾虚 作用观察
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1000-3649 (2008)09-0012-03
Observation on the Effect of Anthriscus sylvestris on Vinegar-induced Spleen Deficiency Mice/Ma Chaoying Li Li∥
Pharmacy School of Southwest J iaotong University (Chengdu Sichuan 610031 , China)
Abstract Objective:To study the effect of Anthriscus sylvestris on mice with vinegar Spleen deficiency.Methods:A total of 60
healthy male mice of Kunming species were randomly divided into six groups.The control group was treated with gastric perfusion of nor-
mal saline(NS), and the other groups treated with vinegar.After eight days , each group was treated with gastric perfusion of NS , high ,
medium , low dose of Anthriscus sylvestris decoction and Baizhu decoction.Then , we observed the food consumption , free activities ,
swimming time , ability to withstand cold and organ indexes.Results:Compared with model group , the high , medium , low-dose An-
thriscus sylvestris decoction and Baizhu decoction could increase the weight and organ indexes , extend the swimming time , improve ap-
petites , enhance the ability to withstand cold , increase the times of free activities and improve the survival rate.Conclusion:Anthriscus
sylvestris can improve the vinegar Spleen deficiency mice to certain extent.
Keywords:Anthriscus sy lvestris Spleen deficiency observation on the effect
峨参 (Anthriscus sylvestris (L.) Hoffm)是四川
峨眉山道地中药材 , 在四川一带的民间应用广泛 ,
但至今尚未对其作用及其机理进行深入研究。本实
验主要观察峨参对食醋所致小鼠脾虚的影响 , 报道
如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 选用健康成年清洁级昆明系雄性小白
鼠60只 , 体重 (20±2) g , 购自成都中医药大学实
验动物研究中心 , 常规饲养。
1.1.2 药物 峨参、 白术均购买于峨眉山市医药公
司 , 经西南交大药学院鉴定为四川产。峨参水煎液:
取适量峨参剪碎后加水浸泡 1h , 分 2次煎煮 , 第 1
次 40min , 第 2次 20min , 用纱布过滤 , 合并 2次水
煎液分别浓缩成 4g、 2g、 1g 生药/ 10ml , 每只小鼠按
0.6ml/ d灌服。药液 4℃保存。白术水煎液:取适量
白术粉碎后加水浸泡 1h , 其余煎煮方法同上 , 浓缩
成 2g/ 10ml , 每只小鼠按 06ml/d 灌服。药液 4℃保
存。保宁醋:四川保宁醋有限公司生产 , 稀释成
50%的稀溶液。
1.1.3 主要仪器 多功能小鼠自主活动记录仪 , 型
号:YLS-1A , 山东省医学科学院设备站产。
1.2 方法
1.2.1 实验分组 昆明系雄性小白鼠 60只 , 随机分
成 6组:正常对照组、 模型对照组 、 阳性药物对照
组及峨参水煎液高、 中、 低剂量组 , 每组 10只。以
下各实验分组均如此。
1.2.2 模型的制备 第 1~ 8天 , 正常对照组每天每
只灌胃生理盐水0.6ml , 其余各组每天每只灌胃食醋
0.6ml。第 9~ 15天 , 药物组每天每只灌胃白术水煎
液或高、 中、 低剂量峨参水煎液 0.6ml , 正常对照组
和模型对照组每天每只灌胃生理盐水 0.6ml。
1.2.3 检测指标
1.2.3.1 动物的外观表现观察 自造模开始每天观
察小鼠的精神、 食欲 、 粪便、 自主活动次数及被毛
情况。
1.2.3.2 游泳实验 (抗疲劳实验) 在末次给药后
30min后实验。实验时将各组小鼠放入水深 25cm , 水
温保持在 20±0.5℃恒温水槽内。为了适当缩短游泳
时间 , 在小鼠尾部束一 2g 的重物 , 以小鼠沉没在水
槽底无力再冲起时为其溺死时间 , 共观察 40min。
40min尚未入水下者 , 按 40min计算。记录以入水至
此时间为其游泳时间。
1.2.3.3 耐寒机能测定 于游泳试验结束后 , 进行
实验。实验时将各组动物同时放入铁箱内 , 以铁皮
隔成 10 格 , 置于-15℃冰箱内 , 40min后取出 , 记
录各组小鼠存活数 , 比较各组动物存活百分率。
1.2.3.4 脾指数与胸腺指数 将小白鼠称重后颈椎
·12· 四 川 中 医Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine 2008 年第 26卷第 9 期Vol.26 , No.9 , 2008
基金项目:四川省应用基础研究资助项目 (05JY029-099)
脱臼处死 , 剖开腹腔 , 取胸腺和脾脏 , 分别称量胸
腺和脾脏的重量 , 并记录数据。
脾虚小鼠的脏器指数=免疫器官鲜重 (g)/体
重 (g) ×1000
1.3 统计学方法 实验采用完全随机设计。结果以
均数±标准差 ( x±s)表示 , 用 SPSS11.5软件分析 ,
并对各指标进行 t检验。
2 结 果
2.1 动物的外观表现 造模动物于灌服食醋后第 5
天开始出现大便稀软 , 毛发枯槁 , 扎堆 , 拱背 , 活
动频率下降 , 体重减轻等典型的脾虚证表现。高、
中、 低剂量峨参治疗组与阳性药物对照组在给药治
疗8天后 , 情况有明显好转 , 模型组在停止灌服食
醋后也有一定恢复。
2.2 24h摄食量 见表 1。结果表明 , 第 7天造模结
束后 , 造模各组的食量均降低 (P<0.01 ~ 0.05)。
第17天治疗结束后 , 模型组 24h摄食量明显低于其
余各组 (P<0.05);与模型组比较 , 阳性药物组、
高剂量组 、 中剂量组、 低剂量组治疗后第 17 天的
24h摄食量均有明显提高 , 与模型组具有极显著性差
异 (P<0.01)。
表 1 峨参水煎剂对脾虚小鼠 24h摄食量
的影响 ( x ±s , n=10)
组别 第 1天 (g) 第 7天 (g) 第 17天 (g)
空白对照组 11.95±0.53 5.36±0.58 5.36±0.36
模型对照组 7.00±0.29 3.95±0.24** 3.45±0.82*
阳性药物组 11.63±0.3011 4.28±0.58* 5.25±0.39☆☆
高剂量组 8.90±0.3899 4.30±0.52* 6.11±0.34☆☆##
中剂量组 10.31±0.6080 3.83±0.30** 6.01±0.23☆☆##
低剂量组 9.98±0.5193 4.23±0.42* 4.65±0.24☆☆#
与空白对照组比较:**P<0.01, *P<0.05;与阳性药物组
比较:##P<0.01 , #P<0.05;与模型组比较:☆☆P<0.01, ☆
P<0.05;下同
2.3 自主活动次数 见表 2。结果表明 , 第 7天造
模结束后 , 造模各组的活动次数均降低 (P<0.01~
0.05)。第 17天治疗结束后 , 模型组的活动次数仍然
有明显的降低 (P<0.05);与模型组比较 , 阳性药
物组、 高剂量组 、 中剂量组 , 低剂量组第 17天的活
动次数有明显的增加 , 具有显著性差异 (P<0.05)。
表 2 峨参水煎剂对脾虚小鼠自主活动次数
的影响 ( x ±s , n=10)
组别 第 1天 (次) 第 7天 (次) 第 17天 (次)
空白对照组 151.8±50.06 207.6±49.77 181.5±33.08
模型对照组 176.8±55.06 159.1±47.68* 142.1±41.55*
阳性药物组 174.2±29.41 140.1±57.92** 184.0±37.50☆
高剂量组 133.1±42.15 93.5±28.02** 197.2±54.00☆
中剂量组 138.4±28.84 121.2±61.43* 182.4±36.21☆
低剂量组 165.1±65.10 112.5±71.02** 165.6±59.46☆
2.4 体重变化 见表 3。结果表明 , 第 7天造模结
束后 , 造模各组的体重均明显降低 (P <0.01 ~
0.05)。第 17天治疗结束后 , 模型组的体重明显低于
其余各组 (P<0.01);与模型组比较 , 阳性药物组 、
高剂量组 、 中剂量组 、 低剂量组的体重有明显的增
加 (P<0.05)。
表 3 峨参水煎剂对脾虚小鼠体重的影响 ( x±s , n=10)
组别 第 1天 (g) 第 7天 (g) 第 17天 (g)
空白对照组 29.12±4.18 31.81±3.03 35.47±4.21
模型对照组 27.65±3.78 24.82±5.24** 25.97±3.02**
阳性药物组 28.55±3.84 26.31±3.48** 29.63±4.46☆
高剂量组 28.90±4.16 26.60±3.70* 29.04±2.35☆
中剂量组 27.53±3.26 24.79±2.75** 29.06±2.75☆
低剂量组 27.23±2.95 26.37±5.04* 28.91±2.63☆
2.5 游泳时间及耐寒存活率 见表 4。结果表明 ,
模型组游泳时间有很明显的降低 (P<0.05);与模
型组比较 , 阳性药物组 、 高剂量组的游泳时间有很
大的提高 , 具有极显著性差异 (P<0.01), 中剂量
组游泳时间明显提高 , 具有显著性差异 (P<0.05)。
耐寒实验表明 , 与模型组比较 , 阳性药物组 、
高、 中、 低剂量组小鼠存活率皆明显提高。
表 4 峨参水煎液对小鼠游泳时间及耐寒存活率
的影响 ( x ±s , n=10)
组别 游泳时间(s) 耐寒存活数(只) 耐寒存活率(%)
空白对照组 363.9±92.53 10 100%
模型对照组 251.9±46.76* 6 60%
阳性对照组 360.5±77.36☆☆ 9 90%
高剂量组 338.0±60.80☆☆ 8 80%
中剂量组 320.3±78.72☆ 8 80%
低剂量组 305.4±76.28 7 70%
2.6 脏器指数 见表 5。结果表明 , 在灌服药物治
疗后 , 模型组脾指数与胸腺指数明显降低 (P<0.05
~ 0.01);与模型组比较 , 各组小鼠的脾指数与胸腺
指数均具有不同程度的升高 (P<0.05~ 0.01), 其
中阳性药物组胸腺指数升高最明显 (P<0.01), 高 、
中剂量峨参组次之 (P<0.05)。
表 5 峨参水煎液对小鼠脾脏指数与胸腺指数
的影响 ( x ±s , n=10)
组别 胸腺指数 脾脏指数
空白对照组 2.0245±0.02 4.7619±0.57
模型对照组 1.7347±0.33* 3.8202±0.59**
阳性药物组 2.0901±0.47☆☆ 4.8444±0.59☆
高剂量组 2.0852±0.47☆ 4.7218±0.52☆☆
中剂量组 2.0779±0.24☆ 4.6418±0.83☆
低剂量组 1.8697±0.49 4.3068±0.73☆
3 讨 论
本文首次从健脾益气的角度考察了峨参的药效。
从上述结果可以看出 , 峨参具有明显的健脾益气的
作用。高、 中、 低剂量峨参治疗和阳性药物对照组
均能不同程度地提高脾虚小鼠的体重及其脏器指数 、
延长脾虚小鼠的游泳时间 、 增强食欲、 提高其耐寒
能力 、增加其活动次数 、提高其存活率 。高 、中剂
·13·2008年第 26卷第 9期Vol.26 ,No.9 ,2008 四 川 中 医Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine
白术 、茯苓 、白术茯苓汤对脾虚大鼠VIP及VIPR2
的基因表达的影响
贾 波1 刘 岩2 张丰华1 彭 成1 李 展2 陈学习3
1.成都中医药大学基础医学院 (四川成都 610075) 2.成都中医药大学 06级硕士研究生 (四川成都 610075)
3.成都中医药大学 05级博士研究生 (四川 成都 610075)
摘要:目的:研究白术 、 茯苓及白术茯苓汤对血管活性肠肽 (VIP)及其 VIPR2 基因表达的影响。方法:运用大
黄厚朴枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型 , 采用放射免疫及 RT-PCR等方法 , 观察白术 、 茯苓 、 白术茯苓汤
对脾气虚大鼠血浆及结肠组织 VIP的影响。结果:(1)与模型组比较 , 白术茯苓汤组能下调血浆及结肠组织 VIP 含量
(P<0.05), 茯苓组呈下调趋势 , 白术组则不明显;(2)与模型组比较 , 三组方药均可使脾虚大鼠 VIPR2 的基因表达
量下降 (P<0.05)。结论:(1)白术茯苓汤组下调脾气虚大鼠 VIP含量优于单味药 , 表明中药配伍运用的必要性和科
学性;(2)三组方药均能降低脾虚大鼠 VIPR2 的基因表达量 , 可能与白术 、 茯苓及白术茯苓汤对 VIP 的作用靶点有
异。
关键词:血管活性肠肽 VIPR2的基因表达 白术 茯苓 白术茯苓汤 脾气虚证模型
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1000-3649 (2008)09-0014-02
Effects of Rhizome Atractylodis Macrocephalae, Poris , Baizhufuling Decoction on the Expression of VIP and VIPR2 in
Spleen Deficiency Rats/ Jia Bo1 Liu Yan2 Zhang Fenghua1 Peng Cheng1 Li Zhan2 Chen Xuexi3∥1.Preclinical Medicine
School of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (Chengdu Sichuan 610075 , China) 2.Master Candidate of Chengdu
University of Traditional Chinese Medicine (Chengdu Sichuan 610075 , China) 3.Doctor Candidate of Chengdu University of Tradi-
tional Chinese Medicine (Chengdu Sichuan 610075 , China)
Abstract Objective:To study the effects of Rhizome Atractylodis Macrocephalae (RAM), Poris , Baizhufuling decoction on va-
soactive intestinal peptide(VIP)and the gene VIPR2 expression of Spleen-Qi deficiency rats.Methods:The rat model of Spleen-Qi
deficiency was made with the use of Radix et Rhizoma Rhei , magnolia bark , Fructus Aurantii Immaturus , and irregular diet.With the
method of RIA and RT-PCR, we observed the effect of RAM , Poria , Baizhufuling decoction on VIP in plasma and colon of Spleen-
Qi deficiency rats.Results:(1)Compared with model group , the level of VIP in plasma and colon was lowered by Baizhufuling decoc-
tion group(P<0.05), and Poria group had a tendency of lowering VIP content.But there was no obvious decrease of VIP content in
RAM group.(2)Compared with model group , the three groups could decline the gene VIPR2 expression of Spleen deficiency rats(P<
0.05).Conclusion:(1)Baizhufuling decoction declines VIP content in Spleen-Qi deficiency rats better than single drug does.It
demonstrates the necessity and science of making use of TCM compatibility;(2)RAM , Poris , Baizhufuling decoction can reduce the
gene VIPR2 expression of Spleen deficiency rats.This might be related to the different targets that RAM , Poris , Baizhufuling decoction
function.
Keywords:VIP gene VIPR2 expression RAM Poris Baizhufuling decoction model of Spleen-Qi deficiency
白术茯苓汤由白术 、 茯苓组成 , 二药配伍运用始见于
《伤寒论》 , 明代徐春甫用命名为白术茯苓汤而载入 《古今医
统大全》 , 谓 “白术茯苓汤治湿泻 , 又治食积 、 湿热作泻。白
术 、茯苓各五钱……” 。研究显示脾虚证与胃肠激素关系密
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (编号:30572296)
量组峨参的健脾益气作用与白术相近 , 低剂量组峨
参健脾益气作用最弱 , 可能与其剂量不足有关。《内
经》 云:“味过于酸 , 肝气以津 , 脾气乃绝” , 说明饮
食过酸 , 肝木旺盛 , 克伐脾土 , 脾气虚衰;“欲令脾
实 , 食勿太酸” , “脾病禁酸” , 进一步说明饮食偏酸
是损伤脾胃的重要因素 , 是产生脾虚的条件之一。
食醋味酸 , 刺激胃黏膜 , 使酸性粘液增多 , 在酸性
物质的持续作用下 , 胃黏膜的分泌功能不能正常进
行 , 进而影响小肠的吸收[ 1] 。酸刺激损伤了小肠的
吸收细胞后 , 使小肠的吸收细胞微绒毛变短、 变细、
排列不整齐 , 肠上皮细胞萎缩 , 绒毛间质中度水肿 ,
小肠水解吸收食物的功能受到影响 , 小肠酶 SDH
(丝氨酸脱水酶)的活性降低。进一步阻碍了运营物
质的吸收[ 2] 。可见过食酸味导致胃肠损伤 , 不能运
化水谷 , 脾气虚弱。根据以上理论 , 本实验选用食
酸所致的脾虚模型是有充分依据的。
参考文献
[ 1] 张立德.脾气虚家兔肌电图与骨骼肌微量元素变化的实验
研究 [ J] .辽宁中医杂志 , 1995 , 22 (8):378
[ 2] 候建平.大黄致脾虚小白鼠植物神经功能的变化 [ J] .天
津中医.1997, 14 (3):128~ 129
(收稿日期 2008-05-28)
·14· 四 川 中 医Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine 2008 年第 26卷第 9 期Vol.26 , No.9 , 2008