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藏药赛北紫堇总生物碱镇痛药效学研究



全 文 :收稿日期:2012-10-19 接受日期:2013-01-22
基金项目:青海省科技厅科技发展基础研究项目(2010-Z-746) ;青
海民族大学大学生科技创新项目
* 通讯作者 Tel:86-013119710300;E-mail:lhlsw @ vip. sina. com;
mypgq@ sina. com
天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2013,25:544-546
文章编号:1001-6880(2013)4-0544-03
藏药赛北紫堇总生物碱镇痛药效学研究
李海丽1* ,潘国庆2* ,酉志亮1,姜 伟1,南康鹏1
1青海民族大学化学与生命科学学院,青海 西宁 810007;2 青海省植物化学资源重点实验室,青海 西宁 810007
摘 要:本文采用小鼠热板法和醋酸扭体法观察藏药赛北紫堇总生物碱的镇痛作用;藏药赛北紫堇总生物碱灌
胃给药,在小鼠热板法和扭体法实验中能提高小鼠热刺激引起的痛阈值(P < 0. 05) ,显著减少醋酸所致的小鼠
扭体反应(P < 0. 05)。结果表明藏药赛北紫堇总生物碱具有明显的镇痛作用。
关键词:藏药赛北紫堇;总生物碱;镇痛;药效学
中图分类号:R965. 3 文献标识码:A
Studies on Analgesic Effects of the Total Alkaloids of
Tibetan Medicine Saibei Corydalis
LI Hai-li1* ,PAN Guo-qing2* ,YOU Zhi-liang1,JIANG Wei1,NAN Kang-peng1
1Qinghai Nationalities University,Xining 810007,China;2Key Laboratory of Qinghai phytochemicals resources,Xining 810007,China
Abstract:The analgesic effect of the total alkaloids of Tibetan medicine Saibei Corydalis was investigated using the hot
plate testing method and acetic acid writh testing method. The mice were gavaged administration of the total alkaloids of
Tibetan medicine Saibei Corydalis. The results showed that the total alkaloids of Tibetan medicine Saibei Corydalis obvi-
ously pro-longed the pain threshold of temperature stimuli on mice (P < 0. 05)and decreased the number of writhe in-
duced by acetic acid (P < 0. 05). The experiments showed that the total alkaloids of Tibetan medicine Saibei Corydalis
had analgesic effect.
Key words:Saibei Corydalis;total alkaloids;analgesic;pharmacodynamic
紫堇属(Corydalis DC. )全球约 320 种,主要产
于亚洲。我国约 200 余种,全国均有分布,以西南部
种类分布最多,其中青藏高原约 120 余种。赛北紫
堇[Corydalis impatiens(Pall.)Fisch]为罂粟科紫堇
属植物[1,2]。赛北紫堇是藏药应用中很重要的药
材,用于治疗各种出血、肝炎、胆囊炎、流感等疾病,
也有将其用于治疗跌打损伤或其它外伤、发烧、肠胃
炎等[3,4]。
但是迄今为止,赛北紫堇药理活性的研究尚处
于空白阶段,本试验对赛北紫堇总生物碱的镇痛药
理活性进行了初步的研究,为藏药赛北紫堇的临床
用药提供了理论基础。
1 材料、动物与仪器
1. 1 药品与试剂
藏药赛北紫堇总生物碱提取物,每克生药约含
0. 04399 g生物碱(藏药赛北紫堇于 2011 年 8 月 21
日采于青海省贵德县,并经由青海省药检所藏药室
骆桂法研究员鉴定,总生物碱提取物是由粗粉经
2%盐酸渗漉提取,提取液浓缩至小体积后加碱碱化
至 pH = 12,收集沉淀干燥即得,待用时用生理盐水
稀释) ;阿司匹林泡腾片(阿斯利康制药有限公司,
生产批号 1101102) ;生理盐水;冰醋酸为分析纯。
1. 2 试验动物
KM小白鼠,雌雄兼用,体重(20 ± 2)g,购于青
海省实验动物中心,青医动字第 2012004 号,饲养于
青海民族大学动物饲养室,环境温度 22 ~ 26 ℃,相
对湿度 55% ~65%。动物饮用纯净水,饲料购于青
海省实验动物中心(普通全价颗粒饲料Ⅱ号) ,适应
环境一周后进行实验,实验前禁食不禁水 12 h。
1. 3 试验仪器
RB-200 智能热板仪(成都泰盟科技有限公司) ;
XB-5200B 超声波清洗(宁波新芝生物科技股份有
限公司) ;FA1604 电子天平(上海精密科学仪器有
限公司) ;金马牌 JPT-5 架盘天平(上海岑达天平秤
有限公司) ;灌胃器;量筒等。
2 试验方法与结果
2. 1 统计学方法
实验数据以 x ± s 表示,采用 SPSS17. 0 统计软
件,进行组间比较的 t检验。
2. 2 对热刺激所致小鼠疼痛的影响[5,6]
取健康雌性小鼠,体重 18 ~ 22 g,实验前对小鼠
进行筛选,智能热板仪温度设定在(55. 0 ± 0. 5)℃,
预热 10 min。将小鼠置于热板仪上,以放置热板仪
至出现小鼠舔后足所需时间(s)为该鼠的正常痛阈
值,重复 2 次,每次间隔 30 min,以 2 次痛阈值平均
值作为该小鼠给药前的正常痛阈值。凡在 5 s 内或
在 30 s后才出现舔后足及跳跃者均弃之不用。选
出合格小鼠 50 只,随机分成 5 组,每组 10 只,空白
对照(生理盐水)组,阳性对照(阿司匹林)组,藏药
赛北紫堇总生物碱高、中、低组(计量依据前期藏药
赛北紫堇总生物碱对小鼠 LD50 测定的试验,根据
药典以其 LD50 8. 55 mg /mL生物碱的 0. 2 倍、0. 15
倍、0. 1 倍为高中低剂量)。按表 1 给药,灌胃给药 1
次 /天,连续灌胃 7 d,末次给药后 15、30、45、60 min
测定痛阈值,若给药后小鼠的痛阈值超过 60 s,立即
取出,以免烫伤,其痛阈值以 60 s 计算。结果见表
1。
表 1 赛北紫堇总生物碱对小鼠热板法痛阈值的影响(x + s)
Table 1 Effect of Saibei Corydalis on pain threshold of mice in hot-plate test (x ± s)
组别
Group
剂量
Dose
(mg /kg)
给药前痛阈值
The pain threshold
before administration
(s)
给药后不同时间的痛阈值
The pain threshold after administration(s)
15 min 30 min 45 min 60 min
空白对照组 Control — 12. 20 ± 0. 65 13. 92 ± 4. 22 12. 89 ± 3. 47 12. 44 ± 4. 56 13. 41 ± 2. 97
阿司匹林组 Aspirin 40 13. 00 ± 4. 16 21. 91 ± 19. 63** 18. 53 ± 10. 78** 0. 81 ± 5. 37** 15. 60 ± 5. 15
紫堇高剂量组 Saibei Corydalis-H 34. 2 13. 25 ± 2. 57 18. 36 ± 3. 83* 20. 53 ± 1. 45** 34. 11 ± 4. 00*** 16. 36 ± 3. 04*
紫堇中剂量组 Saibei Corydalis-M 25. 65 14. 79 ± 3. 27 16. 13 ± 4. 80 15. 92 ± 4. 28 17. 95 ± 3. 64* 15. 64 ± 2. 62
紫堇低剂量组 Saibei Corydalis-L 17. 1 12. 96 ± 3. 17 13. 41 ± 6. 16 14. 47 ± 5. 42 16. 91 ± 4. 19 14. 63 ± 4. 62
注:与空白对照组比较* P < 0. 05,** P < 0. 01。
Note:Compare with control * P < 0. 05,** P < 0. 01.
结果显示赛北紫堇总生物碱高、中、低剂量组均
能显著提高小鼠对热反应的痛阈值,在给药 45min
后各组出现最大痛阈值,并且高剂量组与空白对照
组比较在各时间段均出现显著性差异,显示藏药赛
北紫堇总生物碱对热刺激所致小鼠疼痛具有镇痛作
用。
2. 3 对醋酸引起的小鼠扭体反应的影响[7,8]
取健康小鼠 50 只,体重 18 ~ 22 g,随机分为 5
组,每组 10 只,空白对照(生理盐水)组,阳性对照
(阿司匹林)组,藏药赛北紫堇总生物碱高、中、低组
(计量依据前期藏药赛北紫堇总生物碱对小鼠 LD50
测定的试验,根据药典以其 LD50 8. 55 mg /mL 生物
碱的 0. 2 倍、0. 15 倍、0. 1 倍为高中低剂量)。灌胃
给药 1 次 /天,连续灌胃 7 d,每组小鼠连续灌胃给药
1 周后,再腹腔注 0. 6%的醋酸溶液 0. 2 mL,注射醋
酸 15 min后,观察记录小鼠的扭体反应次数并计算
各组平均值和抑制百分率。结果见表 2。
表 2 赛北紫堇总生物碱对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(x ± s)
Table 2 Effect of Saibei Corydalis on writhing body response of mice induced by acetic acid (x ± s)
组别
Group
剂量
Dose(mg /kg)
扭体次数
Number ofwrithing
抑制率
Inhibition (%)
空白对照组 Control - 45. 7 ± 10. 2 0
阿司匹林组 Aspirin 250 26. 8 ± 13. 4** 41. 4
紫堇高剂量组 Saibei Corydalis-H 34. 2 25. 1 ± 3. 5** 45. 1
紫堇中剂量组 Saibei Corydalis-M 25. 65 27. 9 ± 9. 6** 38. 9
紫堇低剂量组 Saibei Corydalis-L 17. 1 30. 2 ± 10. 1* 33. 9
注:与空白对照组比较* P < 0. 05,** P < 0. 01。
Note:Compare with control * P < 0. 05,** P < 0. 01.
545Vol. 25 李海丽等:藏药赛北紫堇总生物碱镇痛药效学研究
结果显示阿司匹林组和赛北紫堇总生物碱各组
的扭体次数均明显减少,均与空白对照组比较有显
著性差异,显示赛北紫堇总生物碱对醋酸引起的小
鼠扭体反应产生的疼痛有明显的镇痛作用。
3 讨论
紫堇属植物绝大多数具清热解毒,除湿止痛功
效,用于发烧感冒、风湿痹痛,外治疮疡痈肿等症。
藏药赛北紫堇中医药用部位为全草,清热解毒,用于
肿痛,疥癖疮毒,毒蛇咬伤刀伤等,藏医药用部位为
全草,译名桑格丝哇,可活血散瘀利气止痛,治胃炎,
胃溃疡跌打损伤,坐骨神经痛,另有藏医用止血记
载[1]。
植物化学研究表明,本属植物含多种生物碱,是
防治心血管系统、神经系统疾病及抗病毒、抗癌的有
效成分[4],但镇痛药效学仍处于空白阶段,本实验
通过采用小鼠热板法和醋酸扭体法观察藏药赛北紫
堇总生物碱的镇痛作用。在热板实验中,藏药赛北
紫堇生物碱延长了小鼠的痛阈值,说明药赛北紫堇
生物碱对由热引起的疼痛有一定缓解作用;扭体实
验是化学刺激物注射到小鼠腹腔引起深部的、大面
积而较持久的疼痛刺激,是筛选镇痛药最常用的模
型之一,藏药赛北紫堇生物碱对冰醋酸引起小鼠的
扭体反应具有较好的缓解作用。在实验过程中观察
到藏药赛北紫堇高剂量组在 30、45 min 时可明显延
长小鼠痛阈值,并且藏药赛北紫堇各组均能减少小
鼠扭体次数,具有明显的镇痛作用[9-11]。
青海产藏药赛北紫堇植物,海拔在 2500 ~ 5700
m间,被藏医视为珍贵药材[12],并且青海省该植物
资源丰富,且易于采收加工,若从药理方面进行严格
筛选,有可能制成安全、有效、廉价的新成药用于中
医、藏医临床。
参考文献
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