免费文献传递   相关文献

天山花楸叶抗菌作用研究



全 文 : 2006, Vol. 27, No. 08 食品科学 ※基础研究34
收稿日期:2005-10-31 *通讯作者
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30550001)
作者简介:祖丽皮亚·玉努斯(1970-),女,讲师,硕士,主要从事植物有效成分抑菌作用的研究。
天山花楸叶抗菌作用研究
祖丽皮亚·玉努斯,帕提古丽·马合木提*
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:用一系列细菌和真菌试验了天山花楸叶乙醇提取物的抑菌作用。结果表明一定浓度的天山花楸叶乙醇提
取物对供试细菌和真菌都显示出一定的抑制作用,MIC和MBC均较低,其抑菌活性随着提取物浓度的增大而逐渐
增强。提取物对高温、紫外线都具有良好的稳定性。因此天山花楸叶乙醇提取物可用于食物防腐、保鲜等领域,
具有广泛的使用范围。
关键词:天山花楸叶乙醇提取物;抗菌活性;稳定性
Antibacterial Effects of Ethanol Extract from Sorbus i schanica Leaves
ZULFIYA Yunus,PATIGUL Mahmut*
(College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract :The antimicrobial effects of ethanol extract from Sorbus tianschanic leaves on a series of bacterium and fungi
inhibition were studied. The extract was also assayed for its stability to temperature and ultraviolet radiation . The results
indicated that the extract with a certain concentration inhibits the growth of bacteria and fungi, while the antimicrobial activity
of the extracts is quite stable under heating and ultraviolet radiation.
Key words:exrtract of Sorbus tianschanica leaves(ESTL);antibacterial activity;stabil ty
中图分类号:R151.3 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)08-0034-03
天山花楸(Sorbus tianschanica)属于蔷薇科,花楸
属。全世界约有80余种,我国有50余种,主要分布
在东北、西北、西南等地区。新疆有3种花楸:天山
花楸(Sorbus tianschanica)、西伯利亚花楸(Sorbus
aucuparia)、天山毛花楸(Sorbus tianschanica.var.
tomentosa),主要分布在新疆哈密至伊梨的天山山脉。
在维吾尔族和哈萨克族民间常以嫩枝叶、果实和茎
皮入药。天山花楸嫩枝叶味甘苦、性寒;果实:味甘、
性平。具有清热利肺、补脾生津、止咳的作用;常用
于治疗慢性气管炎、肺结核、哮喘、咳嗽、水肿、胃
炎、维生素A和维生素C缺乏症等症[1~3]。药理学研究
表明,天山花楸具有镇咳、祛痰、平喘及依赖性的抑
制心肌收缩和保护心肌缺血等功能[4~6]。花楸属植物主要
含有氰苷、黄酮、萜类和木质素类化合物[ 7 ]。但是,
关于天山花楸抑菌活性的研究尚未见报道。
本实验进行了天山花楸叶乙醇提取物对细菌及真菌
的抗菌活性研究,阐明其抗菌特性,为天山花楸的综
合利用,也为天山花楸乙醇提取物在食品天然防腐剂领
域中的开发利用开辟一条新途径。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1植物材料
天山花楸 6月中旬采于新疆乌鲁木齐南山,经植
物教研室鉴定。
1.1.2主要仪器
旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅、电子天平、压力
蒸汽灭菌锅、冰箱、电热恒温培养箱等。
1.1.3主要试剂
9 5 %的乙醇、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化
钠、葡萄糖等。
1.1.4供试菌种
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis;金黄色葡萄球菌
Staphylococcus aureus;大肠杆菌Escherichia coli;产
气肠杆菌Enterobacter aerogenes;酿酒酵母Saccha-
35※基础研究 食品科学 2006, Vol. 27, No. 08
romyces cerevisiae;黑曲霉Asp rgillus niger;青霉
Penicillium sp.;根霉Rhizopus sp;毛霉Mucor sp. 以
上菌中均由本院微生物教研室提供。
1.1.5培养基
牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养):牛肉膏3g、
NaCl 5g、蛋白胨10g、琼脂粉20g、pH7.2~7.4、水
1000ml。
马铃薯培养基(用于真菌的培养):马铃薯200g、葡
萄糖10g、琼脂粉20g、pH自然、水1000ml。
液体培养基不加琼脂粉。
1.2方法[8~11]
1.2.1制备天山花楸叶乙醇提取物
称取1000g天山花楸叶(自然晾干),加4000ml的95%
乙醇置于室温下24h,次日电热恒温水浴锅中回流提取
90min,抽滤得滤液,药渣在加3倍的95%乙醇提取
60min,滤得药液。将两次所得滤液合并置于旋转蒸发
仪中减压浓缩并分离出乙醇,最后的浓缩液用干燥箱烘
干(45~50℃)后贮藏备用。
1.2.2含不同浓度提取物培养基的制备
以提取备用液作为100%原液,先用少量乙醇溶
解,再加蒸馏水稀释配成浓度为25%的天山花楸叶乙醇
提取物溶液。准确量取该溶液加入到盛有液体培养基的
试管中,配成含不同浓度的天山花楸叶乙醇提取物的系
列培养基。
1.2.3菌悬液的制备
在相对应的试管斜面培养基上,细菌置35~37℃
活化18h,真菌27~28℃活化44~48h。分别用接种环
挑取少许菌体置于装有9ml无菌水的试管内,震荡均
匀,十倍稀释法稀释,制成菌悬液(含菌量为106~107
个/ml)。
1.2.4最低抑菌浓度(MIC)的测定
每一系列接种一种菌种(0.1ml),每个浓度做3个重
复,另取1稀释系列,不接种任何菌做空白对照,置
适宜条件培养(细菌35~37℃,18~24h;真菌27~28℃,
44~48h),观察实验结果。以能抑制细菌和真菌生长的
最低添加量为该提取物的最低抑菌浓度 (MIC)。因含提
取物的培养液肉眼不宜辨明菌体的生长情况,可从各管
取一环转接于固体平板上,经适宜条件培养后观察有无
菌落生长。无菌生长的最低浓度即为该提取物的最低抑
菌浓度(MIC)。
1.2.5最低杀菌浓度(MBC)的测定
将提取物的浓度高于MIC(包括MIC)的各管培养物
各吸取0.1ml涂布于合适的琼脂培养基平板上,置适宜
条件继续培养。平板上菌落数小于5个的最低样品浓度
即为该样品的最低杀菌浓度(MBC)。
1.2.6提取物热稳性的测定
将稀释至一定浓度的提取物分别置于30、50、80、
100℃水浴和121℃湿热条件下处理15min后,测定其抑
菌活性。
1.2.7提取物紫外光稳定性的测定
将稀释至一定浓度的提取物分别在紫外光下处
理10、20、30、40、50、60min后测定其抑菌
活 性 。
2 结果与分析
2.1提取物对供试菌的MIC
菌种 MIC(%) MBC(%)
枯草芽孢杆菌 0.75 1
金黄色葡萄球菌 0.0625 0.5
大肠杆菌 1.25 1.25
产气杆菌 1 1.25
酵母菌 2.5 3
黑曲霉 1.5 2.5
青霉 1.5 2.5
毛霉 2 2
根霉 2 2.5
表1 提取物对受试菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度
Table 1 MIC and MBC of ESTL against some bacterials
注:表中数据为三次平行试验的平均值。
由表1可知,提取物对供试细菌的MIC为1.25%,
MBC为1.25%,对供试真菌的MIC为2.5%,MBC为
3%。尤其是对金黄色葡萄球菌的抑制能力显著。
2.2热处理对提取物抗菌效力的影响(以大肠杆菌和金
黄色葡萄球菌为例)
见图1,提取物的热稳定性良好,经30、50、80、
100、121℃高温处理15min后仍保持其原有的抗菌效
力。因此可将天山花楸乙醇提取物加入到食品中与食品
处理并用,提高加工食品的保存性。
大 肠 杆 菌
金 黄 色 葡 萄 球 菌1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
10 30 50 80 100121
M
I
C
(
%
)
温度(℃)
肠杆菌
黄色葡萄球菌
图1 热处理温度对提取物抗菌效力的影响
Fig.1 Effect of temperature on antimicrobials activity of ESTL
2006, Vol. 27, No. 08 食品科学 ※基础研究36
2.3紫外照射对提取物抗菌效力的影响(以大肠杆菌和
金黄色葡萄球菌为例)
见图2,结果表明随紫外光处理时间的延长,提取
物的抗菌活性基本保持不变,由此可见,该提取物对
紫外光具有极高的稳定性。
3 结 论
3.1天山花楸中活性成分种类很多,目前已从中分离
出了氰苷、黄酮、萜类和木质素类等多种生物活性成
分[7]。在以后的工作中可以考虑对提取物进行成分分离
并对有抑菌作用的物质进行结构分析与鉴定。
3.2一定浓度的天山花楸叶乙醇提取物对供试细菌和真
菌都显示出一定的抑制作用,MIC和MBC均较低。
3.3天山花楸乙醇提取物对高温、紫外线都有良好的
稳定性。因此新疆天山花楸叶乙醇提取物可用于食物防
腐、保鲜等领域,具有广泛的使用范围。
参考文献:
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志(36卷)[M]. 北京: 科
技出版社, 1974. 284.
[2] 新疆植物志编辑委员会. 新疆植物志(第二卷,第二分册)[M]. 乌鲁
木齐: 新疆人民出版社, 1973. 6.
[3] 江苏新医学院.中药大辞典(上海)[M]. 上海: 上海人民出版社, 1979.335.
[4] 李迪民, 陈坚, 王岩. 天山花楸水煎提取液药理学研究[J]. 中草药,
1996, 26(6): 302.
[5] 李迪民, 陈坚. 天山花楸醇提物药理学研究[J]. 西北药学杂志, 1998,
13(2): 10.
[6] 李迪民, 陈坚. 天山花楸醇提物对心肌缺血的保护作用[J]. 西北药
学杂志, 1999, 14(1): 1421.
[7] 陈坚, 王岩. 艾买提江, 等.天山花楸原植物、化学成分和药理学活
性研究(初报)[J]. 中国中医基础医学杂志, 2001, (7)(增刊): 45.
[8] 赵良忠, 王放银, 段林东. 大青叶抗菌物质提取及抗菌效果研究[J].
食品科学, 2004, 25(11): 138-140.
[9] 谭敬军. 竹荪抑菌特性研究[J]. 食品科学, 2001, 22(9): 73-75.
[10]李中南, 龙子江, 程惠娟. 尿路清的抑菌作用及其免疫功能的影响
[J]. 中成药, 1999, 21(9): 472-474.
[11]珧淑敏. 芦荟提取物抑菌作用的研究[J]. 食品科学, 2002, 23(4): 137-
139.
鲜切芦蒿PPO特性的研究
郁志芳,陆兆新,宋雯雯,李 妍
(南京农业大学食品科技学院,江苏 南京 210095)
摘 要:芦蒿去除不可食部分、冰水清洗、切分后用研钵碾成匀浆状于低温(4℃)离心机中离心(10000r/min,
30min),获得的粗酶液用于多酚氧化酶(PPO)活力的测定和酶特性的研究。结果表明:鲜切芦蒿PPO适宜的pH值
为6.5,温度为40℃。鲜切芦蒿PPO对60℃以下的温度不敏感,而在80℃以上温度下很易失活。鲜切芦蒿PPO
对酚底物的亲和力依次为:绿原酸、愈创木酚>焦性没食子酸苯酚>酪氨酸>儿茶酚>间苯二酚>苯酚,且与儿
茶酚结合时出现最大活力。抑制鲜切芦蒿PPO活力以焦亚硫酸钠效果最好,当其浓度达到0.33mmol/L(即0.06%)时
能使PPO完全失活;亚硫酸氢钠和L-Cys的抑制效果也十分强;而EDTA-2Na浓度达3.0mmol/L对鲜切芦蒿PPO的
抑制也仅为29.55%,作用很微弱;植酸、AA、醋酸锌、CA和4-HR的抑制作用介于L-Cys和EDTA-2Na之间。
关键词:鲜切;芦蒿;PPO(多酚氧化酶);特性
收稿日期:2005-09-09
基金项目:江苏省科技攻关项目(BE2002339);南京市03年科技计划项目“蔬菜速冻保鲜加工技术研究”
作者简介:郁志芳(1960-),男,副教授,研究方向为果蔬采后生物学和贮藏加工。
大 肠 杆 菌
金 黄 色 葡 萄 球 菌1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
10 20 30 40 50 60
M
I
C
(
%
)
时间(min)
肠杆菌
黄色葡萄球菌
图2 紫外照射对提取物抑菌效力的影响
Fig.2 Effect of ultraviolet radiation on antimicrobials activity
of ESTL