全 文 :成都中医药大学学报
Journal of Chengdu University of TCM
2015 年 6 月第 38 卷第 2 期
June. 2015,Vol. 38,No. 2
民族药蔓菁膏对小鼠性功能的影响研究
梁未雯 万波 王张 李博 王宇 白成阳 王杰 刘劲松 宋文杰
(成都中医药大学 民族医药学院,四川 成都 611137)
摘 要:目的:初步研究蔓菁膏对小鼠性功能的影响。方法:蔓菁膏按低、中、高剂量给雄性小鼠灌
胃 30 d,灌胃结束后开展雄鼠与雌鼠的交配和合笼实验,观察并记录雄鼠捕捉雌鼠的潜伏期、捕捉次数、
射精潜伏期、射精次数,以及雌鼠观察到阴栓的天数、阴栓出现率。结果:蔓菁膏 3 个剂量均能增加雄鼠
对雌鼠的捕捉率、平均捕捉次数、射精率,缩短“平均捕捉潜伏期”和“射精潜伏期”;其中,中剂量增
加捕捉率的作用最强,高剂量增加射精率的作用最强。但是在停止给药后 12 d 内,蔓菁膏 3 个剂量均能
降低雌鼠与雄鼠合笼后的阴栓率,其中以高剂量组最明显,中剂量次之,低剂量再次。还能促进雄鼠体重
的增长。结论:蔓菁膏连续给予 30 d能增强雄鼠对雌鼠的捕捉、射精行为,但是停止给予后 12 d 内可能
减少雄鼠与雌鼠合笼后的交配行为。
关键词:蔓菁膏;小鼠;交配实验;捕捉率;射精率;合笼;阴栓率
中图分类号:R289. 5R256. 59 文献标识码:A 文章编号:1004-0668 (2015)02-0030-04
DOI编码:10. 13593 / j. cnki. 51-1501 / r. 2015. 02. 030
基金项目:四川省食品药品监督管理局科研课题 (编号:301-377);四川省中医药管理局科技专项 (编号:2012-G-029);
成都中医药大学科技发展基金 (编号:CGZH201201)
作者简介:梁未雯,女,1989 年生;在读硕士研究生;研究方向:民族药的药理学;E-mail:815524763@ qq. com。
通讯作者:王张,男,1980 年生;博士后,副研究员,硕士研究生导师;研究方向:民族药的药理学;E-mail:wzcqcd@
163. com。
Effect of Brassicae Radix Creamon on Sexual Function in Mice
LIANG Wei-wen,WANG Bo,WANG Zhang,et al
(College of Ethnomedicine,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,China)
[Abstract] Objective:To preliminary study the effect of Brassicae Radix Creamon on sexual function in mice. Methods:Bras-
sicae Radix Creamon at low,medium and high doses were administered,qd for 30 days,in male mice. Carry out mating test and Hop
cage experiment on male and female after gavage. Data were collected and analyzed,including capture latency period,times of cap-
ture,sexual endurance and times of ejaculation. Female rats were observed of vaginal plugs for a few days,and the occurrence rate of
vaginal plugs. Results:Three doses of Brassicae Radix Creamon could increase the capture rate of males for females,the average
number of capture,and the ejaculation rate. And,it was proved to be effective in shorting the“average incubation period to capture”
and“ejaculatory latency”;Wherein,medium doses had the strongest effect to increase the capture rate. High dose had the strongest
effect to increase ejaculation. However,Brassicae Radix Creamon of three doses could reduce vaginal suppository rate when females and
males caged together,after stopping administration in 12 days. The most significant lower was high-dose group,middle dose followed
by low-dose again. And,it could promote the weight growth of males. Conclusion:Brassicae Radix Creamon at three doses could en-
hance the capture and ejaculation behavior of male for females,once per day for 30 days. Howeren,it might reduce the mating behav-
ior after male and female caged in 12 days,when stopped giving the drugs.
[Key Words]:Brassicae Radix Creamon;mice;mating experiments;capture rate;ejaculation rate;caged together;vaginal
suppository rate
·03·
第 2 期 梁未雯 等 民族药蔓菁膏对小鼠性功能的影响研究
蔓菁为十字花科植物芜菁 Brassica rapa L. 的
块根,常制备成蔓菁膏使用。藏族、维吾尔族、普
米族有药用历史[1],如藏药名为妞玛、熊麻,制
成蔓菁膏,治“龙”病、 “培根”病和中毒病等。
维吾尔药名为查木古尔、恰玛古尔,治体虚阳痿,
营养不良,肺燥咳嗽等。本文研究民族药蔓菁对小
鼠性功能的影响,以期为蔓菁治体虚阳痿提供现代
科学依据。
1 材料与方法
1. 1 实验动物
KM种小鼠,SPF级,体重 20 g ± 2 g,雄性 70
只 (批号:№ 0016862),雌性 210 只 (批号:№
0014745),由成都达硕生物科技有限公司提供,
生产许可证号:SCXK (川)2013-24。
1. 2 药品
蔓菁样品采自四川省松潘县红土乡,经成都中
医药大学张艺研究员鉴定为十字花科植物芜菁
Brassica rapa L. 的块根。将其切片后,于 60℃烘
干,加 10 倍量水,煎煮 4 次,1 h /次,其中第一
次加水后浸泡 1 h,合并提取液,滤过,浓缩,即
得蔓菁膏[2-3]。枸橼酸西地那非片,成都精勤卓越
药物开发有限公司生产,使用前用生理盐水配成混
悬液备用。甲睾酮片,天津力生制药股份有限公司
生产。金匮肾气丸,北京同仁堂科技发展股份有限
公司制药厂出品。
1. 3 仪器
电子天平 BP-121S,电子称 BS-600L,温湿度
计 WS-2080B。
1. 4 实验方法
1. 4. 1 雄鼠分组和给药
将 73 只雄性动物按照体重随机分为 7 组,分
别为空白对照组、西地那非对照组、甲睾酮对照
组、金匮肾气丸对照组、蔓菁膏低剂量组、蔓菁膏
中剂量组和蔓菁膏高剂量组;每组 10 ~ 11 只动物。
除西地那非对照组动物于观察 “交配情况”前 2 d
给药外,其余组别的动物均连续灌胃给药 30 d,1
次 /d,药物组给予相应剂量的药物溶液,空白对照
组给予生理盐水,给药体积均为 20 mL /kg (体重)
·d。每周根据体重调整具体的给药体积。
1. 4. 2 交配实验
取雌鼠,按照体重随机分组,每组 3 只,放入
一个小鼠笼里面。雄鼠末次给药后 30 min,取未孕
雌鼠,按雄:雌 = 1∶ 3 的比例合笼,置于暗室下观
察,并记录以下指标:① 捕捉率:30 min内“同一
组别中所有雌鼠”被雄鼠捕捉的比率。② 捕捉次
数:30min内雄鼠捕捉 “所有 3 只雌鼠”的次数。
③ 捕捉潜伏期:自雌鼠投入至雄鼠第 1 次捕捉“任
何一只雌鼠”的时间;30 min 内仍未捕捉者, “捕
捉潜伏期”以 30 min计。④射精率:30 min内“同
一组别中所有雌鼠”被雄鼠射精的比率。⑤ 射精
次数:30 min (或 20 min)内雄鼠的“所有射精次
数”。⑥ 射精潜伏期:自雌鼠进入笼中至雄鼠第 1
次射精时间;30 min 内仍未射精者, “射精潜伏
期”以 30 min计[4-6]。
1. 4. 3 雌鼠阴栓观察
①合笼:观察阴栓期间,每晚将 1 只雄鼠与其
交配的 3 只雌鼠合笼,第 2 d清晨满 12 h后将雄鼠
取出饲养。期间,雄性动物不给药。②观察阴栓方
法:捉拿雌鼠,暴露阴部,用棉签沾取适量的生理
盐水,反复搽拭雌鼠阴道口使之扩张,观察阴道部
位。如果有交配行为,就会在雌鼠阴道口留下白色
的雄鼠精液,一般动物在半夜交配,早上检查时精
液结固,“呈白色或黄色小球状”阻塞在阴道口,
即是阴栓。③观察指标:阴栓观察期间,观察到阴
栓的雌鼠当即处死,并记录 “观察到阴栓时间”
(d)。如果雄鼠交配的 3 只雌鼠均观察到阴栓,随
即将雄鼠与雌鼠全部处死。12 d 仍未出现阴栓者,
“观察到阴栓时间”以 12 d 计。计算 12 d 内 “同
一组别中所有雌鼠”出现阴栓的比率 (%)。
1. 4. 4 统计方法
实验中计量资料的数据一般以 “平均值 ±标
准差 (珋x ± s)”表示。组间差异的显著性检验运用
SPSS 17. 0 for windows软件提供的独立样本 T检验。
用 Levene 检验进行方差齐性检验;计数数据采用
非参数检验中的两个独立样本检验,应用 Mann-
Whitney 检验方法进行组间的差异性比较。
2 结果
2. 1 雄鼠捕捉雌鼠情况
在 30 min内,空白对照组雄鼠对雌鼠的捕捉
率为 55. 56%、平均捕捉次数为 2. 22 次、“平均捕
捉潜伏期”为 1205. 81s (20. 10 min)。西地那非
片能十分明显地增加雄鼠对雌鼠的捕捉率,有增加
平均捕捉次数和缩短“平均捕捉潜伏期”的趋势。
甲睾酮片能十分明显地减少雄鼠对雌鼠的捕捉率、
延长“平均捕捉潜伏期”,有减少平均捕捉次数的
趋势。金匮肾气丸能十分明显地增加雄鼠对雌鼠的
捕捉率,有增加平均捕捉次数和缩短 “平均捕捉
潜伏期”的趋势。蔓菁膏低、中剂量能十分明显
地增加雄鼠对雌鼠的捕捉率、增加平均捕捉次数、
缩短“平均捕捉潜伏期”,其中以中剂量的作用最
·13·
成都中医药大学学报 2015 年第 38 卷
明显,低剂量次之,而高剂量没有明显的作用
(见表 1)。
2. 2 雄鼠射精情况
在 30 min内,空白对照组雄鼠对雌鼠的射精率
为 0、射精次数为 0 次、射精捉潜伏期大于1800 s
(30 min)。西地那非片能十分明显地增加雄鼠对雌
鼠的射精率,有增加射精次数和缩短射精潜伏期的
趋势。甲睾酮片组雄鼠对雌鼠的射精率为 0、射精
次数为 0 次、射精捉潜伏期大于 1800 s (30 min)。
金匮肾气丸能十分明显地增加雄鼠对雌鼠的射精
率,有增加射精次数和缩短射精潜伏期的趋势。蔓
菁膏低、中、高剂量均能十分明显地增加雄鼠对雌
鼠的射精率、缩短射精潜伏期,有增加射精次数的
趋势,其中以高剂量的作用最明显,低剂量次之,
中剂量作用再次 (见表 1)。
2. 3 雌鼠阴栓情况
在 12 d的观察期间,空白对照组雌鼠与雄鼠
合笼后的阴栓率为 69. 57%, “平均观察到阴栓天
数”为 5. 25 d。西地那非片能十分明显地降低雌
鼠与雄鼠合笼后的阴栓率,有延长 “平均观察到
阴栓天数”的趋势。甲睾酮片能十分明显地降低
雌鼠与雄鼠合笼后的阴栓率、明显延长 “平均观
察到阴栓天数”。金匮肾气丸能十分明显地升高雌
鼠与雄鼠合笼后的阴栓率,且有缩短 “平均观察
到阴栓天数”的趋势。蔓菁膏低、中、高剂量均
能十分明显地降低雌鼠与雄鼠合笼后的阴栓率,其
中以高剂量组最明显,中剂量次之,低剂量再次。
还均有延长“平均观察到阴栓天数”的趋势 (见
表 1)。
表 1 蔓菁膏对小鼠性功能的影响
组别
剂量
(mg /kg
(体重)·d)
雄鼠
数 (只)
捕捉潜伏期 (s) 捕捉次数
(次)
捕捉率
射精潜
伏期 (s)
射精次
数 (次)
射精率
观察到阴栓
时间 (d) 阴栓率
空白
对照组
——— 9 1205. 81 ± 635. 62
(n =27) 2. 22 ± 3. 07 55. 56%
1800. 00 ± 0. 00
(n =27) 0. 00 ± 0. 00 0
5. 25 ± 3. 35
(n =23) 69. 57%
西地那非
对照组
8. 3333 10 999. 97 ± 654. 96
(n =30) 5. 00 ± 4. 45 70. 00%
** 1687. 53 ± 363. 38
(n =30) 0. 60 ± 1. 07 10. 00%
** 5. 42 ± 3. 16
(n =27) 66. 67%
**
甲睾酮
对照组
1. 6667 9 1573. 81 ± 476. 70*
(n =27) 1. 22 ± 2. 99 14. 81%
** 1800. 00 ± 0. 00
(n =27) 0. 00 ± 0. 00 0
8. 28 ± 3. 62*
(n =16) 18. 75%
**
金匮肾气
丸对照组
1667 10 928. 63 ± 745. 58
(n =30) 6. 00 ± 7. 16 60. 00%
** 1787. 63 ± 67. 74
(n =30) 0. 10 ± 0. 32 3. 33%
** 4. 40 ± 3. 03
(n =30) 73. 33%
**
蔓菁膏
低剂量组
225 11 1003. 00 ± 729. 03
(n =33) 6. 18 ± 6. 85 57. 58%
** 1673. 42 ± 416. 40
(n =33) 0. 55 ± 1. 81 6. 06%
** 6. 37 ± 3. 33
(n =30) 50. 00%
**
蔓菁膏
中剂量组
450 10 863. 57 ± 544. 36*
(n =30) 6. 70 ± 4. 97* 80. 00%
** 1788. 23 ± 64. 45
(n =30) 0. 20 ± 0. 42 3. 33%
** 5. 47 ± 3. 88
(n =24) 45. 83%
**
蔓菁膏
高剂量组
900 9 1182. 22 ± 624. 38
(n =27) 4. 67 ± 6. 78 51. 85%
1681. 85 ± 293. 12*
(n =27) 0. 44 ± 0. 88 14. 81%
** 6. 50 ± 3. 43
(n =20) 40. 00%
**
注:与空白对照组比较,* 表示 P <0. 05,**表示 P <0. 01
2. 4 体重
各组动物的体重在 30 d给药期间均自然增长,
未见肉眼可见的其他不良反应。给药第 1 d 时,与
空白对照组比较,蔓菁膏低、高剂量组雄鼠的体重
明显降低 (P < 0. 01),可能是因为动物在分组时
不均匀所致,与药物无关。与空白对照组比较,在
给药第 8 d ~ 19 d期间,甲睾酮对照组雄鼠的体重
均十分明显地增加 (P < 0. 05 或 P < 0. 01),其后
给药第 20 d ~ 30 d 期间,没有明显差异。与空白
对照组比较,在给药第 4 d ~ 15 d 期间和第 27 d
时,金匮肾气丸对照组雄鼠的体重均十分明显地增
加 (P < 0. 05 或 P < 0. 01),其后给药第 16 d ~
30 d期间,没有明显差异。与空白对照组比较,在
给药第 3 d ~ 16 d 期间和第 27 d 时,蔓菁膏低、
中、高剂量对照组雄鼠的体重均十分明显地增加
(P < 0. 05 或 P < 0. 01),其后给药第 17 d ~ 30 d期
间,没有明显差异。结果表明,蔓菁膏低、中、高
剂量连续给药 30 d,能明显促进雄性动物体重的增
长 (见表 2 和表 3)。
·23·
第 2 期 梁未雯 等 民族药蔓菁膏对小鼠性功能的影响研究
表 2 蔓菁膏对雄性小鼠体重的影响 (g,珋x ± s)
组 别
剂量
(mg /kg
(体重)·d)
动物数
(只)
第 1 d 第 2 d 第 3 d 第 4 d 第 5 d 第 6 d 第 7 d 第 8 d 第 9 d 第 10 d 第 11 d
空白
对照组
——— 10 22. 04 ± 1. 98 22. 79 ± 2. 07 21. 22 ± 1. 73 21. 38 ± 2. 23 21. 81 ± 2. 75 21. 91 ± 2. 81 21. 88 ± 2. 70 26. 76 ± 1. 98 29. 37 ± 2. 25 29. 98 ± 2. 71 31. 17 ± 2. 33
西地那非
对照组
8. 3333 10 ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— ———
甲睾酮
对照组
1. 6667 10 ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— 31. 37 ± 3. 35
**
34. 80 ± 3. 88
**
34. 15 ± 3. 71
**
34. 26 ± 3. 85
**
金匮肾气
丸对照组
1667 11 22. 70 ± 1. 87 20. 81 ± 1. 7* 21. 02 ± 2. 09
25. 24 ± 1. 69
**
28. 19 ± 1. 88
**
28. 19 ± 1. 88
**
31. 13 ± 1. 74
**
33. 88 ± 2. 09
**
36. 29 ± 2. 34
**
34. 95 ± 2. 35
**
35. 08 ± 2. 37
**
蔓菁膏
低剂量组
225 11 19. 95 ± 1. 50
**
22. 82 ± 2. 00 25. 35 ± 2. 29
**
22. 92 ± 1. 65 25. 80 ± 1. 78
**
25. 90 ± 1. 75
**
29. 62 ± 1. 95
**
32. 88 ± 2. 28
**
34. 97 ± 2. 30
**
34. 35 ± 2. 38
**
34. 23 ± 2. 01
**
蔓菁膏
中剂量组
450 11 22. 06 ± 1. 67 22. 91 ± 2. 08 26. 19 ± 2. 26
**
25. 45 ± 1. 86
**
25. 04 ± 2. 87
**
25. 04 ± 2. 87
**
29. 78 ± 1. 79
**
33. 08 ± 2. 05
**
36. 00 ± 1. 72
**
34. 69 ± 1. 71
**
36. 06 ± 1. 8
**
蔓菁膏
高剂量组
900 10 19. 47 ± 1. 65
**
22. 08 ± 22. 08 20. 59 ± 1. 75 24. 49 ± 2. 12
**
27. 05 ± 2. 41
**
27. 05 ± 2. 41
**
29. 32 ± 3. 04
**
31. 79 ± 3. 15
**
33. 59 ± 2. 37
**
33. 45 ± 2. 50
**
34. 35 ± 2. 33
**
注:与空白对照组比较,* 表示 P < 0. 05,**表示 P < 0. 01
表 3 蔓菁膏对雄性小鼠体重的影响 (g,珋x ± s)
组 别
剂量
(mg /kg
(体重)·d)
动物数
(只)
第 12 d 第 15 d 第 16 d 第 19 d 第 20 d 第 22 d 第 24 d 第 27 d 第 29 d 末次给药
空白
对照组
——— 10 32. 44 ± 2. 78 37. 52 ± 2. 65 37. 65 ± 2. 77 39. 62 ± 2. 85 41. 84 ± 3. 06 41. 93 ± 3. 21 42. 75 ± 3. 75 40. 52 ± 5. 01 42. 02 ± 4. 37 40. 38 ± 3. 65
(n = 9)
西地那非
对照组
8. 3333 10 ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— ——— 43. 74 ± 5. 14 41. 78 ± 6. 06
甲睾酮
对照组
1. 6667 10 37. 52 ± 4. 03
**
——— 41. 70 ± 4. 63
**
44. 54 ± 5. 01
* 43. 21 ± 4. 77 44. 58 ± 5. 24 41. 66 ± 5. 84
40. 79 ± 5. 42
(n = 9)
40. 67 ± 4. 78
(n = 9)
39. 78 ± 4. 44
(n = 9)
金匮肾气
丸对照组
1667 11 36. 02 ± 2. 81
**
40. 11 ± 2. 96
(n = 10)*
40. 23 ± 3. 22
(n = 10)
41. 05 ± 3. 85
(n = 10)
41. 93 ± 4. 00
(n = 10)
40. 18 ± 3. 58
(n = 10)
42. 61 ± 3. 19
(n = 10)
44. 67 ± 3. 44
(n = 10)*
44. 65 ± 3. 56
(n = 10)
45. 14 ± 4. 48
(n = 10)
蔓菁膏
低剂量组
225 11 36. 50 ± 2. 20
**
39. 85 ± 2. 63
* 39. 20 ± 2. 44 41. 99 ± 2. 69 42. 14 ± 2. 58 41. 92 ± 2. 46 42. 42 ± 2. 26 41. 69 ± 3. 22 41. 93 ± 2. 90 42. 18 ± 4. 17
蔓菁膏
中剂量组
450 11 36. 30 ± 2. 56
**
40. 31 ± 2. 17
(n = 10)*
40. 32 ± 2. 62
(n = 10)
40. 69 ± 2. 78
(n = 10)
42. 62 ± 2. 61
(n = 10)
42. 03 ± 1. 94
(n = 10)
42. 97 ± 2. 07
(n = 10)
43. 86 ± 2. 52
(n = 10)
44. 93 ± 2. 33
(n = 10)
45. 20 ± 3. 70
(n = 10)
蔓菁膏
高剂量组
900 10 36. 57 ± 2. 81
**
40. 19 ± 2. 69
*
40. 50 ± 2. 53
* 42. 40 ± 2. 74 42. 81 ± 2. 87 43. 84 ± 2. 51
44. 83 ± 2. 98
(n = 9)
46. 26 ± 3. 71
(n = 9)**
45. 03 ± 3. 82
(n = 9)
46. 18 ± 4. 42
(n = 9)
注:与空白对照组比较,* 表示 P < 0. 05,**表示 P < 0. 01
3 讨论
蔓菁的块根、种子治体虚阳痿,营养不良,身
瘦体弱,精液稀少,性欲减退;花治肾脏寒虚。连
续给予蔓菁膏 30 d,3 个剂量能增加雄鼠对雌鼠的
捕捉率、平均捕捉次数、射精率,缩短 “平均捕捉
潜伏期”和 “射精潜伏期”;其中,中剂量增加捕
捉率的作用最强,高剂量增加射精率的作用最强。
但是在停止给药后 12 d内,蔓菁膏 3 个剂量均能降
低雌鼠与雄鼠合笼后的阴栓率,其中以高剂量组最
明显,中剂量次之,低剂量再次。另外,蔓菁膏还
能显著增加正常小鼠体重。本研究为蔓菁膏的临床
应用和进一步研究开发,提供了现代科学依据。
在本研究中,西地那非可增加雄鼠对雌鼠的捕
捉率和射精率,但降低合笼后的阴栓率,其作用机
制为:西地那非 (伟哥,万艾可)为磷酸二酯酶
(PDE)V选择性抑制剂,能增强在性刺激下 NO 释
放导致海绵体平滑肌松弛,动脉血流入,阴茎充血、
坚硬、勃起。而甲睾酮几乎没有作用。金匮肾气丸
能增加雄鼠对雌鼠的捕捉率、射精率,且在停止给
药后 12 d内,雌鼠与雄鼠合笼后的阴栓率升高,另
有研究提示金匮肾气丸通过调节雄鼠体内性激素水
平,而使“肾气”的非健康状态得以改善。但蔓菁
膏的作用是否与调节性激素和 NO 有关,还有待进
一步研究。
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(收稿日期:2014-11-13 责任编辑:薛红)
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