全 文 ：竹节参总皂苷对类风湿性关节炎
大鼠的抗炎作用及其机制研究
*
闵 静1，景玉萍1，刘慧明2，黄 琼1
(1．湖北职业技术学院医学院，湖北 孝感 432000;2．孝感市第一人民医院)
摘要:目的 观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷(TSPJ)对类风湿性关节炎大鼠(RA)抗炎效果，并探讨
其抗炎机制。方法 建立 RA大鼠模型后，灌胃给 TSPJ 10d，采用冰醋酸致大鼠腹腔毛细血管通透性增高实验
检测 TSPJ抗炎效果，测定大鼠巨噬细胞碳清除率、血清 IgG、二硝基氟苯诱导的大鼠迟发性超敏反应(DTH)，
研究 TSPJ对类风湿性关节炎模型大鼠抗炎机制。结果与模型组比较，TSPJ能抑制冰醋酸所致 RA大鼠腹腔毛
细血管通透性的增高，TSPJ对 RA大鼠碳清除率无明显影响，能降低 RA大鼠血清 IgG水平，100mg /kg TSPJ对
DTH反应有抑制作用。结论 TSPJ对 RA 大鼠有抗炎作用，其机制可能是通过抑制 RA 大鼠血清 IgG 水平及
DTH反应而实现的。
关键词:竹节参总皂苷;类风湿性关节炎;血清免疫球蛋白 G;迟发性超敏反应
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0635(2011)04-0280-03
Stduy on Anti-Inflammatory Effect of Total Saponins of Panax
Japonicus in Rheumatoid Arthritis Rats and its Mechanism
MIN Jing，JING Yu-ping，LIU Hui-ming，et al
(Medical School of Hubei Polytechnic Institute，Xiaogan Hubei 432000，China)
ABSTRACT:Objective To study the anti-inflammatory effect and mechanism of total saponins of panax ja-
ponicus in rheumatoid arthritis rats． Methods After the model of rheumatoid arthritis was established，the rats
were administrated with TSPJ (25，50，100mg /kg)for 10 days． The anti-inflammatory effect of TSPJ was observed
by acetic acid-induced abdominal capillary heperpermeability test． The phagocytosis ability of macrophage，serum
IgG level of RA rats，and the delayed type hypersensitivity(DTH)were observed． Results TSPJ could inhibit ace-
tic acid-induced abdominal capillary heperpereability． Compared with model group，TSPJ could decrease serum
IgG content of RA rats，inhibit DTH，but had no effect on phagocytosis ability of RA rat macrophages． Conclusion
TSPJ has anti-inflammatory effect by decreasing serum IgG level and inhibiting DTH of RA rats．
KEY WORDS:Total saponins of Panax japonicus;Rheumatoid arthritis;IgG;Delayed type hypersensitivi-
ty(DTH)
类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是
以对称性多关节炎为主要临床表现的异质性、自
身免疫性疾病。竹节参别名:竹根七、萝卜七、峨
三七(四川) ，以其根茎状如竹节而得名，有滋补强
壮、散瘀止痛、止血、祛痰功能［1］。国内对竹节参
具体成分的系统性研究还很少，我们研究竹节参
总皂苷(total saponins of Panax japonicus，TSPJ)对
RA大鼠的抗炎效果并研究其可能的机制，为利用
竹节参这一宝贵资源提供一定的科学依据。
1 材料与方法
1． 1 仪器与材料
752 分光光度计(上海仪器厂) ，CENTRI-
FUGE TDL-5 型离心机;竹节参为华中科技大学生
082 咸宁学院学报(医学版)2011 年第 25 卷第 4 期〔Journal of Xianning University(Medical Sciences)〕
* 课题项目:湖北职业技术学院立项课题
命科学院天然产物实验室提供，通过标准品检测，
TSPJ净含量 33． 32%;Ⅱ型胶原蛋白(Collagen
Ⅱ)、免疫球蛋白 G(IgG)试剂盒(北京福瑞生物工
程有限公司) ;2，4-二硝基氟苯(DNFB，中国医药
集团上海化学试剂公司) ;甲氨蝶呤(MTX) ，西南
药业股份有限公司，国药准字 H50021768，规格 0．
25g;印度墨汁(欧瑞卡生物技术有限公司) ;冰醋
酸(中国医药上海化学试剂公司) ;葡萄糖及其它
试剂均为分析纯。
1． 2 实验动物
Wistar大鼠为清洁级 8 ～ 12 周龄，体质量 140
～ 160g，雄性，湖北省动物实验中心，合格证号:
SCXK(鄂)2008-2009。
1． 3 方法
1． 3． 1 分组
大鼠随机分为 6 组，每组 10 只，分为空白对
照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、竹节参总皂苷
3 个剂量组共 6 组。除空白对照组外其余均造动
物模型;空白对照组、模型组给等量蒸馏水;MTX
组，MTX 研细末，配混悬液(浓度 0． 35mg /ml)ig
2． 7mg /kg;竹节参总皂苷各组分别 ig 25mg /kg、50
mg /kg、100 mg /kg。大鼠于造模后第 8d 给药，连
续 10d。
1． 3． 2 动物模型制备与检测方法
制备牛源性Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ) ，溶于浓度
为 0． 1mol /L的乙酸中，与弗氏完全佐剂(CFA)乳
化，剃除大鼠背部周围毛，取配置好的乳剂，自鼠
尾根部开始，在脊柱两旁皮下多点注射，每只鼠注
射 0． 5ml，1 周后加强免疫 1 次，注射 0． 1ml /只，建
立大鼠实验性关节炎动物模型［2］。对醋酸所致大
鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响［3］:每组连续
灌胃给药，第 10d给药后 1h，各鼠尾静脉注射 1%
伊文斯蓝生理盐水溶液 0． 1ml /10g，随即腹腔注射
0． 7%冰醋酸溶液 0． 1ml /10g，30min 后脱颈椎处
死，每鼠分别用 5ml生理盐水分数次洗涤腹腔，吸
出洗涤液，合并多次清洗液加生理盐水至 8ml，离
心取上清液，在 752 分光光度计 590nm 处测定吸
光度 A值。碳廓清实验:印度墨汁以生理盐水 10
倍稀释备用，末次给药后 24h，各鼠尾静脉注射墨
汁 0． 1ml /10g体重，注射后第 5min，第 25min 用毛
细吸管分别从眶后静脉丛取血 25μl，溶于 2ml 0．
1%Na2co3 溶液中摇匀，置于 752 分光光度计在
600nm下比色，测光密度(OD值) ，颈椎脱臼致死，
并取肝、脾进行各项指标测定。血清免疫球蛋白
G(IgG)检测，末次给药 1h，摘眼球取血，采用放射
免疫(RIA)法检测 IgG。2，4-二硝基氟苯(DNFB)
诱导迟发性变态反应(DTH)［4］药后第 8d 每鼠腹
部剪毛(3cm×3cm) ，均匀涂抹 1% DNFB50μl 致
敏，药后第 5d 再用 1% DNFB 10μl 攻击右耳，24h
后处死动物，用孔器取下直径 8mm 的耳片，称重，
以左右耳的重量之差(肿胀度)来表示 DTH 的程
度。肿胀度=右耳片重量－左耳片重量。
1． 4 统计学处理
数据均以 珋x±s表示，应用 SPSS17． 0 统计软件
包进行分析。
2 结 果
2． 1 TSPJ对 RA 大鼠冰醋酸所致大鼠腹腔毛细
血管通透性增高的影响
与模型组相比，TSPJ 3 个剂量均能抑制冰醋
酸所致 RA 大鼠腹腔毛细血管通透性的增高，作
用强度与剂量呈正相关，见表 1。
表 1 TSPJ 对冰醋酸所致 RA大鼠腹腔毛细血管
通透性增高的影响 (n=6，珋x±s)
组别 Dose(mg /kg)尤文斯兰(mg /ml)Inhibition(%)
空白组 - 4． 77±0． 16 -
模型组 - 6． 19±0． 36* -
MTX组 2． 7 2． 88±0． 34△△ 60． 48
TSPJ组 25． 0 5． 18±0． 34△ 16． 98
50． 0 5． 02±0． 51△△ 32． 70
100． 0 4． 89±0． 83△△ 48． 64
与空白对照组比较，* P＜0． 01;与模型组比较，△P＜
0． 05、△△P＜0． 01
2． 2 TSPJ对 RA 大鼠巨噬细胞吞噬碳粒的影响
(碳廓清试验)
TSPJ 3 个剂量组的 K和 a值与单纯模型组比
较无明显差异，对 RA 大鼠巨噬细胞吞噬功能无
明显影响，见表 2。
表 2 TSPJ对 RA大鼠巨噬细胞吞噬
碳粒的影响 (n=6，珋x±s)
组别 Dose(mg /kg) K a
空白组 - 0． 33±0． 13 4． 66±0． 21
模型组 - 0． 52±0． 10＊＊ 5． 27±0． 74*
MTX组 2． 7 0． 31±0． 01△△ 4． 85±0． 35△
TSPJ组 25． 0 0． 49±0． 03 5． 18±0． 61
50． 0 0． 45±0． 10 5． 12±1． 01
100． 0 0． 44±0． 13 4． 95±0． 72
与空白对照组比较，* P＜0． 05、＊＊P＜0． 01;与模型
组比较，△P＜0． 05、△△P＜0． 01
182咸宁学院学报(医学版)2011 年第 25 卷第 4 期〔Journal of Xianning University(Medical Sciences)〕
2． 3 TSPJ对 RA大鼠血清 IgG水平影响
与模型组比较，TSPJ 3 个剂量组能明显抑制
RA大鼠血清 IgG 水平，尤其 100mg /kg 组非常明
显，见表 3。
表 3 TSPJ对 RA大鼠血清 IgG水平的影响
(n=6，珋x±s)
组别 Dose (mg /kg) lgG(ng /kg)
空白组 - 1． 40±0． 04
模型组 - 2． 12±0． 02*
MTX组 2． 7 1． 62±0． 05△△
TSPJ组 25 1． 85±0． 08△
50 1． 75±0． 01△
100 1． 67±0． 05△△
与空白对照组比较，* P＜0． 01;与模型组比较，△P＜
0． 05、△△P＜0． 01
2． 4 TSPJ对 RA大鼠 DTH影响
与模型组比较，TSPJ 25mg /kg 组、50mg /kg 组
不明显，TSPJ 100mg /kg组使 RA 大鼠耳肿胀度明
显下降，见表 4。
表 4 TSPJ对 DNFB诱导 RA大鼠迟发性
超敏反应的影响 (n=6，珋x±s)
组别 Dose(mg /kg) 左耳重(mg) 肿胀度(mg)
空白组 - 24． 73±1． 05 1． 15±0． 49
模型组 - 25． 45±1． 18 2． 20±0． 86*
MTX组 2． 7 24． 72±0． 77 1． 73±0． 21△
TSPJ组 25 23． 97±0． 76 2． 19±0． 14
50 24． 46±0． 84 2． 17±0． 33
100 24． 43±0． 98 1． 78±0． 23△
与空白对照组比较，* P＜0． 01;与模型组比较，△P＜
0． 05
3 讨 论
RA是以对称性多关节炎为主要临床表现的
自身免疫性疾病［5］。竹节参的主要活性成分为竹
节参皂苷，其结构与人参皂苷相似，具有人参样、
三七样药理作用，因而应用于治疗风湿性关节炎、
类风湿性关节炎和损伤性关节疾病，尤其是类风
湿性关节炎［6］。实验中与模型组相比，TSPJ 3 个
剂量均能抑制冰醋酸所致大鼠腹腔毛细血管通透
性的增高，作用强度与剂量呈正相关，说明其具有
一定抗炎效果。
如同文献所报道，采用异种 CⅡ与弗氏完全
佐剂成功制备的类风湿关节炎模型，可以用于类
风湿性关节炎(RA)炎性吸收破坏机理及治疗方
面的研究［2］。CⅡ能引起关节炎，导致类风湿关节
炎的免疫功能变化，能增加发病率，且明显促进临
床症状，并提高抗体的应答。实验中单纯模型组
大鼠血液中 lgG抗体水平增高，DNFB 诱导大鼠迟
发性超敏反应增强，这说明 RA 免疫反应增强。
造模后使用竹节参总皂苷的碳廓清试验与模型组
比较无明显差异(P＞0． 05) ，对非特异性免疫意义
不大;造模后使用竹节参总皂苷使大鼠血清 IgG
水平下降，对 DTH 有抑制作用，与单纯模型组比
较有明显差异(P＜0． 05) ，提示该药物作用机理与
免疫抑制有关。
总之，竹节参总皂苷具有抗炎作用，其使 RA
动物血清 IgG 水平下降，对 DTH 有抑制作用，是
该药抗炎、抗风湿作用的重要机理之一。
参考文献:
［1］左锐、袁丁． 竹节参化学成分和药理活性研究进展
［J］．时针国医国药，2005，16(9):838
［2］张国恩，杨德华，钱玉中，等． 痹康饮合剂治疗大鼠胶
原性关节炎的实验研究［J］．中成药，2006，28(5):690
［3］陈奇修．中药药理实验方法学［M］．北京:人民卫生出
版社，1993:317
［4］徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［M］．第 3 版．
北京:人民卫生出版社，2002:1420
［5］陆再英，钟南山，主编．内科学［M］．第 7 版．北京:人民
卫生出版社，2008:777
［6］王承德，姜泉，冯兴华，等． 竹节参总皂苷治疗风湿病
寒湿痹阻证临床研究［J］． 中国中医急症，2008，17
(2):678
(收稿日期:2011-02-20)
282 咸宁学院学报(医学版)2011 年第 25 卷第 4 期〔Journal of Xianning University(Medical Sciences)〕