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影响桃叶卫矛叶斑病病菌发生的环境条件



全 文 :Vol. 31 No.3
Sep. 2013
第 31卷 第 3期
2013年 9月
经 济 林 研 究
Nonwood Forest Research
收稿日期:2013-02-15
基金项目:吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(吉教科合字(2011)第 178号)。
作者简介:胡延生(1974—),男,吉林汪清人。农艺师,硕士,主要从事园艺植物教学与科研工作。E-mail:82642444@qq.com。
桃叶卫矛 Euonymus bungeanus Maxim是卫矛
科 Celastraceae卫矛属 Euonymus植物,又名白杜、
丝棉木、明开夜合等,落叶小乔木,高可达 8 m,
叶长一般为 5~ 10 cm,呈椭圆形或椭圆状披针形,
叶柄细长,长为 2.0~ 3.5 cm,类似桃树叶片,因
此称其为桃叶卫矛。该树为温带树种,产于我国
东北(小兴安岭以南)、华北、华中、华东等地区,
自然生长于路旁、山坡林缘等地,由于其果实成
熟后果瓣开裂,露出种子,种子红色,假种皮橘
红色,非常美丽可观,另外可宿存树上 1~ 2 个
月,观赏期长,是园林建设中重要的秋季观果树
种 [1]。2012年在对吉林市园林绿化树木种类进行调
查时发现了桃叶卫矛叶片起斑点的现象,该叶斑病
影响了观赏效果及其正常生长,经鉴定并确认其病
原为叶点霉 Phyllosticta chlorospora McAlp.[2-4]。叶点
霉在瓜果、蔬菜类植物中比较常见,但在观赏树
木中发生的报道比较少见,是吉林市园林绿化树
的新病害,以前未曾发现 [5]。影响植物病原真菌
生长的主要因素为环境因子,而环境因子中的温
度、pH值和光照条件起主要作用 [6]。笔者通过探
讨不同温度、pH值和光照条件对桃叶卫矛叶斑病
的影响,以进一步了解桃叶卫矛叶斑病病菌的发
生规律,为防控该种病菌奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
菌种来源:病叶采集于吉林农业科技学院校
内,在实验室进行了菌种的分离与提纯,在无菌
影响桃叶卫矛叶斑病病菌发生的环境条件
胡延生
(吉林农业科技学院,吉林 吉林 132101)
摘 要:为了掌握桃叶卫矛叶斑病病菌的发生规律以防控该种病菌的发展,采用菌种组织分离、单孢子分离等
方法,就温度、pH值及光照等环境条件对桃叶卫矛叶斑病病菌菌丝、病原孢子生长的影响问题开展了试验。结
果表明:桃叶卫矛叶斑病病菌菌丝生长的最适温度为 30 ℃,菌丝适宜在偏碱性 (pH在 7~ 10间 )条件下生长,
其生长的最适光照条件是全光照;桃叶卫矛叶斑病病原孢子萌发的最适宜环境条件为,温度 25~ 35 ℃、pH值
4~ 7、光照条件为全光照。
关键词:叶点霉;光照;pH; 温度; 菌丝; 孢子
中图分类号:S685.99;S436.8 文献标志码:A 文章编号:1003—8981(2013)03—0133—03
Environmental factors infl uencing Phyllosticta chlorospora occurence
in Euonymus bungeanus
HU Yan-sheng
(Jilin Agricultural Science and Technology University, Jilin 132101, Jilin, China)
Abstract: In order to grasp the occurrence law of Phyllosticta chlorospora in leaves of Euonymus bungeanus and control
the bacteria development, effects of temperature, pH value and light on mycelium growth and spore germination in P.
chlorospora were researched by adopting the methods of strain tissue separation, single spore separation and so on. The
results show that the most suitable conditions for mycelium growth are full sunlight, alkaline (pH value 7-10) and 30 ℃ ,
and the most suitable conditions for spore germination are full sunlight, pH value 4-7 and 25-35 ℃ .
Key words: Phyllosticta chlorospora; light; pH; temperature; mycelium; spore
DOI:10.14067/j.cnki.1003-8981.2013.03.006
134 第 3期胡延生:影响桃叶卫矛叶斑病病菌发生的环境条件
操作条件下,实施了组织分离和单孢子分离,纯
化菌种后低温无菌保存以备用。
供试材料:桃叶卫矛叶斑病病菌、葡萄糖等,
由本校实验室提供。
PDA培养基的主要成分为马铃薯 200 g、葡萄糖
20 g、琼脂 15~ 20 g、自来水 1 000 mL培养基 pH
值为自然 pH值。
1.2 试验方法
1.2.1 不同温度、pH值和光照条件对菌丝生长的
影响
在无菌条件下,用打孔器取直径为 5 mm的病
菌菌饼接种到 PDA培养上,设置温度分别为 5、
10、15、20、25、30、35 ℃共 7 个处理,每处理
重复 5 次,分别置于 7个处理温度下的生化培养
箱(SHP-1500)中黑暗培养 5 d,测量菌落直径。
在无菌条件下,用 1 mol/L 氢氧化钠和 1 mol/L
盐酸在 pH计下调节酸碱度 ,将 PDA培养基质在
50~ 60 ℃水浴条件下调成 pH值分别为 3、4、5、6、
7、8、9、10、11的基质,待培养基凝固后,在无
菌条件下将直径为 5 mm的病菌菌饼接种到 PDA
培养上,设置上述 9个 pH值共 9 个处理,每处理
重复 5 次,培养条件及测量方法同上 [7-8]。
在无菌条件下,将直径为 5 mm的病菌菌饼接
种到 PDA培养上,设置黑暗、光照与黑暗、全光
照 3 个处理,每处理重复 5 次,设在(25±1)℃
的生化培养箱(SHP-1500、GTOP-430D)中分别
在黑暗(24 h)、光照与黑暗(12 h∶ 12 h)交替、
全光照(24 h)条件下进行培养;测量方法同上。
1.2.2 不同温度、pH值和光照条件对孢子萌发的
影响
配制含葡萄糖的溶液:每 1 000 mL溶液中填
加葡萄糖 5.000 g配成孢子悬浮液,置于生化培养
箱(SHP-1500)中进行黑暗培养,设培养温度为
5~ 35 ℃,温度间距为 5 ℃,设置温度分别为 5、
10、15、20、25、30、35 ℃ 共 7 个处理,定时记
录孢子萌发率 ,直至有一组萌发率达到或接近 90%
才结束试验 [9-11]。
配制含葡萄糖的溶液:每 1 000 mL溶液中填
加葡萄糖 5.000 g,用 1 mol/L 氢氧化钠和 1 mol/L
盐酸在 pH计下调节酸碱度 , 配成孢子悬浮液,设
置 pH值分别为 3、4、5、6、7、8、9、10、11共
9个处理,培养条件及测量方法同上 [12]。
配制含葡萄糖的溶液:每 1 000 mL溶液中填加
葡萄糖 5.000 g,配成孢子悬浮液,设置黑暗、光照
与黑暗、全光照 3个处理,设在生化培养箱(SHP-
1500、GTOP-430D)中分别在黑暗(24 h)、光照
与黑暗(12 h∶ 12 h)交替、全光照(24 h)条件
下进行培养;其他培养条件及测量方法同上 [13-14]。
2 结果与分析
2.1 不同温度、PH值、光照条件对菌丝生长的影响
对不同温度、pH值和光照处理中的菌落直径
(D)进行测量,计算各处理的平均直径,然后进
行方差分析,结果见表 1。由表 1可知,30 ℃与
其它温度处理的菌落直径间差异极显著,说明 30 ℃
的温度条件最适宜菌丝生长;不同温度处理的菌落
直径排序为 D30℃> D25℃> D20 ℃> D15 ℃> D10 ℃>
D35 ℃> D5 ℃,由此可见,最适宜菌丝生长的温度为
30 ℃。pH值分别为 10、9、11、8、7的各处理的
菌落直径间差异不显著,说明菌丝在偏碱性条件下
生长相当;pH值分别为 6、5、4、3的各处理的菌
落直径间差异极显著,说明菌丝不宜在偏酸条件下
生长,由此可知,菌丝适宜在 pH为 7~ 10的偏
碱性条件下生长。全光、全暗和半光各条件下菌落
直径之间差异均极显著,各处理的菌落直径排序为
D全光> D半光> D全暗,由此可知,全光条件为最适
表 1 不同温度、pH值、光照条件对菌丝生长的影响†
Table 1 Effects of different temperature, pH value and light condition on mycelium growth
pH值
pH value
菌落直径均值
Average diameter of
bacterial colony /cm
温度
Temperature
/℃
菌落直径均值
Average diameter of
bacterial colony /cm
光照条件
Light condition
菌落直径均值
Average diameter of
bacterial colony /cm
10 8.10 aA 30 8.26 aA 全 光 7.74 aA
9 7.97 aA 25 6.22 bB 半 光 6.84 bB
11 7.83 aAB 20 6.16 bB 全 暗 5.44 cC
8 7.83 aAB 15 3.30 cC - -
7 7.66 aAB 10 2.71 dD - -
6 7.06 bB 35 1.63 eE - -
5 5.13 cC 5 0.80 fF - -
4 3.92 dD - - - -
3 1.93 eE - - - -
† 小写字母不同,表示差异达到显著水平;大写字母不同,表示差异达到极显著水平。表 2与此相同。
Different lowercases mean signifi cant difference, and different capital letters mean very signifi cant difference. The same as below.
135第 31卷 经 济 林 研 究
宜菌丝生长的光照条件。
2.2 不同温度、PH值、光照对孢子萌发的影响
对不同温度、pH值和光照处理后的孢子萌发
率(S)进行统计计算,然后进行方差分析,结果
如表 2所示。由表 2可以看出,孢子萌发率在 30 ℃、
35 ℃、25 ℃之间差异不显著,说明孢子在以上处
理间比较适宜。不同温度条件下孢子萌发率的排
序为:S30 ℃> S35 ℃> S25 ℃> S20 ℃> S10 ℃> S15℃>
S5 ℃,说明最适宜孢子萌发的温度为 25~ 35 ℃;
在 pH值分别为 5和 6时孢子萌发率的差异不显著,
其他 pH值处理间的差异极显著,各 pH值处理后孢
子萌发率的排序为:SpH=6> SpH=5> SpH=4> SpH=7>
SpH=8> SpH=9> SpH=10> SpH=3> SpH=11,说明在 pH
值为 4~ 7之间的偏酸条件下更适宜孢子萌发;
全光处理与全暗处理之间差异极显著,全暗与半
光之间差异不显著,由孢子萌发率排序为 S全光>
S半光> S全暗,说明光照可以提高孢子的萌发率,
最适于孢子萌发的条件是全光照。
3 结论与讨论
试验结果表明,桃叶卫矛叶斑病病菌菌丝适
宜在 pH值为 7~ 10之间的偏碱性条件下生长;
最适宜菌丝生长的温度为 30 ℃;最适宜菌丝生长
的光照条件是全光照。
在 pH值为 4~ 7之间的偏酸条件下则更适宜
于桃叶卫矛叶斑病病原孢子的萌发;最适宜孢子
萌发的温度为 25~ 35 ℃;最适于孢子萌发的条
件是全光照。
本研究探讨了环境因子中温度、pH值、光照
对桃叶卫矛叶斑病病菌的影响,对于不同的碳、
氮源对桃叶卫矛叶斑病病菌的影响在其它文献中
已有记述 [15-16],对于其它因子对该病的影响,有
待于进一步研究,本研究对于桃叶卫矛叶斑病病
菌的发生规律等具有一定的指导意义。
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[本文编校:赵 坤 ]
表 2 不同温度、pH值、光照对孢子萌发的影响
Table 2 Effects of different temperatures, pH values and light conditions on spore germination
pH值
pH value
孢子萌发率
Spore germination rate /%
温度
Temperature /℃
孢子萌发率
Spore germination rate /%
光照条件
Light condition
孢子萌发率
Spore germination rate /%
6 57.61 aA 30 80.59 aA 全 光 72.91 aA
5 52.99 aA 35 78.35 aA 半 光 54.05 bAB
4 24.62 bB 25 76.51 aA 全 暗 46.88 bB
7 19.49 bB 20 29.65 bB - -
8 11.54 cC 10 25.46 bBC - -
9 11.26 cdC 15 17.81 bcBC - -
10 8.00 cdC 5 6.64 cC - -
3 7.93 cdC - - - -
11 6.98 dC - - - -