全 文 ：一 」4 8 0一 药物分析杂志 C h in JPh am rA n a 2 J 06 , 26 ( 10 )
H P C E 法测定卷柏属植物 中 3 种双黄酮类化合物 的含量
戴忠 , 王钢力 , 马双成 , 鲁静 , 林瑞超
(中国药品生物制品检定所 , 北京 10 田〕5 0 )
摘要 目的 : 测定卷柏属植物中 3 种双黄酮类化合物一穗花杉双黄酮 、扁柏双黄酮和银杏双黄酮的含量 。 方法 :采用胶束毛细
管电泳法系统分离双黄酮 。 压力进样 1. 38 x ol , P a , 9 5 ;运行时间 35 im n ; 电压 20 kV (恒压分析 ;) 柱温 25 ℃ ;检测波长 2 80
n m ;运行缓冲液为胆酸钠系统 ( 10 m m o l · L 一 ’硼酸钠 , 15 m m o l · L 一 ’ 磷酸二氢钠 , 4 0 m m o l · x 一 ’ 胆酸钠 ) 一 乙睛 ( 3 : 2 ) , p H =
7
.
0
。 结果 :通过对表面活性剂 、 pH 和有机改进剂的优选确定了最佳缓冲液比例 , 在该系统条件下 , 供试品中的 3 种双黄酮被
很好分离并定量 。 结论 :该方法可以用来控制卷柏属药材的质量 。 方法简便 、 准确 。
关键词 :胶束毛细管电泳 ;双黄酮 ;卷柏属
中图分类号 : gR l7 文献标识码 : A 文章编号 : 025 4 一 1 7 93 ( 20 06 ) 10 一 14 08 一 05
D e t e r m i n a t i o n o f th e 3 b i fl a v o n o id s i n S e l a g i n e l l a e P l a n st
b y m i c e l l a r e l e c t r o ik n e t i c c a P i l l a r y e l e c t r o P h o r e s i s
D A I Z h
o n g
,
WA N G G
a n g 一 11 , M A Sh u a n g 一 e h e n g , L U J in g , L IN R u i 一 e h a o
( N a t i o n a l I
n s t i t u t e fo
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a e e u t i e al an d B i o l o g
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, B e ij i n g 10 0 5 0
,
C h i n a )
A b s t r a c t O bj e e it v e
:
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n e th e e o n t e n t s
o
f t h r e e b i fl a
v o n o id s一 a m e n to fl a v o n e , h i n o k ifl a v o n e a n d g i n k e罗 ti n
i n S e l a g i n e l l a e p l a n t s
.
M e t h o d
: A e a p i l l a叮 e l e e t or p h o r e t i e m e t h o d w a s e s t a b l is h e d a n d a s u i tab l e e l e e t r o ly te w a s s e -
一e e t e d fo r t h e b in a v o n o id 。 , e p a r a t i o n . I nj e e t i o n m o d e : 1 . 3 5 x l o 5 P。 fo r g s : ur n t im 。 : 3 5 m i n ; 。 p p l i e d v o l t a g e : Z o kV
( e
o n s t a n t v o l t a g e ) ; e a rt
r i d g e t e m p e r a t u r e : 2 5 ℃ ; ur n n i n g b u fe r s o lu t io n : s o d i u m e h o l a t e s y s te m ( 10 m m o l · L 一 ’ 5 0 -
d i u m b o r a t e
,
15 m m o l
·
L
一 ’ S o d i u m d ih y d or g e n p h o s p h a t e a n d 4 0 m m o l
·
L
一 ` 、 o d i u m e h o l a te )
一 a e e t o n i tir l e ( 3 : 2 )
,
p H = 7
.
0
.
R e su l st : T h e e o n t e n ts o f t h e t h
r e e b i fl a v o n o id s i n S e l a g i n e l la e p l a n t s e o u ld b e d e t e mr i
n e d w i t h i n 3 5 m i n
.
T h e e fe
e t s o f s u afr
e r a n t e o n e e n t r a ti o n
,
PH v a l u e a n d t } l e p r o p o rt i o n o f o r g a n i e m o d i if e r o n t h e m ig r a t i o n b e h a
v i o r o f
t h e s o l u t i o n w e r e a l s o i n
v e s t i g a te d
.
C o n e l u s i o n : Th e r e s u l ts s h o w e d rh a t t h e m e t h o d e o u l d be u s e d fo r e o n t or l l i n g t h e
q u a l i ty o f S e la g in e l l a e p l a n ts
.
Th e m e t h o d 15 s i m p l e
, a e e u r a t e a n d s e ie n t iif e
.
K e y w o r d s : m i e e l l a
r e l e
e t or k i n e ti e e a p i l l a口 e le e t or P h o r e s i s : b i fl a v o n o i d s ; S e l la g i n e l l a e
卷柏属 的大部分植物作为传统中药使用 ,用于
治疗肝炎 、 胆囊炎 、 肿瘤及慢性肾炎 〔` , , 民间也有用
该属植物治疗慢性气管炎的报道 ,效果 明显 「’ 」。 双
黄酮类化合物是该属植物的主要有效化学成分 。 到
目前为止 ,从该属植物 中分离并鉴定出的双黄酮有
十几种 ,这些双黄酮具有广泛的药理活性 ,如抗肿瘤
细胞的 细胞毒活 性 、 解 痉活性 和抗 流感病毒 活
性 t ’ 一 5〕 。 因此 ,控制该属植物 中双黄酮的含量十分
重要 。 目前 , 分析双黄酮含量的方法主要是 H PL C
法 L6 一 8〕 ,该方法不适合等度洗脱 , 且分离效果不理
想 。 高效毛细管电泳 ( H P C E )作为一种现代分离模
式具有分离柱效高 、进样体积小和分析快速等特点 ,
尤其是胶束毛细管电泳 ( M E C C ) , 它提供了一种独
特的分离模式 ,并且具有分离中性化合物的能力 。 因
此 ,选用 M E C c 法进行双黄酮类成分的分析研究 。
1 仪器与试药
美国 B e e km a n w A e E 5 5 0 0 型 毛细管电泳仪 ,
D AD 检测器 ,弹性石英毛细管柱 ( 80 c m x 75 林m , 有
效长度 70 Cm ,河北永年光导纤维厂 ) 。
胆酸钠 ( B R , 上海科丰化学试剂有限公司 ) 、 十
二烷基磺酸钠 ( S D S , 纯度 ) 9 . 9% , 德国 S en a 公
司 )及去氧胆酸钠 ( B R , 上海科丰化学试剂有 限公
司 )为生化试剂 。 其他如硼砂 、 磷酸二氢钠均为分
析纯 , 乙睛为色谱纯 。 对照 品穗花杉双黄酮 ( a m e nt -
第一作者 T e l : ( 0 10 ) 67 09 5 2 8 2 ; E 一 m a i l : S u n 一 2 3 0 @ 26 3 c o m
DOI : 10. 16155 /j . 0254 -1793. 2006. 10. 004
药物分析杂志 C i hn JP hamr An a l 2 () 06
,
2 6 ( 10 ) 一 14 09 一
o fl a
v o n e )
、扁柏双黄酮 ( h i n o k i fl a v o n e )和银杏双黄酮
( g i n k e g e t i n )为从中华卷柏中分得 , 并经 IR 、 N M R 及
M S 等谱学鉴定 , H P LC 峰面积归一化法测得纯度均
大于 98 . 5% 。 懈皮素 (批号 : 100 81 一 2 0 4 0 6 ) 来
自中国药品生物制品检定所 。 实验供试品均在 7 -
9 月份采 自河北 、 云南 、福建等省 , 并由中国药品生
物制品检定所张继副主任药师鉴定 。 实验中配制缓
冲液和供试品溶液所用的水均 为去离子水 ( iM il -
Q )
。
2 实验条件
进样方式 , 压力进样 1 . 38 x lo , P a , 9 5 ;运行时
间 , 3 5 m i n : 电压 , 2 0 kV (恒压分析 ) : 柱温 2 5 ℃ ;检
测波长 2 80 n m ;运行缓冲液为胆酸钠系统 ( or m m ol
·
L
一 ’ 硼酸钠 , 1 5 m m o l · L 一 ’ 磷酸二氢钠 , 4 0 m m o l ·
L
一 ’ 胆酸钠 ) 一 乙睛 (3 : 2 ) , p H = 7 . 0 。 每次运行前毛
细管用 0 . 1 m m ol · L 一 `氢氧化钠溶液冲洗 2 m in , 去
离子水冲洗 2 m in , 运行缓冲液冲洗 2 m in 。
3 供试品溶液的制备
称取供试品 1 9 ,加 甲醇 50 m L , 以索氏提取器
回流提取 s h ,提取液浓缩至 25 m L 。 取 5 m L 置 10
m L 量瓶中 ,加内标溶液 (0 . 5 m g · m L 一 ’ 的懈皮素甲
醇液 ) 1 m L , 以甲醇稀释至刻度 ,摇匀 , 即得 。 此供
试品溶液过 0 . 45 林m 的微孔滤膜后 注人毛细管电
泳系统 。
4 方法学验证
4
.
1 线性关系 精密称取对照品穗花杉双黄酮 、卷
柏双黄酮和银杏双黄酮适量 , 用甲醇溶解制成上述
3 种成分浓度分别为 0 . 2 0 2 8 , 0 . 16 8 0 , 0 . 13 2 1 m g ·
m L
一 ’ 的混合储备液 。 分别精密吸取储备液 1 , 2 , 4 ,
6
,
s m L 于 10 m L 量瓶中 ,加 o . s o 3 m g · m L 一 ’ 的 内
标溶液 (棚皮素甲醇溶液 ) 0 . 5 m L , 加 甲醇至刻度 ,
摇匀 ,制成系列的对照 品溶液 , 进样测定 , 测量峰面
积值 。 对照品与 内标峰 面积 比值 Y 和各对照品的
浓度 X ( m g · m L 一 ` )之间呈 良好的线性关系 ,线性范
围及回归方程见表 1 。
4
.
2 精密度 精密量取含 0 . 0 4 056 m g · m L 一 `穗花
杉双黄酮 、 0 . 2 0 16 m g · m L 一 ’卷柏双黄酮 、 0 . 0 5 2 8 m g
·
m L
一 ’ 银杏双黄酮 和 0 . 0 5 0 3 m g · m L 一 ` 内标的对
照品混合溶液 ,连续进样 6 次 ,记录峰面积 。 结果表
明 :穗花杉双黄酮 、卷柏双黄酮 、 银杏双黄酮与内标
峰面积比值的 R SD 分别为 4 . 1% , 3 . 2% , 3 . 6% 。
4
.
3 重复性 取中华卷柏供试品 6 份 ,按 “ 3 ” 项下
方法制备供试品溶液 , 在 “ 2 ” 项条件下测定穗花杉
表 1 线性关系
T a b 1 T h e il n e a r co r
e la t io ns
o f t h e b i fl s
v o n io ds
化合物
(
e ` , . l l p o u n d s )
穗花杉双黄酮
( 。 n e n 一o fl o v o n e )
卷柏双黄酮
( h i
n o k沮 a v o n e )
银杏双黄酮
(邵 n ke 罗 it n )
线性方程
( er脚 5 5 e q ll a石o n )
= 4 1
.
7 3 l X 一 0
. 胆 2
线性范围 ( il n e ar
ar n g e ) / m g
·
m L -
0
.
0 20 3 一 0
.
16 22
y
’
= 3
.
s l l X + 5
.
69 3 x l 0 一 j 0
.
0 16 8 一 0
.
13 4
94 8 X
+ 4
.
97 8 x 10 一 3 0
.
0 13 2 一 0
.
10 57
0
.
99 3
0
.
999 6
0
. 酬列) 2
双黄酮 、卷柏双黄酮和银杏双黄酮 的含量 。 供试品
含量的平均值分别为 0 . 9 6 0 % , 0 . 50 % , 0 . 004 % ;
R SD 分别为 4 . 6% , 4 . 0% , 13 . 4 % 。
4
.
4 回收率 取 已知含量的中华卷柏供试品 (穗
花杉双黄酮 0 . 90 % , 卷柏双黄酮 0 . 5 01 % ,银杏双黄
酮 0 . 0 0 35 % ) 5 份 , 每份 0 . 2 9 , 前 3 份分别加含
2
.
2 7 3 m g
·
m L
一 `穗花杉双黄酮和 1 . 9 6 5 m g · m L 一 ’
卷柏双黄酮 的对照品混合溶液 1 m L ,后 2 份分别加
此对照品混合溶液 2 m L 。 按 “ 3 ” 项下方法制备所需
溶液 , 在 “ 2 ” 项条件下测定穗花杉双黄酮 、 卷柏双黄
酮的含量 ,计算回收率 。 穗花杉双黄酮低加人量的
回收率 ( n = 3 )为 9 6 . 3 4 % ( R SD = 0 . 9 2% ) , 高加人
量的回收率 ( n = 2) 为 97 . 34 % (偏差 为 1 . 2 % ) ;卷
柏双黄酮 低 加人量 的 回收率为 101 . 8% ( R SD =
4
.
4 % )
,高加人量的回收率 ( n = 2 )为 9 8 . 5 0% (偏差
为 3 . 4% ) 。 另取该供试品 5 份 ,每份 0 . 5 9 , 前 3 份
分别加浓度为 0 . 8 10 m g · m L 一 ’ 的银杏 双黄酮对照
品溶液 1 m L ;后 2 份分别加此对照品溶液 2 m L 。 按
“
3
” 项下方法制备所需溶液 ,在 “ 2 ” 项条件下测定银
杏双黄酮的含量 , 计算回收率 。 银杏双黄酮低加人
量的回收率 ( n = 3 ) 为 9 9 . 17% ( R s D 为 3 . 3% ) , 高
加人 量 的 回 收率 ( n 二 2) 为 % . 53 % ( 偏 差 为
1
.
9% )
。
4
.
5 稳定性 取供试品溶液 , 按上述电泳条件于
0
,
0
.
5
,
1
,
2
,
4
,
s h 分别进样测定峰面积 ,穗花杉双黄
酮 、卷柏双黄酮和银杏双黄酮峰面积的 R SD 分别为
3
.
7%
,
5
.
1%
,
4
.
7 %
。 结果表明 , 3 个组分的甲醇提
取液在 s h 内稳定 。
5 供试品含量测定
取供试品 1 9 , 按 “ 3 ” 项下方法制备供试品溶
液 ,在 “ 2 ” 项条件下测定 , 以内标法计算穗花杉双黄
酮 、卷柏双黄酮和银杏双黄酮 的含量 。 各供试品的
含量结果见表 2 。
一 1 4 1 0 一 药物分析杂志 C hin J P hram A n al Z《X巧 , 2 6 ( 1 0 )
表 2 卷柏属药材中双黄酮的含最测定结果 ( % , n 二 2)
T a b 2 eR
s ul st o f d e t e n旧 in a U o n b ifl a v o n io ds i n s P ce ies o f s e la ig ne l a e
供试品 ( 、 an l p l e ) 编 ( N o 产地 (卜a b i妞 t ) 穗花杉双黄酮
( am
e n t o l a v o n e )
卷柏双黄酮
( h i
n o k i l a v o n e )
银杏双黄酮
(邵 n k e罗t l n )
圆枝卷柏 5 . 、 几 g山 no 份咖
峨眉卷柏 5 . 0。 比 IL, 。
旱生卷柏 5 . 似公理之。 。么 an
垫状卷柏 s . p曲 io at
907253
勺ú001毛枝卷柏 5 . bar un i
中华卷柏 5 . 旅 en sn七
蔓生卷柏 S . J山 以 i
充州卷柏 s . in 、 俪出
江南卷柏 5 . ~ le
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l 0
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.
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卷柏 s . at ~
深绿卷柏 5 .
门 占 C乙月哎 2
过云祀 de ler 艺in 艺
l 4
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16
I7
河北 ( H e b i e )
贵州 ( G u i z h o u )
河北 ( H e be i )
广东 ( G u a n酬 o n g )
浙江 ( Z hej i a n g )
浙江 ( Zhej ian g )
福建 ( Fuj i a n )
河北 ( H e he i )
河北 ( H e be i )
北京 ( B e i ji n g )
福建 ( F uj i a n )
福建 ( Fuj i a n )
安徽 ( A n h u i )
广东 ( G u a n g d o n g )
福建 ( F u j i a n )
浙江 ( Z heJ ,an g )
福建 ( Fu ji a n )
0
.
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0
. 《 ) 5 7
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.
(阴〕
0
.
130
0
.
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0
.
0 57
0
.
5 9( )
0
.
0 5 8
/
0
.
0 79
0
.
126
0
.
105
0
.
0 73
0
.
115
/
/
注 ( N ol e ) : `’ / ” 表示未检出 ( “ /’ m e二。 un n 一 d el , le’ l)
6 讨论
6
.
1 运行缓冲液的选择 由于双黄酮类化合物具
有强的疏水特性 ,用常规的毛细管电泳法分离 比较
困难 。 所 以 ,选用 M E C C 法进行研究 。 本文比较和
优化了几种分离 系统 , 包括 S D S 系统 、 胆酸钠系统
和去氧胆酸钠 系统 。 在 S D S 系统中 ,试验了不同浓
度的 SD S 及不 同比例的添加 剂 (如硼砂 , 磷酸二氢
钠 , T isr 盐 , 仔一 环糊精等 ) 和有机改进剂 (如 甲醇 、
乙醇 、 正丙醇及乙睛等 ) , p H 6 一 or 。 结果表明 : SD S
系统无法分离强疏水性的双黄酮类化合物 ,几个成
分峰始终叠 加在 一起 ; 在对去 氧胆酸钠 系统 ( 40
m m o l
·
L
一 ’ 去氧胆 酸钠 , 10 m m o l · L 一 ’ 硼 酸 , p H =
8
.
6
,
1 1% 的甲醇 )的实验中发现 ,这一系统对于分
离双黄酮有 一定的改善 。 胆酸钠系统分离效果最
好 。 这可能与胆酸钠胶束的特殊结构有关 , 在水溶
液中 ,常规的 SD S 胶束呈球状 , 而胆酸钠胶束呈螺
旋状 ,此种胶束的疏水部分在胶束的外侧 ,亲水部分
向内翻转巨 。 这种 “ 内翻螺旋 ’ , 结构具有许多色谱
特性 ,除本身具有较强的识别特性外 ,还能承受高浓
度的有机改进剂 ,这个特性对分析疏水性化合物有
着特殊的意义 。 但这一体系受许多因素制约 , 如 p H
不能低于 7 . 0 , 有机改进剂浓度不能过高等 。 参照
有关文献 〔9 , ’ “ 」 ,本实验选择的运行缓冲液为胆酸钠
系统 一 乙睛 。 并对 p H 、表面活性剂胆酸钠的浓度以
及有机改进剂 乙睛的比例进行优化 。
6
.
2 运行缓冲液的优化
6
.
2
.
1 p H 的影响 运行缓冲液的 p H 既可改变溶
质的结构 ,使溶质电离或呈中性状态 ,又可改变 电渗
流的大小 ,所以 , p H 对 C E 分离有较大的影响 , 因此
本文在保持其他条件不变的情况下 ,改变 p H ( p H 用
稀氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节 )以研究 p H 对
分离选择性的影 响 , 见图 1 。 由图可见 , 不同 p H 条
件下 , 各个双黄酮 的迁移时 间有很大变化 , p H 为
7
.
0 时 ,分离最理想 , 当 p H 大于 7 时 ,峰迁移时间加
长 ,峰展宽 。
县。 0
P H
图 1 p H 对迁移时间的影响
F ig 1 E fe
e t o f p H
o n 而笋 t i o n t i m e
1
. 银杏双黄酮 (爵 n ke g e t i n ) 2 . 卷柏双黄酮 ( h i n o k i fl a v o n e ) 3 . 穗花
杉双黄酮 ( am e n t o n a v o n e )
6
.
2
.
2 胆酸钠浓度的影 响 在胆酸钠系统其他条
件不变 ( 10 m m o l · L 一 ’硼砂 , 1 5 m m o l · L 一 ’ 磷酸二氢
药物分析杂志 h Ci n J p ham rA n al Z以 )6
,
2 6 ( 1 0 ) 14 1 1 一
钠 , p H = 7 . 0 ) 的情况下调节胆酸钠浓度从 10 到 50
m m ol
·
L
一 `来研究胆 酸钠浓度对分离选择性 的影
响 ,结果见图 2 。 随着胆酸钠浓度 的升高 , 各溶质的
迁移时间也加长 ,这是因为胆酸钠浓度的升高 ,也提
高 一了水相中胶束的相 比 , 导致了这些化合物迁移 时
间的加长 〕 然而 , 当胆酸钠浓度达到 50 m m ol · L 一 ’
时 ,各 色谱峰 发生 了变形 。 所以 , 选择 40 m m d ·
L
一 ’作为试验浓度 。 另外 , 与常规的 SD S 系统相反 ,
在胆酸钠系统中 ,极性大的溶质后 出峰 ,这可能与胆
酸钠胶束的内翻结构与极性内核有关 。
日
访 15
15 2 0 3 0 4 0 5 0
口啪 l · ! ’
图 2 胆酸钠浓度对迁移时间的影响
F i g 2 E fe
e t o f s o d i u m e h o l a te e o n e e n t r a t io n
o n m i g
r a t l o n t im e
1
. 银杏双黄酮 ( g i n k e g e t i n ) 2 . 卷柏 双黄酮 ( h i n o k i fl a v o n e ) 3 . 穗花
杉双黄酮 ( arn e n * o fl a v o n e )
6
.
2
.
3 乙睛 比例的影响 有机改进剂对化合物分
离有重要的影响 ,它能影响溶质在胶束相和水相 中
的分布 ;改变胶束化学平衡及影 响水相 一 胶束相 中
改进剂 、 表面活性剂之间的相互作用 。 在胆酸钠 系
统中 ,胆酸钠胶束能相容高浓度的有机改进剂 , 这一
点十分有利于强疏水性化学成分的分析 。 在保持其
他条件不变的前提下 ,从 10 % 到 50 % 改变乙睛的比
例来考察乙睛的量对分离度的影 响 , 见图 3 。 从图
中可以看出 ,随着 乙睛比例的升高 ,卷柏双黄酮和穗
花杉双黄酮的迁移时间加长 , 而银杏双黄酮的迁移
时间缩短 。 乙睛为 40 % 时 , 3 个双黄酮 的分离最为
理想 。
·
L
一 ’ 硼砂 , 巧 m m d · L 一 `磷酸二氢钠 , 4 0 m m d ·
I
J 一 ’ 胆酸钠 ) 一 乙睛 ( 3 : 2 ) , p H = 7 . 0 。
6
.
3 供试品提取工艺考察
6
.
3
.
1 提取方法的选择 方法一 : 取药材粉末 1 9 ,
以氯仿 50 m L 作溶剂 ,索氏提取器回流提取 4 h , 氯
仿提取液蒸干 , 残渣加甲醇 50 m L 溶解 ,作为第 1 份
供试品溶液 ;氯仿提取后的药渣继续用 甲醇 50 m L
提取 s h , 提取液定容至 50 m L ,作为第 2 份供试品
溶液 。 方法二 :取药材粉末 1 9 ,置于索氏提取器中 ,
加甲醇 50 m L 直接回流提取 s h ,提取液定容至 50
m L
,作为第 3 份供试品溶液 。 取以上 3 种供试品溶
液按 “ 2 ” 项条件分析 。 结果证明 : 第 1 份供试品溶
液的电泳图基本为一基线 ,没有黄酮提出来 ,第 2 份
供试品溶液和第 3 份供试品溶液 的图谱基本一致 ,
所以 ,实验选择供试品直接用 甲醇提取 , 不需要脱
月旨。
6
.
3
.
2 提取时间的确定 取供试品 1 9 ,置索氏提
取器中 ,用 甲醇 50 m L 提取 , 于不同时间 0 . 5 , 1 , 2 ,
3
,
4
,
5
,
6 h 进行取样分析 ,结果供试品在 s h 已基本
提取完全 ,所以确定每次分析时供试品的提取时间
为 s h 。
6
.
4 内标的选择 实验 中分别试验了芦丁 、 黄琴
昔 、陈皮昔 、 淫羊蕾昔 、山蔡酚 、 葛根素 、懈皮素等 or
多个化合物 ,最后证明只有懈皮素作内标较为合适 。
如图 4 所示 。
卜一卜一杯二二二 12
一 .一 3 — -
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图 3 乙睛比例对迁移时间的影响
F ig 3 E fe
e t fO a e e t o n i itr l
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o ir i o n o n m i『 a ti o n t im e
1
. 银杏双黄酮 (乎kn e罗 ti n ) 2 . 卷柏双黄酮 ( h i n o k沮 va o n e )
杉双黄酮 ( am e n ot fl a v o n e )
穗花
图 4 样品 ( A )和对照品 ( B )电泳图
F ig 4 E l e e加p h e or 脚m s o f s anr p l e ( A ) an d er fe r e n e e s u b s tan e e s ( B )
1
. 银杏双黄酮 ( ig n k e罗 t i n ) 2 . 内标懈皮素 (明 e cr e t i u m , i n re nr al
s tan d ar d ) 3
. 卷 柏双 黄酮 ( h i n o k i fl a v o n e ) 4 . 穗 花杉 双黄 酮
( a m e n t o fl
a v o n e )
6
.
2
.
4 小结 根据 以上优化结果 , 参照有关文
献 〔` “ 1 ,最终确定运行缓冲液为胆酸钠系统 ( 10 m m ol
6
.
5 结语 从供试品分析结果可以看出 ,卷柏属植
物中双黄酮类化合物含量很高 ,结合临床研究 , 可以
作为一种药用资源进一步开发 。 另外 , 由于 H P c E
14 12 一 药物分析杂志 C h in J Ph ram A n al 2 060
,
2 6 ( 10 )
能提供更多的色谱信息 , 可以用该方法对本属植物
的不同种进行鉴别和 比较研究 。
参考文献
1 St a t e A d m i n i
s
atr
t i o n o f T r ad i t i o n al Ch i n
e s e M e d i e i n
e o
f P
e o P l
e ’ s R e
-
p u b l i e o f Ch i n a (中华人民共和国 中医药管理局 ) . Z h o n gh u ab e n -
e ao ( 中华本草 ) . V o l l (第三卷 ) . S h an g h a i (上海 ) : Sh an gh a i
S c i e n
c e
an d T e c h n o l o群 p u bl , f le r s ( 上 海科 学技术 出版社 ) ,
19 9 9
.
6 2 0
2 以 X i n (李欣 ) , Y U S h i 一 y i n g (于时英 ) . T h e p re p ar t i o n o f im x t u re
ofr m se al g ine al is, , sn is ( 中华卷柏合剂的制备 ) . hC in J 刀。` z〕
hP
a
mr ( 中国医院药学杂志 ) , 19 9 6 , 16 ( l ) : 3 6
3 S i l
v a C L
,
Ch a i H
,
G u p t a M p
,
e t a l
.
C y t
o t o x i e b沮a v o n o id s fro m s e l a -
9 1砚 l l a w i l油~ i i
.
hP 产 , h e m is t叮 , 1 99 5
,
4 0 ( l ) : 12 9
4 L i n Y M
,
M i e hae l 群 . A n t i v i arl ac t i v i t i e s o f b i fl a v o n o i ds . lP a n ` a
Me d
,
19 9 9
,
6 5 ( 2 ) : 12 0
5 C h ak
r a v
art h y K B
,
R a o V K
.
l
s o l a t i
o n o f am
e n t o n a
v o n e 肠 m se lag i -
肥 ll a r u} ,es t用 an d i t s p hamr a e o l
o g i e al a e t i v i t y o n e e n tr al n e vr o u s
s y s t e m
, s
m o t h m u s e l e
s
an d i s o l a t e d F ro g H e iar Pre P ar
a t i o n s
.
lP a 耐 a
赶e以 , 19 8 1 , 4 3 ( ( l ) : 64
P i e t t a P
,
M a u ir P
.
R e v e rs e d 一 ph a s e hi gh 一 P e orf rm an
e e l iq u id e }l or
-
m a t o脚 p h i e me t h o d of r t h e an al y s i s o f bi fl a v o n e s i n G i n k即 b i l o b a
L
·
e x
atr
e t s
.
J hC or am
t吧 , 一9 8 8 , 4 37 ( 2 ) : 45 3
F ran
c o i
s e
BS
,
Gu th A
,
A n r o n R
.
H i g h 一 p e rfo rm an
e e
l iq u i d e h功 rn a -
t o sra p h y
o f b i fl a
v o n e s
fro m G i
n k即 bi l o b a L . J hC ro naz t o g r , 19 8 2 ,
24 5 ( 2 ) : 2 6 1
M a S C
,
B u * P P H
,
0 0 1 V EC
.
A n t i
v iarl
a m e n t o fl a v o n
e
ofr m elS
a g 艺ne lal
5 1、 ns 站. B动1 hP a rm B以 l , 2 0 0 1 , 2 4 ( 3 ) : 3 1 1
C o le R O
,
Se pan iak MJ
,
H i n
z e
W L
.
B i l e s al t
s u
rfa
e tan t s i n n l i
e e l lar
e l e e tro k i
n e t i
e e
h ro m a t
o盯a p h y . J Ch ro naz z吧 , 19 9 1 , 5 5 7 ( l 一 2 ) :
11 3
L i K L
,
S企l e u S L . D e t e rm i n a t i o n o f if va o n o id s a n d al kal o id s i n t h e
s e u t e 一 e o p t i s h e r b e o u p l e b y e叩 11娜 e l e e tro p h o r e s i s . Aruz l hC im
Act a
, 19 9 5
,
3 1 3 ( l 一 2 ) : 1 13
(本文于 2 0 6 年 8 月 7 日修改回 )
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欢迎订阅 2 0 07 年 ( 中国药师》杂志
《中国药师》由国家食品药品监督管理局主管 , 19 98 年 6 月创刊 , 为科技部 中国科技论文统计源期
刊 、 中国科技核心期刊 , 且为 国内许多大型检索数据库和《国际药学文摘 》收 录 。 设有 ” 研究论文 ” ” 继
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目 。 杂志由《中国药师》编辑部 出版 , 国内统一刊号 CN42 一 16 26 / R , 月刊 , 大 16 开 10 页 ,每期 定价 9 .
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o r g (初稿专 用 ) , z即 s@ p e r io d i e a l s . n e t . e n (修改稿专用 ) 。 网址 : h t t p : / /
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