免费文献传递   相关文献

琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液抑菌作用初步研究



全 文 : 2007, Vol. 28, No. 09 食品科学 ※基础研究66
收稿日期:2007-06-20 * 通讯作者
作者简介:艾克白尔·买买提(1981-),男,硕士研究生,主要从事资源植物研究。
琐琐葡萄乙酸乙酯提液和正丁醇提液
抑菌作用初步研究
艾克白尔·买买提,迪丽拜尔·托乎提,阿不都拉·阿巴斯*
(新疆大学生命科学与技术学院,新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要:先用95%乙醇浸泡,然后用乙酸乙酯和正丁醇从琐琐葡萄中提取其活性成分,并探讨了其抑菌作用。结
果表明,琐琐葡萄乙酸乙酯和正丁醇提取物对微生物有明显抑制作用。
关键词:琐琐葡萄;提取物;抑菌作用
Preliminary Study on Antibacterial of Ethylacetate and n-Butanol Extracting Solution from Xinjiang Vitis viniferaL
AKBAR Mamat,DILBAR Tohty,ABDULLA Abbas*
(College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract :The ethylacetate extracts and the n-butanol extracts from Xinjiang Vitis viniferaL wer ssayed for antibacterial
activity four kind of bacteria. Results showed that extracts of Xinjiang Vit s viniferaL has notable inhibiting micro rganism activity.
Key words:Xinjiang V tis vinifera L;extracts;antimicrobial activity
中图分类号:TS201 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2007)09-0066-03
琐琐葡萄又名SUOSUO葡萄、索索葡萄、豆粒葡
萄。果粒小如胡椒。琐琐葡萄来源是葡萄科(Vitaceae)
葡萄属(Vitis vinifera)植物山葡萄,为无核红葡萄系。琐
琐葡萄可内服、煎汤、捣汁或浸酒,有补气血,强
筋骨,利小便之功效。主治气血虚弱,肺虚咳嗽,
心悸盗汗,风湿痹痛,淋病,浮肿。世界上琐琐葡
萄主要分布在东亚[1]。我国主要产于新疆的吐鲁番,
鄯善和田等地。迄今国内外对琐琐葡萄化学成分的研
究比较少,本研究采用不同提取方法从琐琐葡萄中提
取有效抗菌成分做抑菌实验,不仅有望筛选到具有抗
菌成分的药材新资源,也可获知有效的提取方法。这
对评价琐琐葡萄的药用价值,开发利用这一自然资源
具有实际意义[2-4]。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1样品
琐琐葡萄2005年9月采于采自新疆鄯善,经新疆大
学植物教研室阿不都拉·阿巴斯教授鉴定。将全草晾
干、粉碎,备用。
1.1.2菌种
大肠肝菌(Escherichia col,E.c)、金黄色葡萄球
菌(Staphylococcus aureus,S.a),枯草杆菌(Bacillus
subtilis,B.s)和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus,B.),
新疆维吾尔自治区药检所药理室。
1.1.3培养基
牛肉膏蛋白胨培养基[5]。
1.1.4试剂
牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl、蔗糖、葡萄糖、
NaOH、 Cl、乙醇。
1.1.5仪器
超净工作台、手提式灭菌锅、恒温控制箱旋转蒸
发仪,分液漏斗,冰箱等。
1.2方法
1.2.1琐琐葡萄提取液的制备[6-10]
1.2.2菌悬液的制备[11]
将各供试菌菌种接种于普通营养琼脂培养基斜面
上,37℃培养20~22h活化,再将斜面活化好的各供试
菌体置于装有9ml无菌生理盐水的试管中,振荡摇匀,
分别稀释制成含菌量为10-2~10-6CFU/ml的菌悬液。
1.3抑菌实验
67※基础研究 食品科学 2007, Vol. 28, No. 09
1.3.1抑菌效力的测定[2]
将灭菌过的培养基制成平板,吸取0.2ml菌悬液均
匀涂抹到平板上。将各浸渍过琐琐葡萄乙酸乙酯提液和
正丁醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干,放到每个涂有菌
液的平板上,等距离放三片,每个试验平行三次,并
用无菌水作空白对照,确定抑菌效果。在37℃下培养
24h后测定抑菌圈直径大小,取平均值。
1.3.2最低抑菌浓度(MIC)的测定
配置足够量的牛肉膏蛋白胨固体培养基,121℃湿
热灭菌,制成平板,置于0~4℃下冷藏备用。以提取
备正丁醇提取物0.8g,用50ml蒸馏水配成0.16g/ml提取
液,10ml取该溶液加入到40ml有蒸馏水的试管中,配
成不同浓度的琐琐葡萄正丁醇提取液。以提取备乙酸乙
酯提取0.5g,用50ml蒸馏水配成0.1g/ml提取液,10ml
该溶液加入到40ml有蒸馏水的试管中,配成不同浓度的
琐琐葡萄乙酸乙酯提取液。吸取0.2ml菌悬液均匀涂抹到
平板上。将各浸渍过不同浓度的琐琐葡萄乙酸乙酯提液
和正丁醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干,放到每个涂有菌
液的平板上,等距离放三片,每个试验平行三次,并
用无菌水作空白对照,确定抑菌效果。每个浓度做三个
重复,置适宜温度下培养(36+1)℃,24h。观察实验结
果。以能抑制细菌生长的最低添加量为该提取物的最低
抑菌浓度(MIC)。无菌生长的最低浓度即为提取物的最低
抑菌浓度(MIC)。以上操作均在无菌条件下进行。
2 结果与分析
由表1 中结果可知,两种提取物原液对四种供试菌
的生长均有很强的抑制作用。琐琐葡萄乙酸乙酯提液对
大肠杆菌的抗菌作用稍弱之外,对其余菌具有比较强的
抗菌作用,尤其对枯草杆菌的抗菌作用更明显。
琐琐葡萄正丁醇提液对四种细菌均有很强抗菌作
用,尤其对大肠肝菌的抗菌和短小芽孢杆菌作用更明
显。其对金黄色葡萄球菌的抑菌作用比对其他菌种的抑
菌作用相比也较弱。
2.2琐琐葡萄正丁醇提液与琐琐葡萄乙酸乙酯提液对各
供试菌的最低抑菌浓度(MIC)
称取样品500g

加10倍样量的乙醇提取溶剂5000ml

过滤

滤液

旋转蒸发浓缩

加石油醚除去色素

用乙醚得到乙醚提取物

用乙酸乙酯得到乙酸乙酯提取物然后旋转蒸发浓缩至粘着状

用正丁醇得到正丁醇提取物然后旋转蒸发浓缩至粘着状

用水溶解并定容于10ml 而成水悬浊液

分别获得乙酸乙酯提取液,正丁醇提取液
图1 乙酸乙酯提液与正丁醇提液的制备流程
Fig.1 Preparation process of ethylacetate and n-butanol
extracting solution
2.1琐琐葡萄乙酸乙酯取液、正丁醇提取液对各供试
菌的影响
表1 两种提取液的抑菌作用
Table 1 Bacteriostatic activity of two kinds of extracts
抑菌圈直径(mm)
E.c S.a B.s B.p
乙酸乙酯提液 11 16 22 14
正丁醇提液 19 11 14 17
由表2 可知,琐琐葡萄正丁醇提液物对四种供试细
菌的最低抑菌浓度分别为:大肠杆菌、金黄色葡萄球
菌为0.00128g,枯草杆菌为0.0064g,短小芽孢杆菌为
0.032g。表3表明,琐琐葡萄乙酸乙酯提液物对各供试
细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为0.02g,金黄色
葡萄球菌为0.0008g,枯草杆菌为0.004g,短小芽孢杆
菌为0.02g。
3 结 论
琐琐葡萄乙酸乙酯取液,正丁醇提取液都具有不同
表2 琐琐葡萄正丁醇提液对各供试菌的最低抑菌浓度(MIC)
Table 2 MIC of n-butanol extracts on different bacteria
琐琐葡萄正丁醇 抑菌效果
提取浓度(g/ml)E.c S.a B.s B.p
0.16 ++ + + +
0.032 + + + -
0.0064 + + - -
0.00128 - - - -
0.000256 - - - -
注:-表示无菌生长,+ 表示少量菌生长,++ 表示菌大量生长。
表3 琐琐葡萄乙酸乙酯提液对各供试菌的最低抑菌浓度(MIC)
Table 3 MIC of ethylacetate extracts on different bacteria
琐琐葡萄乙酸乙酯 抑菌效果
提液浓度(g/ml) E.c S.a B.s B.t
0.1 + ++ ++ ++
0.02 - + + -
0.004 - + - -
0.0008 - - - -
0.00016 - - - -
2007, Vol. 28, No. 09 食品科学 ※基础研究68
程度的抑菌活性,对球菌和杆菌、革兰氏阳性和阴性
都有抑菌活性,琐琐葡萄正丁醇提液与乙酸乙酯提液
抑菌效果的差异不大。这说明乙酸乙酯像正丁醇一样
将植物体内有效抑菌物质提取出来。正丁醇提液浓度
在0.00128g时对所有供试菌种均有抑制作用,乙酸乙酯
取液提液则要0.0008g。实验证明琐琐葡萄对几种造成食
品腐败的微生物具有一定的抗性,为其在这方面的开发
利用提供一定的理论依据。但对于其抗菌活性物质还有
待进一步的研究。
参考文献:
[1]董方言, 弥宏, 陈颖, 等. 中药微量元素研究进展[J]. 世界元素医学,
1998, 5(3): 20.
[2]刘勇民. 维吾尔药志: 下册[M]. 乌鲁木齐: 新疆科技卫生出版社, 1999:
150-155.
[3]周晓英, 田树革, 孙莲, 等. 维吾尔药琐琐葡萄中无机元素含量测定
及紫外光谱分析[J]. 中国发族医药杂志, 2004(2): 26-27.
[4]中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册[M]. 乌鲁木齐: 新疆
科技卫生出版社, 1999: 88.
[5]沈萍, 范秀容, 李广武. 微生物学实验[M]. 3版北京: 高等教育出版
社, 1999: 214-215.
[6]霍光华, 高荫榆, 陈明辉. 乌柏叶抑菌活性功能成分的研究[J]. 食品
与发酵工业, 2005, 31(3): 52-56.
[7]王晓文, 丛媛媛, 堵年生, 等. 维吾尔药琐琐葡萄化学成分研究[J].
新疆医科大学学报, 2003(6): 579.
[8]堵年生, 丛媛媛, 王晓文, 等. 维吾尔药琐琐葡萄的生药学鉴定[J].
新疆医科大学学报, 2003(6): 581.
[9]DOUILLET-BREUIL A-C, JEANDET P, ADRIAN M, et al. Changes
in the phytoalexin content of various vit s spp. inresponse to ultraviolet
elicitation[J]. J Agric Food Chem, 1999, 47(10): 4456-4461.
[10]TEGUO P W, FAUCONNEAU B, PEFFIEUX G, et al. Isolation,
identification, and antioxidant activity of three stilbene glucosides newly
extracted from Vitis viniferacell cultures[J]. Nat Prod, 1998, 61: 655-657.
[11]严赞开. 生姜提取物的抑菌试验[J]. 中国食品添加剂, 2005(1): 74-76.
[12]赵东亮, 郁建平, 周晓秋, 等. 博落回生物碱的抑菌作用研究[J]. 食
品科学, 2005, 26(1): 45-47.
收稿日期:2007-08-05 *通讯作者
基金项目:国家自然科学基金项目(20676051;2 73048);上海交通大学重点建设资助项目(A类,AE150085)
作者简介:张爱(1982-),女,硕士研究生,研究方向为功能食品。
基于量子化学计算的β-胡萝卜素溶解性能的
QSPR研究
张 爱1,2,赵 波1,*,王正武2
(1.南京师范大学化学与环境科学学院,江苏 南京 210097;
2.上海交通大学农学院食品科学与工程系陆伯勋食品安全研究中心,上海 201101)
摘 要:应用DFT-B3LYP/6-31G*方法计算所得的 4种常用溶剂分子结构单元的物性参数,对β-胡萝卜素溶解
性能做定量结构性质(QSPR)研究。采用多元线性回归法建立QSPR预测模型,其复相关系数R2=0.933,标准偏
差SD=0.316。模型所得的计算值与实验值的相关系数R=0.980,标准偏差SD=0.241。研究表明,影响β-胡萝
卜素溶解性能的因素主要有平均分子极化率α,分子摩尔体积Vm,分子中最正氢原子静电荷qH+,分子摩尔质
量M等参数。用这些量子化学参数所建立的QSPR模型能对未知溶剂做简单快速的预测。
关键词:量子化学计算;QSPR;β-胡萝卜素;溶解度
Quantitative Structure-Property Relationship Study on Solubility of β-Ca oten on
Basis of Quantum Chemistry Calculation
ZHANG Ai1,2,ZHAO Bo1,*,WANG Zheng-wu2
(1.College of Chemistry and Environmental Science, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China;2.Bor Luh Food
Safety Center, Department of Food Science and Technology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 201101, China)
Abstract :The density functional theory method at the B3LYP/6-31G* level were carried out for calculating the