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毛茛总苷对去甲肾上腺素致大鼠离体去内皮胸主动脉环收缩的影响



全 文 :亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific Traditional Medicine
Vol. 6 No.6%
Jun. 2010
第 6 卷 第 6 期
2010 年 6 月
收稿日期:2010-03-12
基金项目:广东省科技厅课题(2004B30101002 )
作者简介:赵晋(1982-),男,硕士,广东医学院助理实验师;谭毓治(1956-),男,广东药学院教授,研究方向为药物筛选与新药研发。
毛茛总苷对去甲肾上腺素致大鼠离体
去内皮胸主动脉环收缩的影响
赵 晋 1,谭毓治 2
(1.广东医学院 实验教学管理处,广东 东莞 523808;
2.广东药学院 药理教研室,广东 广州 510006)
摘 要:目的:研究毛茛总苷对去内皮大鼠离体胸主动脉环的影响。方法:采用离体胸主动脉环张力记录法,考
察毛茛总苷对去甲肾上腺素引起去内皮离体胸主动脉环收缩的影响。 结果:0.5mg / mL、1mg / mL、2mg / mL的毛
茛总苷对去甲肾上腺素引起去内皮离体胸主动脉环的收缩均有显著的抑制作用(P<0.01)。 结论:毛茛总苷对
抗去甲肾上腺素引起离体胸主动脉环收缩的作用不依赖于内皮。
关键词:毛茛总苷;胸主动脉环;收缩作用
中图分类号:R965 文献标识码:A 文章编号:1673-2197(2010)06-0015-02
1 实验材料
1.1 药物
毛茛总苷(TGRJ),广东药学院药理实验室制备;氯化
乙酰胆碱,上海三爱思试剂有限公司;重酒石酸去甲肾上
腺素注射液(NE)、酚妥拉明注射液,均由上海禾丰制药有
限公司生产。所需药物和试剂均用生理盐水配成一定的浓
度,药物剂量均以浴槽中的终浓度表示。
1.2 仪器
生物信号采集系统(Medlab-U / 4C501 型),南京美易
科技公司;10g 张力换能器,北京新航兴业科贸有限公司;
超级恒温器(501型),上海市实验仪器厂。
1.3 动物
SPF 级 SD 成年雄性大鼠 20 只,体重 180~220g,购自
广东省医学实验动物中心。 合格证号:SCXK (粤)2003-
0002,粤监证字 2007A015。
2 实验方法
2.1 去内皮胸主动脉环的制备
取 SD 成年大鼠,断头处死后,迅速分离出胸主动脉,
取中段 16mm 制备 4 个等长血管环,用与血管内径相适的
自制棉棒从管腔内壁擦过,来回数次,再水平悬挂于充有
10mL 改良 Kreb’s 液的 37℃恒温浴槽中,下端固定于拉钩
上,上端通过棉线与张力换能器相连,张力换能器通过生
物信号采集处理系统及计算机进行数据记录和分析。浴槽
中持续通入含体积分数 95% O2 和 5% CO2 的混合气体,
主动脉环的基础张力调至 1.2g, 平衡 1.5h, 其间每隔
15min 换液 1 次,然后加入去甲肾上腺素(10-6mol / L)使主
动脉环收缩,到达平台相后加入乙酰胆碱(10-5mol / L),舒
张幅度不超过收缩幅度的 10%时即认为内皮去除完全,可
以进行实验[1]。
2.2 毛茛总苷对基础状态下去内皮胸主动脉环张力的影响
实验分为 4组,主动脉环在 Kreb’s 液中平衡 1.5h 后,
记录张力值, 分别往浴槽中加等体积的生理盐水、0.5mg /
mL、1mg / mL、2mg / mL 的毛茛总苷,再记录此时的张力值。
2.3 毛茛总苷对 NE引起去内皮胸主动脉环收缩的影响
实验分为 5组,主动脉环在 Kreb’s 液中平衡 1.5h 后,
记录张力值,加入 10-6mol / L NE,待主动脉环收缩达到平
台相后,再记录此时的张力值,然后分别往浴槽中加等体
积的生理盐水 、0.5mg / mL、1mg / mL、2mg / mL 的毛茛总苷
和 5×10-6mol / L 的酚妥拉明, 以生理盐水组作为阴性对照
组,酚妥拉明组作为阳性对照组,记录到达平台相后的张
力值,并计算出张力变化[2]。
3 实验结果
3.1 毛茛总苷对基础状态下去内皮胸主动脉环张力的影响
毛茛总苷对去内皮离体胸主动脉环张力的影响,见表
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亚 太 传 统 医 药
Asia-Pacific Traditional Medicine
Vol. 6 No.6%
Jun. 2010
第 6 卷 第 6 期
2010 年 6 月
1。
表 1 毛茛总苷对去内皮离体
胸主动脉环张力的影响 (x軃±s,n=10)
组别 F1 F2 F2/F1
生理盐水 1.206 ± 0.012 1.205 ± 0.018 0.999
0.5mg/mLTGRJ 1.202 ± 0.018 1.206 ± 0.015 1.003*
1mg/mLTGRJ 1.205 ± 0.016 1.207 ± 0.013 1.002*
2mg/mLTGRJ 1.204 ± 0.016 1.206 ± 0.014 1.002*
注:与生理盐水组比较,*P>0.05。
F1 表示基础张力值;F2 表示加等体积的生理盐水、
0.5mg / mL、1mg / mL、2mg / mL 的 TGRJ后的张力值。结果显
示,0.5mg / mL、1mg / mL、2mg / mL 的 TGRJ 对去除内皮的大
鼠离体胸主动脉环基础张力无影响(P>0.05)。
3.2 毛茛总苷对 NE引起去内皮胸主动脉环收缩的影响
毛茛总苷对 NE 引起去内皮胸主动脉环收缩的影响,
见表 2。
表 2 毛茛总苷对 NE引起去内皮
胸主动脉环收缩的影响 (x軃±s,n=10)
组别 F1 F2
生理盐水 1.195 ± 0.025 2.19 ± 0.036
2mg/mLTGRJ 1.195 ± 0.027 2.31 ± 0.067
酚妥拉明 1.203 ± 0.022 2.226 ± 0.051
0.5mg/mLTGRJ 1.206 ± 0.022 2.359 ± 0.062
1mg/mLTGRJ 1.204 ± 0.024 2.354 ± 0.079
F3
2.189 ± 0.034
1.485 ± 0.05
1.281 ± 0.062
1.709 ± 0.036
1.58 ± 0.038
(F2-F3)/
(F2-F1)
0.001
0.564**
0.674**
0.740**
0.923**
注:与生理盐水组比较,**P<0.01。
图 1 毛茛总苷对 NE引起去内皮胸主动脉环收缩的影响
抑制率=(F2-F3) / (F2-F1)。 F1 表示基础张力值;F2
表示加入 10-6mol / LNE 后收缩达到平台相后的张力值。 F3
表示分别加等体积的生理盐水、0.5mg / mL、1mg / mL、2mg /
mL的 TGRJ和 5×10-6mol / L 的酚妥拉明后的张力值。 结果
显示,0.5mg / mL 至 2mg / mL 的 TGRJ 对由 10-6mol / L NE 引
起去内皮的离体胸主动脉环收缩有抑制作用(P<0.01),并
呈现剂量依赖性。
4 讨论
去甲肾上腺素(NE)是肾上腺素 α 受体的激动剂,是
血管周交感神经释放的主要的交感性递质,其主要作用于
血管平滑肌细胞膜上的 α1受体,大鼠的主动脉上的 α1受
体主要属于 α1D亚型, 血管 α1受体激动时通过 Gq / 11→
PLC信号转导通路从而影响血管的张力, 参与血压调节。
NE 通过兴奋血管平滑肌细胞膜上的 α1受体,激活磷酸脂
酶 C,使胞内肌醇三磷酸增多,促进外 Ca2+经进入细胞内,
触发细胞内钙库释放钙,使细胞内 Ca2+浓度增加,同时还
能引起内质网 Ca2+释放,使胞浆内 Ca2+增加而使平滑肌收
缩从而引起血管的收缩[3]。
在之前的研究中,我们发现毛茛总苷对内皮完整的大
鼠离体胸主动脉环的基础张力无影响,而对 NE 引起内皮
完整的大鼠离体胸主动脉环收缩有抑制作用[4]。 本实验结
果显示,毛茛总苷对去内皮大鼠离体胸主动脉环的基础张
力无影响,而对 NE 引起去内皮大鼠离体胸主动脉环收缩
有抑制作用,并呈现剂量依赖性,表明其舒血管的作用不
依赖于内皮,提示其作用可能与其拮抗血管平滑肌上的肾
上腺素 α1受体减少内钙释放和外钙内流、 降低细胞浆钙
浓度有关。
参考文献:
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民卫生出版社,2005:1037.
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[4] 王榕乐,江欢,谭毓治.毛茛总苷对离体蛙心和大鼠胸主动脉环
张力的作用研究[J].中华中医药学刊,2009,27(1):91.
(责任编辑:姜付平)
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