全 文 ：书　［收稿日期］　２０１４－０８－０７；２０１５－０２－２５修回
　［基金项目］　国家自然科学基金项目“中国西南地区榧树属植物分类与谱系地理学研究”（３１３６００３７）
　［作者简介］　谢　津（１９８９－），男，在读硕士，研究方向：微生物学专业。Ｅ－ｍａｉｌ：ｄｒａｇｏｎ＿ｋｉｎｇ＠１２６．ｃｏｍ
　＊通讯作者：陈玉惠（１９６１－），女，教授，博士，从事资源微生物研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｙｕｈｕｉ＠ｓｗｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
［文章编号］１００１－３６０１（２０１５）０３－０１３２－０１０２－０４
云南榧内生放线菌ＦＴＹ２的分子鉴定及其抑菌活性
谢 津１，李 靖１，黄 伟１，马长乐２，陈玉惠１＊
（１．西南林业大学 生命科学学院，云南 昆明６５０２２４；２．西南林业大学 园林学院，云南 昆明６５０２２４）
　　［摘　要］为探明菌株ＦＴＹ２的分类地位及其发酵液的抑菌活性，采用改进的ＣＴＡＢ法和抑制菌丝生
长速率法对从云南榧新鲜茎叶上分离得到的１株内生放线菌ＦＴＹ２进行分子鉴定及其发酵液的抑菌活性研
究。结果表明：ＦＴＹ２初步鉴定为链霉菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ．）放线菌，其发酵液对小麦雪腐病菌、油菜菌核
病菌、淡色生赤壳菌、腐皮镰刀菌、尖孢炭疽菌和水稻稻瘟病菌等６株植物病原真菌的 ＥＣ５０分别为
５．９０ｍＬ／Ｌ、９．４８ｍＬ／Ｌ、１１．５６ｍＬ／Ｌ、２２７．１９ｍＬ／Ｌ、１２．３５ｍＬ／Ｌ和６１．８７ｍＬ／Ｌ；在１２１℃下处理３０ｍｉｎ
后，对尖孢炭疽菌的抑菌活性开始大幅下降，抑制率从９３．７９％（４℃）降至２６．７３％（１２１℃）；不同ｐＨ处理发
酵液的抑菌率基本不变，均达９２％以上。
［关键词］云南榧；内生放线菌；分子鉴定；活性筛选；毒力
［中图分类号］Ｓ４７６ ［文献标识码］Ａ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ
ＦＴＹ２　Ｓｔｒａｉｎ　Ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｔｏｒｒｅｙａ　Ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ
ＸＩＥ　Ｊｉｎ１，ＬＩ　Ｊｉｎｇ１，ＨＵＡＮＧ　Ｗｅｉ　１，ＭＡ　Ｃｈａｎｇｌｅ２，ＣＨＥＮ　Ｙｕｈｕｉ　１＊
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ　６５０２２４；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌａｎｄｓｃａｐｅ
Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ　６５０２２４，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＦＴＹ２，ａｎ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ　ｓｔｒａｉｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｆｒｅｓｈ
ｓｔｅｍｓ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｔｏｒｒｅｙａ　Ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ＣＴＡＢ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ
ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ
ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ＦＴＹ２ｓｔｒａｉｎ　ａｎｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ．Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＦＴＹ２ｓｔｒａｉｎ　ｉｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ），ａｎｄ　ＥＣ５０
ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｔｙｐｈｌａ　ｉｎｃａｒｎａｔａ，Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ　ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ，Ｂｉｏｎｅｃｔｒｉａ　ｏｃｈｒｏｌｅｕｃａ，
Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏｌａｎｉ，Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ａｃｕｔａｔｕｍ　ａｎｄ　Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ　ｏｒｙｚａｅ　ｉｓ　５．９０ｍＬ／Ｌ，９．４８ｍＬ／Ｌ，
１１．５６ｍＬ／Ｌ，２２７．１９ ｍＬ／Ｌ，１２．３５ ｍＬ／Ｌ　ａｎｄ　６１．８７ ｍＬ／Ｌ　ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｆｏｒ　３０ｍｉｎ　ａｔ　１２１℃ａｇａｉｎｓｔ　Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ａｃｕｔａｔｕｍｄｅｃｒｅａｓｅｓ　ｆｒｏｍ　９３．７９％
（４℃）ｔｏ　２６．７３％（１２１℃）．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐＨ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｓｔｉｌ　ｉｓ　ａｂｏｖｅ　９２％．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｏｒｒｅｙａ　Ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ；ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ；ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｓｃｒｅｅｎ－
ｉｎｇ；ｔｏｘｉｃｉｔｙ
　　植物内生菌（Ｐｌａｎｔ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ）是指能生活于健
康植物各种组织和器官内部或细胞间隙的、不引起
植物患病的真菌或细菌（放线菌），其多样性十分丰
富，并能与宿主植物协同进化［１－４］。近年来，随着植
物内生菌新颖代谢产物的发现，以及越来越多的实
际应用，从植物中分离内生菌用以防治植物病虫害、
人类和动物疾病等已成为科技发展的一种趋势；且
从具有药用价值的植物中分离内生菌更是目前研究
的一大热点［５］。有研究表明［６－１２］，植物内生菌能产
生与宿主植物代谢物相似或相同的次生代谢产物，
或者结构和活性更为新颖的化合物。Ｓｔｉｅｒｌｅ［９］１９９３
年首次从短叶红豆杉（Ｔａｘｕｓ　ｂｒｅｖｉｆｌｉａ）中分离得到
１株能合成抗癌物质紫杉醇的内生真菌，之后，Ｓｔｒｏ－
ｂｅｌ［１０］研究小组于２０００年从澳大利亚北部土著居民
常用以治疗外伤的药用植物蛇藤（Ｋｅｎｎｅｄｉａ　ｎｉｇ－
ｒｉｓｃａｎｓ）中分离到１株新的内生链霉菌，其能产生新
颖的多肽类抗生素ｍｕｎｕｍｂｉｃｉｎｓ　Ａ、Ｂ、Ｃ和Ｄ，该发
现掀起了从药用植物中分离内生菌的热潮。目前，
有学者［１０－１２］从榧树中分离出多种能产生紫杉醇及其
衍生物的内生菌，但对榧树内生菌生物活性及其用
于生物农药生产的研究较少。
我国是一个农业大国，由于农药的过多使用，目
前３Ｒ（Ｒｅｓｉｄｕｅ，Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，Ｒｅｓｕｒｇｅｎｃｅ）问题日益
严重。因此，寻找具有抗菌活性的微生物资源，并将
其用于生物农药生产，具有重要的理论意义和实践
价值。为此，笔者于２０１４年采用改进的ＣＴＡＢ法
和抑制菌丝生长速率法对从云南榧新鲜茎叶上分离
得到的１株内生放线菌ＦＴＹ２进行分子鉴定及其发
酵液的抑菌活性研究，以期为该菌的进一步利用及
其活性成分的分离鉴定奠定基础。
　贵州农业科学　２０１５，４３（３）：１０２～１０５
　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
１ 材料与方法
１．１ 供试材料
１．１．１ 菌种 １）放线菌菌株ＦＴＹ２为从云南榧
新鲜茎叶分离的内生菌，由西南林业大学园林学院
提供；２）小麦雪腐病菌（Ｔｙｐｈｌａ　ｉｎｃａｒｎａｔａ）、油菜
菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ　ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）、淡色生赤壳菌
（Ｂｉｏｎｅｃｔｒｉａ　ｏｃｈｒｏｌｅｕｃａ）、腐皮镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｓｏ－
ｌａｎｉ）、尖孢炭疽菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ａｃｕｔａｔｕｍ）和水
稻稻瘟病菌（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ　ｏｒｙｚａｅ）等６种常见植物
病原真菌，由西南林业大学生命科学学院生物化学
教研室提供。
１．１．２ 培养基 参照文献［１３－１５］的方法配制马
铃薯葡萄糖琼脂培养基（ＰＤＡ）、高氏一号培养基和
小米培养液（放线菌发酵培养基）。
１．２ 内生放线菌ＦＴＹ２的分子鉴定
采用改进的 ＣＴＡＢ 法［１６］提取 ＤＮＡ。利用
ＰＣＲ扩增１６ＳｒＤＮＡ 的基因片段，将１６ＳｒＤＮＡ
ＰＣＲ扩增产物交上海生工生物技术服务有限公司
进行测序。登陆ＮＣＢＩ，利用ＢＬＡＳＴ将１６ＳｒＤＮＡ
测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ中的已知序列进行比对，确定
菌株所属类群。
１．３ 内生放线菌ＦＴＹ２的抗菌活性测定
采用抑制菌丝生长速率法［１７－１８］进行测定。将菌
株采用摇瓶发酵法在小米培养液中发酵１０ｄ，在无
菌条件下经超滤装置过滤发酵液，得无菌发酵液；然
后，将１０ｍＬ无菌发酵液加入到９０ｍＬ温度适宜的
ＰＤＡ培养基中混匀后，倒入培养皿中即制得含
１０％发酵液的带药平板；以加未接内生放线菌的无
菌小米液体培养液制得的平板为对照；在每个培养
皿中接入１块直径（）为０．６ｃｍ的供试植物病原真
菌菌块，每个处理３次重复，培养３～５ｄ；用十字交叉
法测量菌落直径，根据下式计算菌丝生长抑制率。
抑制率＝［（φ对照－φ处理）／φ对照］×１００％
１．４ 内生放线菌ＦＴＹ２发酵液的毒力（ＥＣ５０）测定
根据内生放线菌ＦＴＹ２的抗菌活性测定结果，
分别制备上述６株供试植物病原真菌的不同浓度梯
度的带药平板，采用抑制菌丝生长速率法，参照文献
［１９－２０］测定内生放线菌ＦＴＹ２的发酵液对菌丝生
长的毒力（ＥＣ５０）。
１．５ 内生放线菌ＦＴＹ２发酵液的稳定性测定
１．５．１ 温度 参照文献［２１］的方法，将ＦＴＹ２的
无菌发酵液在６０℃、８０℃、１００℃和１２１℃下处理
３０ｍｉｎ，然后以４℃下保存的无菌发酵液为对照，并
以尖孢炭疽菌为指示菌，参照上述抑制菌丝生长速
率法测定发酵液对温度的稳定性。
１．５．２ ｐＨ 在超净工作台中用１ｍｏｌ／Ｌ的 ＨＣｌ
和 ＮａＯＨ 将 ＦＴＹ２的无菌发酵液的ｐＨ 值调至
３．００，４．００，５．００，６．００，７．００，８．００和９．００，以尖孢
炭疽菌为指示菌，参照上述抑制菌丝生长速率法测
定发酵液对酸碱的稳定性。
２ 结果与分析
２．１ 内生放线菌ＦＴＹ２的分子鉴定
提取得到的总ＤＮＡ经ＰＣＲ扩增１６ＳｒＤＮＡ的
基因，得到６００ｂｐ左右的片段。测序结果登陆ＮＣ－
ＢＩ（Ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ＩＤ：ｇｂ｜ＫＣ９９０７８５．１｜），利用ＢＬＡＳＴ
将测序结果与ＧｅｎＢａｎｋ中的已知序列进行比对，初
步确认该菌为链霉菌属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ．）放线菌。
２．２ 内生放线菌ＦＴＹ２的抗菌活性
从图１可见，含有１０％ＦＴＹ２菌株发酵液的平
板对供试的６株植物病原菌有不同程度的抑菌活
性。其中，对小麦雪腐病菌、油菜菌核病菌、淡色生
赤壳菌和尖孢炭疽菌有较强的抑制作用，抑制率均
达８９％以上，且能对小麦雪腐病菌和油菜菌核病菌
达到完全抑制。
抑
制
率
/%
病原菌
小麦雪腐病菌
油菜菌核病菌
淡色生赤壳菌
腐皮镰刀菌
尖孢炭疽菌
水稻稻瘟病菌
0
20
40
60
80
100
In
hi
bi
tio
n
ra
te
120
Pathogen
　　图１ 菌株ＦＴＹ２发酵液对６株植物病原真菌菌丝
生长的抑制率
　Ｆｉｇ．１　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＦＴＹ２ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ｏｎ
ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｓｉｘ　ｐｌａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｆｕｎｇｉ
２．３ 内生放线菌ＦＴＹ２发酵液的毒力（ＥＣ５０）
从表可见，该内生放线菌的发酵液对小麦雪腐
病菌、油菜菌核病菌、淡色生赤壳菌和尖孢炭疽菌的菌
丝生 长 具 有 极 强 的 抑 制 作 用，其 ＥＣ５０ 分 别 为
５．９０ｍＬ／Ｌ、９．４８ｍＬ／Ｌ、１１．５６ｍＬ／Ｌ和１２．３５ｍＬ／Ｌ。
表 菌株ＦＴＹ２发酵液对６株植物病原真菌的毒力（ＥＣ５０）
Ｔａｂｌｅ　Ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ＦＴＹ２ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ　ａｇａｉｎｓｔ　ｓｉｘ　ｐｌａｎｔ　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｆｕｎｇｉ（ＥＣ５０）
病原真菌
Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　ｆｕｎｇｉ
毒力曲线
Ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｃｕｒｖｅ
相关系数
（Ｒ２）
ＥＣ５０／
（ｍＬ／Ｌ）
小麦雪腐病菌Ｔ．ｉｎｃａｒｎａｔａ　 ｙ＝３４．４２０ｘ＋０．２９６　９　 ０．９９３　６　 ５．９０
油菜菌核病菌Ｓ．ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ　 ｙ＝２３．３５４ｘ＋０．２７８　７　 ０．９９８　６　 ９．４８
淡色生赤壳菌Ｂ．ｏｃｈｒｏｌｅｕｃａ　 ｙ＝５１．７９５ｘ－０．０９９　０　 ０．９７３　３　 １１．５６
腐皮镰刀菌Ｆ．ｓｏｌａｎｉ　 ｙ＝２．０８３　３ｘ＋０．０２６　７　 ０．９７０　５　 ２２７．１９
尖孢炭疽菌Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍ　 ｙ＝２９．１３０ｘ＋０．１４０　３　 ０．９９４　６　 １２．３５
水稻稻瘟病菌Ｐ．ｏｒｙｚａｅ　 ｙ＝２．５２７　８ｘ＋０．３４３　６　 ０．９８８　３　 ６１．８７
·３０１·
　谢　津 等　云南榧内生放线菌ＦＴＹ２的分子鉴定及其抑菌活性
　ＸＩＥ　Ｊｉｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ　ＦＴＹ２Ｓｔｒａｉｎ　Ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍＴｏｒｒｅｙａ　Ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ
２．４ 内生放线菌ＦＴＹ２发酵液的稳定性
从图２和图３可见：１）温度。该内生放线菌发
酵液经过６０℃、８０℃和１００℃处理３０ｍｉｎ后，其抑
菌率均能保持在８５％以上；仅１２１℃下处理３０ｍｉｎ
后，发酵液抑菌活性大幅下降，其抑制率仅为
２６．７３％，抑菌率远低于其他几个温度处理后的抑菌
结果。２）ｐＨ。该内生放线菌发酵液在经过不同ｐＨ
条件处理后，其抑菌率基本不变，均达９２％以上。
抑
制
率
/%
10
20
30
60
40
50
70
80
0
90
100
91
92
93
96
94
95
97
抑
制
率
/%
温度/℃
pH
4 60 80 100 121
3 4 5 6 7 8 9
In
hi
bi
tio
n
ra
te
Temperature
In
hi
bi
tio
n
ra
te
　　图２ 不同温度和ｐＨ处理菌株ＦＴＹ２发酵液对
尖孢炭疽病菌菌丝生长的抑制率
　　Ｆｉｇ．２　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＦＴＹ２ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ
ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐＨ
A
B
注：Ａ为温度的稳定性，Ｂ为ｐＨ的稳定性。
Ｎｏｔｅ：Ａ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ；Ｂ，ｐＨ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．
　　图３ 不同温度和ｐＨ处理菌株ＦＴＹ２发酵液对
尖孢炭疽菌菌丝生长的抑制作用
　　Ｆｉｇ．３　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＦＴＹ２ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｏｒ
ｏｎ　ｍｙｃｅｌｉｕｍ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍｕｎｄｅｒ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐＨ
３ 结论与讨论
１）该内生放线菌ＦＴＹ２初步确认为链霉菌属
（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ．）放线菌。
２）该内生链霉菌的无菌发酵液对小麦雪腐病
菌、油菜菌核病、淡色生赤壳菌和尖孢炭疽病菌的生
长有较强的抑制作用，且在发酵液浓度为１０％的条
件下，能够完全抑制小麦雪腐病菌和油菜菌核病菌
生长，抑菌率为１００％；对淡色生赤壳菌和尖胞炭疽
病菌的抑制率也在８９％以上；而对腐皮镰刀菌和稻
瘟病的菌丝生长抑制率分别为３６．３６％和５６．１５％。
毒力测定结果表明，ＦＴＹ２菌株无菌发酵液对供试
的小麦雪腐病菌、油菜菌核病、淡色生赤壳菌和尖孢
炭疽病菌菌丝的ＥＣ５０均小于１３ｍＬ／Ｌ，其中，对小
麦雪腐病菌和油菜菌核病效果最好，其ＥＣ５０分别为
５．９０ｍＬ／Ｌ和９．４８ｍＬ／Ｌ。
３）该菌株的发酵液对温度和酸碱具有极好的
稳定性，其发酵液对尖孢炭疽病菌的抑制活性仅在
１２１℃处理３０ｍｉｎ后大幅度下降，而在其他温度和
ｐＨ条件下活性变化不大。
４）由于该内生链霉菌的发酵液对６株供试病
原真菌表现出不同程度的活性，说明，该菌的抑菌谱
有一定的范围；该菌的无菌发酵液在经过不同温度
和酸碱处理一段时间后仍能保持抑菌活性，说明，该
菌产生的抗菌物质是一类对温度和酸碱有一定稳定
性的物质，这也间接证明了该内生链霉菌具有潜在
的开发应用价值。目前对放线菌ＦＴＹ２的研究还
处于开始阶段，因此，对该菌活性产物的分离及结构
鉴定还有待进一步研究验证。
［参 考 文 献］
［１］ 贾 栗，陈疏影，翟永功，等．近年国内外植物内生菌
产生物活性物质的研究进展［Ｊ］．中草药，２００７，３８
（１１）：１７５０－１７５４．
［２］ Ｈｅｒｒｅ　Ｅ　Ａ，Ｍｅｊｉａ　Ｌ　Ｃ，Ｋｙｌｏ　Ｄ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ
ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ａｎｔｉ－ｐａｔｈｏｇｅｎ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｒｏｐｉｃａｌ　ｆｕｇａｌ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｅ［Ｊ］．Ｅｃｏｌｏｇｙ，２００７，８８
（３）：５５０－５５８．
［３］ 李 端，郭利伟，郭伟云，等．抗肿瘤药用植物及其内
生菌活性代谢产物的研究［Ｊ］．安徽农业科学，２００９，
３７（１６）：７５０８－７５０９．
［４］ 陈雪英，都晓伟，李 滨．内生菌与药用植物活性成分
相关性研究进展［Ｊ］．国外医药：植物药分册，２００８，２３
（２）：４７－５２．
［５］ 石晶盈，陈维信，刘爱媛．植物内生菌及其防治植物病
害的研究进展［Ｊ］．生态学报，２００６，２６（７）：２３９５－
２４０１．
［６］ 黎万奎，胡之璧．内生菌与天然药物ＣＪＮＭ［Ｊ］．中国
天然药物，２００５，３（４）：１９３－１９９．
［７］ 白志强，林秀萍，刘永宏．内生拟盘多毛孢菌化学成分
研究进展［Ｊ］．天然产物研究与开发，２０１３（２５）：７０６－
７１５，６９７．
［８］ 杨春平，陈华保，吴文君，等．植物内生真菌次生代谢
产物的多样性及潜在应用价值［Ｊ］．西北农业学报，
２００５，１４（２）：１２６－１３２．
［９］ Ｓｔｉｅｒｌｅ　Ａ，Ｓｔｒｏｂｅｌ　Ｇ，Ｓｔｉｅｒｌｅ　Ｄ．Ｔａｘｏｌ　ａｎｄ　ｔａｘａｎｅ
·４０１·
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　贵 州 农 业 科 学
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　Ｔａｘｏｍｙｃｅｓ　ａｎｄｒｅａｎａｅ，ａｎ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
ｆｕｎｇｕｓ　ｏｆ　Ｐａｉｆｉｃ　ｙｅｗ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，２６０（５１０２）：
２１４－２１６．
［１０］ Ｒｉｃｈａｒｄ　Ｓｔｏｎｅ．Ｐｒｏｆｉｌｅ　ｇａｒｙ　ｓｔｒｏｂｅｌ：ｂｉｏｌｏｇｉｓｔ　ｇｅｔｓ
ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｓｋｉｎ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ－ａｎｄ　ｐｅｅｒｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，
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［１１］ 易官美，邱迎君．榧树的研究现状与展望［Ｊ］．资源开
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［１２］ 马长乐，胥 辉，白 琼，等．ＩＣＰ－ＯＥＳ法测定云南榧
树不同部位的矿质元素［Ｊ］．东北林业大学学报，
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（责任编辑：王　海
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（上接第１０１页）
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（责任编辑：聂克艳）
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　谢　津 等　云南榧内生放线菌ＦＴＹ２的分子鉴定及其抑菌活性
　ＸＩＥ　Ｊｉｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ　ＦＴＹ２Ｓｔｒａｉｎ　Ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍＴｏｒｒｅｙａ　Ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ