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荷包花离体繁殖研究初报



全 文 :北方园艺 2009(5):101 ~ 103 ·研究简报 ·
作者简介:周恒(1969-),女 ,贵州松桃人, 硕士, 副教授 ,现从事园
艺及植物组织培养方面的教学研究及科研工作。 E-mail:gzzhou-
heng@163.com。
收稿日期:2008-12-26
荷 包 花 离 体 繁 殖 研 究 初 报
周  恒
(铜仁职业技术学院生物工程系 ,贵州铜仁 554300)
  摘 要:植物激素的种类和不同的组合配比对荷包花的离体繁殖有很大影响。结果表明:诱
导芽阶段以 MS+BA 2 mg/L+IBA 0.2 mg/L 效果较好;丛生芽增殖阶段以 MS+BA 2 mg/ L+
NAA 0.1mg/L 较好;而培养基中低浓度的无机盐有利于生根 ,故1/2MS+IBA 1mg/L 有较好的
生根效果。试管苗移栽以腐殖土∶蛭石=2∶1的栽培基质效果较好。
关键词:植物激素;荷包花;离体繁殖
中图分类号:S 681.903.6 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)05-0101-03
  荷包花又名蒲包花 ,为玄参科蒲包花属的 1 a生草
本花卉 ,原产墨西哥、秘鲁 、智利等地。荷包花色彩艳
丽、花型奇特。其花具二唇花冠 ,上唇前伸 ,下唇膨胀成
荷包状而向下弯曲 ,具有较高的观赏价值 ,是良好的温
室盆花。目前 ,荷包花主要的繁殖方式为种子繁殖 ,但
F1 代种子价格昂贵 ,且种子细小、发芽率低。因此 ,采用
组培方法大量繁殖种性一致的种苗 ,对降低成本 、加快
育苗进程具有重要的生产意义。
1 材料
1.1 供试材料
以荷包花当年生新发幼芽为外植体。
1.2 培养基
初代培养基:MS基本培养基 ,附加不同浓度的 BA 、
KT 、NAA 、IBA 等植物激素 ,蔗糖浓度 3%。增殖培养
基:MS 基本培养基 ,附加不同浓度的 BA 、KT 、NAA 、
IBA等植物激素 ,蔗糖浓度 3%。生根培养基:1/2MS培
养基 ,附加不同浓度的生长素 ,蔗糖浓度 2%。以上培养
基均附加 0.7%琼脂 ,pH 5.2 ~ 5.4。
2 方法
2.1 外植体的选取 、灭菌及初代培养
选生长健康的植株 ,剪取约 1 ~ 2 cm 的带芽茎段 ,
用洗衣粉水浸泡几分钟后流水冲洗干净 ,置于超净台
上 ,用75%酒精消毒30~ 60 s ,无菌水冲洗3次。再置于
0.1%HgCl2(加数滴吐温)中处理 15 min ,无菌水冲洗
4~ 6次。然后接种于含有不同激素组合的初代培养基
上。培养条件为:温度(25±2)℃,光照强度 1 500 ~
2 000 lx ,光照时间 12 h/d。
2.2 继代增殖培养
在初代培养基上诱导分化出芽后 ,将诱导产生的丛
生芽分割成小丛 ,转接到不同激素组合的增殖培养基上
使其增殖。此后 ,每 20 d继代 1次 ,对再生芽进行扩繁。
培养条件与初代培养相同。
2.3 生根和移栽
将增殖后所得的长约 1 cm 的增殖苗切下 ,接种于
不同的生根培养基中 ,培养条件如2.1 ,10 d后统计生根
结果。
将生长健壮的试管苗(根长大于 1 cm)置培养室光
照充足处并揭去封口膜 ,练苗 3 d后即可进行移栽。移
栽时 ,彻底清洗试管苗根部残留的培养基 ,将小苗种植
于腐殖土∶蛭石=2∶1的栽培基质中 ,渗透水后用薄膜
覆盖其上 ,1周后揭膜并移至光照充足处。
3 结果与分析
3.1 初代培养(芽的诱导)
3.1.1 细胞分裂素对芽分化的影响 将幼芽外植体接
种到 IBA 0.2 mg/ L ,含有不同浓度的 6 ~ BA 、KT 组合
的 MS培养基上。1周后茎尖开始生长 ,培养 45 d后开
始形成丛生芽。从表 1看出 ,当 BA达到2 mg/ L 时 ,出
芽效果最好 ,分化率最高;而 KT 的分化率明显低于
IBA 。
  表 1 细胞分裂素对幼芽外植体分化芽的影响
细胞分裂素
种类 浓度/mg·L-1
接种外植体数
/个
出芽外植体数
/个
分化率
/ %
BA 0 30 0 0
1 30 15 50
2 30 20 66.7
3 30 10 33.3
KT 0 30 0 0
1 30 2 6.7
2 30 5 16.7
3 30 7 23.3
  注:各组合均附加 IBA 0.2 mg/ L。
101
·研究简报· 北方园艺 2009(5):101~ 103
3.1.2 生长素对芽分化的影响 将幼芽外植体接种到
设定 BA 2 mg/L , IBA 和 NAA 分别为 0 、0.2、0.4 、
0.8 mg/L 的 MS培养基上 ,培养 3个月。结果发现(表
2), IBA对芽的诱导作用比 NAA 稍强 ,而其浓度为 0.2
mg/ L 时效果最好。结果表明 ,芽诱导的最适激素组合
为BA 2 mg/L+IBA 0.2 mg/ L。
  表 2 生长素对幼芽外植体分化芽的影响
生长素
种类 浓度/mg·L-1
接种外植体数
/个
出芽外植体数
/个
分化率
/ %
IBA 0 30 0 0
0.2 30 20 66.7
0.4 30 5 16.7
0.8 30 1 3.3
NAA 0 30 0 0
0.2 30 18 60
0.4 30 3 10
0.8 30 1 3.3
  注:各组合均附加 BA 2 mg/ L。
3.2 继代增殖(芽的增殖)
3.2.1 细胞分裂素对芽增殖的影响 选生长一致的小
芽分别接种于含 1、2 、3 mg/L 的 BA或 KT 并附加 0.1
mg/ L NAA的 MS培养基上 ,3周后进行统计 ,结果表明
(表 3),KT 增殖系数明显低于 BA;BA 为 2 mg/L 时增
殖率最大。当 BA浓度超过 2 mg/L 时 ,芽的增殖和生
长均受到抑制。
  表 3 细胞分裂素对芽增殖的影响
种类 浓度/mg·L-1 接种芽数/个 增殖系数
BA 1 30 5.8
2 30 6.7
5 30 4.2
KT 1 30 2.0
2 30 3.29
5 30 2.8
  注:各组合均附加 NAA 0.1 mg/ L。
  表 4 生长素种类和浓度对芽增殖的影响
种类 浓度/mg·L-1 接种芽数/个 增殖系数 平均苗高/cm 芽形态
NAA 0 30 2.70 1.3 正常
0.1 30 6.70 1.5~ 1.8 正常
0.3 30 4.57 2.0 正常
0.5 30 3.86 1.0~ 1.3 正常
IBA 0 30 2.30 1.2 正常
0.1 30 5.64 2.4 叶柄过长 、柔软
0.3 30 3.40 1.4 正常
0.5 30 2.70 1.1 正常
  注:每组合均附加 BA 2 mg/ L。
3.2.2 生长素对芽增殖的影响 将单个不定芽分别接
种于含 BA 2 mg/L 和不同浓度的 NAA 、IBA的 MS培
养基上 ,培养 2周后统计结果(表 4)。结果表明 , NAA
在增殖系数 、芽苗形态上都优于 IBA;在 NAA 为 0.1
mg/ L时 ,增殖芽数多且生长健壮;而当培养基中的不加
生长素或其浓度过高时 ,则芽增殖系数较低 ,影响了芽
苗的增殖和生长。结果表明 ,芽增殖的最适激素组合为
BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L。
3.3 生根诱导及移栽
3.3.1 生长素种类及浓度对诱根的影响 将继代增殖
过程中产生的形态完整小芽(高于1 cm)从基部切下(不
带愈伤组织)后转移至去掉细胞分裂素的培养基上生
根 ,在以1/2MS为基本培养基 ,附加 NAA或 IBA 生根
后的结果来看(表 5), IBA优于NAA。在 IBA的不同浓
度水平中 ,以1 mg/L 时最好。
  表 5 生长素种类和浓度对诱导根的影响
生长素 浓度/mg·L-1
接种芽数
/个
生根率
/ %
平均每株
根数/条
根长
/cm
NAA 0.1 30 86 5.1 1~ 2
0.2 30 78 2.7 1~ 2
0.5 30 73 1.9 1~ 2
IBA 0.2 30 81 3.8 3
0.5 30 87 5.2 2.8
1.0 30 98 7.6 <1
  注:接种后 10 d统计结果。
3.3.2 试管苗移栽 当小芽转入生根培养基后 20 d左
右 ,每株生根 4 ~ 6条 ,根系长达 1 ~ 2 cm 时移栽最好。
移栽前在室温条件下开瓶练苗 2 ~ 3 d。把试管苗从瓶
中取出 ,用清水洗净根部粘附的培养基 ,除去基部黄叶 ,
并在 500 mg/kg 的多菌灵液中浸泡 2 min后移到腐殖
土∶蛭石=2∶1的栽培基质中 ,保持温度为 26℃左右 ,
湿度为90%~ 95%;1 ~ 2周后 ,将湿度降为70%~ 80%,
成活率达 90%以上。
4 讨论
该试验探讨了植物激素对荷包花离体繁殖的影响 ,
为荷包花的快速繁殖提供了一些有效依据。试验表明 ,
激素的种类极其比例在荷包花的组织培养中有很大作
用。在芽诱导 、增殖培养及生根阶段 ,分别筛选出了合
适的培养基。但是 ,在试验中也发现在荷包花培养的初
始阶段外植体基部易出现褐变现象;还有就是其试管苗
在瓶内易分化花芽而使得繁殖系数降低 ,试管苗质量下
降。造成这些现象的原因及解决办法尚有待于进一步
研究。
参考文献
[ 1]  赵秀芳.荷包花的组织培养技术[ J] .林业实用技术 ,2005(1):40-41.
[ 2]  龙云铭 ,李洪林 ,杨波.荷包花的组织培养[ J] .植物生理学通讯,
2004 ,40(1):58.
[ 3]  章玉平.不同激素配比对荷包花组织培养的影响[ J] .安徽农业科学 ,
2007 ,35(15):4440-4441.
[ 4]  熊丽 ,吴丽芳.观赏花卉的组织培养与大规模生产[ M] .北京:化学工
业出版社 ,2002.
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北方园艺 2009(5):103 ~ 105 ·研究简报 ·
野菊花蕾的组培与快繁技术研究
韩  磊 , 吕  鑫 , 张文静 , 杨 小霁
(潍坊职业学院,山东潍坊 261041)
  摘 要:利用组织培养的方法 ,首次以野菊花蕾作为外植体 ,借鉴前人组织培养观赏菊花的
经验 ,找到一种使野菊能够快速增殖的方法。以MS为基本培养基 ,添加 BA 1.0 mg/L 和NAA
0.2 mg/L作为外植体的分化与继代培养基 ,得到愈伤组织和大量的丛生芽;用MS培养基进行增
殖培养;用1/2MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L 进行生根培养 ,生根率在 98%以上。最后通
过驯化练苗得到大量的野菊再生植株。
关键词:野菊;花蕾;组织培养
中图分类号:S 682.1+1 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)05-0103-03
  野菊为菊科植物 ,又名山菊花 、路边菊 、野黄菊花
等。易栽培 ,田边地头 、房前屋后皆可种植。野菊全草
可供药用 ,其叶和嫩茎无异味 ,可食用[ 1] 。野菊花为野
菊、北野菊或岩香菊的头状花序 ,直径2 ~ 2.5 cm ,排成聚
伞状;总苞半球形 ,总苞片 4层 ,边缘膜质 ,外层椭圆形[ 2] ;
花小 ,黄色 ,边缘舌状 ,先端3浅裂 ,雌性;中央为管状花 ,
先端5裂 ,两性。花期9~ 11月 ,果期10~ 11月[ 3] 。
野菊花中含有类黄酮 、挥发油、二萜类和酚酸类等
多种化学成分 ,主要化学成分为黄酮类化合物和挥发
油。野菊花总黄酮具有较强的抗炎作用 ,也是治疗高血
压和冠心病的主要有效成分。其中木犀草素具有明显的
抗菌作用 ,蒙花苷具有抗菌活性 ,保肝作用 ,并对慢性气管
炎有一定疗效[ 2, 4] 。野菊花醇提浸膏的水溶液对常见的浅
部真菌有明显的抑制作用。另外 ,野菊花还具有抗氧化作
用 ,野菊花多糖具有清除活性氧自由基的作用[ 5-7] 。
第一作者简介:韩磊(1969-),女 ,副教授, 现主要从事植物遗传与
育种研究工作。E-mail:hanlihanlei@163.com。
收稿日期:2008-12-20
  目前 ,野菊花临床多用于治疗各种急慢性感染性疾
病(如急慢性呼吸道感染、泌尿生殖系统感染 、急性乳腺
炎 、急性淋巴管炎以及急性感染性肝炎等疾病),亦用于
治疗肿瘤 、高血压病和高血脂症以及对感冒 、流行性脑
膜炎的预防。此外 ,野菊花煎液口服或外用治疗皮肤痈
毒疖肿疗效显著[ 2, 8] 。近年来 ,临床研究表明野菊花粗
制剂对慢性盆腔炎 、盆腔结核及前列腺炎等均有较好疗
效[ 9-10] 。野菊花还能治疗头晕目眩 、结膜炎 、腮腺炎 、肠
炎 、痔血 、无名肿毒 、脚癣等。对人体心肺和肝肾功能无
明显影响 ,对黏膜无刺激性 ,除口服偶有胃部不适 、食欲
减退等症状外 ,临床不良反应较少。慢性给药亦无蓄积
中毒现象[ 2] 。
野菊花的加工产品有野菊花注射液 、野菊花口服
液 、野菊花浸膏 、野菊花保健茶 、野菊花保健饮料 、野菊
花洗发香波等[ 5] 。
近年来 ,随着野菊花产品的开发 ,通过野生野菊的
自然繁殖 ,已经远远不能满足人们的需要。为了在短时
间内满足市场对野菊花的需求 ,该试验首次尝试对野菊
进行组织培养 ,以确定组织培养是否适合野菊的快繁。
Reports of The Dicentra Pusilla Exsomatize Reproduction
ZHOU Heng
(Tong ren Vocational and Technical Co llege , Tongren , Guizhou 554300 , China)
Abstract:The plant hormone type and the different combination allocated proportion have the very tremendous influence
to Dicentra pusil la s exsomatize reproduction.The test result indicated that , the induction bud stage induced by the
MS+BA 2 mg/L+IBA 0.2 mg/L w as the best;the bud multiplication stage induced by MS+BA 2 mg/L+NAA 0.1
mg/ L grow s thickly;But in the culture medium the low concentration inorganic salt was advantageous in taking root ,
therefore 1/2MS+IBA 1 mg/L had the best effect for taking roots.The test tube seedling transplants by the humus
soil∶Vermiculite =2∶1 cultivation matrix effect was good.
Keywords:Plant hormone;Dicentra pusi lla;Exsomatize reproduction
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