全 文 ：四川师范学院学报1 9 91 ;1 2(4) : 3 58 一 6 31
Jo r a u n】 S ieh ua n Te aeh e 招 Co l leg e
落蓝的组织培养 `
余绍华
( 生物系)
【摘要】 本文报道 了获蓝的纽织培养. 探讨了外植休郑位 、 外源植物激素的种类 、 浓度等
对培养效果的影响. 初步筛选出较好组合的培养基是: 施十 6一 B Alg m/ L . 十 IB Alg m/ L . 简介了藉蓝试管苗移裁的才法.
关键词 藉蓝 ,
中图分类号
组织培养 , 试管苗 , 植物激素 , 培养基 .
Q 9 4 4
.
6
落蓝 口反“ . `` 比叮翻 1, . ) 又名北板蓝 , 十字花科二年生草本植物 , 其根 (板蓝根 ) 、 叶
(大青叶 ) 均可药用 . 具有清热解毒 、 凉血 的作用 , 对于医治发烧 、 发斑 、 风湿感冒 、 咽喉
肿烂 、 流行性乙型脑炎 、 肝炎 、 腮腺炎等多种疾病 , 均有较好的疗效 .
落蓝属于有性繁殖的植物 , 利用营养器官进行组织培养 , 对于该药的育种及加速 良种的
无性繁殖 , 均具有一定的作用 .
材料和方法
材料 落蓝种子 由四川省中医药研究院南川药物种植研究所提供 . 外植体取自该药盆
栽幼苗的嫩叶 、 叶柄和嫩茎 .
方法 接种前将外植体用自来水冲洗干净 , 再用 0 . 2%的升汞水溶液消毒 7一 1 o m in , 无
菌水冲洗 5 次 , 然后在无菌条件下将叶片剪成 3 X 3mm Z 的小块 ,接入装有固体培养基的试管
中 , 室内培养 . 基本培养基为 sM , 分别附加不同种类 、 不同浓度的植物激素 (6 一BA 、 m A 、
N A A
、
2
.
4一 D 等 ) 进行对比试验 . 光照时间每天 8一 1 h0 , 培养温度 25 一 2 7℃ .
2 结果与讨论
外植体接种后 , d5 开始膨大 , 颜色逐渐由绿变为淡黄色 . 1 0d 左右在切 口处开始产生愈
伤组织 , 1 d5 开始从愈伤组织的边缘分化出芽 , 2 5d 后在一部分芽的基部分化出根 , 形成再
本文 坤91 年 2 月 _ 2` _ 旦收到 · . _
* 省科委资助的应用基础研咒课题
9 3 5
生植株 · 愈伤组织 、 芽和根的诱导率与外植体的部位 、 外源植物激素的种类 、 浓度及激素的
配比有着密切的关系 .
2
.
1不同部位外植体诱导效果的差异
为了掌握落蓝幼苗的叶片 、 叶柄及茎段的培养效果 , 我们将上述外植体分别接种在相同
的培养基上培养 , 结果见表 1 .
表 l 不同部位外植体的培养效果
愈伤组织的诱导
外植体部位 接种数
块数 占接种数的 ( % ) 芽数
芽的分化
占接种数的 (% )
嫩 叶 (块 ) 1 38 9 3 6 7 . 4 8 0 5 7 , 9
J口`nU叶 柄 (小段 )
嫩 茎 (小段 )
90
4 0
注 : 培养基为 M s + 6一 B ^ l m g / L + IB A O· s m g / L
从表 1 中看出 , 不同部位的外植体对愈伤组织的诱导和芽的分化效果差异很大 . 嫩叶的
效果最好 , 叶柄和嫩茎的效果都很差 . 由此看来 , 落蓝的组织培养 , 外植体以嫩叶为好 .
2
.
2 细胞分裂素对培养效果的影响
在组织培养中 , 常用的细胞分裂素是 zT 、 6一 B A 、 K T . z T 的效果最好 , 6一BA 次之 , K T 较
差 , 但由于 zT 的价格太贵 ,所以我们选用了 6一 B A ,
为了摸索不同浓度 6 一BA 对落蓝培养效果的影响 , 我们在基本培养基 (M s ) 、 附加生长
素 ( BI A O . sm g / L )和外植体 (嫩叶 )相同的条件下 ,加入不同浓度的 6一 B A ,结果见表 2 .
表 2 不同浓度 6一 B A 的培养效果
6一 BA 浓度
( m s / L )
根的分化
接种数
块数
愈伤组织
占接种数的 (环 ) 芽数
芽的分化
占接种数的 ( % ) 苗数 占接种数的 ( % )
0
.
2 5 13 6 1 3 6 10 0 2 5 1 8
.
4 2 5 1 8
.
4
1 44 1 4 4 1 0 0 7 5 5 2
,
1
1 5 2 1 2 4 8 1
.
6 8 6 5 6
.
5
19
.
4
1 14 6 7 58
.
7
2 1
I 2
1 3
。
8
1 0
.
5
5 1 2 4 3 5 2 8
.
2 3 2
.
4 1 0
.
8
从表 2 看出 , 在加入不同浓度 6一 B A 的 5 种培养基中 ,效果很不一样 . 单从愈伤组织来
看 , 6一BA 的浓度为 0
.
sm g / L 或略低于这个浓度时 , 效果都好 ,诱导率可达 1 0 % . 超过这个
浓度时 ,诱导率逐渐降低 ; 但从芽的分化来看 , 6一 B A 的浓度在 Zm g / L 的范围内 , 分化率随 6
3 6 0
一 B A 浓度的增大而逐渐升高 , 当 6一 BA 大于这个浓度时 , 则分化率很快降低 ; 而根的分化 ,
则要求较低浓度的 6一 B A , 其浓度为 0 . s m g / L 时最好 .
由此看来 , 6 一 B A 浓度对愈伤组织 、 芽和根的分化都有明显的影响 . 芽的分化要求的浓
度较高 , 而愈伤组织和根的分化所要求的浓度较低 . 三者的效果综合考虑 , 以 6一 B A 的浓度
为 1 m g / L 较为合适 .
2
.
3 生长素对培养效果的影响
( l) 不同生长素的培养效果
我们在外植体 (嫩叶 ) 、 基本培养基 ( sM ) 、 附加细胞分裂素 (6 一 BA I . s m g / L )等条件相同
的情况下 ,分别加入浓度相同 (0 . sm g / )L 而种类不同的生长素 ,结果如表 3 .
表 3 不同生长紊的培养效果
生长素种类
( 0
.
s m盯 L )
愈伤组织
接种数
块数 占接种数的 (写 ) 芽数 占接种数的 ( % ) 出根芽数 占接种数的 ( % )
I B A 1 4 6 1 4 6 1 00 1 08 7 3
.
9 3 8 2 6
N冉A 1 5 7 1 57 1 00 1 51 9 6 . 1 0 0
2
.
4一 D 1 7 1 1 7 1 1 0 0 0 0 0 0
从表 3 中看出 , 3 种生长素对荻蓝培养的效果具有明显的区别 . 虽然单从愈伤组织来看
没有差异 , 诱导率均为 1 0 % , 但从芽和根的分化来看则很不相同 , BI A 的效果最好 , 芽和根
都能分化出来 , 芽的分化率为 73 . 5% , 根的分化率为 26 % . N A A 只有芽的分化 , 而无根的生
长 . 2 . 4一 D 效果最差 , 芽和根均未分化出来 . 所以 , 附加生长素用 扭A 的效果最好 .
(2 )不同浓度生长素 (m A )培养效果的差异
在 BI A 不同浓度的 4种培养基中 ,接入藉蓝叶块观察培养效果 ,结果见表 4 .
表 4 不同浓度生长素 (m A )的培养效果
I B A 浓度
( m s / L )
愈伤组织 芽
接种数
块数 占接种数的 (写 ) 芽数 占接种数的 ( % ) 出根芽数 占接种数的 ( % )
65
.
5
8 6
.
7
5 3
。
1
5 1
。
7
1 2
.
1
4 6
。
6
肠2835019052ōU)2é”nU曰hOJó城,州川内O`,自峨` .几0
。
5
l
2
3
14 2 10 0
90 7 2
。
6
2 4
.
6
注 : 墓本培养基为 aM ,附加细饱分裂素为 6一 B^ 1毗 / L
表 峨中看出 ,撇 浓度对藉蓝培养效果具有明显的影响 . 愈伤组织和根的分化要求皿的浓度较高 , 浓度在 l m g / L 的范围内 , 分化率随 理叭 浓度的增大而提高 ;而芽的分化则相反 ,
分化率随 BI A 浓度的增大而降低 , 当 I BA 浓度达到 3m g / L 时 , 芽的分化率为零 . 综合 3 方面
的效果 ,坦A 的浓度为 lmg / L 时较为合适 .
2
.
4 试管苗的移栽
由于落蓝的试管苗很细嫩 ,直接移栽入土不易成活 , 最好采用逐步过渡法 . 首先打开试
管棉塞炼苗 2~ 3d ,逐渐适应大气环境 ,然后将试管苗小心地从试管中取出 , 用温热水洗去根
上的培养基 , 移入花盆内含有培养液的沙土中 ,上面覆盖薄膜 , 置于培养室内培养 10 多天
后 ,再将花盆移入室外数天才移栽于适宜的土壤中 . 注意保湿 、 控温 , 大部分试管苗都可移栽
成活 .
综上所述 ,落蓝组织培养的效果与外植体的部位 、 激素的种类 、 浓度及配比等都有着密
切的关系 ,将各种效果综合起来分析 , 一个较好组合的培养基为 : M s + 6 一 BA l m g / L + m A
l
gm /
L
. 外植体则以嫩叶为好 ·
有农科院蚕桑所何伟同志参加 了部分工作 , 我院邓佑齐同志和南川药物种植研究所谢货明同志给予大
力支持 ,谈此致谢 1
参 考 文 献
余绍华等· 补骨脂离体培养研究 . 四川师范学院学报 (自) , 19 89 ; 1。(3 ) : 253 一 257
余绍华等· 防风的组织培养 . 植物生理学通讯 , 19 85 ; 5 : 39 ~ 40
w
· 巴尔茨 , .E 赖因哈德 , M · H 岑克主编 ,夏镇澳等译 . 植物组织培养及其在生物技术上的应
用 . 科技出版社 , 1 9 a 3 ; 2 53~ 2 5 7
陈正华主编· 木本植物组织培养及其应用 . 高等教育出版社 , 19 86 ; 2召l一 263
四川省中医药研究院南充药物种植研究所等编 . 四川中药材栽培技术. 重庆出版社 , 1 9 86 ; 33
~ 33 6
T I S S t JE C U L T U R E O F IS A T IS T IN C I ,O R IA L
.
Y U Sha ho U a
(iB ul o g y eD闪 r tme nt )
月昭 T R A C丁
T ll e P r o c e s s o f ti s s u e e u l t u r e of l劝 it s it n tC o r la 户i s er op r tde . T ll e au ht or st du ide ht e e f -
f e c t o f t h e 脚冷 i tion o f ht e e xP lan t , ht e d立f f七r en t k i n d s a n d e o n e e n tr a it o n o f the lP ly t o h o r -
m o n e i n e u l t u r e
.
T h e g以劝 co m 户招 l t ion o f m de i!un w as Pler 宜而 n ar il y leS e c tde : M s 十 6一
B A l m g / L + m A l m g / L
.
hT
e
me ht od
o f lP a n it e st t r an s p lan at ion w as b
r i e f l y in t r od u e c d
·
K e y w o r山 IaS ti s t i n e ot r i a L . , t 1S u e e u l t ur e , lP an it e t ,曲y t o h o r n l o en , m ed i u m