全 文 ：无刺枸骨快速繁殖技术研究 总第 1 6 9 期
无刺枸骨快速繁殖技术研究＊
简大为(1)　范淑芳(2)　孙爱红(2)　左雪枝(2)　易庆平(2)
(1 .荆门市林业局　荆门　4 4 8 0 0 0;2.荆楚理工学院　荆门　4 4 8 0 0 0)
摘　要:无刺枸骨具有较高的生态和观赏价值。笔者以带芽新梢茎段为外植体 ,研究了培养基
配方 、培养方式以及移栽和扦插基质等对其组培快繁的影响。结果表明:无刺枸骨芽诱导和增
殖的最佳培养基为 MS(或 B5)+BA3.0 mg/L+IBA0.1 mg/L (或 NAA0 .1 mg/L)+3.0 %蔗
糖+0.7 %琼脂;生根培养则以试管外扦插生根为好 ,其基质配比为河沙:壤土=5 :5 。
关键词:无刺枸骨;快速繁殖;组织培养
Study on Rapid Propagation of Ilex cornuta Lindl.ex
Part.var.fortunei(Lindl)S.Y.Hu.
Jian Dawe i(1)　Fan Shufang(2)　Sun Aihong(2)　Z uo Xuezh i(2)　Yi Qingping(2)
(1.Jingmen City Forestry Bureau in Hubei Province 　Jingmen　448000;2.Jingchu University of Technology　Jingmen　448000)
Abstract:I lex cornuta Lindl.ex Pa rt.var.f or tune i(Lindl)S.Y.Hu.has the high ecologic al and ornamental
value.The experiment using new shoot and stem with buds as explants , the ef fect on r apid propagation such
as culture medium formula , cultur e method , tr ansplanting and cutting matr ix and so on.The results showed
that the buds induction and best prolife ra tion medium was in MS or B5 medium with BA3.0 mg/ L+IBA0.1
mg/ L or NAA0.1 mg/ L +3.0%sucrose + 0.7% aga r;the bet te r r ooting cultur e was cutt age outside the
tube , and the matr ix r atio of sand and loam soil was 5 to 5.
Key words:I lex cornuta Lindl.ex Par t.var.f or tunei(Lindl)S.Y.Hu.;r apid propagation;tissue cultur e
　　无刺枸骨 Ilex cornuta Lindl.ex Part.var.for-
tunei(Lindl)S.Y.Hu.为冬青科 Aqui f oliaceae 冬
青属 I lex L.植物 ,是常见枸骨的 1个变种 ,也是我
国野生资源中新开发利用的新品种。无刺枸骨寿命
长 ,枝繁叶茂 ,树冠紧凑 ,叶革质坚硬且光亮 ,叶色浓
绿 ,四季常青;一般 3 ～ 4月开花 ,花开时满树黄花;
果实由青至深秋转红 ,秋季串串红果满挂 ,鲜红艳
丽 ,且果实经冬不落至来年春季 ,具有较高的观赏价
值。此外 ,该植物生长快 ,特别3 a苗后生长较快 ,且
其适应性较强 ,耐高温 、耐寒 、耐涝 、耐旱 、耐修剪 ,移
栽成活率较高 ,耐粗放管理 ,经修枝可成球形 ,且较
常见枸骨易于造型 ,是制作盆景的优良植物材料 ,还
可作绿化色块或防护林用 。无刺枸骨观叶 、观花 、观
果 、观树形俱佳 ,已成为目前园林绿化上较高档的品
种之一 ,是目前园林绿化中重点推出的新品种 ,具有
较好的市场前景。但该植物种子多数空壳或不育 ,
故种子繁殖比较困难 ,目前仅能进行扦插繁殖 ,而扦
插繁殖成活率也较低 ,难以满足市场的需求。利用
植物组织培养技术对无刺枸骨进行无性快繁的研
究 ,可为实现工厂化育苗以满足日益增大的市场需
求奠定技术基础 ,解决目前市场上对该植物的供需
矛盾 ,为市场提供大量的优质种苗。
　材料与方法
笔者采用无刺枸骨带顶芽或侧芽的新梢茎段
作为外植体 ,外植体的采取主要于 4 月中旬和 10
月上旬进行 ,从荆门市科技园及其他合作苗圃的植
株上获得 。
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＊ 收稿日期:2011-04-11
2 0 1 1.3 湖　北　林　业　科　技
1.1　芽增殖培养基的确定
在带芽茎段的培养中分别以高盐平衡培养基
MS 、富硝态氮培养基 B5 、中盐培养基 Nitch和低盐
培养基White 为基本培养基 ,进行比较以确定最
佳的基本培养基 。其中生长调节剂 BA3.0 mg/L ,
IBA0.1 mg/ L ,蔗糖 3.0%,琼脂 0.7%,每处理 10
瓶 ,每瓶 1芽 ,重复 3次。
同时 ,在带芽茎段的培养中采用 BA 0.5 , 1.0 ,
2.0 , 3.0 mg/L 4 个水平与 IBA0.1 mg/L 或
NAA0.1 mg/L 配合作为生长调节剂诱导芽的形
成与增殖 ,按完全实验法进行试验处理 ,其中基本
培养基 MS , 蔗糖 3.0%, 琼脂 0.7%。每处理 10
瓶 ,每瓶 1芽 ,重复 3次。
1.2　生根培养基的确定
当芽增殖到一定数量时 ,切取 2 ～ 3 cm高的生
长健壮的试管苗作为材料 ,采用 IBA0 , 0.5 , 1.0 ,
2.0 mg/L 4个水平进行生根培养 ,其中基本培养
基1/2MS ,蔗糖3.0%,琼脂 0.7%。每处理15瓶 ,
每瓶 1个芽 ,重复 3次。
1.3　试管苗的驯化移栽
当试管苗根系长至 1 cm 左右时 ,将生根苗取
出培养室 ,松动封口并在自然环境中放置3 d ,揭掉
封口后在培养基上加一层清水 ,于第 7天进行清洗
移栽 ,移栽后注意保湿透气。移栽基质主要采用珍
珠岩(5份)+腐殖土(5 份)、河沙(5 份)+腐殖土
(5份)和河沙(5份)+壤土(5 份),在移栽前按比
例混配好 ,并采用 1%高锰酸钾进行消毒处理后进
行试管苗的移栽 。每处理 5株 ,重复 3次。
1.4　试管苗的扦插生根
因无刺枸骨试管苗在试管内生根比较困难 ,且
生根率不高 ,所以取 2 ～ 3 cm 高的生长健壮的试管
苗进行驯化扦插 ,驯化过程及基质处理同驯化移
栽 ,扦插前采用 1/2M S+IBA0.5 mg/ L 的培养基
预培养 20 d。每处理 5株 ,重复 3次。
　结果与分析
本研究中的所有数据均采用 Excel 2003进行
统计分析 ,并运用 SAS 9.0 软件进行方差分析及
LSD最小显著性检验分析 。
2.1　芽增殖培养基的确定
2.1.1　芽增殖培养中基本培养基的确定
接种约60 d后 , 4种基本培养基对继代培养的
影响结果见表 1 ,其中增殖倍数为平均芽高与平均
芽数的乘积。
由表1可知:基本培养基对芽的增殖倍数存在显
著影响 ,其中高盐平衡培养基MS 、富硝态氮培养基B5
对芽的增殖比较有利 ,增殖倍数可达到 3左右。
表 1　基本培养基对芽增殖的影响结果表
基本培养基 芽的增殖倍数
1 2 3 平均 差异显著性
MS 3.19 3.13 3.00 3.11 a
B5 2.97 2.62 3.02 2.87 a
N itch 2.25 1.94 2.10 2.10 b
White 2.23 1.98 2.01 2.07 b
2.1.2　芽增殖培养中生长调节剂的确定
接种约 60 d 后 ,生长调节剂对继代培养的影
响结果见表 2 ,3 ,其中增殖倍数为平均芽高与平均
芽数的乘积。
表 2　生长调节剂对芽增殖的影响结果表
处理 细胞分裂素/(mg.L -1)
生长素/
(mg.L-1)
芽的增殖倍数
1 2 3 平均 差异显著性
1 BA0.5 IBA0.1 1.83 2.04 2.27 2.05 c
2 BA1.0 IBA0.1 2.44 1.96 2.17 2.19 bc
3 BA2.0 IBA0.1 2.48 2.5 2.36 2.45 b
4 BA3.0 IBA0.1 2.88 3.28 2.83 3.00 a
5 BA0.5 NAA0.1 2.22 1.89 2.00 2.04 c
6 BA1.0 NAA0.1 2.38 2.11 2.28 2.26 bc
7 BA2.0 NAA0.1 2.21 2.53 2.36 2.37 b
8 BA3.0 NAA0.1 2.86 3.04 2.8 2.90 a
注:a-c为 P=0.05 时最小差异显著性检验结果(LSD),相同的字母之间差异不显著 ,不同字母之间差异显著。
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无刺枸骨快速繁殖技术研究 总第 1 6 9 期
　　由表 2可知:生长调节剂对芽的增殖存在显著
影响;由表 3可知:BA 的浓度对芽的增殖影响显
著 ,3.0 mg/L 时增殖倍数最高达到 2.95 , IBA 与
NAA对芽的增殖影响不显著 ,芽的增殖倍数均达
到 2以上 。综合考虑两个因素对芽增殖效果的影
响 ,确定芽增殖时生长调节剂采用 BA3.0 mg/L
与 IBA 或 NAA0.1 mg/ L 配合比较有利 。
综合确定芽增殖的培养基配方为:MS(或 B5)+
BA3.0 mg/ L+IBA0.1 mg/L (或 NAA0.1 mg/L)+
3.0%蔗糖+0.7%琼脂 ,其增殖倍数可达到 3左右。
表 3　不同生长调节剂对芽增殖的影响结果表
BA/(mg.L-1) 芽的平均增殖倍数 差异显著性 生长素/(0.1mg.L-1) 芽的平均增殖倍数 差异显著性
0.5
1.0
2.0
3.0
2.04
2.22
2.41
2.95
c
bc
b
a
IBA
NAA
2.42
2.39
a
a
表 4　生根处理结果表
IBA/(mg.L-1) 平均根长/cm 平均根数 生根率/ %
1 2 3 平均 差异显著性
0 1.30 2.67 0 6.67 13.33 6.67 b
0.5 0.98 6.37 40.00 46.67 40.00 42.22 a
1.0 1.42 9.75 33.33 46.67 26.67 35.56 a
2.0 1.08 5.67 20.00 13.33 26.67 20.00 b
2.2　生根培养基的确定
生根培养约 60 d后 ,生根培养的结果见表 4。
由表 4可知:在培养基中加入不同浓度的 IBA对试
管苗生根具有一定影响 , 当 IBA 浓度为 0.5 ,
1.0 mg/ L时生根较好 ,说明 IBA0.5 ～ 1.0 mg/ L 时
对试管苗的生根比较有利 ,确定试管苗生根的培养
基配方为:1/2MS+IBA0.5 ～ 1.0 mg/L +3.0%蔗
糖+0.7%琼脂 ,其生根率可达到 35%以上。
2.3　移栽基质的确定
移栽管理约 60 d后 ,移栽成活的结果见表 5 。
由表 5可知:移栽基质对移栽的成活具有一定影
响 ,当采用珍珠岩(5 份)+腐殖土(5 份)、河沙(5
份)+腐殖土(5份)的基质时移栽成活率较高 ,移
栽成活率均可达到 93%以上 ,说明采用腐殖土与
珍珠岩或河沙按 5:5混合时对试管苗的移栽成活
比较有利 。
2.4　扦插基质的确定
扦插管理约 60 d后 ,扦插成活的结果见表 6。
由表 6可知:移栽基质对扦插的成活具有一定影
响 ,但差异不显著 ,为降低成本 ,可直接采用河沙(5
份)+壤土(5份),其移栽成活率可达到 66%以上 。
表 5　移栽处理的结果表
移栽基质 移栽成活率/ %
1 2 3 平均 差异显著性
珍珠岩+腐殖土 100 100 100 100 a
河沙+腐殖土 100 80 100 93 a
河沙+壤土 80 80 80 80 b
表 6　扦插处理的结果表
移栽基质 扦插成活率/ %
1 2 3 平均 差异显著性
珍珠岩+腐殖土 80 80 80 80 a
河沙+腐殖土 80 60 80 73.33 a
河沙+壤土 60 80 60 66.67 a
注:a-为 P=0.05 时最小差异显著性检验结果(LSD),相同的字母之间差异不显著 ,不同字母之间差异显著。
(下转第 64页)
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关于巩固湖北省退耕还林成果的刍议 总第 1 6 9 期
高等因素影响 ,共有 84.6万户 、313.8万人平均高
产稳产口粮田不足 0.033 hm2 。
　巩固退耕还林成果亟待采取的措施
为了巩固退耕还林成果 ,真正做到“退得下 、稳
得住 、不反弹” ,把退耕还林工程建设成为“民心工
程” 、“致富工程” ,目前亟待采取的相关措施如下:
(1)全面开展退耕农户口粮田建设 ,真正做到
“退得下” 。据调查 ,在鄂西北 、鄂西南 、鄂南山区 ,
相当部分退耕农户保留的口粮田仍为坡耕地 ,个别
农户的口粮田坡度甚至超过 25°,耕作中仍然造成
水土流失 、地力衰退 ,粮食产量低而不稳 ,基本口粮
没有保证 。在全省退耕农户中 ,人平现有高产稳产
口粮田仅 0.025 hm2 ,按人平 0.033 hm2 的标准 ,
尚差 0.008 hm2 ,全面开展退耕农户的基本口粮田
建设 ,是巩固退耕还林成果 ,保证退耕还林真正“退
得下”的一项重要措施 。由此 ,建议一是开展坡改
梯 ,将低产地变为高产稳产田;二是开展土地平整 、
改土培肥 ,变劣质耕地为优质耕地 ,增加农户基本
口粮田面积;三是开展水利工程设施建设 ,因地制
宜地兴建蓄水 、灌溉 、防洪排涝设施 ,确保退耕农户
的基本口粮田旱涝保收 ,实现粮食自给有余。
(2)加大退耕还林补植补造力度 ,真正做到“稳
得住” 。退耕还林能否成林 ,成林能否成材 ,是影响
退耕还林工程建设成效的关键 。据调查统计 ,目前
全省退耕还林需要补植补造的面积达 33.20 万
hm
2 。其中:因立地条件差 、未适地适树等原因形
成的低质林面积13.29万 hm2 ,急需合理补植和置
换树种造林;因自然灾害损失的面积达 18.78 万
hm2 ,急需重新造林 ,稳住退耕还林面积;因多种原
因造成未达到造林合格验收标准的面积 1.13 万
hm2 ,需要通过补植 ,提高造林成活率和保存率 。
由此 ,建议在近 3 a 内 ,全省各地要采取积极有效
措施 ,组织退耕农户加大补植补造力度 ,严格执行
退耕还林工程建设质量标准 ,全面提高造林质量 ,
真正稳住退耕还林面积 。
(3)积极发展退耕还林后续产业 ,真正做到“不
反弹” 。退耕还林工程成效 ,主要体现在生态效益
方面 。在坚持“生态优先”前提下 ,对生态林实施多
元化经营 ,发展后续产业 ,是积极巩固退耕还林成
果 ,实现退耕还林长期不反弹的重要保证。发展后
续产业措施:一是实施综合经营 ,提高经济效益 ,如
对生态林中茅栗 、锥栗等树种 ,可结合修枝抚育高
头嫁接板栗优良品系 ,在不影响生态效益前提下 ,
获得林果产品 ,增加农户收益;二是发展林下种植
和养殖业;三是发展林果加工业 ,开展林果初级产
品深加工 ,提高林果产品附加值 ,实现林果产品效
益最大化 ,以利获得良好经济效益 。
(本文编校:唐　岚)
(上接第 32页)
　结论与讨论
3.1　芽的增殖
本试验中在以带芽的新梢茎段为外植体诱导
芽再生和增殖时 ,芽的生长速度较慢 ,继代周期长
达 2 个月左右 ,在 MS(或 B5)+BA3.0 mg/L +
IBA0.1 mg/ L (或 NAA0.1 mg/L)+3.0%蔗糖
+0.7%琼脂的最佳培养基下其增殖倍数也只能达
到 3左右 ,生产时可能限制种苗的繁殖速度。一般
为保持足够的有效苗率 ,工厂化生产要求繁殖倍数
在 3 ～ 8之间 ,因此还需进一步探索增殖培养基及
培养条件 ,以加快繁殖速度 ,满足生产的需要 。
3.2　试管苗的生根
本试验中在试管苗生根培养时生根率较低 ,在
1/2M S +IBA0.5 ～ 1.0 mg/ L +3.0%蔗糖 +
0.7%琼脂的最佳培养基下其生根率才可达到
35%以上 ,最高仅能达到 42.22 ,尽管采用河沙(5
份)+腐殖土(5份)的基质配比其移栽成活率可达
到 93%以上 ,但整体生产率较低;采用预培养然后
扦插生根的方式 ,在河沙(5份)+壤土(5份)的基
质上其移栽成活率可达到 66%以上 ,但最高也只
能达到 80%,需进一步探索生根的方式方法 ,以降
低成本 、提高生产效率。
3.3　展望
无刺枸骨从最初外植体的选取 、消毒方法的确
定 ,到试管苗的增殖 、生根 、驯化移栽及试管苗的扦
插 ,其快速繁殖的各个技术环节均进行了较好的研
究 ,建立了完整的快速繁殖体系 ,为工厂化育苗打
下了比较坚实的技术基础 ,可满足工厂化生产的需
要 ,为市场提供大量的优质种苗 ,解决目前市场上
对该植物的供需矛盾。 (本文编校:郑京津)
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