全 文 ：毛茛黄酮类成分的ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ／Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ分析
芮　雯１，冯毅凡１，刘守钾２，谭毓治２＊
（１．广东药学院 中心实验室，广东 广州５１０００６；２．广东药学院 药科学院，广东 广州５１０００６）
摘　要：目的：建立超高效亲水性液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术（ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ／Ｑ－
ＴＯＦ－ＭＳ）对毛茛黄酮类成分进行分析的方法。方法：用ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　ＨＩＬＩＣ色谱柱，以甲醇
∶水＝１∶１含１０ｍＭ乙酸铵（Ａ）／乙腈∶甲醇＝９５∶５含１０ｍＭ乙酸铵（Ｂ）梯度洗脱，使用ＥＳＩ离子源，
正、负离子模式下采集数据。结果：根据元素组成分析、二级质谱和相关文献，鉴定、推断出毛茛中１１个
主要成分，分别是小麦黄素，牡荆素，荭草素，异荭草素，芹菜素－６－Ｃ－β－Ｄ－葡萄糖苷－８－Ｃ－α－Ｌ－阿拉伯糖苷，
小麦黄素－７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷，芦丁等。结论：经过超高效亲水性液相色谱的分离，借助Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ测定
的准确分子量及二级质谱信息可以判定毛茛中的主要黄酮类成分，为毛茛黄酮类成分分析提供了一种
快速有效的方法。
关键词：毛茛；黄酮；亲水性液相色谱；串联四级杆飞行时间质谱仪
中图分类号：Ｒ２８４．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１１）０８－００１８－０３
收稿日期：２０１１－０５－２８
基金项目：广东省科技计划项目（２００４Ｂ３０１０１００２）
作者简介：芮雯（１９８１－），女，广东药学院硕士，助理研究员，研究方向为中药质量控制。
Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　Ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｂｙ　ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ／Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ
Ｒｕｉ　Ｗｅｎ１，Ｆｅｎｇ　Ｙｉｆａｎ１，Ｌｉｕ　Ｓｈｏｕｊｉａ２，Ｔａｎ　Ｙｕｚｈｉ　２＊
（１．Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　５１０００６，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　５１０００６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｂｙ　Ｕｌｔｒａ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ａｎｄ　ｔａｎｄｅｍ　ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ　ｔｉｍｅ－ｏｆ－ｆｌｉｇｈｔ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ（ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ／Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ａ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ　Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ　ｗｉｔｈ　ａ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔｈａｎｏｌ∶ｗａｔｅｒ＝１
∶１ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　１０ｍＭ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ａｃｅｔａｔｅ（Ａ）ａｎｄ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ∶ｍｅｔｈａｎｏｌ＝９５∶５ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　１０ｍＭ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ａｃｅｔａｔｅ（Ｂ）．Ｔｈｅ　ｄａｔａ
ｗｅｒｅ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｉｏｎ　ｍｏｄｅ，ｕｓｉｎｇ　ＥＳＩ　ｉｏｎ　ｓｏｕｒｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｅｌｅｖｅｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｅｌｅｍｅｎｔａｌ
ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ，ＭＳ／ＭＳ　ｆｒａｇｍｅｎｔ　ｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｓ．Ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｔｒｉｃｉｎ，ｖｉｔｅｘｉｎ，ｏｒｉｅｎ－
ｔｉｎ，ｉｓｏｒｉｅｎｔｉｎ，６－Ｃ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｓｙｌ－８－Ｃ－α－Ｌ－ａｒａｂｉｎｏｓｙｌａｐｉｇｅｎｉｎ，ｔｒｉｃｉｎ－７－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙ，ｒｕｔｉｎ　ａｎｄ　ｅｔｃ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｕｓｉｎｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ｉｏｎ　ａｎｄ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｉｏｎ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｍａｊｏｒ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＨＩＬＩＣ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗｅｉｇｈｔ　ａｎｄ　ＭＳ／ＭＳ　ｄａｔａ．Ｔｈｉｓ　ｉｓ　ａ　ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ．
Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　Ｊａｐｏｎｉｃｕｓ；Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ＨＩＬＩＣ；Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ
　　毛茛Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　Ｔｈｕｎｂ．为毛茛科毛茛属多
年生草本植物，以带根全草入药。中医临床用于主治疟疾、
黄疸、偏头痛、胃痛、风湿关节痛、鹤膝风、痈肿、恶疮、疥癣、
牙痛、火眼等疾病［１，２］。现代药理研究发现，毛茛苷类成分
具有显著的抗炎、镇痛作用和抗心肌肥大等作用［３－６］。毛茛
已知化学成分相关报道较少，分离鉴定的化合物仅有滨蒿
内酯、小麦黄素，原儿茶酸、木犀草素、白头翁素、东莨菪内
酯、５－羟基－６，７甲基酮、５－羟基－７，８－二甲氧基黄酮、小毛茛内
酯、毛茛苷元、异毛茛苷元和二氢毛茛苷元等［７－８］。同属植物
报道的主要成分包括内酯类、黄酮类、皂苷及生物碱
等［３，９－１９］。
前期通过反相液相色谱柱进行分离发现，毛茛黄酮提
取物的极性较大，色谱峰出峰较快，因此本文采用 ＵＰＬＣ
ＨＩＬＩＣ／Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ联用技术对毛茛黄酮提取物进行快速
分离分析，结合Ｑ－ＴＯＦ高分辨质谱计算得到的元素组成和
二级质谱信息分析鉴定其主要成分。
１　仪器与试药
ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ／Ｑ－ＴＯＦＭＳ系统（美国 Ｗａｔｅｒｓ公
司），采用电喷雾离子源（ＥＳＩ），二元高压泵、在线脱气装置、
自动进样器、柱温箱。数据采集与处理采用 Ｍａｓｓｌｙｎｘ软
—８１—
件。牡槿素、亮氨酸－脑啡肽，均购自美国ＳＩＧＭＡ公司。
乙腈、甲醇均为色谱纯，购自德国 ＭＥＲＫ公司，水为超纯
水器所制（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司，德国），其他试剂为分析纯。毛
茛全草采自江西省九江市，原植物由广东药学院刘基柱讲
师鉴定。
２　实验方法
２．１　色谱条件
色谱柱为 ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　ＨＩＬＩＣ，２．１ｍｍ×
５０ｍｍ，１．７μｍ（Ｗａｔｅｒｓ公司），柱温３０℃。甲醇∶水＝１∶１，
含１０ｍＭ乙酸铵（Ａ）／乙腈∶甲醇＝９５∶５，含１０ｍＭ 乙酸
铵（Ｂ）梯度洗脱，洗脱程序如下：０～４ｍｉｎ，１００％Ｂ；４～７ｍｉｎ，
１００％～８５％Ｂ；７～８ｍｉｎ，８５％～８０％ Ｂ；８～１０ｍｉｎ，８０％～
７５％Ｂ。进样量为５μＬ，流速为０．４ｍＬ／ｍｉｎ。
２．２　质谱条件
ＬＣ／ＭＳ系统使用ＥＳＩ离子源，在正离子模式与负离子
模式下分别采集数据。数据采集范围 ｍ／ｚ１５０～１　０００。离
子源参数：ＥＳＩ＋：Ｃａｐｉｌａｒｙ：３　２００Ｖ，Ｓａｍｐｌｅ　ｃｏｎｅ：１５Ｖ，
Ｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｍｐ：１００℃，Ｄｅｓｏｌｖａｔｉｏｎ　Ｔｅｍｐ：３５０℃，雾化气（Ｎ２）
流速６０Ｌ／ｈ，脱溶剂气（Ｎ２）流速６００Ｌ／ｈ；ＥＳＩ－：Ｃａｐｉｌａｒｙ：
３　０００Ｖ，Ｓａｍｐｌｅ　ｃｏｎｅ：２０Ｖ，Ｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｍｐ：１００℃，Ｄｅｓｏｌｖａ－
ｔｉｏｎ　Ｔｅｍｐ：３５０℃，雾化气（Ｎ２）流速６０Ｌ／ｈ，脱溶剂气（Ｎ２）
流速６００Ｌ／ｈ。碰撞能量（ＣＥ）：１５～６０Ｖ，Ｌｏｃｋ　Ｍａｓｓ为亮氨
酸－脑啡肽，正离子模式［Ｍ＋Ｈ］＋为ｍ／ｚ　５５６．２７７　１，负离子
模式［Ｍ－Ｈ］－为ｍ／ｚ　５５４．２６１　５。
２．３　对照品溶液的制备
取牡槿素对照品适量，精密称定，加甲醇溶解至５０μｇ·
ｍＬ－１，过０．２μｍ微孔滤膜，即得。
２．４　供试品溶液的制备
毛茛全草晾干切碎，７５％乙醇回流提取３次，过８０目
筛，合并提取液，减压浓缩，浓缩液经Ｄ　１０１大孔树脂吸附，
水洗，弃去，再用６０％乙醇洗脱，收集此部位，蒸干溶剂得膏
状物即毛茛黄酮提取物。用甲醇：水＝１：１溶解至５ｍｇ·
ｍＬ－１，过０．２μｍ微孔滤膜，即得。
３　结果与讨论
实验中发现，亲水性液相色谱 ＨＩＬＩＣ的色谱条件较难
优化，相关研究发现 ＨＩＬＩＣ色谱柱在分离某些标准样品时
具有和ＲＰＬＣ类似的分离效率，但是对实际样品中的多数
极性化合物（如糖、多肽等）的分离效率较低［２０］。本文选取
了不同的缓冲体系，最终确定１０ｍＭ 的乙酸铵缓冲盐体系
可以得到较好的色谱分离。采用乙腈－甲醇－乙酸铵体系进
行线性梯度洗脱分析毛茛中黄酮类成分，其正负离子模式
总离子流见图１。
ａ．正离子流；ｂ．负离子流
图１　毛茛黄酮提取物的总离子流
　　质谱参数选择时发现毛茛提取物中的黄酮苷成分在锥
孔电压超过３０Ｖ的情况下容易碎裂，因此调节锥孔电压为
１５、２０、２５和３０Ｖ，选择正离子模式为１５Ｖ，负离子模式为
２０Ｖ可以获得较少的碎裂和更好的灵敏度。质谱结果中，
正离子模式下主要产生［Ｍ＋Ｈ］＋和［Ｍ＋Ｎａ］＋的分子离子
峰，负离子模式下主要产生［Ｍ－Ｈ］－的分子离子峰。利用
Ｑ－ＴＯＦ高分辨质谱计算各个主要成分的元素组成，并结合
二级质谱、对照品信息和相关参考文献［３，７，９］，本实验分析鉴
定了毛茛中１１个化学成分（见表１），包括黄酮苷、黄酮苷元
和内酯苷。其中，黄酮苷主要是母核为木犀草素、槲皮素和
小麦黄素的碳苷和氧苷。
研究表明，［Ｍ＋Ｈ－６０］＋，［Ｍ＋Ｈ－９０］＋和［Ｍ＋Ｈ
－１２０］＋离子为碳苷的特征碎片。以保留时间为１．３７ｍｉｎ
的化合物为例，在正离子模式下，其主要碎片 ｍ／ｚ３１３、２８３
是由于糖基环裂解并脱掉一个ＣＨ２Ｏ。碎片 ｍ／ｚ４１５、３９７
和３７９分别是通过脱掉一分子、两分子和三分子的 Ｈ２Ｏ。
碎片［Ｍ＋Ｈ－１６２］＋是由于脱掉一个葡萄糖残基，结合文
献和对照品确定为牡槿素［３］。保留时间为２．４６，２．８２，
—９１—
６．７７和７．０７ｍｉｎ的化合物有类似裂解情况，推测均为黄酮 碳苷。
表１　毛茛黄酮提取物在正、负离子模式下各色谱峰的元素组成及二级质谱信息
保留时间（ｍｉｎ） 选择离子 测定值（ｍ／ｚ）理论值（ｍ／ｚ）偏差ｐｐｍ 分子式 二级质谱（ｍ／ｚ） 化合物
０．８ ［Ｍ－Ｈ］－ ３２９．０６７１　 ３２９．０６６１　 ３．０ Ｃ１７Ｈ１３Ｏ７ ３２９，２９９，２７１，２４３ 小麦黄素
０．９２
［Ｍ＋Ｈ］＋ ４７５．１２４４　 ４７５．１２４０　 ０．８ Ｃ２３Ｈ２３Ｏ１１ ４７５，４５７，３９７，３７９，３１３，２８３
［Ｍ－Ｈ］－ ４７３．１０５２　 ４７３．１０８４ －６．８ Ｃ２３Ｈ２１Ｏ１１ ４７３，４１３，３１１，２８１
黄酮苷
１．０１
［Ｍ＋Ｈ］＋ ４９３．１３３６　 ４９３．１３４６ －２．０ Ｃ２３Ｈ２５Ｏ１２ ４９３，３３１
［Ｍ－Ｈ］－ ４９１．１２０４　 ４９１．１１９０　 ２．９ Ｃ２３Ｈ２３Ｏ１２ ４９１，３２９
小麦黄素－７－Ｏ－β－Ｄ－
葡萄糖苷
１．３７
［Ｍ＋Ｈ］＋ ４３３．１１４８　 ４３３．１１３５　 ３．０ Ｃ２１Ｈ２１Ｏ１０ ４３３，４１５，３９７，３７９，３５１，３２３，３１３，２８３，２７１
［Ｍ－Ｈ］－ ４３１．０９７９　 ４３１．０９７８　 ０．２ Ｃ２１Ｈ１９Ｏ１０ ４３１，３４１，３１１，２８３
牡槿素
２．４６
［Ｍ＋Ｈ］＋ ５３５．１４６１　 ５３５．１４５２　 １．７ Ｃ２５Ｈ２７Ｏ１３ ５３５，４８１，４６３，４４５
［Ｍ－Ｈ］－ ５３３．１２７６　 ５３３．１２９５ －３．６ Ｃ２５Ｈ２５Ｏ１３ ５３３，５１５，４７３，４４３，３８３，３５３
黄酮碳苷
２．８２
［Ｍ＋Ｈ］＋ ５６５．１５５９　 ５６５．１５５７　 ０．４ Ｃ２６Ｈ２９Ｏ１４ ５６５，５１１，４８１，４３３，４２７，４０９，３７９
［Ｍ－Ｈ］－ ５６３．１３８５　 ５６３．１４０１ －２．８ Ｃ２６Ｈ２７Ｏ１４ ５６３，５０３，４７３，４４３，３８３
芹菜素－６－Ｃ－β－Ｄ－葡萄糖苷
－８－Ｃ－α－Ｌ－阿拉伯糖苷
６．３５
［Ｍ＋Ｈ］＋ ７５９．１９５４　 ７５９．１９８４ －４．０ Ｃ３２Ｈ３９Ｏ２１ ７５９，４６５，３０３
［Ｍ－Ｈ］－ ７５７．１８４９　 ７５７．１８２７　 ２．９ Ｃ３２Ｈ３７Ｏ２１ ７５７，５９５，４６３
黄酮氧苷
６．７７
［Ｍ＋Ｈ］＋ ４４９．１１０６　 ４４９．１０８４　 ４．９ Ｃ２１Ｈ２１Ｏ１１ －
［Ｍ－Ｈ］－ ４４７．０９４６　 ４４７．０９２７　 ４．２ Ｃ２１Ｈ１９Ｏ１１ ４４７，３５７，３２７，２９７，２８５
异荭草素
７．０７
［Ｍ＋Ｈ］＋ ４４９．１０８５　 ４４９．１０８４　 ０．２ Ｃ２１Ｈ２１Ｏ１１ ４４９，４１３，３５３，３２９，２９９
［Ｍ－Ｈ］－ ４４７．０９３７　 ４４７．０９２７　 ２．２ Ｃ２１Ｈ１９Ｏ１１ ４４７，３５７，３２７，２９７，２８５
荭草素
７．３６
［Ｍ＋Ｈ］＋ ６１１．１６４０　 ６１１．１６１２　 ４．６ Ｃ２７Ｈ３１Ｏ１６ ６１１，４４９，２８７
［Ｍ＋Ｎａ］＋ ６３３．１４４８　 ６３３．１４３２　 ２．５ Ｃ２７Ｈ３０Ｏ１６Ｎａ
［Ｍ－Ｈ］－ ６０９．１４６１　 ６０９．１４５６　 ０．８ Ｃ２７Ｈ２９Ｏ１６ ６０９，４４７，２８５
芦丁
８．２７
［Ｍ＋Ｎａ］＋ ５９３．１７０２　 ５９３．１６９４　 １．３ Ｃ２２Ｈ３４Ｏ１７Ｎａ
［Ｍ－Ｈ］－ ５６９．１７１４　 ５６９．１７１８ －０．７ Ｃ２２Ｈ３３Ｏ１７ ５６９，５５１，３８９，２７５，１１３
毛茛苷衍生物
　　其中，保留时间为６．７７ｍｉｎ和７．０７ｍｉｎ的化合物是同
分异构体，在负离子模式下，二者的 ＭＳ／ＭＳ信息有所不同
（见图２）。根据文献资料，区分８－碳苷荭草素和６－碳苷异荭
草素的方法是看［Ｍ－Ｈ－１２０］－离子的相对强度，在相同的碰
撞能量下６－碳苷的碎片中此离子的强度比８－碳苷的高［２６］。
因此，结合文献推断保留时间为６．７７ｍｉｎ和７．０７ｍｉｎ的化合
物分别为异荭草素和荭草素［３］。
图２　负离子模式下保留时间为６．７７ｍｉｎ（ａ）和７．０７ｍｉｎ（ｂ）的化合物二级质谱
　　在保留时间为１．０１ｍｉｎ，６．３５ｍｉｎ，７．３６ｍｉｎ和８．２７ｍｉｎ
的化合物的二级质谱中，主要信息是中性丢失１６２ｕ和
１３２ｕ，表明分别脱掉一个五碳糖或者六碳糖基团，推测均为
氧苷裂解。根据文献推断保留时间１．０１和７．３６ｍｉｎ的化
合物分别为小麦黄素－７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷和芦丁
［３，１０］。
４　结论
反相液相色谱 （ＲＰＬＣ）是当前分离分析和分离制备中
应用最为广泛的色谱模式。但是，ＲＰＬＣ对强极性化合物
（如寡糖、糖苷和强极性寡肽等）的保留很弱，甚至不保留，
—０２—
正交设计优化野菊花总黄酮的超声提取工艺
徐秀泉，陈慧涵，李祥民
（江苏大学 药学院，江苏 镇江２１２０１３）
摘　要：优化超声提取野菊花总黄酮的最佳工艺条件。采用正交设计试验，以野菊花总黄酮得率为指
标，对乙醇浓度、超声温度、超声时间、料液比等因素进行优化。结果表明，各因素对总黄酮提取率的影
响大小依次为：超声时间＞超声温度＞乙醇浓度＞料液比。最佳工艺条件为：采用质量分数６０％乙醇，
料液比１∶３０（ｇ／ｍＬ），在６０℃下，超声提取４０ｍｉｎ，在此最佳条件下，总黄酮得率为４．６０％。
关键词：野菊花；总黄酮 ；超声提取；正交设计
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１１）０８－００２１－０２
收稿日期：２０１１－０５－１５
基金项目：江苏大学大学生科研立项项目（０８Ａ０１２）
作者简介：徐秀泉（１９７８－），男，博士，江苏大学讲师，研究方向为天然药物提取分离及活性分析。
　　野菊花为菊科植物野菊（Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ　ｉｎｄｉｃｕｍ　Ｌ．） 的干燥头状花序，其性凉，味苦、辛，归肺、肝经，

具有清热解
因此强极性化合物在 ＲＰＬＣ上不能得到很好的分离［２０］。亲
水作用色谱法（ＨＩＬＩＣ）能为强极性的待测样品提供合适的
保留，它采用水－水溶性有机相作为流动相，又能显著改善样
品在流动相中的溶解度。此外，它和质谱有良好的兼容性，
是一种非常适合于强极性和强亲水性样品定性定量分析的
液相色谱替代技术。
本文通过 ＨＩＬＩＣ的快速分离分析，根据精确元素分析
和二级质谱信息，并结合相关文献鉴定推断出毛茛中１０个
黄酮和１个内酯苷成分。其中只有小麦黄素曾在毛茛中分
离鉴定出，根据同属植物已报道成分初步判断该植物含有
荭草素，芹菜素－６－Ｃ－β－Ｄ－葡萄糖苷－８－Ｃ－α－Ｌ－阿拉伯糖苷，异
荭草素，牡荆素，小麦黄素－７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷，芦丁。同时，
结合黄酮碳苷和氧苷的裂解规律推测毛茛中可能存在其他
一些黄酮类物质。本实验采用 ＵＰＬＣ　ＨＩＬＩＣ／Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ
技术为分析毛茛化学成分提供了一种快速、高效的方法。
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（责任编辑：宋勇刚）
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