全 文 :收稿日期:2013-12-19
作者简介:高啸巍(1990-),男,在读硕士研究生,专业方向:中药活性成分研究与新药研发;E-mail:594700568@qq.com。
通信作者:谭毓治,E-mail:tanyuzhi@163.com。
毛茛总苷对大鼠离体心肌缺血-再灌注损伤的保护作用
高啸巍,刘 苑,杨智承,谭毓治
(广东药学院药科学院,广东 广州510006)
摘要 目的:观察毛茛总苷对大鼠离体心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常对
照组、缺血-再灌注模型组及毛茛总苷0.05、0.10、0.20mg/mL组。采用Langendroff大鼠离体心脏灌流系统,建立
心肌缺血-再灌注损伤模型。记录停灌前、再灌注后1、5、10、20、30、40min时的心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左
室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室舒张压最大下降速率(-dp/dtmax)、冠脉流量(CF)等心功能指标;测定再
灌注后20、40min灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的活性;采用氯化三苯基四氮唑(TTC)进行心肌染
色并计算心肌梗死面积百分比。结果模型组再灌注后 HR、LVDP、±dp/dtmax、CF显著降低,LDH、CK水平升高,
心肌梗死面积达58.78%。结论:毛茛总苷具有减慢心率、舒张冠状动脉等作用,推测其可能通过增加冠脉血流量,
改善心肌缺血缺氧,减轻心肌细胞损伤,起到保护缺血-再灌注导致的心肌损伤。
关键词 毛茛总苷;心肌缺血;再灌注损伤
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)08-
ProtectiveEffectofTGRJonMyocardialIschemic-ReperfusionInjuryinIsolatedRatHearts
GAOXiao-wei,LIUYuan,YANGZhi-cheng,TANYu-zhi
(SchoolofPharmacy,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou510006,China)
Abstract Objectives:TostudytheprotectiveeffectofTGRLonmyocardialischemic-reperfusioninjuryinisolatedrat
hearts.Methods:TheSDratswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,ischemia-reperfusiongroup,andTGRJin0.05,
0.10and0.20mg/mLgroups.Theischemia-reperfusioninjurymodelwasbuiltusingLangendroffisolatedratsheartsperfusion
system.Theindexesofheartfunctionsuchasheartrate(HR),leftventricularsystolicpressure(LVSP),leftventricularsystolic
pressureandmaximumrateofrise(+dp/dtmax),leftventriculardiastolicpressureandmaximumrateofdescent(-dp/dtmax)and
coronaryflow(CF)beforeischemiaandlaterat1,5,10,20,30and40minafterreperfusionwererecorded.TheactivityofLDH
andCKat20and40minafterreperfusionweredetermined.Themyocardialtissueswerestainedwithchloridethreephenyltet-
razole(TCC)andthepercentageofmyocardialinfarctionareawascalculated.Results:HR,LVDP,±dp/dtmaxandCFoftheI/R
groupweresignificantlydecreasedafterreperfusion,theLDHandCKlevelswereincreasedandtheareaofmyocardialinfrac-
tionwas58.78%.Conclusion:TGRJhaseffectsofloweringtheheartrateandrelaxingthecoronaryartery.Suggestingthatit
mightbeimprovedmyocardialischemiaandhypoxiabyincreasingthebloodflowofcoronaryarteryandaleviatingthemyocar-
dialcelinjurytoprotecttheischemia-reperfusioninducedofmyocardialinjury.
Keywords TotalglycosidesofRanunculusjaponicusThunb.;Myocardialischemia;Reperfusioninjury
毛茛RanunculusjaponicusThunb.为毛茛科
毛茛属多年生草本植物。毛茛总苷是从毛茛中提取
出来的总苷类成分群,经化学成分分析研究,表明其
中内酯苷与黄酮苷为毛茛总苷的主要成〔1,2〕。此前
研究发现毛茛总苷对心血管系统有多方面的作用:
可抑制心肌肥厚〔3〕、舒张动脉血管和降低血压〔4,5〕、
改善大鼠血流动力学等作用〔6〕。为探讨毛茛总苷对
心肌缺血-再灌注损伤的影响,本实验采用Lange-
ndroff大鼠离体心脏灌流系统建立心肌缺血-再灌
注损伤模型,观察毛茛总苷的作用,现报道如下。
1 实验材料
1.1 实验动物 SPF级SD大鼠,体质量240~260
g,雌雄各半,由广东省医学实验动物中心提供,许可
证号:SCXK(粤)2008-0002。
1.2 药物与试剂 毛茛药材采自江西省九江县,由
广东药学院刘基柱副教授鉴定为毛茛科植物毛茛
RanunculusjaponicusThunb.。乌来糖,国药集团
化学试剂有限公司产品,批号:T20070418;氯化三
苯基四氮唑(TTC),北京普博生物科技有限责任公
司产品,批号:PBA07654;肝素钠注射液,上海第一
生化药液有限公司产品,批号:110102;肌酸激酶(批
号:20111124)、乳酸脱氢酶(批号:20111117)均购自
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网络出版时间:2014-07-31 11:16
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1286.R.20140731.1116.030.html
南京建成生物工程研究所;其他试剂均为分析纯。
1.3 主要仪器 MedLab生物信号采集处理系统
(南京美易科技有限公司);GL-1离体动物心脏灌流
装置(成都泰盟科技有限公司);蠕动泵(BT100-1L)
(上海领德仪器有限公司);UV-2550型紫外分光光
度计(日本岛津公司);台式高速冷冻离心机(UNI-
VERSAL32R)(德国 Hettich);M450型 ELISA
Reader酶标仪(美国Bio-Rad公司)。
2 方法
2.1 毛茛总苷制备 毛茛Ranunculusjaponicus
Thunb.全草晾干切碎,85%乙醇回流提取3次,过
80目筛,合并提取液,减压浓缩回收溶剂,得膏状物
经D-101大孔树脂吸附,水洗,弃去,用30%~60%
乙醇洗脱,收集此部位,水浴蒸干乙醇得膏状物即毛
茛总苷同时测定水分含量。实验时用生理盐水配成
所需浓度。
2.2 试剂溶液的配制
2.2.1 毛茛总苷:称取毛茛总苷适量,用克氏液
(Krebs-Henseleit液,K-H 液)液溶解,并用0.22
μm的微孔滤膜过滤,配制成浓度约为0.90、1.80、
3.60mg/mL的溶液。
2.2.2 灌流液:分别取灌流液母液 NaCl(137.94
g/L)、NaHCO3(42.04g/L)、KCl(7.01g/L)、KH2
PO4 (3.29 g/L)、Glucose(39.6 g/L)、Mg-
SO4.7H2O(5.92g/L)、CaCl2(5.55g/L)各 50
mL,加入双蒸水650mL,配制1000mL灌流液。
其中CaCl2溶液须在其他基础溶液混合并加超纯水
稀释后,边搅拌边缓慢加入,否则易形成钙盐沉淀。
灌流母液放4℃冰箱保存,存放时间不超过lw。全
部配制完以后用0.22μm的微孔滤膜过滤后使用。
2.2.3 磷酸缓冲液(0.01mol/L磷酸二氢钾):按
先后顺序0.200gKCl、0.240gKH2PO4、1.440g
Na2HPO4、8.000gNaCl逐一溶于双蒸水中,待完
全溶解后定容至1000mL,高压蒸汽灭菌20min,4
℃保存备用。
2.3 离体心脏灌流模型的制备分组及给药 SD大
鼠30只,雌雄兼用,随机分成5组,每组6只,按常
规方法制备大鼠离体心脏,接入Langendorff心脏
灌流装置,进行实验。5 组分别为正常对照组
(NC):连续灌流115min;平衡30min后给予K-H
液15min,再正常灌流70min;缺血-再灌注模型
组:平衡45min后,停灌30min(缺血期间关闭气
体),再灌注40min;毛茛总苷组:平衡30min后,通
过蠕动泵灌流给药15min(流速调整为0.5mL/
min),毛茛总苷在灌流液中的终浓度为0.05、0.10、
0.20mg/mL,停灌30min,再灌40min。
2.4 测定指标
2.4.1 心功能参数:脏预灌流30min后,不符合冠
状动脉流量(CF)7~12mL/min,HR<200次/min,
LVSP<75mmHg者舍弃不用。缺血或再灌注期间
若出现持续性的心室纤颤>5min,认为心肌已死亡。
2.4.2 冠脉流量:测定冠脉流量(CF),分别测量心
脏停灌前(即平衡30min时)、再灌注1、5、10、20、
30、40min时的漏出液,以 mL/min表示。收集再
灌注后20、40min的灌流液冷冻干燥,-20℃保存,
供检测心脏灌流漏出液中CK、LDH的活力。
2.4.3 计算心肌梗死面积:实验结束时,取心脏切
片后用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,计算心肌梗
死面积。
心肌梗死面积(%)=未着色面积/心肌切片总面积×
100%
2.4.4 心肌酶学指标:将预留的心脏灌流漏出液标
本在室温下自然融化,分光光度计检测冠脉流出液
中的肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性(按
试剂盒表明书操作)。
2.5 统计学处理 采用SPSS17.0软件分析,采用
单因素方差分析和LSD-t检验,实验结果用表示,P
<0.05认为有统计学意义。
3 结果
3.1 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏心率的
影响 结果如表1所示。正常对照组在持续灌流的
40min内心率无明显变化;模型组在再灌注后1
min即出现室性心律失常(室性期前收缩,ventricu-
larprematurebeats、室性心动过速,ventriculartar-
chycardia和室颤,ventricularfibrilation),心率较
正常对照组显著加快(P<0.05或P<0.01),且在
再灌注的40min内无显著改善;毛茛总苷0.05
mg/mL组在再灌注20min后心率较模型组显著下
降(P<0.01);毛茛总苷0.1、0.2mg/mL组再灌注
1min后就较模型组显著下降(P<0.01)。
3.2 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏左室发
展压的影响 结果如表2所示。正常对照组在持续
灌流的40min内无明显变化;模型组再灌注后
LVDP显著下降(P<0.01),表明缺血-再灌注损伤
导致心脏收缩功能下降,再灌注末期恢复率为
(34.17±23.72)%;毛茛总苷0.10mg/mL组在再
灌注10min后与模型组差异显著(P<0.01),灌注
末期LVDP恢复率为(52.44±15.15)%;毛茛总苷
0.20mg/mL组在再灌注后与模型组比较差异显著
(P<0.01),且恢复率为(70.42±9.42)%。
·1341·JournalofChineseMedicinalMaterials 第37卷第8期2014年8月
表1 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏心率的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
平衡末心率/
(次/min)
再灌注后不同时间心率(次/min)
1min 5min 10min 20min 30min 40min
正常对照组 - 238±38 220±53* 215±46* 218±46* 210±43** 212±55** 215±51**
模型组 - 233±19 470±335 455±219 370±273 508±308 455±222 340±137
毛茛总苷组 0.05 227±34 435±249 319±227 234±150 100±29** 100±23** 98±22**
0.10 242±21 125±56** 197±150** 108±39** 133±41** 134±34** 129±23**
0.20 244±23 109±24** 129±30** 184±22* 205±27** 227±26** 227±27**
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
表2 毛茛总苷对大鼠左室发展压的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
平衡末LVDP/
(mmHg)
再灌注后不同时间LVDP/(mmHg)
1min 5min 10min 20min 30min 40min
正常对照组 - 103.09±21.12101.18±13.68**
95.42 ±
18.71**
93.80 ±
17.48**
92.25 ±
18.34**
89.30 ±
20.84**
89.68±20.90**
模型组 - 116.32±15.9517.00±11.09 20.91±16.93 21.46±16.04 23.53±17.90 42.56±34.05 41.30±30.79
毛茛总苷组 0.05 104.96±21.3111.72±8.10 37.14±31.14 35.80±23.91 38.60±15.87 38.84±15.02 38.37±15.22
0.10 114.45±7.80 12.31±5.25 35.40±22.74
60.88 ±
15.01**
57.24 ±
16.23**
59.36±16.06 59.35±15.09
0.20 105.91±15.9932.19±9.92* 37.02±7.46
5 59 ±
15.23**
6554 ±
13.46**
69.32±10.89*73.86±9.74**
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
3.3 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏左室收
缩压最大上升速率的影响 结果如表3所示,正常
对照组在持续灌流的40min内无明显变化;模型组
再灌注后dp/dtmax显著下降(P<0.01),表明缺血-
再灌注损伤导致心脏收缩功能下降,再灌注末期恢
复率为(25.78±19.57)%;毛茛总苷0.10mg/mL
组在灌注末期dp/dtmax恢复率为(26.21±12)%,但
与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);毛茛
总苷0.20mg/mL组在再灌注10min后与模型组
比较差异有统计学意义(P<0.01),恢复率为
(60.96±14.59)%。
表3 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏左室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax)的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
平衡末+dp/dtmax
/(mmHg/s)
再灌注后不同时间+dp/dtmax/(mmHg/s)
1min 5min 10min 20min 30min 40min
正常对照组 - 2631.05±321.01 2463.43±317.97** 2425.97±281.09** 2431.78±230.30** 2537.34±117.98** 2388.19±235.17** 2425.24±120.19**
模型组 - 2467.65±566.35 223.39±125.90 384.32±311.93 436.40±395.65 485.34±325.59 578.95±393.75 616.82±430.55
毛茛总苷组 0.05 2759.40±410.28 218.30±125.46 531.21±553.57 566.58±498.44 505.17±379.45 471.19±270.24 460.00±254.82
0.10 2790.61±284.61 371.30±215.62 449.63±409.98 773.54±487.01 747.49±500.10 753.22±488.81 737.87±368.69
0.20 2769.16±385.67 435.42±139.71 847.69±576.71 1471.36±569.81** 1577.45±607.95** 1629.02±599.61** 1706.55±569.70**
注:与模型组比较,**P<0.01
3.4 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏左室舒
张压最大下降速率的影响 结果如表4所示,正常
对照组在持续灌流的40min内无明显变化;模型组
再灌注后-dp/dtmax显著下降(P<0.01),表明缺血-
再灌注损伤导致心脏舒张功能下降,再灌注末期恢
复率为(26.05±17.56)%;毛茛总苷中剂量组在灌
注末期-dp/dtmax,恢复率为(34.00±12.23)%,高于
模型组,但仍无显著性差异;毛茛总苷高剂量组在再
灌注10min后与模型组有显著性差异(P<0.01),
恢复率为(75.53±19.09)%。
表4 毛茛总苷对大鼠左室舒张压最大下降速率(-dp/dtmax)的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
平衡末-dp/dtmax
/(mmHg/s)
-dp/dtmax/(mmHg/s)
1min 5min 10min 20min 30min 40min
正常对照组 - -1907.24±283.07 -1849.82±242.99**-1824.47±370.40**-1742.68±356.70**-1771.00±415.68**-1704.73±333.45**-1755.17±314.34**
模型组 - -1836.67±499.86 -170.49±63.71 -310.34±257.23 -327.66±267.86 -308.10±208.21 -450.24±210.36 -433.79±207.72
毛茛总苷组 0.05 -1949.18±457.28 -191.85±109.59 -300.30±167.94 -335.90±187.09 -340.14±124.86 -320.60±105.76 -311.25±103.61
0.10 -1983.64±111.19 -269.78±140.49 -283.41±240.38 -654.93±413.05 -736.23±375.47** -660.40±343.82 -678.22±262.45
0.20 -1979.49±260.80 -213.90±75.66 -404.94±345.98 -1294.02±155.74**-1432.97±241.20**-1449.45±239.08**-1457.77±220.89**
注:与模型组比较,**P<0.01
·2341· JournalofChineseMedicinalMaterials 第37卷第8期2014年8月
3.5 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏冠脉流
量的影响 结果如表5所示,正常对照组在持续灌
流的40min内冠脉流量无明显变化;模型组在再灌
注后冠脉流量显著降低(P<0.01),再灌注末期恢
复率为(25.58±16.76)%;毛茛总苷0.05mg/mL
组对冠脉流量影响与模型组差异无统计学意义(P
>0.05);毛茛总苷0.10、0.20mg/mL能显著增加
再灌注5~10min后的冠脉流量(P<0.01),恢复
率分别为(57.84±15.30)%、(74.11±14.74)%。
表5 毛茛总苷对大鼠冠脉流量的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
平衡末CF/
(mL/min)
再灌注后不同时间CF(mL/min)
1min 5min 10min 20min 30min 40min
正常对照组 - 8.7±1.3 8.4±1.6** 8.2±1.6** 8.3±1.2** 8.3±1.2** 8.2±0.8** 7.8±0.9**
模型组 - 9.4±0.9 3.3±1.7 3.7±1.8 3.3±1.4 3.4±1.8 2.6±1.6 2.3±1.4
毛茛总苷组 0.05 8.8±2.3 3.7±1.8 4.3±1.8 4.3±1.5 4.1±2.0 3.9±2.0 3.6±2.0
0.10 8.5±1.3 4.6±0.9 4.8±0.8 5.0±0.7* 5.2±0.9* 5.1±0.9** 4.8±1.0**
0.20 8.3±1.5 4.8±0.8 6.2±1.2** 6.3±1.2** 6.0±1.3** 6.1±1.0** 6.1±1.0**
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
3.6 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏心肌梗
死面积影响 结果如表6所示,与正常对照组比较,
模型组心肌梗死面积显著升高(P<0.01);与模型
组比较,毛茛总苷0.05、0.10、0.02mg/mL组心肌
梗死面积均有显著下降(P<0.01),表明毛茛总苷
能减少缺血再灌注引起的心肌组织坏死。
3.7 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠离体心脏心肌酶
学指标的影响 结果如表7所示,与正常对照组比
较,模型组各时间点CDH、CK水平均显著升高(P
<0.01);与模型组比较,毛茛总苷0.05mg/mL组
再灌注40min时灌流液中LDH水平显著降低(P
<0.05),毛茛总苷0.10、0.20mg/mL组在再灌注
20、40min时灌流液中 LDH 水平显著降低(P<
0.01);毛茛总苷0.20mg/mL组对再灌注20、40
min时灌流液中CK水平较模型组显著降低(P<
0.01)。
表6 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠心肌梗死
面积的影响(x±s,n=6)
组别 剂量/(mg/mL) 梗塞区面积/%
正常对照组 - 4.33±1.80**
模型组 - 58.78±7.51
毛茛总苷组 0.05 48.36±6.35**
0.10 38.10±6.04**
0.20 24.62±3.95**
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
表7 毛茛总苷对缺血-再灌注大鼠心肌灌流液中LDH、CK的影响(x±s,n=6)
组别
剂量/
(mg/mL)
LDH(U/L) CK(U/L)
平衡末
再灌注时间
20min 40min
平衡末
再灌注时间
20min 40min
正常对照组 - 12.19±2.96
14.19 ±
4.52**
12.74±5.76** 8.88±2.00
8.28 ±
0.95**
10.64±2.38**
模型组 - 11.05±1.75 73.50±19.47 87.86±26.39 7.34±0.96 61.01±10.28 68.63±25.95
毛茛总苷组 0.05 11.34±1.84 64.09±10.33 68.84±12.97* 9.39±1.82 64.38±11.77 67.45±8.55
0.10 11.56±2.51
49.50 ±
8.02**
59.40 ±
15.59**
9.06±2.02 50.66±11.23 53.63±8.96
0.20 12.57±3.45
29.77 ±
9.40**
45.54±8.88** 7.96±2.21
42.84 ±
7.04**
43.32±12.61**
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
4 讨论
缺血-再灌注时,在恢复血流的不同时间心肌氧
自由基聚集,钙离子超载,加之缺血区心肌能量代谢
紊乱,收缩蛋白的降解,导致心室肌收缩和舒张功能
发生障碍,表现为心室肌静息张力的增加和发展张
力的下降,左心室舒张期末压(LVEDP)升高;左室
发展压峰值(LVDP)下降以及心室内压最大变化速
率(±dp/dtmax)降低。此外,由于氧自由基的聚集和
细胞内钙超载,使心肌细胞静息膜电位的负值减小,
易于发生早后去极化和迟后去极化,心肌传导性和
不应期暂时不一致,易于形成折返激动而发生再灌
注性心律失常。
乳酸脱氢酶(LDH)是催化乳酸和丙酮相互转
化的同工酶,属于氢转移酶。当急性心肌梗塞时,可
见LDH活性显著升高。肌酸激酶(creatinekinase,
CK)是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再
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生有直接关系的重要激酶,它可逆地催化肌酸与
ATP之间的转磷酰基反应。通常存在于动物的心
脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中。心肌
梗塞发生时,血清中肌酸激酶水平迅速提高。
LVDP、+dp/dtmax反映左心室的收缩功能,-
dp/dtmax反映左心室的舒张功能,当心肌损伤程度越
重,水平越低〔7〕。短暂缺血后,再灌注数秒至数 min
内就会出现再灌注心律失常。
缺血时,在特殊中枢递质或特殊细胞表面受体
作用下Ca2+通过电压敏感性(慢)通道进入细胞
内,而慢通道在心肌兴奋收缩耦联中起着重要作用。
在动作电位的2相早期,Ca2+进入慢通道,触发
Ca2+从肌浆网释放。Ca2+通道阻滞剂可降低心
肌缺血再灌注损伤,其保护作用主要是由于在缺血
时快速中止电活动和收缩活动,为缺血后细胞的修
复过程保存能量。
本研究结果表明,缺血-再灌注后,模型组的大
鼠心率减慢或出现室颤死亡,LVDP、±dp/dtmax、CF
均显著下降,冠脉流出液中的CK、LDH 活性显著
升高,提示心肌损伤模型建立成功。毛茛总苷中、高
剂量组,再灌注末期大鼠的 HR、LVDP、±dp/dtmax
和CF均得到了显著改善,其可能通过减慢心率、增
加冠脉流量来改善心肌供氧和耗氧平衡,减轻心肌
缺血再灌注损伤,起到保护心肌的作用。毛茛总苷
对NE诱发的受体调控钙通道有抑制作用,推测毛
茛总苷可能通过影响钙通道,抑制钙内流和钙超载,
起到 对 缺 血 再 灌 注 损 伤 的 保 护 作 用。0.10、
0.20mg/mL的毛茛总苷能够显著改善大鼠离体心
脏的缺血-再灌注损伤,具有保护心肌的作用。
参 考 文 献
[1]RUIWen,CHENHongyuan,TANYuzhi,etal.Rapida-
nalysisofthemaincomponentsinthetotalglycosidesof
RanunculusjaponicusbyUPLC/Q-TOF-MS[J].Nat
ProdCommun,2010,5(5):783-788.
[2]刘苑,张兴,谭毓治,等.紫外分光光度法测定毛茛总苷
不同部位总黄酮的含量[J].广东药学院学报,2012,28
(2):160-162.
[3]王榕乐,谭毓治.毛茛总苷对血管紧张素Ⅱ致心肌肥大
影响[J].广东药学院学报,2008,24(2):154-156.
[4]王榕乐,江欢,谭毓治.毛茛总苷对离体蛙心和大鼠胸
主动脉环张力的作用研究[J].中华中医药学刊,2009,
27(1):91-93.
[5]刘守钾,刘苑,张兴,等.毛茛总苷对肾性高血压大鼠血
压、NO、Ang域及 A7r5细胞内钙的影响[J].中药材,
2012,35(6):953-957.
[6]杨智承,刘守钾,刘苑,等.毛茛总苷对麻醉大鼠血流动
力学的影响[J].中药药理与临床,2011,27(2):82-84.
[7]BagateK,MeiringJJ,Gerlofs-NijlandME,etal.Ambient
particulatematteraffectscardiacrecoveryinaLange-
ndroffischemiamodel[J].InhalToxicol,2006,18(9):
633-643.
收稿日期:2014-1-8
作者简介:师林(1983-),女,主治医师,主要从事中西医结合肿瘤研究;E-mail:shilin293@qq.com。
加味龟鹿二仙胶汤对气阴两点肺癌小鼠化疗的减毒增效作用
师 林1,柯 斌2,宋朝阳1
(1.南方医科大学珠江医院中医科,广东 广州510282;2. 中山大学附属第一医院中医科,广东 广州
510080)
摘要 目的:观察加味龟鹿二仙胶汤对气阴两点肺癌小鼠化疗的减毒增效作用。方法:建立气阴两虚型
C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,随机分为正常对照组、模型组、顺铂组、加味龟鹿二仙胶汤组、加味龟鹿二仙胶汤
+顺铂组(联合组),每组各12只,共14d。观察小鼠一般生存状态及肿瘤生长情况,计算抑瘤率,测定小鼠免疫功
能,计数各组外周血常规及骨髓有核细胞。结果:联合组抑瘤率显著高于顺铂组(P<0.01);联合组小鼠脾指数和
胸腺指数显著高于顺铂组(P<0.01);与顺铂组比较,加味龟鹿二仙胶汤可使化疗荷瘤小鼠外周血白细胞、血小板
和血红蛋白计数升高,其中血红蛋白和血小板计数显著升高(P<0.01);加味龟鹿二仙胶汤可使化疗后荷瘤小鼠的
骨髓有核细胞计数显著升高,与顺铂组比较统计学差异显著(P<0.01)。结论:加味龟鹿二仙胶汤对顺铂抑制小鼠
肿瘤生长有增效作用,对骨髓造血细胞及骨髓有核细胞有保护作用,同时可以增强小鼠机体免疫机能。
关键词 加味龟鹿二仙胶汤;顺铂;气阴两虚;Lewis肺癌;骨髓抑制
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2014)08-
·4341· JournalofChineseMedicinalMaterials 第37卷第8期2014年8月