全 文 ：3． 2 测定结果的分析 超临界萃取所得的罗勒子萃取物为
淡黄色，得率为 10． 5%，通过 GC-MS 分析分离出 63 种化合
物，鉴定出 58 种成分，占其总相对质量分数的 99． 23%(以峰
面积计，下同)。对鉴定出的 58 种成分进行归类分析，可知
已鉴定组分中含烷烃(C20以上)、烯烃、醇类、酚类、酯类及高
级脂肪酸等物质，其中烷烃占 5． 08%，烯烃占 3． 92%，醇类
占 5． 28%，酚类占 1． 41%，酯类占 7． 55%，高级脂肪酸占
73． 60%，萜类化合物约占 1． 00%。在已鉴定的组分中相对
含量较高的几种化合物为:亚油酸(68． 70%) ，三十酸甲酯
(5． 22%) ，棕榈酸(3． 69%) ，穿贝海绵甾醇(3． 45%) ，E-角
鲨烯(2． 55%)。以上分析证明罗勒子中含有大量的亚油酸，
亚油酸是人体必需的脂肪酸之一，对于心脑血管有良好的保
护作用，多种动物试验都已经证实亚油酸异构体混合物或单
一异构体能够抑制胃、乳腺、结肠以及前列腺肿瘤的发
生［4-6］，亚油酸还具有降血糖，增强免疫力等作用。另外，在
罗勒子中还发现了活性物质角鲨烯。角鲨烯(squalene) ，又
名鲨烯，鲨萜，其化学名称为 2，6，10，15，19，23-六甲基-2，6，
10，14，18，22-二十四碳六烯。是一种高度不饱和烃类化合
物，具有提高体内超氧化物歧化酶活性、增强机体免疫力、抗
衰老、抗肿瘤等多种生理功能［7-8］，是一种无毒性的具有防病
治病作用的海洋生物活性物质，被广泛应用于医药、化妆品
等相关领域。由以上分析可知，罗勒子是一个很有开发前景
的天然药物。
参考文献:
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扬子毛茛的质量标准研究
贾清艳， 沈祥春， 吴春高* ， 肖海涛， 陶 玲
(贵阳医学院药学院，贵州 贵阳 550004)
收稿日期:2011-01-20
作者简介:贾清艳(1985—) ，女，硕士研究生，从事中药临床前研究。Tel:15223292613，E-mail:jiaqingyan2006@ 126． com
* 通信作者:吴春高，副教授。Tel:(0851)6908478
摘要:目的 建立高效液相色谱法定量测定扬子毛茛中尿囊素的方法。方法 采用 Ultimate XB-NH2-2 色谱柱(5 μm，
4． 6 mm × 250 mm) ，流动相为乙腈-10 mmol /L磷酸二氢钠(85 ∶ 15) ，检测波长 210 nm;体积流量:1． 0 mL /min;柱温:30
℃。结果 尿囊素在 0． 043 2 ～ 0． 604 8 μg 范围内，进样量与峰面积积分值线性关系良好，回归方程为 Y = 959． 27X －
10． 687，相关系数为 r = 0． 999 9(n = 7)。尿囊素回收率为 93． 80% ～ 98． 80%(n = 6)。结论 本法操作快速、简便、准确，
可用于扬子毛茛药材质量控制的方法。
关键词:尿囊素;扬子毛茛;HPLC
中图分类号:R284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)08-1451-03
扬子毛茛 Ranunculus sieboldii Miq．，又名辣子草、鸭脚板
草，为毛茛科 Ranunculaceae 毛茛属 Ranunculus 植物扬子毛
茛的全草。分布广泛，全草入药，味辛、苦、性热、有毒，具有
清热解毒、利湿、消肿、止痛、退翳、截疟、杀虫等功效［1］。贵
州苗族地区民间将全草捣烂外敷，用于肿毒、跌打损伤、蛇
咬，煎煮内服治疗肝炎、胃肠绞痛等疾病［2］。国内外对扬子
毛茛的研究较少［3-8］，其质量控制方法及药效成分的研究至
今尚未见报道。课题组通过对扬子毛茛的化学成分及药效
研究发现，尿囊素(allantoin)作为扬子毛茛的主要化学成分
之一，是扬子毛茛解痉利胆作用的活性成分，其量的高低与
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抗炎作用具有正相关性，表现出较强的抗炎镇痛作用，有明
显的剂量依赖性，为扬子毛茛的药效成分。因而尿囊素可以
作为反映扬子毛茛药材质量的一个重要指标。本实验建立
高效液相色谱法定量测定扬子毛茛中尿囊素的方法，从而为
扬子毛茛的质量控制提供可靠的手段。
1 实验材料
1． 1 仪器 高效液相色谱仪(美国，Agilent 1100) ;电子天
平(日本，BL-220H) ;超声波清洗器(上海冠特超声仪器有限
公司) ;旋转蒸发仪(德国，R-200 /V) ;离心机(上海分析器械
厂)。
1． 2 试药 尿囊素对照品(国药集团化学试剂有限公司，
F20060929，纯度≥98． 5%)。乙腈为色谱纯，其余所用试剂
均为分析纯，水为乐百氏纯净水。
本实验所用扬子毛茛全草于 2009 年 5 月采自贵阳市云
岩区、乌当区和花溪区，并由贵阳医学院药学院龙庆德老师
鉴定为扬子毛茛 Ranunculus sieboldii Miq．。
2 方法与结果［9-10］
2． 1 色谱条件 Ultimate XB-NH2-2 柱(5 μm，4． 6 mm ×
250 mm) ;流动相为乙腈-10 mmol /L 磷酸二氢钠(85 ∶ 15) ;
检测波长为 210 nm;体积流量为 1． 0 mL /min;柱温为 30 ℃。
对照品和样品 HPLC图谱见图 1。理论塔板数以尿囊素峰计
算，不低于 2 500。在上述条件下，尿囊素色谱峰与其他杂质
峰均能达到基线分离。
A
B
图 1 对照品和样品 HPLC图
A．尿囊素对照品 B．扬子毛茛样品 1．尿囊素
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取经 105 ℃干燥至恒定质
量的尿囊素对照品适量，加高纯水溶解制成每 1 mL 含尿囊
素0． 54 mg的对照品贮备液。
2． 3 供试品溶液制备 取扬子毛茛(50 ℃干燥 3 h)约 5 g，
精密称定，以 90%乙醇(体积比 1 ∶ 12)于 80 ℃回流提取1． 5
h，提取 3 次。回收溶剂至近干，用高纯水定容于 10 mL量瓶
中，精密吸取 1 mL，加入到 10 mL 的量瓶中定容，即为供试
品溶液。进样前 4 000 r /min 离心 10 min，取上清液用0． 45
μm的微孔滤膜过滤，即得。
2． 4 线性关系考察 精密量取 0． 1、0． 2、0． 4、0． 6、0． 8、1． 2、
1． 4 mL贮备液，分别置于 25 mL 量瓶，稀释至刻度，混匀。
取上述系列浓度对照品溶液，分别进样 20 μL，并测定其峰
面积。以峰面积积分值 Y 为纵坐标，尿囊素质量 X 为横坐
标，绘制标准曲线，并得出回归方程 Y = 959． 27X － 10． 687，
相关系数为 r = 0． 999 9(n = 7)。结果表明，尿囊素在
0． 043 2 ～ 0． 604 8 μg间线性关系良好。
2． 5 精密度试验 取同一对照品溶液，连续进样 6 次，每次
20 μL，所测得尿囊素峰面积积分值的 RSD 值为 0． 4%(n =
6) ，表明仪器精密度良好。
2． 6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液 10 μL，分别在 0、
1、2、4、6、8 h进样，测得供试品尿囊素峰面积积分值在 8 h
之内的 RSD值为 2． 5%(n = 6)。表明供试品溶液在 8 h 内
稳定。
2． 7 重复性试验 精密称取同一批次扬子毛茛 5 g，共 6
份，回流提取，照样品处理方法处理后分别进样，进样量为
10 μL。计算平均峰面积积分值，其 RSD 为 1． 17%，表明本
方法重现性良好。
2． 8 加样回收率实验 取已测定尿囊素的扬子毛茛(50 ℃
干燥 3 h) ，精密称定 6 份，每份 5 g，各精密加入约 1 mL尿囊
素对照品溶液，照供试品溶液制备方法操作，作为供试品溶
液，进样量为 10 μL。用外标法测定，计算尿囊素的平均回
收率 95． 8%，RSD为 1． 98%。结果见表 1。
表 1 加样回收率试验 (n =6)
样品中原有量
/mg
加入量
/mg
实测总量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
8． 720 6 0． 54 9． 148 7 98． 8
8． 717 2 0． 54 8． 919 6 96． 4
8． 713 7 0． 54 8． 713 3 94． 2 95． 8 1． 98
8． 722 4 0． 54 8． 960 6 96． 7
8． 718 9 0． 54 8． 768 1 94． 7
8． 717 2 0． 54 8． 685 1 93． 8
2． 9 样品中尿囊素的测定 分别取不同产地的扬子毛茛约
5 g，精密称定，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液。
分别进样 10 μL，测定峰面积，计算不同产地扬子毛茛中尿
囊素的量，结果见表 2。
表 2 扬子毛茛中尿囊素的测定结果 (n =3)
采集地 尿囊素 /(mg /g) RSD /%
贵阳市云岩区 1． 816 0 1． 9
贵阳市乌当区 1． 812 2 2． 1
贵阳市花溪区 1． 742 4 2． 4
贵州六盘水 1． 809 2 1． 87
3 讨论
在色谱柱的选择过程中，曾用 AQ-C18柱，Ultimate XB-
C18柱，Diamonsil C18柱分析样品，尿囊素的保留时间太短，尽
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管加入了辛烷磺酸钠之类的离子对试剂也没有太大改变，不
能与杂质较好的分离。因此考虑用氨基柱，选用 Ultimate
XB-NH2 柱后，尿囊素的保留时间可延长到 7 min 以后。因
此选定此柱作为本研究的分析柱;在流动相的选择中，曾以
甲醇-水(80 ∶ 20) ，乙腈-水(80 ∶ 20) ，甲醇-10 mmol /L 磷酸
二氢钠(85 ∶ 15) ，乙腈-10 mmol /L 磷酸二氢钠(85 ∶ 15)来
进行考察，结果后者分离效果好，尿囊素前后无干扰，色谱重
现性好，因此将乙腈-10 mmol /L磷酸二氢钠(85 ∶ 15)做为本
实验的流动相。在波长的选择中，以 210、220、230、240、250
nm来考察检测波长对图谱的影响，结果在 210 nm 处，色谱
峰峰形最好且峰面积大，从而选定 210 nm 为检测波长。该
方法简便、准确、具有良好的重复性，适于扬子毛茛中尿囊素
的定量测定，为扬子毛茛原材料的质量控制提供了科学可靠
的依据。
参考文献:
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不同工艺制备茵陈蒿汤化学成分的比较
梁 会， 曹佩雪， 潘卫东， 梁光义*
(贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
收稿日期:2011-01-06
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30860364)
作者简介:梁 会(1985—) ，女，硕士研究生，主要从事天然药物化学研究。Tel:(0851)3807713，15985116082，E-mail:lianghuidaihongpen@
163． com
* 通信作者:梁光义(1952—) ，教授，博士生导师。E-mail:guangyi_liang126． com
摘要:目的 考察茵陈蒿汤合煎颗粒剂、分煎颗粒剂与传统汤剂浓缩剂化学成分的差异，从化学成分的角度为合煎颗粒
剂、分煎颗粒剂与传统汤剂浓缩剂应用于临床提供依据。方法 采用液质联用仪，以 Hypersil BDS-C18为分析柱，对 3 种
剂型的茵陈蒿汤的成分进行分析比较。结果 通过对 10 批样品的考察，发现合煎颗粒剂和分煎颗粒剂与传统汤剂浓缩
剂相似度均达到 0． 9 以上，相似度较好，且合煎颗粒剂的相似度比分煎颗粒剂相似度更高。结论 合煎颗粒剂、分煎颗
粒剂均可用于临床，且合煎颗粒剂的临床作用可能更与传统汤剂浓缩剂相符。
关键词:茵陈蒿汤;HPLC;LC-MS;指纹图谱
中图分类号:R284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)08-1453-04
茵陈蒿汤出自《伤寒论》，由茵陈蒿、栀子、大黄三味药
组成，具有清热除湿、保肝利胆之功效，是临床上治疗黄疸的
要药［1］。现代研究表明它具有利胆、保肝、护胰、解热、抗炎、
镇痛、抗菌、抗病毒等药理作用［2］。传统中药汤剂越来越难
以适应现代化社会快节奏的生活方式和临床应用的需要［3］，
所以现代也有将传统煎煮汤液进行改进，做成分煎颗粒剂或
合煎颗粒等形式用于临床，但这种新的用药形式是否与传统
汤剂浓缩剂的药效有相似性，是一个值得探讨的问题，而且
中药配方颗粒的发展问题仍值得思考和研究［4-8］。另外，由
于合煎时各成分间的相互作用所产生的增溶助溶作用，提高
或降低了某些成分的溶出率，所以分煎与合煎在成分上存在
着差异［9］。本实验从化学组成角度比较其与传统汤剂浓缩
剂的相似性，考察茵陈蒿汤合煎颗粒剂、分煎颗粒剂与传统
汤剂浓缩剂化学成分的差异，从化学成分的角度为合煎颗粒
剂、分煎颗粒剂与传统汤剂浓缩剂应用于临床提供依据。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 HP1100 高效液相色谱仪(在线脱气机、二元泵、
自动进样器、柱温箱、DAD 检测器，Chemstation 色谱工作
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