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+ mAO
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0111〕岁L , ③ M S + 6 一 B AO . S I n酬 L + m A o . o l
n娜 L 。 继代及壮苗培养基 : ①MS + 6 一 BA 1 . 0 1 11岁 L
+ NAA 0
.
1 1 11岁L , ② MS + 6 一 B冉2
. 侃〕酬 L + N AA
0
.
05 m群L , ③ MS , ④ MS + 6 一 B月
. 伪娜 L + N AA
0
.
01 11 1酬 L 。 生 根培养 基 : ① MS , ② 12/ MS + m A
0
.
h 刀岁L 。
2 试验结果与分析
2
.
1 启动培养诱导 出芽的生长情况 5 月 28 日将
接彩叶草腋芽茎段分别接种在启动培养基① 、 ② 、
③中 , 从表 1可看 出 , 培养基中加人的激素浓度不
同 , 外植体诱导芽表现出不同的生长形态 , 在培养
基②中 , 芽的诱导成活率较好 , 并且丛生芽的产生
及生长较适 中 。 而在培养基①中 , 松散型愈伤形成
较多 , 诱导芽成活率低 。 在培养基③中 , 却表现出
茎端生长势旺 , 单株生长明显 , 没有芽丛产生 , 且
长势弱 , 愈伤形成少 。 彩 叶草具有较强的顶端优
势 , 而培养基中细胞分裂素超过 1刀州酬L 时 , 虽然
抑制 了芽的伸长 , 但造成植物细胞内源激素过盛 ,
与外源激素的相作用下 , 造成植株承受不住过高激
素的刺激 , 而导致植株膨胀 、 透明以致断裂现象的
发生 , 影响了丛生芽的产生及生长 , 产生 出较多不
具备分化能力的愈伤团 。 而培养基②中 , 诱导出芽
的生长表现与培养基①和③的生长表现相反 。 通过
此现象可看出 , 配合一定量 的细胞分裂素与生长素
才能 共同诱导侧 芽 的萌发 、 生长及不定 芽 的分
化川 。 试验表明 , 芽诱导的适宜培养基为② sM + 6
一 B月 . o n娜 L + BI OA . 0 l l x娜 L 。
2
.
2 试管苗继代增殖及壮 苗培养 将萌动 出的新
生芽从茎段切下 , 将接人继代增殖培养基①和② 中
的新生芽 , 与先接人壮苗培养基③ 、 再接人继代增
殖的培养基④中的新生芽进行生长分化对 比 (表
2 )
, 观察对比时间为转人后 30 do
表 1 诱导出芽的生长情况 (〕压』后观察 )
培养基 (网岁 L 诱导率
( % )
生 长 情 况
① M S + 6 一 B ZA . 0 + 扭八0 01
②MS + 6 一 B A I . 0 + 田人0 . 01
③泌十 6 一 B八D . 5 + 田月习 . 01
萌动芽生长慢 ,丛生 芽形成少 , 芽高 0 . 8 一 1。 , 多为单株 ,基部膨大 、 透明 ,有断裂砚象发生
诱导芽成活率较高 ,丛生芽形成较多 , 芽高 2口 ,有淡绿色愈伤形成
芽萌动力弱 , 单株生长不 良 ,较瘦小 ,愈伤形成少 ,茎高 2。
扮os刃
表 2 不同增殖培养墓对苗分化及壮苗培养的影晌
沮度 、
光照度
培养基
(网岁L ) 增殖倍数 生 长 状 态
①②③2X( X) ~ 乃田h
25 ℃
2 ~ 3 倍 植株生长慢 ,茎细小 , 叶片未完全展开 , 叶色失绿 ,株高 3二 , 节间短 ,愈伤组织老化
2从XJ 、 刃田h
30 ℃
l 一 1 . 5 倍 植株生长停止 ;叶片狭小 , 无绿色 , 白化苗较多 , 茎瘦弱 , 茎杆透明 、软化 ,具松散愈伤组织
2 倍 植株生长旺盛 , 叶片伸展 , 茎增粗 , 花色显现 ,愈伤形成好
④ 4 一 5倍 叶片花色显现 ,植株生长旺盛 , 分化较好 ,愈伤组织结构坚硬 ,产生较多
从表 2 可看出 , 未经 M S 壮苗培养的彩叶草试
管苗在培养基①和②中生长力差 , 尤其是②号培养
基 , 由于刚分化不久的丛生芽 , 从母株体上切除 ,
离开先前 已适应的环境 , 吸收不到母株体内所能供
给适量 浓度的营养 , 在无适应过程及壮苗的情况
下 , 转人新的生长环境中 , 又在细胞分裂素较高浓
度的刺激下 , 植株体内产生拮抗和不适应表现 。 在
培养基①中 , 虽然彩叶草试管苗生长形态较②强 ,
但与经③号 MS 培养后的④中的新生芽在同样激素
浓度下对比 , 反应差 , 这说明 , 虽 然激素浓度适
宜 , 但与苗的生长势是紧密相关的 , 需二者紧密结
合 , 才能分化生长出具有繁殖能力的继代苗 , 充分
达到快繁效果 。
表 2 表明 , 彩叶草诱导出的丛生芽 , 由于很多
外界及 内源 因素的影响下 , 苗长势弱 , 不能直接进
人分化增殖培养基中生长 , 必须经过 毗 壮苗培养
后 , 方可进行彩叶草的增殖 、 快繁生长 。 为了提高
试管苗有效繁殖系数 , 根据试管苗的形态模型 z[] 及
增芽倍数 , 选出了适宜培养基 , 即经壮苗后的 MS
+ 6 一 B龙众 1娜 L + N九切 . 01 喇扩L 培养基 。
2
.
3 继代苗在生根培养基中的表现 将继代 5 一 6
次的增 芽苗 , 选择生长迅速 , 芽粗壮 , 节 间距适
中 , 叶片正常 , 作 为生根苗 , 经 35 一 40 d 后观察 ,
发现彩 叶草茎段所诱导出的试管苗在 2 种生根培养
中国农学通报 2以 ) 1年 第 17 卷 第 1期
基中 , 均可诱导生根 , 是属易生根植物 , 两种培养
基对比 , 相差不是很大 , 以② 12/ M S + BI OA . 1御g/ L
生根培养基稍领先 , 是最适宜生根培养基 , 当根数
长至 5 一 6 条左右 , 便可开瓶移栽 。
2
.
4 试管苗的移栽 将准备移栽的试管无菌苗 ,
在自然光下炼苗 3 一 d4 , 一般采 用 自然散射光最
好 。 炼苗结束后取出无菌苗 , 洗净根部培养基 , 移
栽人苗床 , 覆盖薄膜 , d2 喷水 1次 , 加 d 左右开始
生长 , 移栽前苗床要充分浇透水 , 移栽基质要求保
水 、 保湿 、 通气性好 , 移栽时间秋季为好 。
2
.
5 温度 、 光照时试管苗的影响 由表 2 可看出 ,
在温度 20 一 25 ℃ , 光 照强度 在 2 X( X) 一 2酬X】l x 时 ,
植株发黄 , 愈伤组织疏松 、 老化 , 分化率低 , 叶色
失绿 , 出现白化苗现象 , 叶小苗弱 , 分化 、 生长缓
慢 , 甚至停止分化生长 , 而在 温度 为 28 一 30 ℃ ,
光照强 度在 25 0 一 3X( X) h 时 , 苗分化增殖率显著
提高 , 叶片伸展 , 叶色显现 , 整个植株生长势 旺 ,
株高增加 , 叶色深绿 , 植株健壮 , 白化苗消失或缓
和呈淡绿色 , 具分化能力的愈伤组织形成较多 。 试
验表 明 , 在温度为 28 一 O3 ℃ , 光强 度 在 2 5( X) -
3 (】】)h 时 , 有利于彩叶草试管苗分化生长 。
一般来说 25 一 28 ℃ , 荧光灯 照度 2X( X) h 和持
续光照就能满足细胞绿化的要求阎 。 不同植物材料
对光强的要求也有所不同 , 在光照条件下 , 二氧化
碳有利于叶绿素的合成闭 , 而且 , 植物生长在光下
生长的同步性很强困 。 光对植物 的生长也有一定的
促进作用困 。 总之 , 温度 、 光照及适量的激素浓度
对彩叶草试管苗的分化生长有着不同的影响 。
.2 6 不 同取材时间试管苗生长差异 经多次试验
比较 , 发现不同取材时期对其成活与分化影响较
大 , 从 5 一 8 月不同取材时期长 出的试管苗可以看
出 : 5 月份所取材料正处在春暖花开植物枝条生长
及促进侧芽萌动 , 养分最充足的时期 , 它所形成试
管苗成活率高 , 长势 、 长相好 , 容易成苗且苗壮 ,
而 8 月份外殖体处于生殖生长旺盛时期 , 接种后 ,
试管苗生长缓慢易死亡 , 由此可见 , 取材时间与植
物生长有密切关系 。
3 讨论
3
.
1 芽的诱导是进行无性系快速繁殖的关键环节 ,
试验表明 , 6 一 BA 可有效地诱导芽的萌发 和增殖 ,
一定浓度的生长素与细胞分裂素配比对彩叶草器官
分化有很大影响 , 低浓度生长素 可以促进茎 的伸
长 , 彩叶草诱导分化培养基 以 MS + ` BA I 刃咧扩L +
BI OA
.
ol n娜 L 与 M S + 吞 B刀 . o n娜 L + N AA 0 . 01 1 1娜 L
较好 。
3
.
2 生根试验表明 , 低浓度的生长素有利于根的
形成 , 加速苗的生长 。 生根培养基中加 m A 及 M S
均可诱导根的形成 , 其 中 以 l 2/ MS + IB AO . 11 11岁 L
较好 。
3
.
3 不同植物对于温度 、 光照强度及取材时间有
不同的要求 , 试验表明 , 彩叶草组织培养对温度及
光照强度有着较高需求 。 今后可开展光生理问题的
研究 , 如光对细胞的生长 、 分裂与发育的影响 , 光
对组织培养中细胞分化能力的影响等 e[] 。
主要参考文献
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(上接第 24 页 ) 两种可能 : 一是小麦 DN A 片断
(基因 ) 插人水稻 DNA 链中 , 使小麦的 “ 糯性 ” 转
人水稻 , 二是小麦 DN A 诱变作用所致 。
主要参考文献
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