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大吴风草叶柄的胚状体诱导和植株再生



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杜仲芽培养形成完整植株
张朝成 (湖北省农科院原子能农业应用研究所 , 武功
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植物名称 : 杜仲 (肠匆。 。仇 嘟 , 口记云习 )
材料类别 : 从生长健壮的成龄树上 , 取下当年
生幼枝 , 除去叶片 , 经 0 . 1% 升汞液消毒 9 分钟 , 无
菌水冲沐几次后 , 切成带 1~ 2个腋芽的茎段 。
培养条件 : 繁殖培养 芽采 用加有 B A 2 m g / L
(单位下同 )和 N A A 0 . 2的 M S 培养基 , 蔗糖 3% , 琼
脂 0 . 8% , 培养基 p H 值为 5 . 8 。 生根用 1 / Z M S (大
量元素减 半) + 工B A 1 . 5 + 活 性炭 0 . 2 9 + 蔗塘 20 9
的固体培养基 。 培养温度 2o5 C 左右 , 每 日光 照 12
小时 , 光照强度 1 50 0~ 2 0 0 0 l x
生长与分化情况 : 接种后腋芽很快萌发 , 一个
月左右就能长成带 4 ~ 6 片叶 , 高 3 ~ s c m 的嫩枝 ,
叶片深绿色 , 有光泽 , 长 3~ 5 c m , 宽 1 . 5~ Z o m , 叶
片中也含有银白色胶丝 。 茎粗壮 , 节间明显 , 腋芽发
育正常 , 将此腋芽和顶芽转接到新鲜培养基上培养 ,
一个月左右又长成一些新嫩枝 , 有时基部还发生 一
些丛生芽 。 若培养基中 B A 的浓度超过 3 二 g / L , 则
叶片成细线形 (宽仅 2 ~ 3 m ln , 长 10 ~ 15 nI m ) , 茎极
短 , 叶呈丛生状 , 所以要培养出又多又健壮的嫩杭
B A 的浓度取 Z m g两 为好。
将这些嫩枝接种于生根培养基中 , 巧 ~ 20 天即
生出粗壮的根 , 但粗根在固体培养基中不发生根毛 ,」
只有当它伸出固体培养基 , 暴露于空气之中时 , 粗壮 .
. 根的前端才迅速长出根乱 这样的完整植株即可移
栽土壤中 。
新进展 : 杜仲芽培养形成完整植株国内外未见
报道 。
意义与用途: 杜仲为我国特产经济林木 , 其树
皮 、 叶和果内所含银白色胶踢 为制造硬橡胶的重要
原料。 树皮还是一味常用中药 , 木材也较好。 常规
用种子繁殖 , 但种子资源并不丰凰 发芽率也不高 。
组织培养的方法有可能在较短的时间内获得大量整
齐一致的优良种苗。 此项研究对其优良单株的快速
繁殖有一定的参考价值 。
收稿 1 9 8 7年 8 月 2 0 日
大吴风草叶柄的胚状体诱导和植株再生
魏正元 李广彦 刘启宏 陈英兰 (中国科学院武汉植物研究所 , 武汉 )
S o m a t i e E m b r y o g e n e s is a n d P la n t le t R e g e n e r a t i o n f r o m t h e C a llu s o f
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植物名称 : 大吴风草 (尸 a) 了叩伽 、 尹脚而哪饥 ) ,
又名活血莲 、 莲蓬草 、 八角乌。
收稿 1 98 7 年 9 月 3 0 日致谢 徐惠珠 、 何子灿同志曾给予大力协助 。
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1988. 02. 028
材料类别 : 叶柄表面灭菌后切成 5 m m 长切段 。
培养条件 : 诱导愈伤 组织 仍用 M S 基本培 养
基 , 激素成分为 : 2 , 冬D 1 . 0 ~ 2 . o m g / L (单位下同 )
+ B A 0 4~ 1
. 。。 诱导胚性愈伤组织用无激素的 M S
培养基 。 胚性愈伤组织继代培养和胚状体分化生长
采用 N 。培养基 , 附加激素工人A O . 5 + B人。 . 1。 促根
壮苗培养基为 1/ 2 班 S + 工A 八 。 . 5 十玉米素 0 . 1 。 培
养室温度 23 ~ 3 0o C 。 照光采用日光灯 , 每天光照
8 ~ 10 小时。
生长和分化情祝 : 叶柄切段接种在力瀚飞奋为和 B A 的 M S 培养基上 , 15 天后可以从切 口处形成
质地紧密的愈伤组织 , 诱导率达 90 % 以上 。 在本实
习全使用的 2 , -4 D 和 B A 的浓度配比范围内 , 愈伤组
织可分为三类: ( 1) 白色或淡绿色 ; ( 2) 黄绿包 掷)绿
色 。 将绿色的愈伤组织转移到无激素的 M S 培养基
上再培养 3。无 即能从表面产生胚性细胞团, 频率达 5 0% 。 胚性细胞团呈淡触 , 颗粒状 , `彼此连接松散。 少数胚性细胞团上已可着到 1~ 2 个小胚状
` 体。 这些胚性细胸团和胚状体在无激素的 M S 培养
基上增长缓慢 , 继续培养 30 天后 , 没青明显变化 。 将
胚性细胞团从愈伤组 织上剥 下 , 转移 到 N 。 附加
I公一 A 0 . 5 和 B人 .0 1 的培养基上 , 又可迅速增繁 , 同
时分化出大量的胚状体。 胚状体常由几个至几十个
聚集在一起 , 不经转移就可萌发成苗 。 分化成苗 时 ,
胚根端聚集在一起的多个胚状体 , 可见胚根膨大而
不能伸长 , 最后形成丛状的无根苗 。 少数单个的胚
状体和胚根撇游离扣的滋状体则可同时看到胚芽和
胚根的生长 , 形成完整植株。 胚性细胞团每月继代
培养一次 (同时将胚状体苗移出 )可不断增繁和产生
胚状体。 转移 6 代后 , 仍保持胚状体分化能力 。 无
根的胚状体苗在 1 / 2M 8 + 工人人 。 .沂+ 玉米素 。 . 1 的
培养基上生长 30 天 , 即可生 根 。 将根 长 2 ~ 3 c m
以上 的胚状体苗移入沙土 盆 栽 , 植 株 即可存
活。
新进展 : 大吴风草的组织培养和植株再生 , 国
内外尚未见报道 。
意义和用途 : 大吴风草是菊科多年生衡绿草本
植物 , 可供药用 , 能清热解毒 , 活血散肿 , 为江南常见
中草药 , 亦是常见的庭园观赏植物。 大吴风草叶柄
的胚状体诱导和植株再生为其快速擎殖提供了一 条
有效途径 , 亦为体细胞胚胎发生的深入研究提供了
一种新的实验材料。
T i o a o e C . It肠 r e a n d P lau t le t R e f
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名H U Y o u 一 G u a n g , X l 叭 (D印叮 饥` . 心 oj B `O切夕夕, 万。邝彻郎` 万汾们。 乙U画” 盯咐 t夕,
植物名称: 菜豆 (尸 h韶 eo z、 哪 lg ar 2’s )
材料类别 : 上胚轴 、 幼茎 。
培养条件 : 基本培养基为 M S 。 附加 : (力卜B入
1
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0 且嗯 / L (单位下同 ) + 工A A O . 1 ; (2) 6一 B A
2
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0 + 几冬D 0 . 5 ; ( 3 ) I A A O . 0 1 : (幻 Z T 2 . 0 + 工人入
0
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2
。 以上培养基均加蔗 糖 3% , 琼酷 0 . 7% , p H
5
.
6
, 培养温度 25 士 oZ C , 每夭光照 1 2 小时 , 光照度
为 120 0 l x 。
生长与分化情况 : 把株龄为 1。 天的 菜豆无 菌
苗的上胚轴与幼茎切成约 0 . 5 0 m 长的切段 , 分别接
种于培养基 ( 1 )和 ( 2 ) 上。 2 周后在上胚轴和幼茎 切
段上都直接长出丛生芽 , 同时形成愈伤组织 。 在相
同的培养基上继代培养 , 每 2 周转 接一 次 。 8沁 10
周后 , 培养基 ( 1) 上的愈伤组织分化出芽 。 从愈伤组
织分化出的芽较小 , 生长缓慢 。 大部分芽畸形 , 只有
10 % 左右以后能发育成正常的苗。 培养基 (2) 上形
成味松的愈伤组织 , 这种愈伤组织以后不再分化 。
带芽的愈伤组织转接到培养基 ( 3) 上 , 穿即可发
育成苗。 当苗长至 2 c m 高时 , 切取带少量愈伤组织
的苗转接到培养基 (4) 上 , 10 天后从愈伤组织 、 茎的
基部以及与培养基接触的幼叶上长出大量的根 , 形
成完整植株。 生根率可达 10 。% 。
新进展 : 国内外未见报道 。
意义与用途 : 菜豆是重要的蔬菜和杂 粮作物。
利用组织培养方法获得再生植株可能对选育菜豆 的
优良品种有一定的意义。
收稿 1 9 8 7 年 10 月 8 日-