全 文 ：2014 年 8 月第 21 卷第 8期 中国中医药信息杂志 ·63·
散血草水提物抗胃溃疡的实验研究
朱凯 1,赵欣 1,骞宇 1,易若琨 2
1.重庆第二师范学院生物与化学工程系,重庆 400067；2.釜山大学食品营养学科,韩国 釜山 609-735
摘要：目的 观察散血草水提物对胃溃疡小鼠的影响,为临床应用提供实验依据。方法 采用利血平诱导
制作胃溃疡动物模型。实验小鼠随机分为正常组、模型组、散血草低剂量组、散血草高剂量组、雷尼替丁组,
各给药组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水,连续 4 周。测定胃溃疡面积、胃液量和胃液酸
度,酶联免疫法检测血清中相关因子水平,RT-PCR法检测胃组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)
基因表达。结果 与模型组比较,散血草低、高剂量组胃溃疡面积明显减少,血清中生长抑素和血管活性肠肽水
平升高,胃动素和 P 物质水平降低(P＜0.05,P＜0.01)；散血草低、高剂量组白细胞介素(IL)-6、IL-12、肿瘤
坏死因子-α、γ-干扰素水平及 iNOS、COX-2 基因表达水平降低(P＜0.05,P＜0.01)。结论 散血草具有较好
的抗胃溃疡作用,散血草高剂量组表现更优。
关键词：散血草水提物；胃溃疡；细胞因子；基因表达；小鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.08.018
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2014)08-0063-04
Experimental Study on Anti-Gastric Ulcer Effect of Aqueous Extractive of Clarke Boea
Herb ZHU Kai1, ZHAO Xin1, QIAN Yu1, YI Ruo-kun2 (1.Department of Biological and Chemical Engineering,
Chongqing University of Education, Chongqing 400067, China；2.Department of Food Science and Nutrition, Pusan
National University, Busan 609-735, Korea)
Abstract：Objective To observe effects of aqueous extractive of Clarke boea herb on mice with
gastric ulcer, and provide basis for clinical application. Methods Gastric ulcer model was induced
by reserpine. The mice were divided into normal group, model group, ranitidine group, low and
high dose of Clarke boea herb groups. Mice in treatment groups were given corresponding drugs
by gavage, and the normal group and control group were given the same amount of saline for 4
weeks. The area of gastric ulcer, serum proinflammatory cytokines gastric juice volume, gastric
juice acidity, iNOS and COX-2 gene expressions were detected. Results Compared with control
group, the gastric ulcer area in low and high dose of Clarke boea herb groups decreased
significantly. Clarke boea herb increased the SS and VIP, decreased the MOT and SP serum levels
(P＜0.05, P＜0.01). Clarke boea herb reduced the levels of serum proinflammatory cytokines of
IL-6, IL-12, TNF-α and IFN-γ (P＜0.05, P＜0.01). Clarke boea herb also decreased the genetic
expressions of iNOS and COX-2 (P＜0.05, P＜0.01). Conclusion Clarke boea herb has good gastric
ulcer preventive effects, and the high dose of Clarke boea herb group showed the best efficiency.
Key words：aqueous extractive of Clarke boea herb；gastric ulcer；cytokine；genetic expression；mice

基金项目：重庆高校创新团队建设计划(KJTD201325)
通讯作者：赵欣,E-mail：foods@live.cn
散血草 Ajuga decumbens Thunb.是唇形科筋骨草
属植物,主要分布在浙江、四川、重庆、江苏和福建
等省[1]。《中药大辞典》对其形态的记载为“多年生草

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(收稿日期：2013-11-29；编辑：华强)
·64· Chinese Journal of Information on TCM Aug.2014 Vol.21 No.8
本,高 10～30 cm,茎基部倾斜或匍匐,上部笔直,多分
支,四棱形,略带紫色,全株密被白色柔毛”[2]。散血草
味苦、性寒,归肺、肝经,清热解毒、凉血消肿,止血、
止痛作用较好[3]。现代药理研究表明,散血草具有抑
菌、调节免疫功能、抗纤维化、抗肿瘤等功效[4-5]。本
研究采用利血平诱导小鼠胃溃疡模型,观察散血草对
胃溃疡小鼠的影响,为临床应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 药物
散血草,购自于重庆和平药房连锁有限责任公
司,重庆市食品药品检验所毛庆高级工程师鉴定为正
品；雷尼替丁,韩国 Sam Chun Dang 制药株氏会社,批
号 12003；利血平,美国 Sigma 公司。
1.2 动物
SPF 级昆明小鼠 50 只,购自于重庆医科大学动物
实验中心,雄性,体质量 20～25 g,动物许可证号：
SCXK(渝)2012-0001,相对湿度(50±10)%,室温(24±
2)℃,12 h 明暗轮换条件下饲养。
1.3 试剂与仪器
胃动素(MOT)、生长抑素(SS)、P 物质(SP)和血管
活性肠肽(VIP)试剂盒,北京普尔伟业生物科技有限
公司；白细胞介素(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α
(TNF-α) 和 γ- 干 扰 素 (IFN-γ) 试 剂 盒 , 美 国
Biolegend 公司；TRIzol 总 RNA 抽提试剂,美国
Invitrogen 公司；诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧
化酶-2(COX-2)引物,上海生物工程公司；无水乙醇
(分析纯)、甲醛(分析纯),重庆市品誉化工有限公司。
旋转蒸发仪(R-114,瑞士 Buchi 公司)；离心机
(VS-15CFN,韩国 Vision 科学株式会社)；紫外分光光
度计(UV-1750,日本岛津公司)；数码相机(D550,日本
佳能公司)；PCR 仪(T100,美国 Bio-Red 公司)。
1.4 散血草提取物制备
将干散血草粉碎后与蒸馏水按质量比 1∶20 混
合,将混合物加热至沸腾,每次提取 20 min,过滤得到
提取液,重复3次,合并提取液,蒸干后得水提物备用。
1.5 造模、分组与给药
采用生理盐水配制利血平悬浊液。除正常组外,
其余小鼠按 10 mg/kg 浓度腹腔注射 0.2 mL 利血平悬
浊液,制作胃溃疡模型[6]。昆明小鼠按体质量随机分为
正常组(A组)、模型组(B组)、散血草低剂量组(C组,
100 mg/kg)、散血草高剂量组(D组,200 mg/kg)和雷尼
替丁组(E 组,50 mg/kg),每组 10 只。实验期间,A 组、
B 组小鼠每日灌胃 0.2 mL 生理盐水,C 组、D 组每日
灌胃0.2 mL散血草水提物稀释液,E组每日灌胃0.2 mL
雷尼替丁稀释液。实验期间各组小鼠自由摄食和饮水,
连续 4周。
1.6 胃溃疡面积、胃液量和胃液总酸度检测
4 周后小鼠禁食 24 h 处死并解剖,取全胃,浸泡在
福尔马林中 10 min 后用数码相机拍照,使用 ImageJ 软
件分析胃溃疡面积,计算胃溃疡抑制率[(各给药组胃
溃疡面积－模型组胃溃疡面积)/模型组胃溃疡面积×
100%],并对胃液量和胃液总酸度进行测定[7]。
1.7 血清中相关因子检测
取小鼠动脉血浆 0.2 mL,4 ℃、3000 r/min 离心
10 min,取上层血清。采用酶联免疫法,按试剂盒说明
书,于紫外分光光度计 450 nm 处检测血清中 IL-6、
IL-12、TNF-α、IFN-γ和 MOT、SS、SP、VIP 水平。
1.8 胃组织诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶-2 基因
表达检测
各组小鼠解剖后取胃组织,用TRIzol试剂提取胃
组织细胞的总 RNA。定量分离到 RNA 后,用 Oligo dT
在 AMV 反转录酶作用下制备 SS cDNA,然后以该 cDNA
为模板 ,RT-PCR 扩增。 iNOS 基因引物：正义
5-AGAGAGATCGGGTTCACA-3,反义 5-CACAGAACTGAG
GGTACA-3；COX-2基因引物：正义5-TTAAAATGAGATTG
TCCGAA-3,反义 5-AGATCACCTCTGCCTGAGTA-3。持家
基因 GAPDH：正义 5-CGGAGTCAACGGATTTGGTC-3,反
义 5-AGCCTTCTCCATGGTCGTGA-3。以含溴化乙锭的
1%琼脂电泳检查 PCR 扩增产物[8]。
1.9 统计学方法
采用 SAS9.0 统计软件进行分析。实验数据用—x±s
表示,组间比较采用方差分析。P＜0.05 表示差异有
统计学意义。
2 结果
2.1 散血草水提物对小鼠胃溃疡、胃液的影响
B 组溃疡最为严重,C、D、E 组胃溃疡面积明显低
于 B 组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)；A、C、
D、E 组小鼠胃液量和胃液总酸度低于 B 组,差异有统
计学意义(P＜0.05,P＜0.01)。结果见表 1。
2.2 散血草水提物对小鼠血清中细胞因子的影响
B 组小鼠 MOT、SP 因子水平最高,SS、VIP 因子水
平最低,而 A 组小鼠表现出相反的趋势；C、D 组血清
MOT 和 SP 因子含量降低,SS 和 VIP 因子含量增加(P＜
0.05)；D 组各血清因子水平最接近 A、E 组。与 A 组
比较,B 组 IL-6、IL-12、TNF-α 和 IFN-γ 水平明显
升高(P＜0.05)；与 B 组比较,C、D、E 组 IL-6、IL-12、
TNF-α 和 IFN-γ 水平降低,E 组各细胞因子水平较 B
组显著降低,最为接近 A 组,见图 1。
2014 年
组别 只
A 组
B 组
C 组
D 组
E 组
注：与 B 组

























2.3 散血
氧化酶-2
各组
显差异(P
弱,C、D
A 组
含
量
/n
g·
L-1

100
80
60
40
20
0
A 组

含
量
/n
g·
L-1

150
120
90
60
30
0
A 组
含
量
/p
g·
L-1

100
80
60
40
20
0
A 组
含
量
/p
g·
L-1

120
100
80
60
40
20
0
8 月第 2
数 剂量(
10
10
10 10
10 20
10 5
比较,*P＜0.
MOT
SP
IL-6
TNF-α
图 1
草水提物
基因表达
小鼠胃组织
＜0.05),B
组 iNOS 和
B 组 C 组 D
B 组 C 组 D
B 组 C 组 D
B 组 C 组
1 卷第 8期
表
mg/kg) 胃


0
0
0
05,**P＜0.01




各组小鼠血清
对小鼠胃组
的影响
中 iNOS 和
组 iNOS
COX-2 明显
组 E 组
含
量
/n
g·
L-1

12
10
8
6
4
2
组 E 组

含
量
/n
g·
L-1
1
组 E 组
含
量
/p
g·
L-1

D 组 E 组
含
量
/p
g·
L-1

10
8
6
4
2

1 各组小鼠
溃疡面积(—x±s
0
5.28±1.14
2.76±1.27*
1.44±0.59*
1.15±0.38*




细胞因子比较
织一氧化
COX-2 mR
和 COX-2 最
低于 B 组,
A 组 B 组
0
0
0
0
0
0
0
A 组 B 组
00
80
60
40
20
0
A 组 B 组
100
80
60
40
20
0
A 组 B 组
00
00
00
00
00
0
中国
胃溃疡面积、胃
,mm2)

*
*
SS
VIP
IL-12
IFN-γ

氮合酶、环
NA 表达有明
强,A 组最
见图 2。
C 组 D 组 E
C 组 D 组 E
C 组 D 组
C 组 D 组 E
中医药信
溃疡抑制率、
胃溃疡抑制率(
100.0
0
47.7
72.7
78.2











3 讨
症细胞
织损伤
于胃部
抗力下
化合物
修复组
的抗炎
M
高,引
剧胃溃
制胃酸
泌,使
后引发
生改变
含量明
平。
作用。
炎症后
组
组
E 组
组
iN
OS
表
达
强
度

1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
息杂志
胃液量和胃液总
%) 胃
0
0
0
0
0
图 2 各
论
胃溃疡作为
因子和胃
引起胃溃
不适,慢
降,引起其
、糖苷和
织损伤的
症成分[9]
OT 和 SP
起胃酸大量
疡程度。
的分泌[11
引起胃溃疡
胃部组织
,IL-6、I
显升高[12
由此可见,散
iNOS 和 C
,这2种基
A 组 B 组 C
iNOS
COX-2
GAPDH

酸度比较
液量(—x±s,mL)
.33±0.06**
.78±0.15
.57±0.11
.46±0.05**
.40±0.07**
组小鼠胃组织
一种常见病
肠组织的酶
疡,同时胃
性胃溃疡患
他疾病。
甾酮,有利
能力,特别
,能较好地
是兴奋性胃
分泌[10],大
SS 和 VIP
]。散血草水
的血清因
发炎,血液
L-12、TNF
],散血草水
血草水提
OX-2 基因
因的表达
组 D 组 E 组
A 组 B 组

胃液
2
1
1
1



iNOS、COX-2 基
,临床上可
因子进行
组织出现发
者长期进
散血草含有
于患者,增强
是黄酮类
起到对炎症
肠激素,被
量胃酸使
是抑制性胃
提物能够抑
子变化减弱
中的炎症相
-α 和 IFN
提物能够降
物对胃溃疡
是炎症相关
会明显升高
A组 B
CO
X-
2表
达
强
度

1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
C 组 D
·65
总酸度(—x±s,mE
8.77±3.11**
6.43±2.25
7.72±2.08*
2.26±1.56**
0.55±0.87**
因表达
通过血液
判断。胃黏
炎等症状
食困难,引
丰富的黄
自身抵抗
化合物,是
的抑制作用
刺激后含
胃内呈酸性
肠激素,可
制小鼠胃
。胃溃疡
关细胞因
-γ 等炎症
低上述因
有良好的
基因,组织
,可以作为
组 C组 D组
组 E 组
·
q/L)
中炎
膜组
。由
发抵
酮类
力和
有效
。
量升
,加
以抑
酸分
发生
子发
因子
子水
预防
出现
判断
E组
·66· Chinese Journal of Information on TCM Aug.2014 Vol.21 No.8
炎症的标准[13]。散血草水提物灌胃后,小鼠胃组织的
iNOS和COX-2表达低于B组,接近于A组,表明散血草
具有很好的抑制炎症、预防胃溃疡的效果。同时胃黏
膜损伤会引起胃液分泌量增多,此时胃液总酸度较正
常值有所上升[14]。高剂量散血草能明显减少胃液量和
胃液总酸度,起到预防效果。
本研究以散血草作为研究对象,从胃溃疡抑制
率、血清细胞因子水平、胃液分泌量和总酸度、胃组
织中相关酶 mRNA 表达等方面进行小鼠体内胃溃疡预
防效果的研究,观察到散血草水提物可以起到预防胃
溃疡的作用,并且随浓度的增加效果更为明显。散血
草对胃溃疡预防效果的机理和临床效果有待进一步
深入研究。
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